检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2000年第2期21卷 101-103页

作者：道书艳卞广兴苗红邱磊郭葆玉余建国张淑英第二军医大学药学院生化药学教研室上海200433 济南军区第88医院肝病研究中心第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室

目的 :我们克隆了有中国人特征的胸腺素 α原 (prothymosinα,PTMAα)全长 c DNA,并进行测序分析。方法 :从健康中国人 PBMC po1y(A) + RNA中采用 RT- PCR法克隆 hu PTMAα c DNA,酶切鉴定 ,序列分析。结果 :经测序后发现该基因是一个... 详细信息

目的 :我们克隆了有中国人特征的胸腺素 α原 (prothymosinα,PTMAα)全长 c DNA,并进行测序分析。方法 :从健康中国人 PBMC po1y(A) + RNA中采用 RT- PCR法克隆 hu PTMAα c DNA,酶切鉴定 ,序列分析。结果 :经测序后发现该基因是一个与国外的高加索人种胸腺素 α原有 86 .4%同源性的新基因。结论 :从中国人中新发现了一个 hu PTMAα基因 ,并于日前被美国 NCBI(National Center of Biotechnology Inform ation) Gen Bank收入 ,获得登录号 (Accession:AF170 2 94)

关键词：胸腺素α原 cDNA 结构分析克隆

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克隆人胸腺素α原cDNA及RNA二级结构分析和带Xa因子的融合表达

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第二军医大学学报 2000年第1期21卷 34-37页

作者：郭葆玉余建国张淑英道书艳苗红邱磊第二军医大学药学院生化药学教研室上海200433 济南军区第88医院肝病研究中心第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室

目的：克隆表达具有重要生物功能的胸腺素α原ｃＤＮＡ（ｈｕｍａｎｐｒｏｔｈｙｍｏｓｉｎα，ｈｕＰＴＭＡα）。方法：从健康中国人ＰＢＭＣｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ中采用ＲＴ－ＰＣＲ法克隆ｈｕＰＴＭＡαｃＤＮＡ，并作ＲＮ... 详细信息

目的：克隆表达具有重要生物功能的胸腺素α原ｃＤＮＡ（ｈｕｍａｎｐｒｏｔｈｙｍｏｓｉｎα，ｈｕＰＴＭＡα）。方法：从健康中国人ＰＢＭＣｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ中采用ＲＴ－ＰＣＲ法克隆ｈｕＰＴＭＡαｃＤＮＡ，并作ＲＮＡ二级结构分析。结果：克隆出长度为３００ｂｐ，编码１００个氨基酸的ｈｕＰＴＭＡαｃＤＮＡ，经氨基酸序列分析发现在３７～４１位缺失Ａｓｎ３７－Ｇｌｙ３８－Ａｓｎ３９－Ａｌａ４０－Ｇｌｕ４１和６５～６８位缺失Ｇｌｕ６５－Ｇｌｕ６６－Ｇｌｕ６７－Ｇｌｕ６８，与国际基因库连接检索证明是与ｈｕＰＴＭＡα有８６．４％同源性的一个新亚型，融合表达蛋白的相对分子质量为３．７×１０４，有促进ＩＦＮ和ＴＮＦ产生的生物学活性。结论：本研究克隆的ｈｕＰＴＭＡαｃＤＮＡ是中国人中新发现的一个多态型基因序列，它的克隆并表达成功为今后该基因的免疫功能研究及中国人基因型研究分析提供了有用的材料。

关键词：胸腺素α原 RNA 融合表达克隆 cDNA

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人单核细胞趋化蛋白受体5的基因克隆及该基因超家族成员氨基酸结构分析(英文)

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第二军医大学学报 2000年第11期21卷 1055-1058页

作者：郭葆玉张淑英余建国道书艳苗红邱磊第二军医大学药学院生化药学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室济南军区第88医院肝病研究中心

目的 :获取有重要生物功能的人单核细胞趋化蛋白受体 5 (hum an m onocyte chemotactic receptor5 ,hu CCR5 )。方法 :从人 PBMC中提取总 RNA和 poly(A) + RNA,而后经反转录合成 c DNA第一链 ,再以 PCR扩增出 hu CCR5 c DNA并插入融合... 详细信息

目的 :获取有重要生物功能的人单核细胞趋化蛋白受体 5 (hum an m onocyte chemotactic receptor5 ,hu CCR5 )。方法 :从人 PBMC中提取总 RNA和 poly(A) + RNA,而后经反转录合成 c DNA第一链 ,再以 PCR扩增出 hu CCR5 c DNA并插入融合表达载体 pc DNA3.0的 Bam H 和 Hind 位点 ,转化大肠杆菌 TG- 1,挑取克隆 ,酶切鉴定 ,序列分析。结果 :克隆出长度为 10 5 6 bp,编码 35 2个氨基酸的 hu CCR5 c DNA。并分析证明与该基因超家族氨基酸有 80 %同源性 ,与国外发表资料比较有3个碱基突变。结论 :克隆出人单核细胞趋化蛋白 5受体 ,为今后基础研究提供了较有用的材料。

关键词：人单核细胞趋化蛋白受体5 克隆氨基酸

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乙型肝炎前S1蛋白的融合表达

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第二军医大学学报 2000年第3期21卷 294-295页

作者：郭葆玉李文捷杜风鸣张淑英汤琰程振球第二军医大学药学院生化药学教研室上海200433 海军医学研究所免疫室第二军医大学长海医院检验科基础医学部卫生毒理学教研室

研究发现,肝炎病毒前S1和前S2蛋白与HBV的复制密切相关,而前S1蛋白较前S2蛋白在HBV的致病机制上可能起着更为重要的作用.现在越来越多的医院将检测前S1蛋白做为HBV复制的指标和判断HBV活动性的一个重要依据.我国是肝炎高发区,HBVsAg 携... 详细信息

研究发现,肝炎病毒前S1和前S2蛋白与HBV的复制密切相关,而前S1蛋白较前S2蛋白在HBV的致病机制上可能起着更为重要的作用.现在越来越多的医院将检测前S1蛋白做为HBV复制的指标和判断HBV活动性的一个重要依据.我国是肝炎高发区,HBVsAg 携带者为1.2亿以上(全世界3亿),为提高对HBV的诊断、治疗和预防水平,我们克隆并对前S1蛋白129个氨基酸进行了融合表达、纯化和实验应用.现将实验结果报道如下.

关键词：乙型肝炎前S1蛋白蛋白凳合基因表达

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恶性疟原虫裂殖子表面蛋白2基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

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第二军医大学学报 2000年第4期21卷 322-325页

作者：陈志辉管惟滨吴少廷缪为民焦炳华第二军医大学基础医学部寄生虫学教研室上海200433 深圳市卫生防疫站第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室

目的：克隆恶性疟原虫裂殖子表面蛋白２全基因，并在大肠杆菌中进行表达。方法：采用ＰＣＲ扩增恶性疟原虫ＦＣＣ－１／ＨＮ株ＭＳＰ２基因，克隆插入ｐＵＣ１９，并重组人表达质粒载体中，转化大肠杆菌，诱导重组质粒ｐＢＫ－ＣＭＶ／... 详细信息

目的：克隆恶性疟原虫裂殖子表面蛋白２全基因，并在大肠杆菌中进行表达。方法：采用ＰＣＲ扩增恶性疟原虫ＦＣＣ－１／ＨＮ株ＭＳＰ２基因，克隆插入ｐＵＣ１９，并重组人表达质粒载体中，转化大肠杆菌，诱导重组质粒ｐＢＫ－ＣＭＶ／ｍｓｐ２表达ＭＳＰ２蛋白抗原，对表达产物进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｗｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定。结果：ＰＣＲ扩增出８２４ｂｐＤＮＡ片段。

关键词：恶性疟原虫裂殖子表面蛋白2 基因克隆大肠杆菌

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乙醇及乙醛对胚胎发育的联合作用

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中国药理学与毒理学杂志 2000年第5期14卷 373-378页

作者：屈卫东张天宝吴德生邓莹周颖上海医科大学公共卫生学院环境卫生学教研室上海200032 第二军医大学卫生毒理学教研室上海200433 华西医科大学公共卫生学院环境卫生学教研室四川成都610041

为探讨乙醇及其代谢产物乙醛在胎儿酒精综合征 (FAS)中的作用 ,应用植入后全胚胎培养研究不同浓度的乙醇 ,乙醛组合对 9.5- 1 1 .5d大鼠胚胎发育的联合作用 .结果显示在卵黄囊直径 ,头长 ,体长 ,心脏 ,前脑 ,DNA含量等指标乙醇与乙醛存... 详细信息

为探讨乙醇及其代谢产物乙醛在胎儿酒精综合征 (FAS)中的作用 ,应用植入后全胚胎培养研究不同浓度的乙醇 ,乙醛组合对 9.5- 1 1 .5d大鼠胚胎发育的联合作用 .结果显示在卵黄囊直径 ,头长 ,体长 ,心脏 ,前脑 ,DNA含量等指标乙醇与乙醛存在交互作用 .进一步分析发现 0 .1 g·L-1乙醇与不同剂量乙醛组合可导致拮抗 ,协同和独立等多种联合作用类型 ,但对头长和脑均表现为独立作用 . 0 .2 g· L-1乙醇与不同剂量乙醛组合除心脏呈协同作用外其余均为乙醇独立作用 .上述结果提示 FAS中的脑发育异常是乙醇独立作用的结果。

关键词：璃乙醛胚胎发育联合作用

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中国姥鲨软骨源新生血管抑制因子(Sp8)的分离纯化及生物学活性

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第二军医大学学报 2000年第2期21卷 107-110页

作者：陈建鹤焦炳华缪为民王路王梁华缪辉南解放军第422医院内二科广东湛江524005 第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的 :从中国姥鲨软骨组织抽提蛋白质中筛选具有新生血管抑制活性和抗肿瘤活性的分子。方法 :盐酸胍抽提姥鲨软骨蛋白 ,采用超滤和分子筛柱层析等方法分离纯化获得相对分子质量为 8.3× 10 3的蛋白质 (Sp8) ,以体外抑制血管内皮细... 详细信息

目的 :从中国姥鲨软骨组织抽提蛋白质中筛选具有新生血管抑制活性和抗肿瘤活性的分子。方法 :盐酸胍抽提姥鲨软骨蛋白 ,采用超滤和分子筛柱层析等方法分离纯化获得相对分子质量为 8.3× 10 3的蛋白质 (Sp8) ,以体外抑制血管内皮细胞增殖、体内抑制新生血管生长和抑制小鼠移植 S180肉瘤生长作为筛选指标。结果 :Sp8可在体外抑制血管内皮细胞增殖 ,40μg/ml浓度时抑制率为 2 0 % ;在体内具有抑制新生血管生长的作用 ,兔角膜模型抑制率为 72 .7% ,鸡胚模型 (CAM)抑制率为 79% ;并能明显抑制小鼠体内移植 S180肉瘤的生长 (P<0 .0 0 1)。结论 :Sp8介导了鲨鱼软骨中的抗肿瘤活性 ,其作用可能是通过抑制肿瘤诱生新生血管形成这一途径来实现的。

关键词：鲨鱼软骨抑制因子新生血管抗肿瘤活性

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人单核细胞趋化蛋白1基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

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第二军医大学学报 2000年第4期21卷 318-321页

作者：王汉涛郭葆玉屠岳王元和张淑英孟荣贵第二军医大学长海医院普通外科上海200433 药学院生化药学教研室长征医院普通外科基础医学部卫生毒理学教研室

目的：克隆表达具有重要生物功能的人单核细胞趋化蛋白１（ｈｕＭＣＰ－１）。方法：从人外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中提取ｐｏｌｙ（Ａ）~＋ＲＮＡ，用ＲＴ－ＰＣＲ法扩增出ｈｕＭＣＰ－１ｃＤＮＡ。将ｈｕＭＣＰ－１ｃＤＮＡ插... 详细信息

目的：克隆表达具有重要生物功能的人单核细胞趋化蛋白１（ｈｕＭＣＰ－１）。方法：从人外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中提取ｐｏｌｙ（Ａ）~＋ＲＮＡ，用ＲＴ－ＰＣＲ法扩增出ｈｕＭＣＰ－１ｃＤＮＡ。将ｈｕＭＣＰ－１ｃＤＮＡ插入融合表达载体ｐＧＥＸＩＮ，１ｍｍｏｌ／Ｌ异丙基－β－Ｄ－硫代半乳糖苷（ＩＰＴＧ）诱导后获得高效表达。结果：Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证明与ｈｕＭＣＰ－１单克隆抗体有明显交叉反应。结论：ｈｕＭＣＰ－１基因的克隆并表达成功为今后的实验室和临床研究提供了有用的材料。

关键词：基因克隆融合表达单核细胞趋化蛋白 huMCP-1

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大鼠头端延髓腹外侧区 NMDA受体在动脉压力感受器反射中的作用

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第二军医大学学报 2000年第8期21卷 739-741页

作者：肖振祥王伟忠施善芬陈辉孙刚上海市松江区卫生学校 201600 第二军医大学基础医学部生理学教研室上海200433 第二军医大学学员一旅

目的 :研究大鼠头端延髓腹外侧区 (RVL M)谷氨酸 NMDA受体在介导动脉压力感受器反射 (ABR)中的作用。方法 :在氨基甲酸乙酯麻醉的大鼠 RVL M双侧各微注射 0 .1μl的 5 0 mm ol/L氯胺酮 ,观察动脉血压、心率以及 ABR的变化。结果 :双侧 ... 详细信息

目的 :研究大鼠头端延髓腹外侧区 (RVL M)谷氨酸 NMDA受体在介导动脉压力感受器反射 (ABR)中的作用。方法 :在氨基甲酸乙酯麻醉的大鼠 RVL M双侧各微注射 0 .1μl的 5 0 mm ol/L氯胺酮 ,观察动脉血压、心率以及 ABR的变化。结果 :双侧 RVL M内微注射氯胺酮后动脉血压和心率明显下降 (P<0 .0 5 ) ,同时能部分或完全阻断 ABR(P<0 .0 5 )。结论 :谷氨酸 NMDA受体在维持交感心血管活动的紧张性兴奋和介导 ABR中具有十分重要的作用。

关键词：头端延髓腹外侧区动脉压力感受器反射 NMDA受体

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中国姥鲨软骨源溶菌酶样分子的分离纯化、部分氨基酸序列测定及体内抗肿瘤活性研究

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药物生物技术 2000年第2期7卷 77-81页

作者：陈建鹤焦炳华缪为民王梁华冯煜朱玉平娄永华缪辉南第二军医大学毒理学教研室上海200433 第二军医大学微生物学教研室上海200433

用含 0 0 2mol/LMES的 1mol/L盐酸胍抽提新鲜中国姥鲨软骨组织 ,抽提物经Mr30 0 0 0PTTK膜超滤、SephacrylS 2 0 0和Superdex 75柱层析获得 1种新的Mr 为 15 2 0 0的高纯度蛋白质 (Sp15 ) ,N 末端序列测定表明其与多种哺乳动物来源的... 详细信息

用含 0 0 2mol/LMES的 1mol/L盐酸胍抽提新鲜中国姥鲨软骨组织 ,抽提物经Mr30 0 0 0PTTK膜超滤、SephacrylS 2 0 0和Superdex 75柱层析获得 1种新的Mr 为 15 2 0 0的高纯度蛋白质 (Sp15 ) ,N 末端序列测定表明其与多种哺乳动物来源的溶菌酶具有相关性 ,并在体外具有显著的溶菌酶活性 ,其比活性高达 2 2 30 0 0U/mg ;Sp15在 10 μg/ml浓度下 ,可显著抑制血管内皮细胞的增殖 ,其抑制率高达 75 % ;在 8mg/kg剂量下 ,对小鼠移植的S180肉瘤的抑瘤率达 33 3% ,并可显著延长荷S180腹水瘤小鼠的生存时间。

关键词：鲨鱼软骨溶菌酶抗肿瘤活性氨基酸

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