检索结果-内蒙古大学图书馆

消化外科 2005年第3期4卷 181-184页

作者：王中川傅传刚王庆敏何天霖郝立强孙树汉上海市第二军医大学附属长海医院肛肠外科 200433 上海市第二军医大学医学遗传学教研室 200433

目的检测以质粒pIRES为载体构建的带有全序列癌胚抗原(CEA)基因的核苷酸疫苗对机体特异性抗肿瘤免疫反应的激活效果。方法将CEA基因片段连接于真核表达质粒pIRES中,用肌肉注射方法接种核酸疫苗;检测CEA在小鼠肌肉组织中的表达情况及其... 详细信息

目的检测以质粒pIRES为载体构建的带有全序列癌胚抗原(CEA)基因的核苷酸疫苗对机体特异性抗肿瘤免疫反应的激活效果。方法将CEA基因片段连接于真核表达质粒pIRES中,用肌肉注射方法接种核酸疫苗;检测CEA在小鼠肌肉组织中的表达情况及其对小鼠脾细胞CEA特异性细胞免疫反应的激活效果。结果小鼠经肌肉注射质粒后,免疫组化证实该核酸疫苗可在体内有效表达CEA;分子免疫检测显示注射后小鼠特异性淋巴细胞增值反应明显并且伴有自然杀伤细胞NK活性显著增高。结论实验所构建的核酸疫苗pIRESCEA可在体外及小鼠体内高效表达并表现出良好的细胞免疫原性。

关键词：大肠肿瘤 DNA疫苗癌胚抗原

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肿瘤坏死因子α基因多态性对强直性脊柱炎发病易感性和临床病变程度的影响(英文)

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中国临床康复 2005年第22期9卷 252-254页

作者：韩星海陈蕊雯段世伟杨波蔡青林懿孙树汉解放军第二军医大学长海医院风湿免疫科上海市200433 解放军第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海市200433 上海交通大学生命科学研究中心中国科学院营养研究所上海市200031

背景:肿瘤坏死因子α基因多态性与强直性脊柱炎发生与发展的关系是近年强直性脊柱炎遗传学研究的热点。目的:探讨肿瘤坏死因子α基因启动子-238和-308位点多态性对强直性脊柱炎发病易感性和病变程度的影响。设计:病例-对照观察。单位:... 详细信息

背景:肿瘤坏死因子α基因多态性与强直性脊柱炎发生与发展的关系是近年强直性脊柱炎遗传学研究的热点。目的:探讨肿瘤坏死因子α基因启动子-238和-308位点多态性对强直性脊柱炎发病易感性和病变程度的影响。设计:病例-对照观察。单位:第二军医大学长海医院风湿免疫科。对象:随机选择1999-01/2003-12在第二军医大学长海医院风湿免疫科就诊的强直性脊柱炎患者108例,各对象间均无血缘关系。男女比为5.3∶1;年龄13～71(30±12)岁,根据骶髂关节破坏程度X射线片评估为Ⅰ～Ⅳ级。另从解放军上海血站(长海医院)随机选取100名健康献血者作为对照,年龄19～56(33±9)岁,男女比为4.9∶1,参与者均知情同意。方法:每例参与者取外周血,加乙二胺四乙酸A抗凝后进行肿瘤坏死因子-α基因启动子的聚合酶链反应扩增和纯化;对聚合酶链反应产物测序,并用Chromas1.62软件展示分析DNA测序结果。②以X射线骶髂关节片分级和肿瘤坏死因子α-308位点(G/C)和(G/A)的对应值评估其对疾病程度的影响。主要观察指标:以DNA直接测序法对-238和-308位点进行基因分型,并分析基因类型与疾病临床表现之间的关系。结果:①肿瘤坏死因子α-238G/G基因型和-238G/A基因型:强直性脊柱炎组有106例(98.1%)和2例(1.9%),正常对照组有95例(95.0%)和5例(5.0%),两组间比较无显著性差异。②肿瘤坏死因子α-308.1.1(G/G)基因型和-308.1.2(G/A)基因型:强直性脊柱炎组有89例(82.4%)和19例(17.6%),正常对照组中有85例(85.0%)和14例(14.0%)。两组比较亦无显著性差异。③根据骶髂关节X射线分级判定疾病严重程度与肿瘤坏死因子α-308位点G/G和G/A基因型之间的关系:强直性脊柱炎患者X射线片Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级时,(G/G)型为3/35/40/11例,(G/A)型为1/12/6/0例。两组差异比较意义显著(χ2GMH=4.77,P<0.05)。结论:在观察对象中未发现肿瘤坏死因子α基因启动子-238和-308位点多态性与强直性脊柱炎发病易感性相关,但根据骶髂关节损害程度X射线分级说明肿瘤坏死因子α基因启动子-308位点的多态性对强直性脊柱炎的严重程度有影响。

关键词：脊柱炎,强直性肿瘤坏死因子多态现象(遗传学) 基因疾病易感性

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癌胚抗原与B-7.1双表达基因疫苗的构建及表达

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中华实验外科杂志 2005年第3期22卷 372-372页

作者：王中川傅传刚何天霖王庆敏孙树汉第二军医大学附属长海医院肛肠外科上海200433 第二军医大学医学遗传学教研室

基因疫苗是把外源基因连接到真核表达质粒载体上,将重组的质粒DNA注射到动物体内,使外源基因在活体内表达,产生的抗原激活机体免疫系统引发免疫反应.DNA疫苗制备简便、安全长效、可组建多价疫苗并兼有预防和治疗作用.癌胚抗原(CEA)有一... 详细信息

基因疫苗是把外源基因连接到真核表达质粒载体上,将重组的质粒DNA注射到动物体内,使外源基因在活体内表达,产生的抗原激活机体免疫系统引发免疫反应.DNA疫苗制备简便、安全长效、可组建多价疫苗并兼有预防和治疗作用.癌胚抗原(CEA)有一定的抗原性,可作为诱导肿瘤免疫的有效靶抗原[1].B7.1分子可促进多种抗原诱导的免疫反应[2].我们选择编码人全长CEA和B7.1的cDNA构建共表达质粒载体,并检测其在体内、外的表达,为增强CEA基因疫苗的免疫效果进行研究。

关键词： B7.1 免疫反应癌胚抗原 CEA 诱导基因疫苗靶抗原表达基因真核表达质粒载体外源基因

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人层黏连蛋白α4链LG2组件单克隆抗体的制备

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第二军医大学学报 2005年第8期26卷 958-959页

作者：张艳宇张玉静朱世成金华许金波陆一鸣军事医学科学院输血研究所北京100850 吉林大学生物化学教研室长春130062 军事医学科学院放射医学研究所北京100850 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

层黏连蛋白（laminin，LN）为基底膜结构成分之一，它参与细胞分化和细胞内信号转导，对细胞的生长、分化和组织的发育和修复有很重要的作用。本研究探讨采用基因免疫技术制备LG2组件的单克隆抗体．为后续实验对LNα4链LG组件进行体外... 详细信息

层黏连蛋白（laminin，LN）为基底膜结构成分之一，它参与细胞分化和细胞内信号转导，对细胞的生长、分化和组织的发育和修复有很重要的作用。本研究探讨采用基因免疫技术制备LG2组件的单克隆抗体．为后续实验对LNα4链LG组件进行体外重组奠定实验基础。

关键词：层黏连蛋白α4链 LG2组件抗体,单克隆

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新型重组膜联蛋白B1的特征及其抗血液凝固活性的比较

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福建医科大学学报 2005年第1期39卷 1-4页

作者：杨湘越兰小鹏朱忠勇颜宏利张毅孙树汉南京军区福州总医院全军医学检验中心(福建医科大学福总临床医学院) 福州350025 第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

目的　研究毕赤酵母重组膜联蛋白 B1的特征变化 ,比较其和原核表达产物对血细胞凝集与血栓形成过程的影响。　方法　对毕赤酵母重组膜联蛋白 B1行 SDS- PAGE,等电聚焦 ,脱磷酸反应 ,蛋白质 N端氨基酸测序 ,白陶土部分凝血活酶时间 (KPTT... 详细信息

目的　研究毕赤酵母重组膜联蛋白 B1的特征变化 ,比较其和原核表达产物对血细胞凝集与血栓形成过程的影响。　方法　对毕赤酵母重组膜联蛋白 B1行 SDS- PAGE,等电聚焦 ,脱磷酸反应 ,蛋白质 N端氨基酸测序 ,白陶土部分凝血活酶时间 (KPTT)测定及大鼠下腔静脉血栓形成观察。　结果　毕赤酵母重组膜联蛋白 B1显示两条电泳带 ,其中一条带的相对分子质量比原核表达产物大 ,已被磷酸化 ,等电点较理论值低 ,两条带的 N端均携带了来自载体的 4个氨基酸 ,毕赤酵母重组膜联蛋白 B1和大肠杆菌谷胱甘肽转移酶融合膜联蛋白 B1具有明显的抗凝及抑制血栓形成作用。　结论　虽然毕赤酵母重组膜联蛋白 B1的分子特征较原核产物有了明显变化 ,但其抗凝及抑制血栓功能基本未受影响。

关键词：膜联蛋白原核表达产物血液凝固抗凝部分凝血活酶时间 KPTT 白陶土毕赤酵母等电点电泳

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氦氖激光穴位照射后缺氧缺血新生大鼠脑组织中超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的变化

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中国临床康复 2005年第23期9卷 196-197页

作者：李宛青陈雪梅吴爱群刘伟刘华郑州师范高等专科学校生命科学系河南省郑州市450044 郑州大学基础医学院人体解剖学教研室河南省郑州市450052 解放军第二军医大学解剖学教研室上海市200433 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所解剖与组织胚胎学系北京市100005 郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室河南省郑州市450052

目的:观察缺氧缺血新生大鼠经过氦氖激光穴位照射后脑组织中的活性物质超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的变化情况。方法:实验于2003-03/11在郑州大学基础医学院人体解剖学教研室完成。选择30只7d龄健康Wistar大鼠,体质量12～15g,雌雄... 详细信息

目的:观察缺氧缺血新生大鼠经过氦氖激光穴位照射后脑组织中的活性物质超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的变化情况。方法:实验于2003-03/11在郑州大学基础医学院人体解剖学教研室完成。选择30只7d龄健康Wistar大鼠,体质量12～15g,雌雄不拘。随机分为3组,即假手术对照组、缺氧缺血组和激光穴位照射组,每组10只。缺氧缺血组与激光穴位照射组动物均制作成缺氧缺血模型,在清醒状态下实施左侧颈总动脉结扎术,术后在室温中恢复1～4h后,置于常压缺氧仓中,通入8mL/L氧气、920mL/L氮气(体积比)的混合气体,2h后将动物取出。缺氧缺血组不加任何治疗。激光穴位照射组于缺氧缺血后第2天,采用氦氖激光照射百会、大椎两穴,功率4mW,光斑直径3mm,每次照射10min,1次/d,同一时间进行,10d为1个疗程,共3个疗程,各疗程间隔2d。百会穴在颅顶正中,大椎穴在C7～T1之间,背部正中。假手术组仅分离左侧颈总动脉,不结扎,不缺氧。各组大鼠常规饲养34d后,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶活性,比色法测定丙二醛含量。结果:因缺氧缺血对动物造成了伤害,缺氧缺血组死亡3只,激光穴位照射组死亡2只。进入结果分析,假手术对照组、缺氧缺血组和激光穴位照射组分别为10,7和8只。①大鼠脑组织超氧化物歧化酶活性:缺氧缺血组显著低于假手术对照组和激光穴位照射组[(59.70±4.03)NU/mL,(76.24±2.43)NU/mL,(72.56±5.60)NU/mL,(t=5.03,4.83,P<0.05)]。②大鼠脑组织丙二醛含量:缺氧缺血组显著高于假手术对照组和激光穴位照射组[(267.58±30.55)mmol/L,(99.87±15.48)mmol/L,(135.29±32.76)mmol/L,(t=10.68,8.81,P<0.05)]。结论:氦氖激光穴位照射能提高、诱发缺氧缺血大鼠脑组织中超氧化物歧化酶的生成和活力,降低丙二醛水平。新生大鼠未成熟脑的可塑性较大,如果利用此关键时期进行氦氖激光穴位照射,可能对脑功能的恢复有一定帮助。

关键词：脑缺氧脑缺血氦氖激光超氧化物歧化酶丙二醛

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在中国汉族人群中发现一个强直性脊柱炎新的易感位点

在中国汉族人群中发现一个强直性脊柱炎新的易感位点

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中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：陈蕊雯段世伟蔡青吴丹林经安吕柯胡建达施柯韩星海陈琦冯国鄞贺林孙树汉第二军医大学医学生物技术与分子遗传研究所基础医学部医学遗传学教研室上海交通大学Bio-X生命科学研究中心中国科学院营养研究所第二军医大学长海医院风湿免疫科第二军医大学医学生物技术与分子遗传研究所基础医学部医学遗传学教研室福建医科大学第一附属医院中心实验室第二军医大学医学生物技术与分子遗传研究所基础医学部医学遗传学教研室福建医科大学协和医院福建省血液研究所第二军医大学医学生物技术与分子遗传研究所基础医学部医学遗传学教研室第二军医大学长海医院风湿免疫科上海交通大学Bio-X生命科学研究中心中国科学院营养研究所上海交通大学Bio-X生命科学研究中心中国科学院营养研究所上海交通大学Bio-X生命科学研究中心中国科学院营养研究所第二军医大学医学生物技术与分子遗传研究所基础医学部医学遗传学教研室

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种常见的、累及中轴关节和肌腱韧带骨附着点的慢性炎症性疾病,在炎症性关节炎中发病率占第二位,被认为是一种复杂性状疾病。目前,AS病因尚不清楚,近年来,随着分子遗传学技术的发展和人类基... 详细信息

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种常见的、累及中轴关节和肌腱韧带骨附着点的慢性炎症性疾病,在炎症性关节炎中发病率占第二位,被认为是一种复杂性状疾病。目前,AS病因尚不清楚,近年来,随着分子遗传学技术的发展和人类基因组研究的深入,对AS的研究已取得很大进展, 发现遗传因素在发病中起了主导作用,所涉及的遗传因素除HLA-B27以外,尚有HLA区域内外的其它易感基因的参与。肿瘤坏死因子基因(TNFα)位于染色体6p21．3的MHC Ⅲ区域,由4个外显子和3个内含子组成,四个独立的全基因组扫描结果提示TNFα位于AS的易感区域。TNFα具有介导炎症和免疫调节作用。相关研究表明:AS病人骶髂关节的滑液中TNFαmRNA升高;cDNA芯片表达谱显示AS病人 TNF-α表达上调,半定量RT-PCR证实TNF-α转录显著高于健康人。所有这些都提示TNFα是AS的候选易感基因。

关键词：强直性脊柱炎 TNF 启动子易感位点中国汉族人群

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核受体的研究进展

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Acta Genetica Sinica 2004年第4期31卷 420-429页

作者：王水良傅继梁第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

核受体是配体依赖性转录因子超家族 ,与机体生长发育、细胞分化 ,以及体内许多生理、代谢过程中的基因表达调控密切相关。文中综述了核受体研究的一般概况以及核受体与脂生物学、核受体与肿瘤、核受体与辅调节因子等方面的研究进展。

关键词：核受体转录因子辅调节因子基因表达调控

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钩端螺旋体鞭毛蛋白B(FlaB)基因flaB在大肠杆菌内的表达

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中国人兽共患病杂志 2004年第3期20卷 180-182页

作者：寇志华张毅郭瀛军陈祖欢施柯孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

目的　在大肠杆菌中高效表达钩端螺旋体内鞭毛蛋白 (FlaB)用于钩体病的诊断和预防。方法　将目的基因flaB定向克隆至原核表达载体 pGEX - 5T ,构建重组融合表达质粒 pGF ;Western -blot鉴定其特异性 ,ELISA法判定其用于钩体病诊断的可... 详细信息

目的　在大肠杆菌中高效表达钩端螺旋体内鞭毛蛋白 (FlaB)用于钩体病的诊断和预防。方法　将目的基因flaB定向克隆至原核表达载体 pGEX - 5T ,构建重组融合表达质粒 pGF ;Western -blot鉴定其特异性 ,ELISA法判定其用于钩体病诊断的可行性。结果　GST -FlaB主要以包涵体形式表达 ,表达量约占菌体总蛋白的 4 0 % ;Western -blot结果显示该蛋白与FlaB抗血清能呈现明显的单一条带 ;包涵体经TritonX - 10 0及尿素纯化后 ,纯度可达 90 % ,并且能溶于包被缓冲液中 ;ELISA检测显示纯化后的GST -FlaB具有较好的特异性。结论　钩端螺旋体FlaB可以高效表达并可能用于ELISA检测及钩体病的预防。

关键词：钩端螺旋体鞭毛蛋白B 基因 flaB 大肠杆菌表达

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CpG-ODN气道内应用抑制哮喘小鼠过敏性气道炎症及GATA-3的表达

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中华微生物学和免疫学杂志 2004年第7期24卷 540-544页

作者：商艳李强胡振林施柯周凤娟刘忠令孙树汉第二军医大学长海医院呼吸内科上海200433 第二军医大学医学遗传学教研室

目的　研究气道内应用CpG寡脱氧核苷酸 (CpG ODN)对小鼠哮喘模型气道过敏性炎症的治疗作用及对肺内GATA 3表达的影响。方法　鸡卵蛋白 (OVA)免疫BALB c小鼠建立哮喘模型 ,激发后 1h气道内滴入 10 0 μgCpG ODN ,处死动物后观察支气管... 详细信息

目的　研究气道内应用CpG寡脱氧核苷酸 (CpG ODN)对小鼠哮喘模型气道过敏性炎症的治疗作用及对肺内GATA 3表达的影响。方法　鸡卵蛋白 (OVA)免疫BALB c小鼠建立哮喘模型 ,激发后 1h气道内滴入 10 0 μgCpG ODN ,处死动物后观察支气管肺泡灌洗液 (BALF)中白细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比 (EOS % )的变化及IL 4、IL 5、IL 12、IFN γ的含量变化。取肺组织行病理切片HE染色、AB PAS染色检查 ,观察小鼠气道炎症情况 ,免疫组化染色观察CpG ODN对小鼠哮喘模型肺部GATA 3表达的影响。结果　CpG ODN治疗组BALF中IL 12和IFN γ的产生增加 ,IL 4、IL 5的产生减少 ,BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞比例降低 ,肺部炎症情况明显减轻 ,肺血管周围及支气管周围表达GATA 3的细胞数较哮喘模型组及对照寡核苷酸治疗组明显减少。结论　哮喘小鼠激发阶段气道内滴入CpG可能通过诱导IL 12、IFN γ产生 ,抑制GATA 3的表达 ,导致TH2型细胞因子的产生减少 ,从而减轻哮喘气道过敏性炎症。

关键词： CpG-ODN气道哮喘小鼠过敏性气道炎症 GATA-3 基因表达细胞因子

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