检索结果-内蒙古大学图书馆

生物学杂志 2001年第3期18卷 22-24页

作者：李植峰高丽杰曹韫旭孙树秦陆德如解放军北京军医学院生物化学教研室北京100017 第二军医大学分子遗传学研究所上海200433

将萤火虫荧光素酶基因cDNA真核表达载体pGL2 导入大肠杆菌HB1 0 1、鼠伤寒杆菌LB50 0 0和X4 0 64中 ,它在这些原核细胞中均有较好的表达效果。它在大肠杆菌HB1 0 1的表达量是该基因cDNA原核表达载体 pUHF12 - 1的表达量的 3 0倍。采用... 详细信息

将萤火虫荧光素酶基因cDNA真核表达载体pGL2 导入大肠杆菌HB1 0 1、鼠伤寒杆菌LB50 0 0和X4 0 64中 ,它在这些原核细胞中均有较好的表达效果。它在大肠杆菌HB1 0 1的表达量是该基因cDNA原核表达载体 pUHF12 - 1的表达量的 3 0倍。采用计算机PC/GENE程序包分析 ,pGL2 的SV4 0 早期启动子序列中含有SV4 0 基因组HindⅢB片断中一段长为 4 9bp的DNA序列 ,这一序列可能就是SV4 0 基因组HindⅢB片断的原核增强子功能的决定序列 ,正是该序列使pGL2 在细菌中获得了高效表达。

关键词：荧光素酶基因真核表达载体原核增强子

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热休克后表达受抑基因的分子克隆及其表达特性

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2000年第6期32卷 657-660页

作者：戴建新王易伦周凤娟陆德如刘宇建徐仁宝第二军医大学病理生理学教研室!上海200433 第二军医大学分子遗传学教研室!上海200433

以人成骨肉瘤细胞株HOS 860 3为热休克模型 ,在利用DDmRNA方法筛选和克隆了一个热休克后表达受抑基因的cDNA片段的基础上 ,以该片段为探针 ,筛选HOS 860 3细胞的cDNA文库 ,获得该基因的全长cDNA克隆(HSSG 1) ;DNA序列测定表明该cDNA全长... 详细信息

以人成骨肉瘤细胞株HOS 860 3为热休克模型 ,在利用DDmRNA方法筛选和克隆了一个热休克后表达受抑基因的cDNA片段的基础上 ,以该片段为探针 ,筛选HOS 860 3细胞的cDNA文库 ,获得该基因的全长cDNA克隆(HSSG 1) ;DNA序列测定表明该cDNA全长 14 5 6bp ,编码 2 76个氨基酸 ,经计算机辅助分析 ,该cDNA序列尚未被报道。经RNA斑点杂交证实 ,该基因的表达于多种组织细胞之中 ,并且热休克反应对其表达水平的抑制具有普遍性

关键词：热休克基因表达表达调控差别显示基因克隆

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转基因动物研究的现状与展望

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中国科学基金 2000年第1期14卷 23-26页

作者：戴旭明李坚傅继梁第二军医大学医学遗传教研室医学分子遗传学开放实验室上海200433

简要评述了国内外转基因动物研究的现状,归纳了目前常用的几种转基因动物遗传修饰的策略,比较分析了几种转基因动物建立途径的特点以及存在的问题。在此基础上介绍了国家自然科学基金重点项目“医学转基因动物模型研究”的研究内容,并... 详细信息

简要评述了国内外转基因动物研究的现状,归纳了目前常用的几种转基因动物遗传修饰的策略,比较分析了几种转基因动物建立途径的特点以及存在的问题。在此基础上介绍了国家自然科学基金重点项目“医学转基因动物模型研究”的研究内容,并对转基因动物研究的未来发展作了展望。

关键词：转基因动物遗传修饰基因组修饰

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LIF受体α亚基和gp130细胞内区与U937细胞内信号分子Stat3的关系

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中华血液学杂志 1999年第12期20卷 621-623页

作者：刘厚奇汤淑萍刘善荣胡世杰杨玲朱奎傅继梁第二军医大学组织胚胎教研室上海200433 第二军医大学分子遗传学开放实验室

目的　探讨人白血病细胞系Ｕ９３７的白血病抑制因子（ＬＩＦ）受体α亚基和ｇｐ１３０亚基细胞内区与转录活性因子Ｓｔａｔ３的活性关系，旨在研究白血病细胞增殖和分化的机制。方法　用基因重组技术将２个基因在细胞内区截除（ｇ... 详细信息

目的　探讨人白血病细胞系Ｕ９３７的白血病抑制因子（ＬＩＦ）受体α亚基和ｇｐ１３０亚基细胞内区与转录活性因子Ｓｔａｔ３的活性关系，旨在研究白血病细胞增殖和分化的机制。方法　用基因重组技术将２个基因在细胞内区截除（ｇｐ１９０ＥＸ、ｇｐ１３０ＥＸ），并分别在Ｕ９３７细胞中表达，因其可与野生型受体竟争性结合ＬＩＦ，故可用免疫印迹法分析受体细胞内区截除后Ｓｔａｔ３的表达水平及该信号分子酪氨酸磷酸化。结果　转染ｇｐ１９０ＥＸ和ｇｐ１３０ＥＸ的Ｕ９３７细胞Ｓｔａｔ３表达量增加；Ｓｔａｔ３酪氨酸磷酸化水平下降。结论　ＬＩＦ受体α亚基和ｇｐ１３０的细胞内区均参与了Ｓｔａｔ３的激活和Ｕ９３７细胞的分化。

关键词：白血病细胞株 U937 LIF受体 gp130细胞

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肝细胞癌患者血液AFP mRNA检测的临床意义

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第二军医大学学报 1999年第2期20卷 121-123页

作者：刘扬张柏和钱光相陈汉吴孟超傅继梁黄长辉第二军医大学东方肝胆外科医院第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室

目的：探讨肝细胞癌患者血液甲胎蛋白（ＡＦＰ）ｍＲＮＡ检测的临床意义。方法：取９３例肝癌患者、１５例肝炎后肝硬化患者、１２例慢性肝炎患者及１０例健康人静脉血各５ｍｌ，应用巢式ＲＴ－ＰＣＲ检测其周围静脉血中ＡＦＰｍＲＮＡ... 详细信息

目的：探讨肝细胞癌患者血液甲胎蛋白（ＡＦＰ）ｍＲＮＡ检测的临床意义。方法：取９３例肝癌患者、１５例肝炎后肝硬化患者、１２例慢性肝炎患者及１０例健康人静脉血各５ｍｌ，应用巢式ＲＴ－ＰＣＲ检测其周围静脉血中ＡＦＰｍＲＮＡ。结果：在５０个肝癌血标本中检测到ＡＦＰｍＲＮＡ（５３．８％），而对照组中未检测到１例。ＡＦＰｍＲＮＡ检出率与肝癌分期、血清ＡＦＰ浓度、肝内转移、门静脉癌栓、肿瘤大小及远处转移有明显相关（Ｐ＜０．０５）。２１例伴有肝外远处转移的原发性肝癌血标本均被检测到ＡＦＰｍＲＮＡ（１００％），没有远处转移的７２例肝癌血标本中有２９例检测到ＡＦＰｍＲＮＡ（４０．３％）。结论：ＡＦＰｍＲＮＡ可以作为肝癌细胞血液转移的标志。

关键词：肝肿瘤 mRNA 甲胎蛋白类肝细胞癌

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人巨核白血病细胞诱导分化后差异表达基因的mRNA差别显示和克隆

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第二军医大学学报 1999年第1期20卷 14-17页

作者：韩建中戴建新林文李川晟童书鹏程涛陆德如第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室第二军医大学药学院药理学教研室第二军医大学长海医院

目的：克隆巨核白血病细胞诱导分化后表达变化的ｍＲＮＡ，从中寻找对诱导分化起关键作用的基因，最终揭示巨核白血病细胞诱导分化的分子机制。方法：人巨核白血病细胞ＨＩＭｅｇ经１３－顺式维甲酸处理４ｄ后，收集细胞总ＲＮＡ，进行... 详细信息

目的：克隆巨核白血病细胞诱导分化后表达变化的ｍＲＮＡ，从中寻找对诱导分化起关键作用的基因，最终揭示巨核白血病细胞诱导分化的分子机制。方法：人巨核白血病细胞ＨＩＭｅｇ经１３－顺式维甲酸处理４ｄ后，收集细胞总ＲＮＡ，进行ｍＲＮＡ差别显示、ｃＤＮＡ片段克隆和序列分析。结果：获得５个差示ｃＤＮＡ片段，经ＲＮＡ点杂交分析后发现其中３个为假阳性，１个因没有杂交信号而无法确定，只有１个ｃＤＮＡ片段得到证实，其对应的ｍＲＮＡ在诱导分化后表达下降。该ｃＤＮＡ片段的核苷酸序列已在ＧｅｎＢａｎｋ中登录，登录号为ＡＦ０２６５２６。结论：克隆到一个未知基因的ｃＤＮＡ片段，其全长ｃＤＮＡ序列。

关键词：巨核细胞白血病诱导分化克隆基因表达 mRNA

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血液AFP mRNA在复发性肝癌及伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌中的诊断意义

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第二军医大学学报 1999年第3期20卷 192-193页

作者：刘扬吴孟超钱光相张柏和陈汉傅继梁黄长辉第二军医大学东方肝胆外科医院胆道外科第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室第二军医大学基础医学部生物开放实验室

目的：探讨血液ＡＦＰｍＲＮＡ在复发性肝癌及伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌中的表达及意义。方法：应用巢式ＲＴ－ＰＣＲ检测４０例复发性肝癌及伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌血液ＡＦＰｍＲＮＡ。结果：２１例伴有肝外远处器... 详细信息

目的：探讨血液ＡＦＰｍＲＮＡ在复发性肝癌及伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌中的表达及意义。方法：应用巢式ＲＴ－ＰＣＲ检测４０例复发性肝癌及伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌血液ＡＦＰｍＲＮＡ。结果：２１例伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌血液ＡＦＰｍＲＮＡ均表达阳性（１００％），１９例复发性肝癌患者中有７例血液ＡＦＰｍＲＮＡ表达阳性（３６．８％），两组比较差异有显著性意义（Ｐ＜０．０１）。结论：血液ＡＦＰｍＲＮＡ有希望成为判断肝癌复发或预测肝癌远处器官转移的客观性指标之一。

关键词：甲胎蛋白类肝肿瘤肿瘤转移 mRNA

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MAPPING重组噬菌体中插入片段的“分/合”策略

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生物化学与生物物理进展 1998年第5期25卷 454-459页

作者：戴旭明薛红杨桦胡以平傅继梁第二军医大学医学分子遗传学开放实验室

随着胚胎干细胞基因打靶技术不断推广应用，如何有效地从小鼠基因组ＤＮＡ文库中筛选得到基因组ＤＮＡ并进行结构分析（如限制性内切酶酶切图谱分析，即ｍａｐｐｉｎｇ等）已成为一个被普遍关心的问题．设计应用了“分／合”的策略，即... 详细信息

随着胚胎干细胞基因打靶技术不断推广应用，如何有效地从小鼠基因组ＤＮＡ文库中筛选得到基因组ＤＮＡ并进行结构分析（如限制性内切酶酶切图谱分析，即ｍａｐｐｉｎｇ等）已成为一个被普遍关心的问题．设计应用了“分／合”的策略，即先对重组噬菌体插入片段制备一套亚克隆，在对亚克隆进行详细的ｍａｐｐｉｎｇ的基础上，再对完整的大分子噬菌体ＤＮＡ进行酶切分析，将两者相结合，可以分析得到完整的酶切图谱．应用此策略，简便准确地对所克隆的含有小鼠凝血因子ＩＸ基因组ＤＮＡ的大分子插入片段进行了限制性内切酶酶切图谱分析，结果得到了ＤＮＡ印迹等的验证．

关键词：重组噬菌体 “分/合”策略基因打靶 mapping

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寄生虫的核酸疫苗研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1998年第3期16卷 223-225页

作者：陈蕊雯戴建新孙树汉第二军医大学分子遗传学教研室

所谓核酸疫苗，就是把外源基因克隆到真核质粒表达载体上，然后将重组的质粒ＤＮＡ直接注射到动物体内，使外源基因在活体内表达，产生的抗原激活机体的免疫系统，引发免疫反应。核酸疫苗具有突出的优点：（１）能诱导全方位的免疫应答... 详细信息

所谓核酸疫苗，就是把外源基因克隆到真核质粒表达载体上，然后将重组的质粒ＤＮＡ直接注射到动物体内，使外源基因在活体内表达，产生的抗原激活机体的免疫系统，引发免疫反应。核酸疫苗具有突出的优点：（１）能诱导全方位的免疫应答，优于亚单位疫苗和灭活疫苗，既可产...

关键词：寄生虫核酸疫苗目的基因

来源：评论

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以融合蛋白为抗原的简化Westernblot法诊断囊虫病

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1998年第5期16卷 360-363页

作者：彭郁葱陈蕊雯孙树汉戴建新王俊霞河北医科大学分子生物学教研室第二军医大学分子遗传学教研室

目的：为囊虫的诊断提供简便有效的方法。方法：猪囊尾蚴ｃＤＮＡ表达文库中筛选出的β－半乳糖苷糖－猪囊虫ｃＤＮＡ编码的融合蛋白为抗原，进行简化的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析。结果：四个克隆的融合蛋白（ｃＣ１、ｃＣ２、ｃＰ１... 详细信息

目的：为囊虫的诊断提供简便有效的方法。方法：猪囊尾蚴ｃＤＮＡ表达文库中筛选出的β－半乳糖苷糖－猪囊虫ｃＤＮＡ编码的融合蛋白为抗原，进行简化的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析。结果：四个克隆的融合蛋白（ｃＣ１、ｃＣ２、ｃＰ１和ｃＨ１）联合使用，检测１２４例人囊虫病血清中的抗囊尾蚴ＩｇＧ抗体，阳性率达９３．７％，三个克隆的融合蛋白（ｃＣ１、ｃＣ２、和ｃＰ１）联合使用，检测３８例猪囊虫病血清中的相应抗体，阳性率达１００％，均高于各克隆融合蛋白单独使用的阳性率，且与其他寄生虫病血清无交叉反应。结论：以融合蛋白为抗原所进行的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析具有高度灵敏性和特异性，且简便易操作。

关键词：囊虫病融合蛋白免疫诊断简化 Westernblot法

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