检索结果-内蒙古大学图书馆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1999年第4期17卷 215-217页

作者：郭瀛军吴丹孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

目的：构建含猪囊尾蚴抗原ｃＣ１ｃＤＮＡ与猪γ干扰素（ＩＦＮγ）的融合表达载体。方法：从已克隆的含人猪囊尾蚴共通抗原ｃＣ１的质粒中，用ＰＣＲ方法扩增出含酶切位点及接头的ｃＣ１和ＩＦＮγｃＤ... 详细信息

目的：构建含猪囊尾蚴抗原ｃＣ１ｃＤＮＡ与猪γ干扰素（ＩＦＮγ）的融合表达载体。方法：从已克隆的含人猪囊尾蚴共通抗原ｃＣ１的质粒中，用ＰＣＲ方法扩增出含酶切位点及接头的ｃＣ１和ＩＦＮγｃＤＮＡ，两ｃＤＮＡ经接头融合后构建成融合形式的原核表达载体转入大肠杆菌ＸＬ Ｂｌｕｅ。结果：经酶切分析，表明重组载体中含１５ｋｂ插入片段。ＳＤＳ ＰＡＧＥ显示一５２ｋＤａ的诱导产物。结论：猪ＩＦＮγ和猪囊尾蚴抗原ｃＣ１融合ｃＤＮＡ在大肠杆菌中获得表达。

关键词：囊尾蚴病融合蛋白 γ-干扰素

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猪囊尾蚴抗原与猪白细胞介素-4基因融合DNA疫苗载体的构建

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1999年第3期17卷 172-174页

作者：吴丹郭瀛军孙树汉上海第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

目的：为增强猪囊尾蚴抗原ｃＣ１的免疫保护作用而构建一表达猪白细胞介素４（ＩＬ４）与ｃＣ１抗原融合蛋白的ＤＮＡ疫苗载体。方法：通过聚合酶链反应（ＰＣＲ），分别扩增猪ＩＬ４ｃＤＮＡ和ｃＣ１ｃ ... 详细信息

目的：为增强猪囊尾蚴抗原ｃＣ１的免疫保护作用而构建一表达猪白细胞介素４（ＩＬ４）与ｃＣ１抗原融合蛋白的ＤＮＡ疫苗载体。方法：通过聚合酶链反应（ＰＣＲ），分别扩增猪ＩＬ４ｃＤＮＡ和ｃＣ１ｃＤＮＡ片段并进行融合，获得的嵌合基因ＩＬ４ｃＣ１中含有１０个氨基酸的中间接头序列，同时对其５’ ＡＵＧ侧翼序列进行翻译优化突变。结果：经酶切鉴定，证实有一１．５ｋｂ的片段插入载体，其ＤＮＡ序列分析结果与文献报道和实验设计完全一致。结论：表达猪ＩＬ４与猪囊尾蚴抗原ｃＣ１融合蛋白的ＤＮＡ疫苗载体构建成功。

关键词：囊尾蚴病抗原基因融合 DNA疫苗 IL-4

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表达绿色荧光蛋白的小鼠胚胎干细胞系的建立及其特性研究

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云南大学学报（自然科学版） 1999年第S3期21卷 252-253页

作者：杨桦戴旭明傅继梁第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

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pM CLacⅠ/Neo质粒的构建和基因突变研究的新策略

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第二军医大学学报 1999年第8期20卷 509-512页

作者：卢洋黎怀星傅继梁第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的：构建一个用于比较研究哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的不同突变机制的质粒载体。方法和结果：设计并构建一种具两个ｌａｃⅠ突变靶基因的突变研究载体：ｐＭＣＬａｃⅠ／Ｎｅｏ质粒。在该质粒中，一个ｌａｃⅠ靶基因受 ... 详细信息

目的：构建一个用于比较研究哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的不同突变机制的质粒载体。方法和结果：设计并构建一种具两个ｌａｃⅠ突变靶基因的突变研究载体：ｐＭＣＬａｃⅠ／Ｎｅｏ质粒。在该质粒中，一个ｌａｃⅠ靶基因受ＣＭＶ启动子的驱动而使其在人和哺乳动物细胞内能表达，而另一个ｌａｃⅠ靶基因则不能表达。将所获得的ｐＭＣＬａｃⅠ／Ｎｅｏ质粒经酶切鉴定后，再进行如下功能鉴定：一是分析两个ｌａｃⅠ靶基因在大肠杆菌细胞内的功能状态，结果显示这两个ｌａｃⅠ基因在ＤＨ５α宿主菌内功能正常；二是将其导入ＮＩＨ３Ｔ３细胞内，分析两个靶基因是否能模拟哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的功能状态。结果表明其中一个ｌａｃⅠ靶基因在ＮＩＨ３Ｔ３细胞中处于转录表达状态。结论：本研究构建了一种新型的突变研究载体，位于该载体上的两个ｌａｃⅠ靶基因能模拟人和哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的功能状态。

关键词：基因突变 lacⅠ基因质粒 DNA损伤沉默基因

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lacⅠ 靶基因突变子的一种正向选择系统的建立

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第二军医大学学报 1999年第10期20卷 713-715页

作者：黎怀星卢洋姚真真傅继梁第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的：建立一种能正向选择ｌａｃⅠ靶基因突变子的选择系统。方法：比较了分别携带有ｌａｃⅠ－／ｌａｃＺα型质粒和ｌａｃⅠ＋／ｌａｃＺα型质粒的ＤＨ１０Ｂ菌在ＬＢ完全培养基、以葡萄糖为碳源的Ｍ９基本培养基和以乳糖为碳源... 详细信息

目的：建立一种能正向选择ｌａｃⅠ靶基因突变子的选择系统。方法：比较了分别携带有ｌａｃⅠ－／ｌａｃＺα型质粒和ｌａｃⅠ＋／ｌａｃＺα型质粒的ＤＨ１０Ｂ菌在ＬＢ完全培养基、以葡萄糖为碳源的Ｍ９基本培养基和以乳糖为碳源的Ｍ９／Ｌ基本培养基内的生长情况。结果：组成型ＤＨ１０Ｂ菌在Ｍ９／Ｌ固体培养基中只需培养２３ｈ便可观察到生长，而诱导型ＤＨ１０Ｂ菌则需培养８８ｈ才可观察到生长，但在ＬＢ和Ｍ９培养基内两者的生长速度却相同；当将少量的组成型ＤＨ１０Ｂ菌与大量的诱导型ＤＨ１０Ｂ菌混合接种于Ｍ９／Ｌ固体培养基上培养时，Ｍ９／Ｌ固体培养基能从约２．７×１０６的ｌａｃⅠ＋型ＤＨ１０Ｂ菌中将少量的ｌａｃⅠ－型ＤＨ１０Ｂ菌筛选出来。结论：本研究建立了一种在特定时间内只选择生长携带有ｌａｃⅠ－／ｌａｃＺα型质粒的ＤＨ１０Ｂ菌落。

关键词：正向选择 lacⅠ靶基因基因突变子

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含小鼠糖皮质激素受体第二外显子基因片段的克隆和结构分析

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癌变．畸变．突变 1999年第4期11卷 161-164页

作者：李坚以平傅继梁第二军医大学基础部生物教研室第二军医大学医学遗传学教研室

克隆适于构建可调控基因打靶载体的小鼠糖皮质激素受体（ＧＲ）基因片段，为建立糖皮质激素受体基因缺陷型小鼠模型奠定基础。用ＰＣＲ扩增小鼠ＧＲ基因第二外显子上５６２ｂｐ的核酸片段作为探针，筛选小鼠基因组文库，共获得６个阳性... 详细信息

克隆适于构建可调控基因打靶载体的小鼠糖皮质激素受体（ＧＲ）基因片段，为建立糖皮质激素受体基因缺陷型小鼠模型奠定基础。用ＰＣＲ扩增小鼠ＧＲ基因第二外显子上５６２ｂｐ的核酸片段作为探针，筛选小鼠基因组文库，共获得６个阳性克隆。对Ｃ１０克隆进行详细的测序和酶切图谱和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析后获得一６．５ｋｂ的基因片段。该片段含完整的ＧＲ基因第二外显子，左右分别有３９ｋｂ和１４ｋｂ的ＤＮＡ片段可作为下一步构建基因打靶载体的同源臂。

关键词：基因打靶糖皮质激素受体基因结构

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小鼠神经细胞cdc2类蛋白激酶调节亚基p35^(Nck5a)基因的克隆和鉴定

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第二军医大学学报 1999年第10期20卷 716-719页

作者：周常文戴旭明薛红傅继梁兰州军区乌鲁木齐总医院临床医学研究所新疆乌鲁木齐市830000 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433 香港科技大学生物化学系

目的：获取小鼠神经细胞ｃｄｃ２类激酶（Ｎｃｌｋ）调节亚基ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因组ＤＮＡ，用于构建基因重复性打靶载体。方法：用噬斑原位杂交法从λＰＳ基因文库中克隆小鼠ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因；用限制性内切酶酶切图谱分析和... 详细信息

目的：获取小鼠神经细胞ｃｄｃ２类激酶（Ｎｃｌｋ）调节亚基ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因组ＤＮＡ，用于构建基因重复性打靶载体。方法：用噬斑原位杂交法从λＰＳ基因文库中克隆小鼠ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因；用限制性内切酶酶切图谱分析和序列测定进行基因组结构分析。结果：获得较完整的ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因组ＤＮＡ酶切图谱；该基因由一个外显子组成，长９２４ｂｐ，编码３０７个氨基酸的蛋白质，内含子长２０８ｂｐ，位于５′端侧翼序列中。测定的序列（－１０８０至＋９２４ｂｐ和＋３７２１至＋４２２２ｂｐ）与已报道的序列基本一致，仅在－１３５和－２９５位各插入一个碱基Ｇ。结论：得到的ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因组ＤＮＡ片段长约１１ｋｂ，其５′端侧翼序列含有一些已知的调控序列，３′端含有ｐｏｌｙＡ的信号序列。

关键词： P35^Nck5a基因克隆序列分析 cdc2类激酶小鼠

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小鼠神经细胞cdc2类蛋白激酶调节亚基p35^(Nck5a)胚胎于细胞基因重复打靶研究

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云南大学学报（自然科学版） 1999年第S3期21卷 253-254页

作者：周常文薛红傅继梁第二军医大学医学遗传学教研室上海200433 香港科技大学生物化学系香港九龙清水湾香港科技大学生物化学系

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基于pMTR1质粒的转基因小鼠突变研究模型的建立

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云南大学学报（自然科学版） 1999年第S3期21卷 254-254页

作者：卢洋黎怀星李建秀傅继梁第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海200433

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含稳定整合pMCLacI/Neo质粒的NIH3T3细胞的构建和基因突变研究的新策略

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云南大学学报（自然科学版） 1999年第S3期21卷 255-255页

作者：卢洋黎怀星傅继梁第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海200433

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