检索结果-内蒙古大学图书馆

癌变．畸变．突变 2010年第3期22卷 171-174页

作者：金彩霞李文林李元杰徐方胡以平第二军医大学细胞生物学教研室上海200433 宁夏医科大学医学遗传学与细胞生物学教研室宁夏银川750004

目的:利用报告基因监测肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。方法:通过PCR从大鼠鼠尾基因组中克隆胰岛素启动子片段,构建大鼠胰岛素Ⅰ启动子调控的红色荧光蛋白报告载体(pRIP Ds Red),并利用报告载体标记的肝原始细胞系(liver epithelialpr... 详细信息

目的:利用报告基因监测肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。方法:通过PCR从大鼠鼠尾基因组中克隆胰岛素启动子片段,构建大鼠胰岛素Ⅰ启动子调控的红色荧光蛋白报告载体(pRIP Ds Red),并利用报告载体标记的肝原始细胞系(liver epithelialprogenitor cells,LEPCs)及经逆转录病毒感染后表达MafA的肝原始细胞系(LEPCs-MafA),观察肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。结果:获得胰岛素启动子调控的报告载体、报告载体标记的LEPCs及LEPCs-MafA。结论:pRIP DsRed报告载体的成功构建为研究LEPCs向胰腺细胞的转分化提供了简捷的分子工具。

关键词：肝干细胞胰岛素启动子转分化红色荧光蛋白

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医学细胞生物学实验教学改革的探索与实践

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2010年第1期12卷 49-52页

作者：何志颖朱海英陈元晓訾晓渊谢东甫胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 昆明医学院细胞生物学及遗传学教研室

突出细胞生物学实验课教学的主体地位,实验课课程设置以验证性实验、综合性实验及创新性实验相结合,激发学生的积极性和主观能动性,培养学生的创新思维和分析问题解决问题的综合实践能力,取得了良好的教学效果。

关键词：细胞生物学实验课教学改革

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以树突状细胞为基础的肿瘤疫苗设计策略的研究进展

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临床荟萃 2010年第2期25卷 179-182页

作者：羡鲜王永祥孙树汉河北医科大学基础医学院病原生物学教研室河北石家庄050017 上海第二军医大学遗传学教研室上海200433

树突状细胞(dendritic cells,DC)是人体内功能最强的专职抗原提呈细胞(antigen presenting cells,APC),它能激活CD8^+细胞毒性T细胞(CTL)和CD4^+辅助性T细胞(Th),在抗肿瘤、抗病毒等免疫应答过程中均发挥着重要的作用。自1973年Steinman... 详细信息

树突状细胞(dendritic cells,DC)是人体内功能最强的专职抗原提呈细胞(antigen presenting cells,APC),它能激活CD8^+细胞毒性T细胞(CTL)和CD4^+辅助性T细胞(Th),在抗肿瘤、抗病毒等免疫应答过程中均发挥着重要的作用。自1973年Steinman和Cohn报道DC具有重要的免疫调节作用以来,该细胞在生物治疗领域已备受关注。DC疫苗已成为极具潜力的癌症及慢性感染性疾病的治疗性疫苗,[第一段]

关键词：肿瘤疫苗,合成树突状细胞

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MiR-122稳定转染细胞系的建立及其脂代谢特征

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第二军医大学学报 2009年第7期30卷 825-829页

作者：章亚南王芳杨富殷一旋张玲孙树汉第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海200433

目的:利用稳定表达人miR-122前体的表达载体,转染低表达miR-122的人肝癌细胞系HepG2细胞,获得过量表达miR-122的稳定转染细胞系,探讨miR-122对肝脏细胞脂代谢的影响及其机制。方法:对已构建完成的表达质粒pEZX-hsa-mir-122和对照质粒pEZ... 详细信息

目的:利用稳定表达人miR-122前体的表达载体,转染低表达miR-122的人肝癌细胞系HepG2细胞,获得过量表达miR-122的稳定转染细胞系,探讨miR-122对肝脏细胞脂代谢的影响及其机制。方法:对已构建完成的表达质粒pEZX-hsa-mir-122和对照质粒pEZX-mir-control进行酶切鉴定,对酶切正确的克隆进行DNA测序,测序正确的克隆应用脂质体试剂转染,绿色荧光蛋白表达监测转染效率,应用嘌呤霉素筛选稳定转染细胞系,实时定量PCR在RNA水平鉴定miR-122的表达,蛋白质印迹法从靶分子水平验证miR-122的抑制功能,尼罗红染色观察细胞内脂质。结果:pEZX-hsa-mir-122质粒成功转染HepG2细胞,质粒携带的miR-122前体序列整合到细胞基因组中,获得过量表达miR-122的HepG2细胞株,细胞内成熟体miR-122可抑制靶基因的翻译,细胞内脂质明显增加。结论:人miR-122前体序列可整合在HepG2细胞基因组中,过量表达miR-122的HepG2细胞出现脂质代谢异常。

关键词：人miR-122 稳定转染脂代谢嘌呤霉素 HepG2细胞

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孕妇外周血中胎儿游离DNA在产前诊断中的应用

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第二军医大学学报 2009年第4期30卷 442-446页

作者：王文博张毅孙树汉第二军医大学学员十队上海200433 第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海200433

孕妇外周血中胎儿游离DNA的发现,为无创性产前诊断开辟了一条新途径。检测孕妇血浆中特异的胎儿DNA序列已被用于胎儿性连锁疾病鉴定、RhD血型检查和多种单基因遗传病的产前诊断;游离DNA水平的变化还可被用作某些妊娠相关疾病如先兆子、... 详细信息

孕妇外周血中胎儿游离DNA的发现,为无创性产前诊断开辟了一条新途径。检测孕妇血浆中特异的胎儿DNA序列已被用于胎儿性连锁疾病鉴定、RhD血型检查和多种单基因遗传病的产前诊断;游离DNA水平的变化还可被用作某些妊娠相关疾病如先兆子、早产和胎儿染色体疾病的临床诊断新指标。本文对母体外周血中胎儿游离DNA的生化特征及其临床应用研究,进行了总结和分析。

关键词：胎儿游离DNA 游离核酸无创性产前诊断基因诊断孕妇血浆

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类风湿关节炎易感基因的全基因组关联分析研究进展

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第二军医大学学报 2009年第11期30卷 1303-1307页

作者：郝峻烽魏玉保陈蕊雯第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海200433

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种炎性侵润关节及其周围结缔组织的系统性自身免疫疾病,也是一种具有复杂遗传模式的多基因遗传病。环境因素和遗传因素共同影响RA的发生、发展。它的易感基因研究给临床的诊断、治疗提供了理... 详细信息

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种炎性侵润关节及其周围结缔组织的系统性自身免疫疾病,也是一种具有复杂遗传模式的多基因遗传病。环境因素和遗传因素共同影响RA的发生、发展。它的易感基因研究给临床的诊断、治疗提供了理论基础。新兴的全基因组关联分析作为寻找易感基因的高通量技术,是发现多基因遗传性疾病包括RA易感基因的强大工具。它不仅能够验证已有的易感基因位点,还能够发现新的候选易感位点。近5年来,用全基因组关联分析研究易感基因取得了很多新的进展,为探明RA的发病机制和治疗RA提供了新的契机。本文就近年来全基因组关联分析技术研究RA易感基因的进展做一综述。

关键词：全基因组关联分析类风湿关节炎易感基因

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携带抑胃多肽序列的HBc病毒样颗粒蛋白疫苗的制备及其免疫效果

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第二军医大学学报 2009年第11期30卷 1230-1235页

作者：田建卿王越林宁邹大进孙树汉第二军医大学长海医院内分泌科上海200433 第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海200433 第二军医大学长海医院临床营养科上海200433

目的：设计及制备携带抑胃多肽（GIP）抗原序列的HBc病毒样颗粒（VLP）蛋白疫苗,并研究其免疫效果,为肥胖免疫干预治疗提供新的策略。方法：克隆GIP cDNA序列,并与HBc VLP（1-144aa）cDNA序列进行融合,通过原核表达及纯化,制备携带GIP... 详细信息

目的：设计及制备携带抑胃多肽（GIP）抗原序列的HBc病毒样颗粒（VLP）蛋白疫苗,并研究其免疫效果,为肥胖免疫干预治疗提供新的策略。方法：克隆GIP cDNA序列,并与HBc VLP（1-144aa）cDNA序列进行融合,通过原核表达及纯化,制备携带GIP序列的HBc VLP疫苗（HBc-GIP）;同时将该融合基因的cDNA序列克隆入pVAX1真核表达载体,制备GIP核酸疫苗。用2种疫苗免疫大鼠并进行免疫学指标评价。结果：成功制备了携带GIP抗原序列的HBc-GIP,并同时制备了编码该融合蛋白序列的核酸疫苗pVAX1-HBc-GIP。经过两种疫苗的联合免疫,可以获得高滴度的GIP特异性抗体IgG,显示了良好的免疫效果。结论：采用HBc（1-144aa）作为GIP的载体,制备VLP蛋白疫苗,联合核酸疫苗免疫可以有效地诱导靶向大鼠GIP的特异性体液免疫反应,打破大鼠自身抗原耐受。该疫苗可以作为一种新的控制肥胖的免疫干预药物来进一步深入研究。

关键词：抑胃多肽病毒样颗粒肥胖症免疫疗法蛋白疫苗

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医学遗传学双语教学的实践和思考

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医学研究与教育 2009年第6期26卷 91-93页

作者：王芳商艳李强孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室上海200433 第二军医大学附属长海医院呼吸科上海200433

总结医学遗传学双语教学的体会和经验,提出:(1)提高双语教学认识,选择合理教学方式;(2)培养双语教学能力,提高教员讲授水平;(3)采用多种教学手段,丰富双语教学内容;(4)及时总结教学经验,提高学生学习兴趣,以期进一步提高医学遗传学的外... 详细信息

总结医学遗传学双语教学的体会和经验,提出:(1)提高双语教学认识,选择合理教学方式;(2)培养双语教学能力,提高教员讲授水平;(3)采用多种教学手段,丰富双语教学内容;(4)及时总结教学经验,提高学生学习兴趣,以期进一步提高医学遗传学的外语教学能力。

关键词：医学遗传学双语教学医学教育

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血清DNA结合蛋白对质粒介导的基因治疗的影响作用研究

血清DNA结合蛋白对质粒介导的基因治疗的影响作用研究

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第八次全国医学遗传学学术会议(中华医学会2009年医学遗传学年会)

作者：王越黄金凤郭瀛军孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室

DNA介导的基因治疗是一种简便经济而具有巨大潜力的基因治疗模式,在乙肝,HIV,结核等多种感染性疾病;肿瘤,风湿免疫性疾病的治疗中均被给予厚望。DNA介导的基因治疗早期以核酸疫苗的形式进行了大量临床研究,但是由于在多项临床实验中核... 详细信息

DNA介导的基因治疗是一种简便经济而具有巨大潜力的基因治疗模式,在乙肝,HIV,结核等多种感染性疾病;肿瘤,风湿免疫性疾病的治疗中均被给予厚望。DNA介导的基因治疗早期以核酸疫苗的形式进行了大量临床研究,但是由于在多项临床实验中核酸疫苗效力不佳,使得DNA介导的基因治疗受到了很大限制。目前,该领域仍然缺乏相关的解释机制和解决策略。如果能够分析和解释DNA载体在体内表达效力低下的原因,进而发展合适的基因治疗策略及佐剂,无疑对于预防及临床医学发展具有重大的研究价值。本研究中,我们提出了外源性质粒可能受到体内某些保护性分子的清除及负向调控分子的抑制,进而影响DNA治疗效率的假设。为了筛选这些分子,我们进一步提出这些分子至少具有以下两种属性:1,胞外的DNA结合属性;2,质粒注射后显著上调(做为一种应答机制)。因此,我们通过蛋白质组学先后筛选了质粒注射后血清中上调的蛋白分子以及血清中的DNA结合蛋白,二者进行正交分析,发现血清淀粉样蛋白P物质(SAP)是其中的重要分子。我们进一步验证了SAP在质粒注射后小鼠血清中显著上调,在局部组织中也有显著分布,并且具有很强的DNA结合活性和调理吞噬活性。我们还证实了SAP蛋白可以介导单核吞噬细胞对DNA质粒的胞吞作用,并且该作用不能促进质粒表达,反而抑制质粒转染实质细胞。因此我们提出了SAP可能抑制质粒体内转染与表达的假设。该研究提出DNA介导的基因治疗的体内调节新机制及其对应用的指导意义,同时也对DNA先天免疫识别中胞外分子的作用进行新的探讨。

关键词：基因治疗质粒 DNA结合蛋白 SAP

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用pdx-1和EGFP建立核定位信号的实验教学模型

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昆明医学院学报 2009年第3期30卷 51-53页

作者：陈元晓何志颖田明李文林胡以平陈英杰昆明医学院细胞生物学及遗传学教研室云南昆明650031 第二军医大学细胞生物学教研室上海200433 昆明医学院人体解剖学教研室云南昆明650031

目的建立核定位信号的实验教学模型.方法构建pdx-1基因和EGFP基因融合表达的表达载体,脂质体转染法将载体转入培养的HeLa细胞,荧光显微镜下观察.结果转染的HeLa细胞仅在细胞核发荧光,证明pdx-1蛋白的核定位信号将融合蛋白EGFP-pdx-1引... 详细信息

目的建立核定位信号的实验教学模型.方法构建pdx-1基因和EGFP基因融合表达的表达载体,脂质体转染法将载体转入培养的HeLa细胞,荧光显微镜下观察.结果转染的HeLa细胞仅在细胞核发荧光,证明pdx-1蛋白的核定位信号将融合蛋白EGFP-pdx-1引导到细胞核.结论用转录因子pdx-1和增强型绿色荧光蛋白EGFP建立核定位信号的实验教学模型是可行的.

关键词：胰十二指肠同源框-1 增强型绿色荧光蛋白核定位信号实验教学模型

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