检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通讯 1995年第3期6卷 105-109,113页

作者：王易伦陈农安陆长德郭瀛军戴建新陆德如中国科学院生物化学研究所上海200032 第二军医大学分子遗传教研室上海200433

本文分析了9个表达量相差55倍的5′PCNA-LacZ′重组子的TIR二级结构与翻译起始效率的关系。在5′NTR顺序确定为28个核苷酸(从转录起始位点起)时,TIR范围在约编码第12个密码子(第33至37核苷酸)处存在一个二级结构及其△G的变化阈位,在该... 详细信息

本文分析了9个表达量相差55倍的5′PCNA-LacZ′重组子的TIR二级结构与翻译起始效率的关系。在5′NTR顺序确定为28个核苷酸(从转录起始位点起)时,TIR范围在约编码第12个密码子(第33至37核苷酸)处存在一个二级结构及其△G的变化阈位,在该阈位处按表达量调正重组子TIR的范围,得到△G与表达量之间相关系数为0.97的曲线;在TIR二级结构中,起始密码子处于配对的空间位置对翻译起始效率有明显抑制作用,但SD顺序的空间位置与表达量之间无明显相关性。

关键词：翻译起始二级结构 mRNA 表达调控相关性分析

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江浙沪地区汉人HLA－DQA1基因对重症肌无力的遗传易感性研究

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中华医学遗传学杂志 1995年第6期12卷 354-357页

作者：潘星华陆建荣猪子英俊谈家桢庚镇城张仁琴涂来慧蒋建明日本东海大学医学部分子生命科学系上海长海医院神经科第二军医大学生物学教研室医学分子生物学开放实验室复旦大学遗传学研究所

采用一种新的多聚酶链反应－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）基因分型法，研究了江浙沪地区中国汉人重症肌无力（ｍｙａｓｔｈｅｎｉａｇｒａｖｉｓ，ＭＧ）４５例和对照组９８例的ＨＬＡ－ＤＱＡ１等位基因。发现ＭＧ的胸腺... 详细信息

采用一种新的多聚酶链反应－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）基因分型法，研究了江浙沪地区中国汉人重症肌无力（ｍｙａｓｔｈｅｎｉａｇｒａｖｉｓ，ＭＧ）４５例和对照组９８例的ＨＬＡ－ＤＱＡ１等位基因。发现ＭＧ的胸腺瘤型和非胸腺瘤型ＤＱＡ１基因遗传背景有所不同，ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０３０１基因参与非胸腺瘤型ＭＧ（尤其是男性组）的遗传易感作用（ＲＲ＝３．６３，Ｐ＜０．０５），家系分析支持群体研究结果。推测了中国汉人ＭＧ可能的ＨＬＡ易感单体型：ＤＱＡ１＊０３０１ＤＱＢ１＊０３０３－ＤＲＢ１＊０９０１和ＤＱＡ１＊０３０１－ＤＱＢ１＊０３０３－ＤＲＢ１＊０４０６．结果从基因分型的角度统一了关于华人ＭＧ与ＨＬＡ相关抗原提法不一致的报道，并揭示了ＭＧ的其它ＨＬＡⅡ系统易感基因ＤＱＢ１＊０３０１、ＤＲＢ１＊０９０１及ＤＲＢ１＊０４０６或ＤＢＲ＊０４０５存在的极大可能性。为进一步分析ＭＧ的遗传易感机理提供了重要依据。

关键词：重症肌无力人类白细胞抗原DQA1基因多聚酶链反应－限制片段长度多态性遗传易感性中国汉人

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一种优化翻译起始效率的方法

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生物技术通讯 1995年第2期6卷 87-90页

作者：王易伦郭瀛军戴建新裘敏燕陆长德第二军医大学分子遗传教研室上海200433 中国科学院上海生物化学研究所上海200032

本文以人分裂细胞核抗原(PCNA)基因作为目的基因,把包括PCNA基因5′端非翻译区(5′NTR)的24bp和编码38个氨基酸114 bp的顺序插入pTZ19R,构建与LacZ’5′端的融合基因。用寡核苷酸定点突变法在PCNA 5′NTR形成SD顺序,再用PCR法在SD顺序... 详细信息

本文以人分裂细胞核抗原(PCNA)基因作为目的基因,把包括PCNA基因5′端非翻译区(5′NTR)的24bp和编码38个氨基酸114 bp的顺序插入pTZ19R,构建与LacZ’5′端的融合基因。用寡核苷酸定点突变法在PCNA 5′NTR形成SD顺序,再用PCR法在SD顺序左右两侧分别随机突变6个和7个碱基,使它们与结构基因5′端顺序自发地形成各种可能的翻译起始区(TIR)二级结构。重组质粒转化JM109(DE3),以T7 RNA聚合酶-T7启动子调控转录。对288个重组子的β-gal活性测定表明,不同重组的表达量可相差55倍,其中9个表达量不同的重组子的RNA dot blot证实它们在转录水平无明显表达差异。由此提示,该研究策略和方法能有效地改变目的基因的TIR二级结构和捕获具有高翻译起始效率的表达克隆。

关键词：翻译起始表达调控 T7 RNA聚合酶 β-半乳糖苷酶

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用Tip column法分离纯化mRNA

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生物技术通讯 1994年第4期5卷 193-194页

作者：王易伦戴建新郭瀛军第二军医大学分子遗传教研室上海200433

鉴于大多数真核生物的mRNA具有3′端poly(A)的特征,目前,分离mRNA广泛采田oligo(dT)纤维素层析法。尽管这一方法成熟可行,但存在以下问题;流速较慢;柱床易发生堵塞;操作费时;洗脱体积较大。常需先沉淀浓缩后才能进行后续实验(如cDNA合... 详细信息

鉴于大多数真核生物的mRNA具有3′端poly(A)的特征,目前,分离mRNA广泛采田oligo(dT)纤维素层析法。尽管这一方法成熟可行,但存在以下问题;流速较慢;柱床易发生堵塞;操作费时;洗脱体积较大。常需先沉淀浓缩后才能进行后续实验(如cDNA合成);在制备少量mRNA时,回收率较低等。据此,我们对mRNA分离方法作了改良,利用oligo(dT)纤维素吸附mRNA容量大的特点。

关键词： oligo 真核生物层析法洗脱体积分离纯化 Tip column 洗脱缓冲液层析柱洗脱液倍比稀释

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抗bFGF抗体对雄激素及糖皮质激素促SC-3细胞增殖作用的抑制效应

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中国肿瘤生物治疗杂志 1994年第1期1卷 54-58页

作者：卢建张金山松本圭史第二军医大学病理生理教研室上海200433 日本大阪大学医学部第二病理学教研室

以无血清培养的小鼠乳腺癌细胞(SC-3)为模型,研究了雄激素及糖皮质激素(GC)对该细胞增殖促进作用及其机制。实验表明,生理剂量的睾酮(T)及药理剂量的地塞米松(Dex)对SC-3细胞均有明显的增殖促进作用,该作用通过两激素各自的受体介导,两... 详细信息

以无血清培养的小鼠乳腺癌细胞(SC-3)为模型,研究了雄激素及糖皮质激素(GC)对该细胞增殖促进作用及其机制。实验表明,生理剂量的睾酮(T)及药理剂量的地塞米松(Dex)对SC-3细胞均有明显的增殖促进作用,该作用通过两激素各自的受体介导,两激素均可诱导SC-3细胞产生成纤维细胞生长因子(FDF)样因子,该细胞膜上存在能与FGF高亲和力结合的FGF受体,用抗碱性FGF(bFGF)抗体能将雄激素及GC的促增殖作用抑制70％,从而证明了雄激素及GC对SC-3细胞的保增殖作用通过诱导该细胞产生自分泌的FGF样因子介导。

关键词：抗bFGF抗体雄激素糖皮质激素 SC-3细胞增殖抑制效应乳腺癌癌细胞

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差异筛选人胃癌组织异常高表达的基因

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中华肿瘤杂志 1993年第5期15卷 325-328页

作者：王易伦孙仑泉 710032，西安第四军医大学生化教研室 200433，第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所

对一例用人低分化胃腺癌组织构建的cDNA文库进行差异筛选,筛选所用的探针来自于同一患者手术标本的癌变组织和癌旁正常组织的两种cDNA探针。经二轮原位噬菌斑筛选,从约20000个噬菌斑中获得4个初选克隆,再以这些克隆的cDNA插入片段作为探... 详细信息

对一例用人低分化胃腺癌组织构建的cDNA文库进行差异筛选,筛选所用的探针来自于同一患者手术标本的癌变组织和癌旁正常组织的两种cDNA探针。经二轮原位噬菌斑筛选,从约20000个噬菌斑中获得4个初选克隆,再以这些克隆的cDNA插入片段作为探针,对9例胃癌组织及其癌旁正常组织作RNA打点杂交定量分析,最后获得一个在胃癌组织中异常高表达的基因hSCG-3。序列分析表明,hSCG-3是一个未知的基因,它有可能成为胃癌诊治的一个新标志。

关键词：胃肿瘤基因表达 DNA探针

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重组嵌合毒素研究近况

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国外医学（分子生物学分册） 1993年第2期15卷 79-83页

作者：苗小飞孙宪涛第二军医大学医学防护教研室上海200433 第二军医大学临床免疫学研究所上海200003

重组嵌合毒素是现代抗肿瘤药物研究的一个令人瞩目的领域.由于化疗药物对人体危害较大和不敏感性等,使毒素在肿瘤治疗方面的作用日益受到重视,利用基因融合的方法制备重组嵌合毒素,使新生的蛋白物质既有毒素的细胞毒作用又有特异结合功... 详细信息

重组嵌合毒素是现代抗肿瘤药物研究的一个令人瞩目的领域.由于化疗药物对人体危害较大和不敏感性等,使毒素在肿瘤治疗方面的作用日益受到重视,利用基因融合的方法制备重组嵌合毒素,使新生的蛋白物质既有毒素的细胞毒作用又有特异结合功能,在体内、体外都显示出良好的杀伤靶细胞作用.

关键词：重组嵌合毒素毒素

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