检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2004年第1期25卷 58-60页

作者：刘善奎高申钟延强张洪英孙树汉第二军医大学药学院药剂学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室

目的 :研制 DNA疫苗海藻酸钠微球 ,并对其体外释药特性进行考察。方法 :以海藻酸钠为载体 ,采用 W/ O乳化 -离子交联法制备 DNA疫苗海藻酸钠微球 ;考察粒径大小、外观、载药量等理化特性 ;考察微球的体外释药特性及影响因素。结果 :... 详细信息

目的 :研制 DNA疫苗海藻酸钠微球 ,并对其体外释药特性进行考察。方法 :以海藻酸钠为载体 ,采用 W/ O乳化 -离子交联法制备 DNA疫苗海藻酸钠微球 ;考察粒径大小、外观、载药量等理化特性 ;考察微球的体外释药特性及影响因素。结果 :微球球形圆整 ,分散性好 ,平均粒径为 (1 2 .0 3± 6 .9) μm,载药量可达 5 % ,包封率为 5 6 .0 % ;微球的体外释放速率与载药量呈正相关 ,与壳聚糖的交联固化度呈负相关。结论 :海藻酸钠可以作为 DNA疫苗微球的可生物降解辅料 ;乳化离子交联法的制备工艺简便 ,有利于 DNA疫苗结构和功能的稳定性 ;海藻酸钠微球是

关键词： DNA疫苗海藻酸钠微球制备体外释药

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

口蹄疫DNA疫苗海藻酸钠微球的制备及体外释放的研究

引用

药学服务与研究 2004年第2期4卷 107-110页

作者：刘善奎钟延强王芳孙树汉高申第二军医大学药学院药剂学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :研制DNA疫苗海藻酸钠微球 ,并对其体外释药特性进行考察。方法 :以口蹄疫DNA疫苗为DNA疫苗的模型药物 ,采用喷雾干燥离子交联法制备DNA疫苗海藻酸钠微球 ;考察粒径大小、外观、载药量等理化特性 ;考察微球的体外释药特性及其... 详细信息

目的 :研制DNA疫苗海藻酸钠微球 ,并对其体外释药特性进行考察。方法 :以口蹄疫DNA疫苗为DNA疫苗的模型药物 ,采用喷雾干燥离子交联法制备DNA疫苗海藻酸钠微球 ;考察粒径大小、外观、载药量等理化特性 ;考察微球的体外释药特性及其影响因素。结果 :微球球形圆整 ,分散性好 ,平均粒径为 11.9μm ,载药量为 5 % ,产率为 5 3.2 %。微球的体外释放速率受载药量影响较小 ,而壳聚糖的交联固化度增高 ,微球的体外释放速率变慢。结论 :以生物降解材料海藻酸钠、壳聚糖 ,用喷雾干燥法制备DNA疫苗微球 ,不需要超声和有机溶剂 ,因而有利于DNA疫苗结构和功能的稳定性 ;工艺简便 ,易于工业化生产。

关键词：口蹄疫 DNA疫苗海藻酸钠微球喷雾干燥体外释药

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

BCG-DNA对哮喘患者外周血单个核细胞IFN-γ和IL-4产生的作用

引用

第二军医大学学报 2004年第7期25卷 718-720页

作者：商艳胡振林李强施柯刘忠令孙树汉第二军医大学长海医院呼吸内科上海200433 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室

目的 :研究免疫活性物质卡介苗基因组 DNA(BCG- DNA)对哮喘患者外周血单个核细胞 (PBMC) IFN- γ和 IL- 4产生的影响。方法 :分离哮喘患者 PBMC,分别加入 BCG- DNA、地塞米松刺激培养 ,EL ISA检测培养上清中 IFN- γ及 IL- 4含量 ,RT- ... 详细信息

目的 :研究免疫活性物质卡介苗基因组 DNA(BCG- DNA)对哮喘患者外周血单个核细胞 (PBMC) IFN- γ和 IL- 4产生的影响。方法 :分离哮喘患者 PBMC,分别加入 BCG- DNA、地塞米松刺激培养 ,EL ISA检测培养上清中 IFN- γ及 IL- 4含量 ,RT- PCR检测 PBMC IFN-γ m RNA及 IL - 4 m RNA的表达量 ,并与空白对照组相比较。结果 :地塞米松在体外对哮喘患者PBMC产生的 IFN-γ m RNA和蛋白、IL - 4 m RNA和蛋白均有抑制作用 ;BCG- DNA抑制哮喘患者 PBMC IL - 4 m RNA和蛋白的分泌 ,而促进 IFN -γ m RNA和蛋白的分泌 ,与对照组比较差异显著 (P<0 .0 1 ) ,且在体外对 PBMC无毒性。结论 :BCG-DNA不仅具有和地塞米松相同的下调 IL - 4表达的作用 ,而且还具有地塞米松所没有的诱导 IFN -γ表达的作用 ,利于纠正哮喘患者体内存在的 Th1 / Th2比例失衡状态。

关键词： BCG-DNA 哮喘外周血单个核细胞 IFN-r IL-4

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小鼠Retn基因siRNAs的设计及其稳定表达载体的构建

引用

第二军医大学学报 2004年第2期25卷 136-139页

作者：李雅慧黎怀星吴丹施柯蔡东联孙树汉长海医院营养科上海200433 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :设计小鼠 Retn基因特异性的 si RNAs,并构建一系列能在哺乳动物细胞内稳定表达这些 si RNAs的表达质粒 ,以便为在体外研究 Retn基因的功能打下基础。方法 :(1 )设计并合成小鼠 Retn基因特异性的一组寡核苷酸片段 ,并克隆到 p Sil... 详细信息

目的 :设计小鼠 Retn基因特异性的 si RNAs,并构建一系列能在哺乳动物细胞内稳定表达这些 si RNAs的表达质粒 ,以便为在体外研究 Retn基因的功能打下基础。方法 :(1 )设计并合成小鼠 Retn基因特异性的一组寡核苷酸片段 ,并克隆到 p Silencer EM 1 .0 - N eo载体 ;(2 )用电穿孔转染和 G4 1 8筛选等方法建立能稳定表达相应 si RNAs的一组 3T3- L1细胞克隆 ;(3)诱导细胞分化为脂肪细胞 ,并用 RT- PCR分析这些脂肪细胞内 Retn基因的 m RNA水平。结果 :设计并构建了 4个小鼠Retn基因特异性的 si RNAs表达质粒 ,并证明其中的 2种质粒能在脂肪细胞内稳定表达相应的 si RNAs,显著地抑制了这些脂肪细胞内 Retn基因的 m RNA水平。结论 :本研究设计并构建出的小鼠 Retn基因特异性的 si RNAs表达载体 ,所表达的 si R-NAs具有较强的 RNA干涉功能 ,为

关键词：小鼠 Retn基因 siRNAs 设计载体基因表达脂肪细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建立高表达小鼠Retn基因的3T3-L1细胞系的研究

引用

第二军医大学学报 2004年第8期25卷 892-894页

作者：李雅慧黎怀星吴丹蔡东联孙树汉长海医院营养科第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的:建立一个组成性地高表达小鼠Retn基因的3T3-L1细胞系。方法:(1)采用重组DNA技术将小鼠Retn基因的全长cDNA克隆到质粒pcDNA3的CMV启动子下面而获得一个能在真核细胞内组成性表达小鼠Resistin蛋白的表达载体pcDNA3-mRetn。(2)用电穿... 详细信息

目的:建立一个组成性地高表达小鼠Retn基因的3T3-L1细胞系。方法:(1)采用重组DNA技术将小鼠Retn基因的全长cDNA克隆到质粒pcDNA3的CMV启动子下面而获得一个能在真核细胞内组成性表达小鼠Resistin蛋白的表达载体pcDNA3-mRetn。(2)用电穿孔转染和G418筛选等方法建立能组成性地高表达小鼠Retn基因的3T3-L1细胞系。(3)诱导细胞分化为脂肪细胞,并用实时荧光RT-PCR法分析这些脂肪细胞内Retn基因mRNA的水平。结果:构建了一个能在真核细胞内表达小鼠Retn基因的表达载体;建立了一个携带有pcDNA3-mRetn载体并组成性地高表达小鼠Retn基因的细胞系。结论:成功地建立了一个组成性地高表达小鼠Retn基因细胞系,为进一步研究Retn基因的功能和小鼠Resistin蛋白的获得奠定了基础。

关键词： Resistin蛋白 Retn基因基因表达 3T3-L1细胞系

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

毕赤酵母重组猪囊尾蚴抗原cC1的特征研究

引用

中国人兽共患病杂志 2004年第3期20卷 241-243,253页

作者：杨湘越兰小鹏颜宏利陈蕊雯孙树汉南京军区福州总医院全军医学检验中心福州350025 上海第二军医大学医学遗传学教研室

目的　研究毕赤酵母重组猪囊尾蚴抗原cC1蛋白的特征变化。方法　对表达产物行SDS -PAGE ,FPLC离子交换层析和分子筛 ,等电聚焦 ,脱磷酸反应 ,N端氨基酸测序 ,小鼠免疫接种。结果　毕赤酵母重组猪囊尾蚴抗原cC1蛋白的分子量较原核的大 ,... 详细信息

目的　研究毕赤酵母重组猪囊尾蚴抗原cC1蛋白的特征变化。方法　对表达产物行SDS -PAGE ,FPLC离子交换层析和分子筛 ,等电聚焦 ,脱磷酸反应 ,N端氨基酸测序 ,小鼠免疫接种。结果　毕赤酵母重组猪囊尾蚴抗原cC1蛋白的分子量较原核的大 ,易于纯化 ,等电点较理论值低 ,重组cC1已被磷酸化 ,N端携带了来自载体的 4个氨基酸 ,免疫原性较原核的明显增强。结论　毕赤酵母重组猪囊尾蚴抗原cC1蛋白的特征较原核的有了明显变化 ,尤其是蛋白易于纯化及免疫原性的增强 ,表明毕赤酵母表达系统非常适合重组亚单位疫苗的生产制备。

关键词：抗原cCl 特征猪囊尾蚴巴斯德毕赤酵母

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

利用荧光mRNA差异显示技术克隆短芒大麦盐胁迫相关基因的ESTs

引用

第二军医大学学报 2004年第2期25卷 203-206页

作者：陆一鸣李彦舫白杰英颜宏利贺艳孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433 解放军军需大学生物学教研室长春130062

目的 :获取短芒大麦盐胁迫相关基因的 ESTs。方法 :应用荧光 m RNA差异显示技术进行筛选 ,并利用反向 North-ern杂交方法对差异片段进行快速鉴定以排除假阳性。结果 :共获得 32个与盐胁迫相关的 c DNA序列 ,并获得 Gen Bank注册号。BL ... 详细信息

目的 :获取短芒大麦盐胁迫相关基因的 ESTs。方法 :应用荧光 m RNA差异显示技术进行筛选 ,并利用反向 North-ern杂交方法对差异片段进行快速鉴定以排除假阳性。结果 :共获得 32个与盐胁迫相关的 c DNA序列 ,并获得 Gen Bank注册号。BL AST同源性分析结果表明 ,1 3个与已知基因序列有同源性 ,1 9个为未知 ESTs。其类型分别为 :诱导表达型 ,2 2个 ;增强表达型 ,7个 ;抑制表达型 ,3个。结论 :通过荧光 m RNA差异显示技术获得了短芒大麦盐胁迫相关基因的 ESTs。

关键词：荧光mRNA差异显示技术克隆短芒大麦盐胁迫相关基因 ESTs 基因表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

结核杆菌抗原MPT64基因在大肠杆菌中的表达及纯化

引用

第二军医大学学报 2004年第10期25卷 1146-1147页

作者：王庆敏胡振林周凤娟殷明章建程孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433 上海海军医学研究所舰艇卫生研究室上海200433

近几年来,结核病的发病有上升的趋势,全世界每年约有300万人死于结核病,800万人患结核病[1].尤其是多重耐药菌株的出现及与艾滋病共同感染更加重了结核病对人类健康的危害.

关键词：结核分枝杆菌 MPT64抗原表达纯化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

结核杆菌抗原HSP65基因在大肠杆菌中的表达及纯化

引用

中国生物工程杂志 2004年第4期24卷 74-76页

作者：王庆敏胡振林肖存杰章建程孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室上海200433 海军医学研究所舰艇卫生研究室上海200433

目的 :为研制预防结核病疫苗 ,选取结核杆菌HSP65蛋白为免疫抗原 ,将结核分枝杆菌HSP65抗原基因在大肠杆菌中表达、纯化。方法 :将HSP65的全长cDNA插入到原核表达载体pGEX5T中 ,构建成pGEX5T HSP65重组质粒。将质粒转化到E .coli.K80 2... 详细信息

目的 :为研制预防结核病疫苗 ,选取结核杆菌HSP65蛋白为免疫抗原 ,将结核分枝杆菌HSP65抗原基因在大肠杆菌中表达、纯化。方法 :将HSP65的全长cDNA插入到原核表达载体pGEX5T中 ,构建成pGEX5T HSP65重组质粒。将质粒转化到E .coli.K80 2细菌 ,用IPTG诱导HSP65表达 ,然后用亲和层析的方法进行纯化 ,最后用Western blot方法确认表达蛋白的特异性。结果 :获得了pGEX5T HSP65重组子 ,HSP65蛋白在k80 2菌中获得了表达 ,表达的蛋白条带大小约 86kDa ,与预期的结果相符。表达产物经亲和层析后获得了较单一的蛋白条带 ;表达及纯化的蛋白在纯化前后均可被结核病患者血清特异地识别。为进一步研究其在结核病诊断和防治中的应用打下了基础。

关键词：结核分支杆菌抗原 HSP65 基因大肠杆菌表达纯化免疫

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

毕赤酵母重组Annexin32的分子特征及其对血凝与血栓形成的影响

引用

中国生物工程杂志 2004年第11期24卷 33-37页

作者：杨湘越兰小鹏颜宏利张毅朱忠勇孙树汉南京军区福州总医院全军医学检验中心福州350025 第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

采用SDS PAGE、等电聚焦、脱磷酸反应、蛋白质N端氨基酸测序、KPTT及大鼠下腔静脉血栓形成观察 ,发现毕赤酵母重组Annexin32的分子特征较原核产物有了明显变化。有主、次 2条带 ,主带的分子量比原核产物大 ,等电点较理论值低 ,已被磷酸... 详细信息

采用SDS PAGE、等电聚焦、脱磷酸反应、蛋白质N端氨基酸测序、KPTT及大鼠下腔静脉血栓形成观察 ,发现毕赤酵母重组Annexin32的分子特征较原核产物有了明显变化。有主、次 2条带 ,主带的分子量比原核产物大 ,等电点较理论值低 ,已被磷酸化 ,2条带的N端均携带了来自载体的 4个氨基酸 ,可能对其与活化血小板表面磷脂的结合有所下调 ,导致血凝与血栓形成受到一定的影响 ,但仍具有明显的抗凝及抑制血栓形成作用。

关键词：血栓形成血凝原核分子特征 Annexin32 KPTT 活化血小板毕赤酵母等电点等电聚焦

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：