检索结果-内蒙古大学图书馆

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2002年第3期34卷 318-322页

作者：张冬梅潘卫庆陆德如第二军医大学病原生物学教研室第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所上海200433 第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所

42kD恶性疟原虫裂殖子表面蛋白质 1C末端片段 (MSP1 42 )是当今重要的疟疾疫苗候选抗原。为获得大量构象正确的MSP1 42重组蛋白进行疫苗有效性试验 ,在毕氏酵母系统中分泌表达了MSP1 42重组蛋白。通过与一组特异性识别构象表位的单抗反... 详细信息

42kD恶性疟原虫裂殖子表面蛋白质 1C末端片段 (MSP1 42 )是当今重要的疟疾疫苗候选抗原。为获得大量构象正确的MSP1 42重组蛋白进行疫苗有效性试验 ,在毕氏酵母系统中分泌表达了MSP1 42重组蛋白。通过与一组特异性识别构象表位的单抗反应 ,该重组蛋白在重要构象表位上与天然蛋白质一致。由该蛋白质诱生的抗体能有效地抑制恶性疟原虫的体外生长 ,这些结果为进一步开展MSP1 42重组蛋白疫苗有效性试验提供了基础

关键词：恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1 毕氏酵母体外抑制试验

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一个与小鼠锌指蛋白基因ZF-12相关的假基因的克隆和鉴定

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实验生物学报 2002年第2期35卷 135-141页

作者：厉建中张亚洲王水良杨桦李坚余龙傅继梁上海第二军医大学医学遗传学教研室上海200433 复旦大学遗传学研究所上海200433

小鼠类Krüppel锌指蛋白基因ZF-12为人的类Krüppel锌指蛋白基因ZNF191的同源基因,它们都编码368个氨基酸残基,N端存在SCAN结构域,C端有4个连续的锌指模体,最近的研究表明ZNF191是肝癌发生的相关基因。我们以人锌指蛋白基因ZNF... 详细信息

小鼠类Krüppel锌指蛋白基因ZF-12为人的类Krüppel锌指蛋白基因ZNF191的同源基因,它们都编码368个氨基酸残基,N端存在SCAN结构域,C端有4个连续的锌指模体,最近的研究表明ZNF191是肝癌发生的相关基因。我们以人锌指蛋白基因ZNF191的cDNA为探针,筛选小鼠λ噬菌体基因组文库,意外地获得了1个与小鼠锌指蛋白基因ZF-12相类似的基因,多种组织的RT-PCR和启动子序列分析,暗示该基因不表达,且该基因无内含子,与ZF-12高度相似,存在突变,暗示其为与ZF-12相关的假基因序列,经查新证实它为新的序列后,以ZF12p(ZF-12 pseudogene)命名在GenBank登录(AY040222)。查寻GenBank的人类基因组库以及Southern结果显示人类基因组中无ZNF191假基因序列。ZF12p与ZF-12高度相似,暗示ZF12p在进化过程中产生的时间较晚,这对研究锌指蛋白基因ZF-12的突变与进化具有重要的意义。

关键词：小鼠锌指蛋白基因 ZF-12 假基因克隆鉴定 ZNF191 进化

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恶性疟原虫3D7株主要裂殖子表面抗原C-末端基因的全合成及其表达

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中华医学杂志 2002年第3期82卷 198-202页

作者：张冬梅潘卫庆陆德如蒋立平第二军医大学病原生物学教研室第二军医大学医学生物技术与分子遗传研究所上海200433

目的　在毕赤酵母表达系统中获得大量构象正确的 3D7/MSP1 4 2重组蛋白进行疫苗有效性试验。方法　采用不对称PCR法拼接合成了 3D7/msp1 4 2基因 (12 0 2bp) ,用电穿孔法将合成基因导入毕赤酵母并进行诱导表达 ,用免疫印迹法检测表达产... 详细信息

目的　在毕赤酵母表达系统中获得大量构象正确的 3D7/MSP1 4 2重组蛋白进行疫苗有效性试验。方法　采用不对称PCR法拼接合成了 3D7/msp1 4 2基因 (12 0 2bp) ,用电穿孔法将合成基因导入毕赤酵母并进行诱导表达 ,用免疫印迹法检测表达产物。结果　按毕赤酵母密码子使用频率重新设计并全合成了 3D7/msp1 4 2基因序列 ,该合成基因在毕赤酵母系统 (Pichiapastoris)中得到高水平分泌表达 ,产生全长重组蛋白。识别构象表位的特异性单克隆抗体能与该重组蛋白反应。结论　重新设计的基因能在毕赤酵母中高水平分泌表达 ,并产生构象正确的重组蛋白。

关键词：毕赤酵母疟原虫基因合成裂殖子表面蛋白1

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DNA的免疫激活作用——Ⅰ.作用机理研究进展

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生物工程进展 2002年第2期22卷 48-55页

作者：胡振林孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

含有免疫激活序列的DNA或寡聚核苷酸对脊椎动物的免疫系统可以产生广泛的激活作用。本文综述DNA免疫激活作用的结构基础。

关键词：免疫激活序列 DNA 作用机制

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DNA的免疫激活作用——Ⅱ应用基础研究进展

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中国生物工程杂志 2002年第3期22卷 58-63页

作者：胡振林孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

综述免疫激活序列 (ISS)应用基础方面的研究进展。ISS- DNA不仅有望成为新一代高效低毒的免疫佐剂 ,而且在抗肿瘤、抗感染、促进造血、治疗免疫缺陷以及防治哮喘等方面均有非常乐观的应用前景。

关键词：免疫激活序列 ISS 应用研究进展 DNA 免疫激活应用

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庆大霉素诱导LLC-PK1细胞凋亡与p27^(Kip1)表达关系的研究

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中国抗生素杂志 2002年第8期27卷 485-489页

作者：傅鹏崔若兰袁伟杰周凤娟梅小斌戴建新孙树汉第二军医大学长海医院肾内科上海200433 第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海200433

目的　观察庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞凋亡的诱导作用 ;研究细胞周期调节蛋白 p2 7Kip1蛋白和mRNA表达在凋亡过程中的变化 ;并探讨细胞凋亡与p2 7Kip1之间的关系。方法　对体外培养的猪肾近端小管上皮细胞株 (LLC PK1细胞 )... 详细信息

目的　观察庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞凋亡的诱导作用 ;研究细胞周期调节蛋白 p2 7Kip1蛋白和mRNA表达在凋亡过程中的变化 ;并探讨细胞凋亡与p2 7Kip1之间的关系。方法　对体外培养的猪肾近端小管上皮细胞株 (LLC PK1细胞 )予以不同浓度的庆大霉素溶液分别作用 2 4～ 96h ,以MTT法测定庆大霉素对LLC PK1细胞增殖的抑制率 ,抽提细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡条带 ,流式细胞术测定细胞凋亡率和细胞增殖动力学 ,WesternBlot法检测细胞内p2 7Kip1的蛋白表达 ,RT PCR法检测细胞p2 7Kip1mRNA表达的变化。结果　庆大霉素对LLC PK1细胞增殖有抑制作用 ,具诱导LLC PK1细胞凋亡的作用 ,凋亡率呈药物浓度和作用时间依赖性 ;庆大霉素致细胞周期停滞于G1期。p2 7Kip1蛋白在细胞内的表达随着干预的庆大霉素浓度增加而逐渐上调 ,蛋白水平与凋亡率之间呈正相关 ,其mRNA表达趋势与其蛋白表达一致。结论　庆大霉素诱导的LLC PK1细胞凋亡与细胞周期蛋白p2 7Kip1表达密切相关。

关键词：庆大霉素 LLC-PK1细胞 p27^Kip1 细胞凋亡 MTT法

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大鼠硬膜外腔注射磷脂酶A_2后马尾神经根的电生理改变

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上海医学 2002年第4期25卷 220-223,T003页

作者：贺石生侯铁胜单晓巍王建文夏金辉王劼第二军医大学附属长海医院骨科上海200433 第二军医大学出版社第二军医大学生理教研室复旦大学医学院解剖教研室

目的　探讨磷脂酶A2 在腰腿痛发病中的作用。方法　向大鼠的硬膜外腔注射磷脂酶A2 ,然后对其马尾神经根的电生理及组织形态改变进行观察。结果　大鼠在磷脂酶A2 注射后电生理检查可见马尾神经根诱发电位出现明显的波幅降低及潜伏期延长 ... 详细信息

目的　探讨磷脂酶A2 在腰腿痛发病中的作用。方法　向大鼠的硬膜外腔注射磷脂酶A2 ,然后对其马尾神经根的电生理及组织形态改变进行观察。结果　大鼠在磷脂酶A2 注射后电生理检查可见马尾神经根诱发电位出现明显的波幅降低及潜伏期延长 ,组织学上可见马尾神经根出现明显的轴突变性。结论　磷脂酶A2 可能在椎间盘突出症患者腰腿痛的发病中起重要的作用。

关键词：磷脂酶A2 电生理疼痛马尾神经根大鼠腰腿痛硬膜外注射椎间盘突出

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膜联蛋白32与低分子质量单链尿激酶融合基因的构建及高效表达

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第二军医大学学报 2002年第4期23卷 378-380页

作者：颜宏利孙树汉陈蕊雯杨湘越第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的：构建膜联蛋白32（annexin32，Anx32）和低相对分子质量单链尿激酶（ScuPA32k）的融合基因，并在大肠杆菌系统内作表达。方法：利用重叠区扩增法进行基因拼接，然后在谷胱甘肽S转移酶原核表达系统内表达，Western印迹验证表达产物... 详细信息

目的：构建膜联蛋白32（annexin32，Anx32）和低相对分子质量单链尿激酶（ScuPA32k）的融合基因，并在大肠杆菌系统内作表达。方法：利用重叠区扩增法进行基因拼接，然后在谷胱甘肽S转移酶原核表达系统内表达，Western印迹验证表达产物。结果：重叠区扩增得到 1．8 kb融合基因，该基因在原核表达系统内得到高效表达，表达量占菌体总蛋白的 26％，Western印迹证明表达产物正确。结论：用重叠区扩增法进行基因拼接快速、简便。

关键词：膜联蛋白32 低相对分子质量单链尿激酶基因拼接基因表达重叠区扩增法大肠杆菌

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影响核酸疫苗应用研究的若干问题

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第二军医大学学报 2002年第4期23卷 353-354页

作者：孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

核酸疫苗又称基因疫苗或DNA疫苗,这种核酸既是载体又能在真核细胞中表达抗原,刺激机体产生特异而有效的免疫应答,尤其是能诱导产生具细胞毒杀伤性功能的T淋巴细胞,可有效预防病毒、细胞内寄生细菌和寄生虫所引起的传染病.核酸疫苗由于... 详细信息

核酸疫苗又称基因疫苗或DNA疫苗,这种核酸既是载体又能在真核细胞中表达抗原,刺激机体产生特异而有效的免疫应答,尤其是能诱导产生具细胞毒杀伤性功能的T淋巴细胞,可有效预防病毒、细胞内寄生细菌和寄生虫所引起的传染病.核酸疫苗由于具有可诱发全面的免疫应答、提供同种异株交叉保护作用、能制备抗多种病原体的多价疫苗、兼有预防和治疗的作用等优点,且制备简单、成本较低、容易储存运输,自上世纪90年代初问世以来,已在多种疾病[1～3]的防治研究中显示出巨大的应用潜力.在美国,目前乙肝病毒、HIV 核酸疫苗、流感DNA疫苗、单纯疱疹病毒DNA疫苗已进入Ⅱ期临床研究,疟疾DNA 疫苗已进入Ⅲ期临床研究.在我国,某些兽用疫苗也已进入应用研究阶段.然而核酸疫苗是一个新生事物,围绕着增强核酸疫苗的免疫效果和安全性、改善纯化工艺等国际热点问题,在理论上还没有真正得到解决.这些问题大大限制了核酸疫苗的推广应用.

关键词：核酸疫苗免疫应答安全性应用研究免疫效果

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缺血性急性肾功能衰竭病程进展中p27^(kip1)作用的研究

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中华肾脏病杂志 2002年第4期18卷 301-302页

作者：傅鹏崔若兰袁伟杰戴建新孙树汉第二军医大学长海医院肾内科上海200433 第二军医大学长海医院基础部医学遗传学教研室上海200433

在缺血性急性肾功能衰竭(ARF)中,肾脏能否通过受损肾小管上皮细胞的再生、增殖而实现其结构和功能的自我修复是病程转归的关键。而作为细胞增殖和分化共同途径的细胞周期,其运转过程由一系列调控因子即细胞周期调节蛋白(cellcycle regul... 详细信息

在缺血性急性肾功能衰竭(ARF)中,肾脏能否通过受损肾小管上皮细胞的再生、增殖而实现其结构和功能的自我修复是病程转归的关键。而作为细胞增殖和分化共同途径的细胞周期,其运转过程由一系列调控因子即细胞周期调节蛋白(cellcycle regulatory proteins,CCRP)所控制[1]。其中p27kip1是重要的负性CCRP,表现为p27kip1抑制细胞增殖[1],同时还可促进细胞分化成熟、诱导细胞凋亡[2]。为此,我们动态观察了缺血性ARF大鼠肾脏细胞增殖程度以及肾组织内p27kip1的表达,并探讨了p27kip1的表达量与肾小管上皮细胞增殖程度之间的关系,以明确缺血性ARF病程中p27kip1的可能作用。

关键词：缺血性急性肾功能衰竭 p27^kipl 肾小管上皮细胞细胞增殖动物实验

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