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含稳定整合pMCLacI/Neo质粒的NIH3T3细胞体外突变研究模型的建立

中华医学遗传学杂志 2000年第2期17卷 125-128页

作者：卢洋黎怀星傅继梁第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

目的　建立一个用于比较研究哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的突变机理的实验模型。方法　以脂质体转染法将线性化的 p MCL ac I/Neo质粒导入 NIH3T3细胞 ,用 G418筛选 ,选择一个药物抗性细胞克隆进行扩增 ,用基因组 Southern杂交 ,R... 详细信息

目的　建立一个用于比较研究哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的突变机理的实验模型。方法　以脂质体转染法将线性化的 p MCL ac I/Neo质粒导入 NIH3T3细胞 ,用 G418筛选 ,选择一个药物抗性细胞克隆进行扩增 ,用基因组 Southern杂交 ,RT- PCR及 RT- PCR Southern杂交进行分子鉴定。结果　 (1)在此细胞克隆的基因组中整合有 p MCL ac I/Neo质粒 ;(2 )该质粒上的两个 lac I靶基因中 ,有一个在 NIH3T3细胞内处于转录表达状态 ;(3)可以通过酶切环化的方法从阳性细胞克隆的基因组 DNA中回收出结构完整、功能正常的 p MCL ac I/Neo质粒。结论　建立了在基因组中整合有 p MCL ac I/Neo质粒的NIH3T3细胞系 ;两个 lac I靶基因可分别模拟哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的功能状态 ;可以将该细胞系用作研究哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的不同突变机理的实验模型。

关键词：基因突变 lacI基因 NIH3T3细胞质粒

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人IL-2真核表达质粒对副肌球蛋白核酸疫苗的免疫调节作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2002年第6期22卷 622-624页

作者：王庆敏陈蕊雯吴丹孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

目的　观察IL 2表达质粒对副肌球蛋白 (AgB)核酸疫苗的免疫调节作用。方法　将人的IL 2全长cDNA插入到真核表达质粒pcDNA3中构建成pcDNA3 IL 2重组质粒 ;然后接种C5 7BL 6小鼠 (分为pcDNA3组、AgB组、联合免疫组 ) ,ELISA法检测小鼠血... 详细信息

目的　观察IL 2表达质粒对副肌球蛋白 (AgB)核酸疫苗的免疫调节作用。方法　将人的IL 2全长cDNA插入到真核表达质粒pcDNA3中构建成pcDNA3 IL 2重组质粒 ;然后接种C5 7BL 6小鼠 (分为pcDNA3组、AgB组、联合免疫组 ) ,ELISA法检测小鼠血清中的IgG和IgG2a的水平 ;用MTT法检测小鼠脾细胞增殖反应 ,用ELISA法检测其分泌的IL 2和IL 4的水平。最后在仔猪中进行攻击实验 ,观察pcDNA3 IL 2质粒的免疫刺激作用。结果　注射疫苗后 ,pcDNA3 IL 2协同注射组增强了副肌球蛋白特异性的IgG和IgG2a的水平 ,增强了脾细胞的增殖反应 ,提高了其分泌IL 2的水平 ,但对IL 4的水平产生轻微影响。仔猪攻击实验中 ,共同注射IL 2基因组提高了仔猪的相对保护率。结论对于副肌球蛋白核酸疫苗而言 ,人的IL

关键词：副肌球蛋白猪囊尾蚴人IL-2 核酸疫苗免疫保护 ELISA法囊虫病

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小鼠锌指蛋白基因ZF-12基因剔除的ES细胞系的建立

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Acta Genetica Sinica 2002年第10期29卷 860-864页

作者：厉建中杨桦傅继梁第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

利用小鼠锌指蛋白ZF 12基因组DNA片段 ,构建了针对小鼠ZF 12基因座的替换型打靶载体pSSC TV 10 .5。经限制性核酸内切酶酶切及部分测序鉴定其结构正确后 ,通过电穿孔将线性化打靶载体导入ES细胞内 ,经G4 18/GANC双药筛选和分子鉴定 ,获... 详细信息

利用小鼠锌指蛋白ZF 12基因组DNA片段 ,构建了针对小鼠ZF 12基因座的替换型打靶载体pSSC TV 10 .5。经限制性核酸内切酶酶切及部分测序鉴定其结构正确后 ,通过电穿孔将线性化打靶载体导入ES细胞内 ,经G4 18/GANC双药筛选和分子鉴定 ,获得 4个ZF 12 + /-基因的ES细胞杂合子克隆 ,其生长状态良好 ,为进一步建立ZF 12基因剔除的小鼠动物模型创造了条件。

关键词：小鼠锌指蛋白基因 ZF-12 基因剔除 ES细胞系基因打靶胚胎干细胞

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基于凝血因子IX基因剔除小鼠建立血友病乙转基因动物模型

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Acta Genetica Sinica 2002年第7期29卷 594-598页

作者：车文良贺艳姚真真李坚傅继梁第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

为在凝血因子IX基因剔除小鼠基础上建立基因组中整合有含特定点突变的人凝血因子IX基因表达载体的转基因小鼠家系 ,为血友病乙的研究提供更接近临床实际的动物模型。利用体外定点突变技术 ,构建含有特定点突变的人凝血因子IX基因表达载... 详细信息

为在凝血因子IX基因剔除小鼠基础上建立基因组中整合有含特定点突变的人凝血因子IX基因表达载体的转基因小鼠家系 ,为血友病乙的研究提供更接近临床实际的动物模型。利用体外定点突变技术 ,构建含有特定点突变的人凝血因子IX基因表达载体 ,该载体包括由人凝血因子IX编码区及第一内含子构成的人凝血因子IX基因(hFIXml)、4个拷贝的MCK增强子 (MCKe)、鸡 β -肌动蛋白启动子 (bA)及PolyA ,命名为pMe4bAIXml质粒。将其线性化后 ,用显微注射法注射入 817只凝血因子IX基因剔除小鼠受精卵雄原核 ,再将它们分别回输 4 5只假孕受体母鼠的输卵管中 ,共产仔 6 9只 ,存活 6 3只。采用PCR与基因组Southern杂交筛选法鉴定小鼠 ,证实 6只小鼠基因组中整合有含特定点突变的pMe4bAIXml质粒 ,并对 1只小鼠的PCR产物进行测序。

关键词：血友病乙转基因小鼠模型点突变人凝血因子IX基因

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重组裂殖子表面蛋白质1特异性抗体有效抑制恶性疟原虫体外生长

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2002年第3期34卷 318-322页

作者：张冬梅潘卫庆陆德如第二军医大学病原生物学教研室第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所上海200433 第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所

42kD恶性疟原虫裂殖子表面蛋白质 1C末端片段 (MSP1 42 )是当今重要的疟疾疫苗候选抗原。为获得大量构象正确的MSP1 42重组蛋白进行疫苗有效性试验 ,在毕氏酵母系统中分泌表达了MSP1 42重组蛋白。通过与一组特异性识别构象表位的单抗反... 详细信息

42kD恶性疟原虫裂殖子表面蛋白质 1C末端片段 (MSP1 42 )是当今重要的疟疾疫苗候选抗原。为获得大量构象正确的MSP1 42重组蛋白进行疫苗有效性试验 ,在毕氏酵母系统中分泌表达了MSP1 42重组蛋白。通过与一组特异性识别构象表位的单抗反应 ,该重组蛋白在重要构象表位上与天然蛋白质一致。由该蛋白质诱生的抗体能有效地抑制恶性疟原虫的体外生长 ,这些结果为进一步开展MSP1 42重组蛋白疫苗有效性试验提供了基础

关键词：恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1 毕氏酵母体外抑制试验

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医疗质量的综合评价方法

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中国卫生统计 1998年第5期15卷 34-43页

作者：曹阳张罗漫第二军医大学卫生统计学教研室

客观、科学地评价医疗工作的服务水平和质量，是卫生事业管理中的一个重要课题。自８０年代以来，我国卫生统计界的理论和实际工作者经过大量研究，提出了许多行之有效的多指标综合评价方法，在卫生管理工作中发挥了巨大的作用。本文结... 详细信息

客观、科学地评价医疗工作的服务水平和质量，是卫生事业管理中的一个重要课题。自８０年代以来，我国卫生统计界的理论和实际工作者经过大量研究，提出了许多行之有效的多指标综合评价方法，在卫生管理工作中发挥了巨大的作用。本文结合实例讨论了目前卫生管理统计领域中...

关键词：医疗质量综合评价法加权平均指数法秩和比法

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某地区6家医院住院海军官兵疾病谱分析

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海军军医大学学报 2023年第10期44卷 1161-1166页

作者：秦宇辰秦婴逸何倩郭威吴骋海军军医大学(第二军医大学)卫生勤务学系军队卫生统计学教研室上海200433

目的调查分析住院海军官兵疾病谱,为其健康管理和医疗保障提供参考。方法基于某地区6家医院2013年至2017年住院海军官兵的病案首页数据分析其疾病谱。根据国际疾病分类(ICD)-10标准对住院海军官兵的主要出院诊断进行分类和统计分析。结... 详细信息

目的调查分析住院海军官兵疾病谱,为其健康管理和医疗保障提供参考。方法基于某地区6家医院2013年至2017年住院海军官兵的病案首页数据分析其疾病谱。根据国际疾病分类(ICD)-10标准对住院海军官兵的主要出院诊断进行分类和统计分析。结果共纳入21177人次海军官兵住院诊疗数据,排名前10位的疾病诊断大类总占比为85.98%(18208/21177)。循环系统疾病(14.79%,3132人次)、消化系统疾病(14.59%,3090人次)、呼吸系统疾病(14.06%,2978人次)、泌尿生殖系统疾病(9.94%,2104人次)列居疾病主要诊断大类的前4位。上述4种疾病主要诊断大类的主要病种分别是慢性缺血性心脏病[21.87%(685/3132)]、急性阑尾炎[16.38%(506/3090)]、肺炎(病原体未特指)[19.21%(572/2978)]、肾和输尿管结石[20.77%(437/2104)]。不同性别、年龄段住院海军官兵的疾病谱具有不同特征。结论循环系统、消化系统、呼吸系统、泌尿生殖系统疾病是海军官兵住院的主要疾病类型,应加强对以上疾病主要诊断大类及主要病种的诊疗服务能力和防控教育。

关键词：海军官兵住院疾病谱构成分析

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基于机器学习算法的重症缺血性脑卒中早期死亡预测效果评价

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海军军医大学学报 2022年第12期43卷 1365-1371页

作者：罗枭程义何倩涂博祥吴骋贺佳海军军医大学(第二军医大学)卫生勤务学系军队卫生统计学教研室上海200433

目的评价支持向量机(SVM)、随机森林、极限梯度提升(XGBoost)3种机器学习算法与logistic回归模型在重症缺血性脑卒中30 d死亡结局预测中的效果。方法使用2008年至2019年美国重症监护医学信息数据库Ⅳ(MIMIC-Ⅳ)中符合纳入标准的2 358... 详细信息

目的评价支持向量机(SVM)、随机森林、极限梯度提升(XGBoost)3种机器学习算法与logistic回归模型在重症缺血性脑卒中30 d死亡结局预测中的效果。方法使用2008年至2019年美国重症监护医学信息数据库Ⅳ(MIMIC-Ⅳ)中符合纳入标准的2 358例重症缺血性脑卒中患者资料,分别用SVM、随机森林、XGBoost3种机器学习算法与logistic回归方法,结合合成少数过采样技术(SMOTE)建立早期死亡预测模型,并使用ROC曲线的AUC值、准确度、F1分数、布里尔分数等指标评价模型的预测效果。结果 SVM、随机森林、XGBoost与logistic回归模型在原始不平衡数据集中预测早期死亡的AUC值分别为0.78、0.81、0.84、0.83。应用SMOTE合成数据集后,SVM、随机森林、XGBoost与logistic回归模型的AUC值分别为0.72、0.84、0.83、0.83。除SVM模型外,随机森林、XGBoost模型与logistic回归之间有相似的预测能力,但其准确度、布里尔分数均优于logistic回归模型,综合分类性能更优。结论机器学习算法在缺血性脑卒中早期死亡预测中性能较传统logistic回归方法更优。

关键词：重症缺血性脑卒中早期死亡预测机器学习合成少数过采样技术

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上市后药品不良反应信号检测方法的进展与思考

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海军军医大学学报 2022年第2期43卷 117-122页

作者：叶小飞海军军医大学(第二军医大学)卫生勤务学系军队卫生统计学教研室上海200433

国内外大量惨痛的药源性事件提醒人们需关注药品的安全性。药品监管部门和上市许可持有人要尽可能早地开始收集药品不良反应信息,针对不同的药品制订不同的风险管理计划,以最大程度地保障患者的用药安全。在药品全生命周期管理上,药品... 详细信息

国内外大量惨痛的药源性事件提醒人们需关注药品的安全性。药品监管部门和上市许可持有人要尽可能早地开始收集药品不良反应信息,针对不同的药品制订不同的风险管理计划,以最大程度地保障患者的用药安全。在药品全生命周期管理上,药品不良反应信号检测是上市后安全性监测的重要环节。本文介绍了上市后药品不良反应信号检测常用的不相称测定分析技术的基本原理和数据分析中可能存在的各种偏倚及控制方法,并讨论了用于信号检测的机器学习方法、信号检测报告的规范性等,为提高信号检测的准确性与及时性提供参考。

关键词：药品不良反应药物警戒信号检测不相称测定分析

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热区某抗洪抢险部队疾病与非战斗外伤逐日减员率的统计分布

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第二军医大学学报 2008年第7期29卷 851-852页

作者：秦超江雷陆建周亚平第二军医大学卫生勤务学系卫生勤务学教研室上海200433 第二军医大学卫生勤务学系卫生统计学教研室上海200433

目的:研究每日疾病与非战斗外伤减员率的统计学分布,为今后模拟研究提供基础。方法:引用某抗洪抢险部队逐日疾病与非战斗外伤发生数,计算逐日疾病与非战斗外伤减员率,运用χ2和柯尔莫哥洛夫-斯米尔诺夫方法进行理论统计分布的拟合优度... 详细信息

目的:研究每日疾病与非战斗外伤减员率的统计学分布,为今后模拟研究提供基础。方法:引用某抗洪抢险部队逐日疾病与非战斗外伤发生数,计算逐日疾病与非战斗外伤减员率,运用χ2和柯尔莫哥洛夫-斯米尔诺夫方法进行理论统计分布的拟合优度检验。结果:逐日疾病与非战斗外伤减员率分布符合对数正态分布,而各病种逐日减员率不全一致。结论:疾病与非战斗外伤减员率符合对数正态分布,可作为相关模拟研究的基础。

关键词：热带气候自然灾害疾病刨伤和损伤统计学分布

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