检索结果-内蒙古大学图书馆

Acta Pharmacologica Sinica 2003年第2期24卷 181-186页

作者：秦路平张巧艳田野苹郑汉臣黄矛黄宝康第二军医大学基础医学部免疫学教研室第二军医大学新药评价中心第二军医大学药学院生药学教研室第二军医大学药学院生药学教研室上海 200433 中国

目的:研究蛇床子总香豆素(TCFC)对破骨细胞的作用,探讨其抗骨质疏松的作用机制。方法:采用原代培养的成骨细胞和骨髓单核细胞联合培养的方法,在1,25-(OH)2维生素D3和地塞米松作用下,使骨髓单核细胞分化形成破骨细胞。通过相差显微镜下... 详细信息

目的:研究蛇床子总香豆素(TCFC)对破骨细胞的作用,探讨其抗骨质疏松的作用机制。方法:采用原代培养的成骨细胞和骨髓单核细胞联合培养的方法,在1,25-(OH)2维生素D3和地塞米松作用下,使骨髓单核细胞分化形成破骨细胞。通过相差显微镜下的形态观察,抗酒石酸酸性磷酸酶染色和骨片上骨吸收陷窝的形成来鉴定破骨细胞。磷酸苯二钠法测定破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶的活性,计算机图像分析技术测定骨片上破骨性骨吸收陷窝的面积,原子吸收光谱法测定破骨细胞和骨片联合培养的培养上清中钙的浓度。结果:蛇床子总香豆素(TCFC)2.5—25mg/L抑制破骨细胞的形成和分化。TCFC0.25-25mg/L作用24-72h,可以显著抑制抗酒石酸酸性磷酸酶的活性,TCFC 25mg/L作用48h和72h分别可使其降低26.3%和24.1%。TCFC 25mg/L可使破骨细胞在骨片上形成的吸收陷窝的面积减少25.05%,骨片中Ca2+的释放减少41.73%。结论:TCFC通过抑制破骨细胞的形成、抗酒石酸酸性磷酸酶的活性和骨吸收作用减少骨质丢失。

关键词：蛇床子香豆素类骨质疏松破骨细胞骨吸收

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蛇床子总香豆素对成骨细胞产生NO,IL-1及IL-6的影响

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中国药学杂志 2003年第5期38卷 345-348页

作者：张巧艳秦路平田野苹郑汉臣黄宝康刘祖德黄矛第二军医大学药学院生药学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部免疫学教研室上海200433 第二军医大学长征医院骨科上海200003 第二军医大学基础医学部新药评价中心上海200433

目的　以新生大鼠颅盖骨成骨细胞为模型 ,观察蛇床子总香豆素对成骨细胞产生NO ,IL 1和IL 6的影响。方法　原代培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞 ,3 H 胸腺嘧啶掺入法测定成骨细胞的增殖 ;Griess试剂法、小鼠胸腺细胞增殖法和用B9细胞作为靶... 详细信息

目的　以新生大鼠颅盖骨成骨细胞为模型 ,观察蛇床子总香豆素对成骨细胞产生NO ,IL 1和IL 6的影响。方法　原代培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞 ,3 H 胸腺嘧啶掺入法测定成骨细胞的增殖 ;Griess试剂法、小鼠胸腺细胞增殖法和用B9细胞作为靶细胞的生物测定法 ,分别检测与蛇床子总香豆素共育的无刺激或受LPS及TNF等刺激的成骨细胞培养上清液中NO ,IL 1和IL 6的含量。结果　蛇床子总香豆素在 0 .0 2 5～ 2 .5mg·L-1的范围内抑制成骨细胞自发地或在LPS及细胞因子刺激下产生NO ,IL 1及IL 6。结论　蛇床子总香豆素的抗骨质疏松作用与其抑制成骨细胞产生NO ,IL 1和IL

关键词：蛇床子总香豆素成骨细胞 NO IL—1 IL—6 骨质疏松

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瘤内注射脂质体包裹的IL－2基因激活免疫效应细胞及诱导细胞因子

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第二军医大学学报 1996年第1期17卷 15-18页

作者：王全兴曹雪涛章卫平马施华周正芳叶天星第二军医大学基础医学部免疫学教研室

目的：为了探讨脂质体介导的ＩＬ－２基因体内基因转移的可行性及对荷瘤小鼠全身免疫功能的激活作用及诱导细胞因子产生的效果。方法：将脂质体分别包裹ＩＬ－２基因、空白质粒及ＰＢＳ后，直接注射至黑瘤体内，１０ｄ后无菌取出小鼠脾... 详细信息

目的：为了探讨脂质体介导的ＩＬ－２基因体内基因转移的可行性及对荷瘤小鼠全身免疫功能的激活作用及诱导细胞因子产生的效果。方法：将脂质体分别包裹ＩＬ－２基因、空白质粒及ＰＢＳ后，直接注射至黑瘤体内，１０ｄ后无菌取出小鼠脾细胞，诱导并检测肿瘤特异性杀伤细胞（ＣＴＬ）活性、ＬＡＫ活性及细胞因子的含量，用抗ＭＨＣＩａ单抗检测腹腔巨噬细胞的ＭＨＣＩ类分子的表达。结果：瘤体内注射脂质体包裹的ＩＬ－２基因后，小鼠脾ＣＴＬ细胞活性明显高于瘤体内注射脂质体包裹空白质粒及ＰＢＳ的对照组，其脾淋巴细胞ＬＡＫ活性、诱导ＩＦＮ－γ等细胞因子的含量及表达ＭＨＣＩａ分子的水平均有相应的提高。结论：瘤体内注射脂质体包裹的ＩＬ－２基因后，通过在原位转染肿瘤细胞，增强了肿瘤细胞的免疫原性，诱导机体产生肿瘤特异性的ＣＴＬ以及提高机体非特异性的抗肿瘤免疫反应，发挥抗肿瘤作用。本研究为肿瘤的基因治疗的研究和应用提供了较实用的方法。

关键词：肿瘤免疫疗法白细胞介素2 基因治疗脂质体

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一种利用微小磁珠建立的免疫磁珠细胞分离方法

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第二军医大学学报 1997年第4期18卷 387-388页

作者：马施华曹雪涛章卫平郑玲莉周正芳第二军医大学基础医学部免疫学教研室

一种利用微小磁珠建立的免疫磁珠细胞分离方法＊马施华曹雪涛章卫平郑玲莉周正芳临床和实验研究中常需要得到纯度高、活力佳和足够数量的特定细胞群或细胞亚群，这对细胞分离技术提出了新的要求。用免疫学方法将磁珠标记至特定细胞的表... 详细信息

一种利用微小磁珠建立的免疫磁珠细胞分离方法＊马施华曹雪涛章卫平郑玲莉周正芳临床和实验研究中常需要得到纯度高、活力佳和足够数量的特定细胞群或细胞亚群，这对细胞分离技术提出了新的要求。用免疫学方法将磁珠标记至特定细胞的表面，根据细胞在磁场中的不同物理行为...

关键词：细胞分离免疫磁珠 T细胞

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α-黑素细胞刺激素处理的树突状细胞对小鼠心脏移植物存活时间的影响

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第二军医大学学报 2005年第2期26卷 143-146页

作者：张丽娟田野苹沈娟闵彦应楹第二军医大学基础医学部免疫学教研室

目的:观察α黑素细胞刺激素(αMSH)处理的小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC)预防同种异基因小鼠心脏移植排斥反应的效果。方法:在供者BALB/c小鼠DC培养的过程中加入αMSH,用流式细胞仪分析DC的表型变化,用ELISA方法检测培养上清中IL 12的分... 详细信息

目的:观察α黑素细胞刺激素(αMSH)处理的小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC)预防同种异基因小鼠心脏移植排斥反应的效果。方法:在供者BALB/c小鼠DC培养的过程中加入αMSH,用流式细胞仪分析DC的表型变化,用ELISA方法检测培养上清中IL 12的分泌水平。在同种异基因心脏移植前,分别将αMSH处理后7 d的DC(αMSH DC)和正常培养7 d的DC(Day7 DC)输至受者C57BL/6小鼠体内,并另设输入PBS的小鼠为对照组,通过颈部Cuff法小鼠异位心脏移植模型,观察心脏移植物存活时间,并用ELISA方法测定受者血清细胞因子水平的变化。结果:αMSH DC表面分子的表达明显低于Day7 DC。αMSH DC培养上清中分泌IL 12 [(95.2±6.3) pg/ml]的水平也明显低于Day7 DC[(197.1±10.2) pg/ml]。与PBS组[(7.17±0.26) d]相比,Day7 DC组[(6.25±0.61) d]的心脏移植物存活时间缩短;而αMSH DC组[(15.08±1.32) d]的心脏移植物存活时间明显延长。与Day7 DC和PBS组相比,αMSH DC组移植后血清IL 2 和IFN γ细胞因子水平明显降低。结论:αMSH可以抑制体外培养的DC表面分子的表达和IL 12的分泌;αMSH处理的DC在体内能延长同种异基因心脏移植物的存活时间。

关键词： α-黑素细胞刺激素树突状细胞心脏移植移植排斥反应

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重组人睫状神经营养因子对大鼠胶质细胞瘤C_6细胞系生长的影响

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第二军医大学学报 1995年第5期16卷 409-411页

作者：张树辉詹镕洲田野萍何成王建军第二军医大学基础医学部病理学教研室第二军医大学基础医学部免疫学教研室第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

本研究观察了重组人睫状神经营养因子（ｒｈＣＮＴＦ）对大鼠胶质瘤Ｃ６细胞系生长的影响。发现ｒｈＣＮＴＦ２０～２０００ｎｇ／ｍｌ可抑制Ｃ６细胞增殖，细胞形态发生明显改变，且具有剂量─时间效应。此外，ｒｈＣＮＴＦ还可诱导Ｃ... 详细信息

本研究观察了重组人睫状神经营养因子（ｒｈＣＮＴＦ）对大鼠胶质瘤Ｃ６细胞系生长的影响。发现ｒｈＣＮＴＦ２０～２０００ｎｇ／ｍｌ可抑制Ｃ６细胞增殖，细胞形态发生明显改变，且具有剂量─时间效应。此外，ｒｈＣＮＴＦ还可诱导Ｃ６细胞分泌少量ＩＬ─６。结果表明，ｒｈＣＮＴＦ对Ｃ６细胞的抑制作用可能与其参与瘤细胞的生长调节有关，推测ｒｈＣＮＴＦ作为一种细胞调节因子对胶质瘤具有潜在治疗作用。

关键词：睫状神经营养因子白细胞介素胶质瘤 C6细胞系

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MIF基因修饰的瘤苗免疫小鼠后T细胞数量和功能的分析

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第二军医大学学报 2001年第1期22卷 32-35页

作者：刘艳君田野苹曹雪涛张明徽厉永建周正芳郑玲莉第二军医大学基础医学部免疫学教研室上海200433

目的 :研究 T细胞在巨噬细胞游走抑制因子 (MIF)基因修饰的瘤苗诱导抗肿瘤免疫反应中的作用。方法 :将重组MIF腺病毒转染小鼠 FBL 3红白血病细胞制成的瘤苗接种于小鼠体内 ,观察脾脏和淋巴结中 T细胞数量和功能的改变。结果 :经 MIF... 详细信息

目的 :研究 T细胞在巨噬细胞游走抑制因子 (MIF)基因修饰的瘤苗诱导抗肿瘤免疫反应中的作用。方法 :将重组MIF腺病毒转染小鼠 FBL 3红白血病细胞制成的瘤苗接种于小鼠体内 ,观察脾脏和淋巴结中 T细胞数量和功能的改变。结果 :经 MIF基因修饰的瘤苗免疫后 ,小鼠脾细胞和腹股沟引流淋巴结细胞数量明显增多 ,脾细胞 CTL活性显著增强 ,引流淋巴结中 CD3+ 、CD2 8+ 、CD4+ 和 CD8+ T细胞百分率均较对照组增加。MIF基因修饰的瘤苗免疫对小鼠受野生型 FBL 3肿瘤细胞再攻击具有明显的保护作用。结论 :MIF基因修饰的瘤苗能诱导 T细胞介导的抗肿瘤免疫反应。

关键词：巨噬细胞游走抑制因子疫苗 T淋巴细胞基因修饰肿瘤基因治疗

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MIF基因修饰的FBL3红白血病细胞的生物学性质

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第二军医大学学报 2000年第8期21卷 727-730,F003页

作者：刘艳君田野苹曹雪涛于益芝厉永建弭静张明徽陶群第二军医大学基础医学部免疫学教研室上海200433

目的 :研究巨噬细胞游走抑制因子 (MIF)基因修饰的 FBL 3红白血病细胞的生物学性质变化 ,为探讨其体内诱导抗肿瘤免疫反应的作用奠定基础。方法 :以腺病毒介导 ,将 MIF基因导入小鼠 FBL 3红白血病细胞 ,观察其体外生物学性质变化。将 ... 详细信息

目的 :研究巨噬细胞游走抑制因子 (MIF)基因修饰的 FBL 3红白血病细胞的生物学性质变化 ,为探讨其体内诱导抗肿瘤免疫反应的作用奠定基础。方法 :以腺病毒介导 ,将 MIF基因导入小鼠 FBL 3红白血病细胞 ,观察其体外生物学性质变化。将 MIF基因修饰的 FBL 3细胞 (MIF- FBL 3)接种小鼠体内 ,观察其致瘤性和局部病理学变化 ,同时检测细胞因子 m RNA表达。结果 :腺病毒能有效地将 MIF基因导入 FBL 3细胞 ,MIF的分泌可持续 10 d。 MIF- FBL 3细胞形态、增殖能力及表面MHC- ,MHC- ,B7- 1,B7- 2 ,ICAM- 1等分子的表达与野生型 FBL 3细胞相比无明显变化 ,但在小鼠体内的致瘤性降低 ,小鼠存活期延长 ,肿瘤局部可检测出 m TNF-α m RNA和 m L tn m RNA的表达 ,并有明显的单核和淋巴细胞浸润。结论 :MIF-FBL 3细胞体外生物学性质无明显改变 ,但可能通过分泌 MIF在体内激活抗肿瘤免疫功能。

关键词：巨噬细胞游走抑制因子基因修饰红白血病细胞

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人线粒体tRNA^(Leu(UUR))基因氧化损伤与修复研究

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生物化学与生物物理进展 2004年第10期31卷 887-894页

作者：汪振诚王学敏缪明永焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

人mtDNA比核DNA更易受到自由基的氧化损伤 ,这些损伤可以被线粒体内的DNA修复机制所修复 ,损伤与修复是决定突变是否产生的两个重要因素 .为了确定氧化损伤与损伤后修复对mtDNA突变的具体影响 ,采用四氧嘧啶处理LO2 细胞 ,这种试剂进入... 详细信息

人mtDNA比核DNA更易受到自由基的氧化损伤 ,这些损伤可以被线粒体内的DNA修复机制所修复 ,损伤与修复是决定突变是否产生的两个重要因素 .为了确定氧化损伤与损伤后修复对mtDNA突变的具体影响 ,采用四氧嘧啶处理LO2 细胞 ,这种试剂进入细胞后 ,经氧化还原反应生成的自由基与线粒体自身代谢产生的自由基类似 ,然后观察自由基对细胞mtDNA的氧化损伤与损伤后DNA修复的动力学变化 .由于线粒体的正常功能为修复机制所必需 ,采用MTT细胞活力实验检测不同浓度四氧嘧啶处理下线粒体酶活力 ,发现 9mmol/L四氧嘧啶培养细胞 1h后 ,线粒体琥珀酸脱氢酶功能在撤去药物后 0 ,2 ,8和 2 4h时间点均无明显变化 .提取各组细胞的mtDNA ,用EndoⅢ和Fgp两种酶切除受氧化损伤的核苷酸 ,然后用碱性琼脂糖凝胶电泳分离大小不等的mtDNA ,进行DNA印迹实验 ,地高辛抗体碱性磷酸酶系统显色 ,检测完整与断裂的mtDNA量 ,利用Poisson公式 (s=-lnP0 /P ,P0 为未断裂链光密度值 ,P为所有链光密度值总和 )计算一个mtDNA分子的平均损伤频率 ,结果显示 ,9mmol/L四氧嘧啶处理细胞 1h ,链平均损伤频率由对照的 0 11个 /分子增加至 5 6 0个 /分子 ,明显增加了mtDNA上核苷酸的氧化损伤 ,除去药物后 8h ,绝大部分损伤可被修复 ,损伤频率减至

关键词：线粒体DNA tRNA^Leu(UUR) 突变人线粒体亮氨酰tRNA合成酶 A3243G 体外转录基因表达

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胎肝特异性癌胚RNA——AK003710的筛选及功能研究

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第二军医大学学报 2015年第3期36卷 233-240页

作者：王少冰孙树汉王芳第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的筛选胎肝特异性癌胚RNA,探讨其对肝癌细胞增殖、侵袭能力的影响。方法对小鼠肝发育和肝再生的长链非编码RNA(lncRNA)芯片数据进行生物信息学分析,筛选得到在胎肝和再生肝脏中均高表达的候选lncRNA,利用实时定量PCR在小鼠肝癌组织中... 详细信息

目的筛选胎肝特异性癌胚RNA,探讨其对肝癌细胞增殖、侵袭能力的影响。方法对小鼠肝发育和肝再生的长链非编码RNA(lncRNA)芯片数据进行生物信息学分析,筛选得到在胎肝和再生肝脏中均高表达的候选lncRNA,利用实时定量PCR在小鼠肝癌组织中对候选lncRNA进行表达水平检测,综合芯片分析及实时定量PCR结果,选择表达差异最明显的lncRNA行进一步研究。首先在胎肝和肝再生模型中验证该lncRNA的表达,然后利用siRNA技术干扰该lncRNA,再通过EdU标记技术和Transwell实验分别检测细胞的增殖能力和侵袭能力。结果生物信息学分析筛选得到在胎肝和再生肝脏中均高表达的7条lncRNA,其中3条在小鼠肝癌组织中较正常肝组织高表达,3条表达无差异,1条无表达;高表达的3条lncRNA中,lncRNA-AK003710在小鼠肝发育和肝再生芯片中的差异表达倍数最高,可作为进一步研究对象。进一步验证显示lncRNA-AK003710在胎肝及多种肝损伤修复模型中表达上调;功能实验表明对lncRNA-AK003710靶向干扰后能降低小鼠肝癌细胞Hepa1-6的增殖和侵袭能力。结论 lncRNA-A003710在胎肝、再生肝组织及肝癌组织中均高表达,是胎肝特异性癌胚RNA,可调控肝癌细胞的增殖及侵袭过程,有望成为肝癌治疗的潜在靶点。

关键词：长链非编码RNA 肝发育肝再生肝损伤肝肿瘤

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