检索结果-内蒙古大学图书馆

案例教学模式在军事卫生毒理学课程改革中的运用

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西北医学教育 2015年第6期23卷 1024-1026页

作者：于卫华张晓迪王欣刘江正海春旭第四军医大学军事预防医学院军事毒理学教研室陕西西安710032

分析了案例教学法在军事卫生毒理学课程中应用的可行性,并从课前准备阶段案例库建立、课程实施阶段案例展开和课后考核阶段案例解析等三个方面阐述了案例教学法在军事卫生毒理学课程中的运用情况。

关键词：案例教学卫生毒理学课程改革

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铅暴露对大脑屏障的损伤作用及其机制研究

铅暴露对大脑屏障的损伤作用及其机制研究

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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛

作者：郑刚宋晗刘新秦沈学锋骆文静陈景元第四军医大学军事预防医学院劳动与环境卫生教研室

【目的】研究铅暴露对大脑屏障,即血-脑屏障（blood-brain barrier,BBB）和血-脑脊液屏障（blood-cerebrospinal fluid barrier,BCB）,结构和功能的损伤作用及其分子机制。【材料和方法】BBB体外模型选择大鼠大脑微血管内皮细胞系RBE4... 详细信息

【目的】研究铅暴露对大脑屏障,即血-脑屏障（blood-brain barrier,BBB）和血-脑脊液屏障（blood-cerebrospinal fluid barrier,BCB）,结构和功能的损伤作用及其分子机制。【材料和方法】BBB体外模型选择大鼠大脑微血管内皮细胞系RBE4与星型胶质瘤细胞C6共培养建立,BCB体外模型选择大鼠脉络丛上皮细胞系Z310建立,铅暴露剂量为10μmol/L,。采用葡聚糖通过性实验评价屏障结构的完整性,Western blot和免疫荧光等方法检测紧密连接蛋白occludin和ZO-1的表达水平变化;,以Western blot检测Src、Erk、GRP78、connexin-43、基质金属蛋白酶-2,9（MMP-2,9）等分子的磷酸化水平或表达改变,同时采用siRNA技术、或使用信号通路磷酸化抑制剂、基质金属蛋白酶抑制剂等,观察上述分子在铅暴露所致紧密连接蛋白表达下降中的调控作用。另外,采用Cu示踪技术,并构建铜离子转运体1（CTR1）可诱导高表达细胞系,观察铅暴露对大脑屏障离子转运功能的影响。【结果】在屏障结构方面,铅暴露可引起BBB和BCB屏障完整性的破坏,对葡聚糖的通透性增高,伴随有紧密连接蛋白occludin和ZO-1的表达水平下降（p<0.01）。同时,铅可引起RBE4和Z310细胞Src和Erk磷酸化水平的显著增高（p<0.01）,使用相应磷酸化抑制剂分别阻断Src或Erk通路后,结果显示Src磷酸化特异性负向调控occludin蛋白水平,而Erk磷酸化则特异性负向调控ZO-1蛋白水平;在BBB模型中,铅可以通过增高内质网分子伴侣GRP78的表达水平而调控Src的磷酸化,而在BCB模型中,铅暴露并未引起GRP78表达水平的显著增高。另外,铅暴露引起C6细胞MMP-2、MMP-9表达水平及活性的增强（p<0.01）,使用MMPs抑制剂,可在一定程度上恢复BBB体外模型的完整性,表明胶质细胞源性MMPs也参与了铅破坏BBB的过程。在屏障转运功能方面,铅可以通过上调CTR1的表达水平,引起BCB对Cu吸收的增加,并导致细胞氧化应激水平增高（p<0.01）;采用Tet可诱导CTR1高表达细胞进行实验,发现铅可下调细胞ATP7A的表达,从而抑制细胞内Cu的排出。【结论】铅暴露可通过影响Src和Erk通路的磷酸化水平,分别引起特定紧密连接蛋白水平的下降,导致大脑屏障通透性增高;而在BBB和BCB中,GRP78和MMPs对于屏障破坏所起的作用并不完全相同。同时,铅还可引起大脑屏障金属离子转运功能的异常。上述结构和功能的损伤可导致大脑屏障对于物质的过滤和转运能力受损,从而导致大脑内部微环境的紊乱。

关键词：铅血-脑屏障血-脑脊液屏障紧密连接蛋白转运

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IL-1抑制剂研发策略及临床应用进展

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中国新药杂志 2014年第10期23卷 1121-1126页

作者：余琛琳宗英张晓芳袁伯俊崔淑芳陆国才第二军医大学药物安全性评价中心第二军医大学实验动物中心

白细胞介素-1(IL-1)是促炎细胞因子,在许多急性和慢性炎症性疾病中起着重要作用。通过抑制IL-1活性可以治疗IL-1介导的炎症性疾病。IL-1抑制剂的研发策略有阻断或拮抗IL-1受体和中和IL-1策略等。IL-1抑制剂临床上可用于治疗自身炎症性... 详细信息

白细胞介素-1(IL-1)是促炎细胞因子,在许多急性和慢性炎症性疾病中起着重要作用。通过抑制IL-1活性可以治疗IL-1介导的炎症性疾病。IL-1抑制剂的研发策略有阻断或拮抗IL-1受体和中和IL-1策略等。IL-1抑制剂临床上可用于治疗自身炎症性疾病、关节炎、痛风、卒中、糖尿病及其并发症、肿瘤等疾病,其临床安全性主要关注增加机体感染风险和对造血系统特别是中性粒细胞的影响。IL-1拮抗剂的研发将使更多的炎症相关疾病患者从中获益。

关键词：白细胞介素-1 炎症性疾病 IL-1抑制剂研发策略临床应用

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GRP78参与低剂量铅暴露致血脑屏障紧密连接损伤的机制研究

GRP78参与低剂量铅暴露致血脑屏障紧密连接损伤的机制研究

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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛

作者：宋晗郑刚沈学锋刘新秦骆文静陈景元第四军医大学军事预防医学院劳动与环境卫生教研室

【目的】铅是环境中广泛存在的一种重金属元素,具有很强的神经发育毒性。血脑屏障则对早期铅暴露尤为敏感,文献显示铅可以显著降低其紧密连接蛋白(TJ)occludin与ZO-1的水平,但是其下调机制并不明确。而TJ的破坏与内质网应激密切相关,既... 详细信息

【目的】铅是环境中广泛存在的一种重金属元素,具有很强的神经发育毒性。血脑屏障则对早期铅暴露尤为敏感,文献显示铅可以显著降低其紧密连接蛋白(TJ)occludin与ZO-1的水平,但是其下调机制并不明确。而TJ的破坏与内质网应激密切相关,既往报道发现在不同的细胞中,铅可以显著上调作为内质网应激标记分子的78KD葡萄糖调节蛋白(GRP78),因此本文旨在探索GRP78在铅下调紧密连接蛋白的关键作用。【材料和方法】体内模型选取21d龄SD大鼠,按完全随机方法分为对照组和三个剂量的染铅组(100,200和300ppm)。暴露8w后进行硝酸镧灌注检测渗漏情况,Western blot检测脑组织TJ蛋白的表达,提取脑微血管进行磷酸化蛋白芯片检测。体外模型选择大鼠大脑微血管内皮细胞系(RBE4)作为研究对象,采用星型胶质瘤细胞(C6)上清共培养RBE4细胞,MTT法筛选最佳剂量,RTPCR检测GRP78的mRNA水平,Western blot检测GRP78,P-SRC,C-SRC,ZO-1,occludin等蛋白水平。GRP78的siRNA干涉技术和SRC磷酸化的阻断剂用于研究分子间调节的上下游关系。使用免疫细胞化学和免疫电镜检测GRP78在细胞中分布以及定位,生物素标记活细胞膜蛋白检测质膜GRP78的表达,中和抗体技术封闭膜GRP78后检测信号通路改变。【结果】体内模型证明铅引起硝酸镧颗粒的渗漏,降低occludin与ZO-1的蛋白水平,蛋白芯片显示SRC的磷酸化水平变化显著(3.19倍)。体外模型中,10μM在6-48时间点上均能引起SRC的磷酸化水平显著升高(24h最高),总SRC水平被负反馈抑制,SRC的磷酸化阻断剂实验显示SRC的磷酸化在铅负向调节occludin,正向调节ZO-1。进一步,在6-48h时间点上均能引起GRP78的mRNA和蛋白水平的显著身高(24h最高),GRP78的siRNA干涉技术实验显示GRP78同样负向调节occludin,正向调节ZO-1,方向同SRC的磷酸化一致。同时证明GRP78是SRC的磷酸化的上游分子。免疫细胞化学发现对照组GRP78的分布在近核区,铅处理后远核区分布明显增加。免疫电镜结果显示铅能够显著引起GRP78定位的改变,内质网以外的区域以及细胞膜上明显增多。生物素化膜蛋白实验进一步证明铅可以引起细胞膜GRP78蛋白水平上调,但是中和抗体封闭后并未引起SRC的磷酸化的逆转。【结论】GRP78作为关键的分子通过SRC的磷酸化参与铅特异性下调occludin,而不是ZO-1。因为GRP78作为受体引起该通路的变化得以排除,推测这个过程更有可能通过胞内完成。

关键词：铅血脑屏障紧密连接蛋白 78KD葡萄糖调节蛋白(GRP78) Src信号通路

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幼年期大鼠铅暴露改变突触功能可塑性及结构可塑性损害海马相关的学习和记忆

幼年期大鼠铅暴露改变突触功能可塑性及结构可塑性损害海马相关的...

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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛

作者：王涛官瑞丽刘明朝骆文静第四军医大学预防医学系劳动与环境卫生学教研室

【目的】铅是一种环境毒物,铅暴露导致各种神经行为改变,比如学习记忆损害,青春期儿童的行为暴力倾向增加。以前大量的研究集中与发育早期铅暴露(孕期至哺乳期)对神经行为的影响。在我们这项研究中,我们通过对幼年期大鼠铅暴露(幼年期... 详细信息

【目的】铅是一种环境毒物,铅暴露导致各种神经行为改变,比如学习记忆损害,青春期儿童的行为暴力倾向增加。以前大量的研究集中与发育早期铅暴露(孕期至哺乳期)对神经行为的影响。在我们这项研究中,我们通过对幼年期大鼠铅暴露(幼年期至成年期)。【材料和方法】我们采用行为学方法,对大鼠恐惧学习记忆,大鼠运动功能,疼痛状态进行了检测。采用电生理方法检测了海马突触可塑性,AMPA电流和NMDA受体电流功能。采用形态学方法研究了突触结构的改变最终验证其神经行为学改变及其相关性。【结果】我们的结果表明,幼年期铅暴露导致成年大鼠恐惧条件化记忆损害以及焦虑样症状,而运动及痛觉感觉并没有明显改变。电生理研究发现,铅暴露大鼠诱导长时程增强受到影响,而这可能与兴奋性突触传递改变有关。另外我们发现NMDA及AMPA受体电流受到抑制,然而GABA突触传递并没有受到影响。Westem blot结果显示,磷酸化的GluR1及GR2A表达降低。另外,通过形态学研究发现,铅暴露大鼠树突棘密度减少20%,进一步分析发现,树突棘减少主要集中与海马的放射层,对树突棘形态进行量化分析发现,树突棘头部直径减少,树突棘长度增加,呈现不成熟状态。【结论】我们的结果表明,幼年期铅暴露导致大鼠学习记忆能力降低,但对基础的运动及痛觉无显著性影响。铅暴露主要影响突触可塑性,这与AMPA受体及NMDA受体功能与表达数量呈相关性。另外铅暴露导致树突棘数量及形态发生变化。这些变化与神经行为学变化紧密相关。

关键词：树突棘恐惧条件记忆海马铅突触可塑性

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hSulf-1在胆囊癌间质、上皮、淋巴结中表达下降及其影响

hSulf-1在胆囊癌间质、上皮、淋巴结中表达下降及其影响

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作者：闫培宁第二军医大学

学位级别：博士

【背景】人硫酸酯酶1（hSulf-1）基因位于8号染色体长臂8q13.3上，大小约257Kb，开放阅读框架（open reading frame，ORF）长2616bp，编码871个氨基酸残基。氨基酸序列可分为4段：信号肽（23AA），硫酸酯酶结构域（373AA），亲水结构域... 详细信息

【背景】人硫酸酯酶1（hSulf-1）基因位于8号染色体长臂8q13.3上，大小约257Kb，开放阅读框架（open reading frame，ORF）长2616bp，编码871个氨基酸残基。氨基酸序列可分为4段：信号肽（23AA），硫酸酯酶结构域（373AA），亲水结构域（346AA）和C端结构域（109AA）。hSulf-1能够特异性水解硫酸乙酰肝素（HS）链上的6-氨基葡萄糖硫酸酯键，将6-O-氨基葡萄糖从HS链上解离下来。硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）能够稳定肝素结合生长因子受体类信号通路，其功能发挥有赖于完整的HS链。当hSulf-1表达时，HSPG的硫酸化状态下降，信号通路稳定性下降，能够传导至胞内的有效信号减少，从而降低细胞增殖等。因此hSulf-1被认为是细胞功能下调基因，能够影响肝素结合类生长因子及wnt信号通路等。其在多种肿瘤组织，如肝癌、肺癌、结肠癌、乳腺癌、卵巢癌中表达下调，但在胰腺癌中表达上调，其变化与肿瘤具有相关关系且与部分肿瘤的预后相关。 hSulf-1在胆囊癌中的表达情况尚不清楚，其在胆囊中表达状态与肝素结合生长因子受体类信号通路的关系也不清楚。hSulf-1在间质（包括间质细胞和基质）中的表达也未见报道，因此其在间质中表达有无改变也不清楚。本研究采取临床手术中的胆囊癌肿瘤组织及非肿瘤组织、淋巴结组织，采用免疫组织化学的方法进行蛋白表达的原位检测，同时检测了几种常见的细胞信号通路蛋白，采用光密度软件测定蛋白表达光密度值，经过统计分析，分别观察hSulf-1在非肿瘤及肿瘤胆囊间质、上皮、淋巴结中的表达。并分析其表达对部分细胞信号通路的影响及其与部分信号通路蛋白的相互关系。通过干扰间质细胞hSulf-1表达进一步分析间质细胞hSulf-1表达改变后对肿瘤细胞趋化能力的影响。饮酒与人类生活息息相关，根据世界卫生组织报道，58%的成年人在最近的12个月内饮过酒。研究表明，乙醇与多种癌症的发生有关，但是乙醇与癌症侵袭转移的关系尚不明确：有文献认为二者不相关；也有文献认为饮用不同浓度的酒精对癌症侵袭转移的影响不同，高浓度抑制、低浓度促进、中等浓度不相关；此外也有文献认为中低浓度抑制、高浓度促进；尚有文献认为，摄入酒精的量是决定因素，重度酗酒者癌症侵袭转移加快，中等量或低等量饮酒则无明显影响。乙醇与癌症侵袭转移的相关关系有了明确的定论后，可以解决以下临床问题：1，为预防癌症的早期侵袭转移，健康成年人群是否有必要适量饮酒？2，已经明确诊断的癌症患者，本来有饮酒习惯者是否需要戒酒？本来无饮酒习惯者，是否有必要适量饮酒？在将来的实验研究中可以将低表达hsulf-1的胆囊癌细胞系进行转染使其正常表达hsulf-1，此时再检验乙醇刺激对胆囊癌细胞迁移侵袭的影响，从而可以判断hsulf-1有没有在该过程中发挥作用。第一部分hSulf-1在胆囊癌间质中表达下降【目的】检测临床手术中取得的胆囊癌患者组织标本间质组织中hSulf-1的表达，明确与非肿瘤间质组织相比，hSulf-1在胆囊癌间质中表达。【方法】取上海东方肝胆外科医院2012-2至2013-09收治的胆囊癌患者的胆囊肿瘤及其非胆囊癌组织，排除术后病理结果回报中报告为非胆囊癌者，共取得84组组织：胆囊肿瘤组织84例，胆囊非肿瘤组织84例。将组织经石蜡包埋，制作成组织芯片，每张芯片上84个组织点。采用免疫组化方法在组织芯片上检测hSulf-1及一系列相关蛋白。对结果采用IPP6.0软件进行光密度分析，对光密度值再采用SPSS20.0进行统计分析。【结果】配对t检验分析了hSulf-1在胆囊肿瘤间质组织及非肿瘤对照间质组织中的表达情况。在α=0.05水准，hSulf-1在非肿瘤胆囊间质组织及胆囊肿瘤间质组织中的光密度差异具有统计学意义。【结论】与非肿瘤胆囊间质组织比较，hSulf-1在胆囊癌间质组织中的表达下降。第二部分间质细胞hSulf-1表达改变影响其对肿瘤细胞趋化作用【目的】验证间质细胞中hsulf-1表达改变是否影响其对胆囊癌细胞的趋化作用。【方法】人胚肺成纤维细胞系MRC-5能够正常表达hsulf-1。采用shRNA-hsulf-1质粒转染MRC-5来抑制hsulf-1表达。随后将hsulf-1表达抑制的MRC-5与人胆囊癌细胞系EHGB-1进行transwell共培养。EHGB-1放在上室，MRC-5放在下室。【结果】shRNA-hsulf-1质粒转染MRC-5组，其上室细胞穿透小室的数目比阴性对照及空白对照数目多。【结论】hSulf-1在间质细胞MRC-5中表达下降后，间质细胞MRC-5对胆囊癌细胞EHGB-1的趋化能力增强。第三部分胆囊癌上皮h

关键词：间质细胞胆囊癌人硫酸酯酶-1 细胞迁移细胞侵袭

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1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯对小鼠精子畸形的影响

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环境与健康杂志 2015年第6期32卷 546-547页

作者：高永超王鸿刘志永孙超岳红夏洁芳牛浩高俊宏兵器工业卫生研究所生物效应与毒理研究室陕西西安710065 第四军医大学第一附属医院妇产科生殖医学中心

为评价1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯(FOX-7)对小鼠精子畸形的影响,将小鼠随机分为6组,分别为阳性对照组、溶剂对照(4%淀粉溶液)组和34.82、69.64、139.29、348.22 mg/kg FOX-7染毒组及阳性对照(40 mg/kg环磷酰胺)组,每组12只。采用灌胃方... 详细信息

为评价1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯(FOX-7)对小鼠精子畸形的影响,将小鼠随机分为6组,分别为阳性对照组、溶剂对照(4%淀粉溶液)组和34.82、69.64、139.29、348.22 mg/kg FOX-7染毒组及阳性对照(40 mg/kg环磷酰胺)组,每组12只。采用灌胃方式进行染毒,每日1次,连续染毒5 d。首次染毒35 d后,观察精子畸形情况。结果显示,与溶剂对照组比较,139.29、348.22 mg/kg FOX-7染毒组小鼠的精子畸形率均较高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着FOX-7染毒剂量的升高,小鼠的精子畸形率呈上升趋势。提示FOX-7可引起小鼠精子发生畸形。

关键词： 1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯(FOX-7) 精子畸形

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严重烧伤伤员的转运

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中华烧伤杂志 2015年第4期31卷 241-243页

作者：彭毅志第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

近年来突发性重大烧伤事故频发，其中2009年6月5日成都公交车燃烧造成45例伤员；2010年11月15日上海胶州路高层公寓火灾造成127例伤员；2013年6月7日厦门公交车燃烧造成34例伤员；2014年5月12曰宜宾公交车燃烧造成44例伤员；特别严重的... 详细信息

近年来突发性重大烧伤事故频发，其中2009年6月5日成都公交车燃烧造成45例伤员；2010年11月15日上海胶州路高层公寓火灾造成127例伤员；2013年6月7日厦门公交车燃烧造成34例伤员；2014年5月12曰宜宾公交车燃烧造成44例伤员；特别严重的是2014年8月2日昆山粉尘爆炸事故，当场死亡75人，烧伤伤员185例，平均烧伤总面积95％TBSA，平均Ⅲ度创面面积达82％TBSA，90％的伤员合并吸入性损伤。

关键词：烧伤病人转送时机

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miR-34b/VAMP2通路在铅神经毒性中的作用及机制研究

miR-34b/VAMP2通路在铅神经毒性中的作用及机制研究

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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛

作者：曹子鹏康蓓佩赵芳王迪雅苏鹏王晓静骆文静第四军医大学军事预防医学系劳动与环境卫生学教研室

【目的】研究miR-34b/VAMP2通路在铅神经毒性中的作用及机制研究。【方法】采用饮水染铅方法建立大鼠发育期铅暴露模型;采用大鼠肾嗜铬细胞瘤PC12细胞和小鼠海马神经元HT22细胞建立细胞铅暴露模型;采用实时荧光定量qRT-PCR方法检测miR-... 详细信息

【目的】研究miR-34b/VAMP2通路在铅神经毒性中的作用及机制研究。【方法】采用饮水染铅方法建立大鼠发育期铅暴露模型;采用大鼠肾嗜铬细胞瘤PC12细胞和小鼠海马神经元HT22细胞建立细胞铅暴露模型;采用实时荧光定量qRT-PCR方法检测miR-34b和突触小泡膜蛋白vamp2 mRNA的表达水平;采用Western blot方法检测VAMP2蛋白的表达水平;采用荧光素酶报告基因系统检测miR-34b对vamp2 mRNA3'-UTR区稳定性的影响;采用免疫电镜技术观察发育期铅暴露对大鼠海马CA1区突触小泡膜蛋白VAMP2表达水平的影响;采用透射电镜技术检测发育期铅暴露对大鼠海马CA1区突触囊泡形成的影响。【结果】铅暴露组大鼠海马组织中miR-34b表达量均高于对照组,差异具有统计学意义(p<0.01),且高剂量暴露组高于低剂量暴露组,差异具有统计学意义(p<0.05)。铅暴露还影响PC12细胞和HT22细胞中miR-34b的表达,且表达水平随着染铅剂量的增加而升高(p<0.05)。采用生物信息学方法对miR-34b的靶基因进行分析,结果显示突触小泡膜蛋白VAMP2作为miR-34b靶分子的可能性较大。向PC12细胞中转染miR-34b的抑制剂,突触小泡膜蛋白VAMP2 mRNA和蛋白表达水平显著升高。荧光素酶报告基因系统检测显示,miR-34b能够与vamp2 mRNA的3'-UTR区特异结合影响其稳定性。铅暴露组大鼠海马组织中VAMP2 mRNA和蛋白表达水平较对照组下降。与对照组相比,PC12细胞和HT22细胞处理24h和48h后,VAMP2 mRNA和蛋白表达水半下降。免疫电镜方法检测结果显示,发育期铅暴露后海马区突触结构内VAMP2蛋白表达显著下调;透射电镜检测结果显示,发育期铅暴露能够显著减少大鼠海马区神经元内突触囊泡的数量。【结论】铅暴露通过诱导miR-34b表达进而影响下游靶分子突触小泡膜蛋白VAMP2的表达以及海马区神经元内突触囊泡的形成。

关键词：铅 miR-34b VAMP2 突触囊泡神经毒性

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miR-34bNAMP2通路在铅神经毒性中的作用及机制研究

miR-34bNAMP2通路在铅神经毒性中的作用及机制研究

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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛

作者：曹子鹏康蓓佩赵芳王迪雅苏鹏王晓静骆文静第四军医大学军事预防医学系劳动与环境卫生学教研室

[目的]研究miR-34b/VAMP2通路在铅神经毒性中的作用及机制研究. [方法]采用饮水染铅方法建立大鼠发育期铅暴露模型;采用大鼠肾嗜铬细胞瘤PC12细胞和小鼠海马神经元HT22细胞建立细胞铅暴露模型;采用实时荧光定量qRT-PCR方法检测miR-34b... 详细信息

[目的]研究miR-34b/VAMP2通路在铅神经毒性中的作用及机制研究. [方法]采用饮水染铅方法建立大鼠发育期铅暴露模型;采用大鼠肾嗜铬细胞瘤PC12细胞和小鼠海马神经元HT22细胞建立细胞铅暴露模型;采用实时荧光定量qRT-PCR方法检测miR-34b和突触小泡膜蛋白vamp2 mRNA的表达水平;采用Western blot方法检测VAMP2蛋白的表达水平;采用荧光素酶报告基因系统检测miR-34b对vamp2 mRNA 3'-UTR区稳定性的影响;采用免疫电镜技术观察发育期铅暴露对大鼠海马CA1区突触小泡膜蛋白VAMP2表达水平的影响;采用透射电镜技术检测发育期铅暴露对大鼠海马CA1区突触囊泡形成的影响. [结果]铅暴露组大鼠海马组织中miR-34b表达量均高于对照组,差异具有统计学意义(p＜0.01),且高剂量暴露组高于低剂量暴露组,差异具有统计学意义(p＜0.05).铅暴露还影响PC12细胞和HT22细胞中miR-34b的表达,且表达水平随着染铅剂量的增加而升高(p＜0.05).采用生物信息学方法对miR-34b的靶基因进行分析,结果显示突触小泡膜蛋白VAMP2作为miR-34b靶分子的可能性较大.向PC12细胞中转染miR-34b的抑制剂,突触小泡膜蛋白VAMP2 mRNA和蛋白表达水平显著升高.荧光素酶报告基因系统检测显示,miR-34b能够与vamp2 mRNA的3'-UTR区特异结合影响其稳定性.铅暴露组大鼠海马组织中VAMP2 mRNA和蛋白表达水平较对照组下降.与对照组相比,PC12细胞和HT22细胞处理24h和48h后,VAMP2 mRNA和蛋白表达水平下降.免疫电镜方法检测结果显示,发育期铅暴露后海马区突触结构内VAMP2蛋白表达显著下调;透射电镜检测结果显示,发育期铅暴露能够显著减少大鼠海马区神经元内突触囊泡的数量.[结论]铅暴露通过诱导miR-34b表达进而影响下游靶分子突触小泡膜蛋白VAMP2的表达以及海马区神经元内突触囊泡的形成.

关键词：铅 miR-34b VAMP2 突触囊泡神经毒性

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