检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 1997年第4期18卷 316-318页

作者：于敏杨建民曹雪涛楼国良章卫平孟沛霖第二军医大学长海医院血液科第二军医大学基础医学部免疫学教研室

目的：研究白细胞介素２（ＩＬ－２）、白细胞介素３（ＩＬ－３）基因共转染瘤苗的体内外生物学特性。方法：用ＩＬ－２重组腺病毒（Ａｄ－ＩＬ－２）、ＩＬ－３重组腺病毒（Ａｄ－ＩＬ－３）转染ＦＢＬ－３红白血病细胞株，观察其体外... 详细信息

目的：研究白细胞介素２（ＩＬ－２）、白细胞介素３（ＩＬ－３）基因共转染瘤苗的体内外生物学特性。方法：用ＩＬ－２重组腺病毒（Ａｄ－ＩＬ－２）、ＩＬ－３重组腺病毒（Ａｄ－ＩＬ－３）转染ＦＢＬ－３红白血病细胞株，观察其体外增殖能力及体内致瘤性的变化。结果：ＩＬ－２、ＩＬ－３共转染的ＦＢＬ－３细胞１周内能较稳定地分泌ＩＬ－２和ＩＬ－３，体外增殖能力无明显变化，但体内致瘤性明显下降，ＩＬ－２、ＩＬ－３共转染的ＦＢＬ－３体内致瘤性下降最为显著，肿瘤生长明显延缓，存活期显著延长。结论：ＩＬ－２，ＩＬ－３基因的转入导致ＦＢＬ－３细胞体内致瘤性的下降可能是由于激发体内免疫功能所致。

关键词：白细胞介素基因治疗致瘤性白血病基因转染

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rhG-CSF cDNA高表达质粒的构建及其在COS7细胞中的表达

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第二军医大学学报 1997年第4期18卷 313-315页

作者：陈坚曹韫旭陆德如第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室第二军医大学基础医学部生物学教研室

目的：构建一个能在哺乳动物细胞中高表达人粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）ｃＤＮＡ的重组质粒。方法：利用化学合成引物，进行ＰＣＲ，对人Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ５＇ＡＵＧ侧翼序列进行翻译优化突变。测序确证后，重组入表达载体ｐＥ... 详细信息

目的：构建一个能在哺乳动物细胞中高表达人粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）ｃＤＮＡ的重组质粒。方法：利用化学合成引物，进行ＰＣＲ，对人Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ５＇ＡＵＧ侧翼序列进行翻译优化突变。测序确证后，重组入表达载体ｐＥＤ，构建成质粒ｐＥＤ－ＧＣＳＦ，用ＤＥＡＥ－Ｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ７细胞，ＥＬＩＳＡ法定量测定ｒｈＧ－ＣＳＦ表达水平。结果：转染ＣＯＳ７细胞后４８ｈ收集的上清ｒｈＧ－ＣＳＦ表达量为５２ｎｇ／ｍｌ，７２ｈ为２３０ｎｇ／ｍｌ，显示ｒｈＧ－ＣＳＦ获得了暂时性高表达。结论：ｐＥＤ－ＧＣＳＦ是一个能在哺乳动物细胞中高效表达ｒｈＧ－ＣＳＦ的真核表达质粒。

关键词：基因重组 G-CSF 多肽生长因子

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电针刺激大鼠足三里穴对视上核、室旁核催产素神经元的影响

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第二军医大学学报 1995年第1期16卷 37-40页

作者：何润昌范溥生王旭明何北平张忠义周世臣宋朝佑林葆城第二军医大学基础医学部解剖学教研室第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

用ＷＱ－９Ｅ钾离子透入仪筛选出对痛刺激敏感的ＳＤ大鼠８只，随机分成对照组及针刺组，每组４只。针刺鼠用ＷＱ－９Ｅ电针仪刺激两侧＂足三里＂穴，持续３０ｍｉｎ。所有动物同时用１％戊巴比妥钠腹腔内麻醉后开胸，用Ｂｏｕｉｎ液经... 详细信息

用ＷＱ－９Ｅ钾离子透入仪筛选出对痛刺激敏感的ＳＤ大鼠８只，随机分成对照组及针刺组，每组４只。针刺鼠用ＷＱ－９Ｅ电针仪刺激两侧＂足三里＂穴，持续３０ｍｉｎ。所有动物同时用１％戊巴比妥钠腹腔内麻醉后开胸，用Ｂｏｕｉｎ液经心灌注固定，开颅取脑，作连续冰冻切片（片厚４０μｍ），隔片取一。所有切片均按Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇｅｒ（ＰＡＰ）法进行免疫细胞化学反应，ＤＡＢ呈色，封片后直接连ＩＢＭ２８６－ＣＡＰ５３０图像分析系统对视上核，室旁核催产素免疫反应阳性物质作定量测定。结果显示：针刺鼠下丘脑视上核，室旁核催产素免疫反应阳性物质的总面积比对照鼠分别增加了４４．１％、４７．３％（Ｐ＜０．０１）。提示，催产素免疫反应阳性物质的增加与电针刺激足三里穴有关，催产素可能参与电针镇痛的中枢调节过程。

关键词：电针视上核室旁核催产素免疫细胞化学

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心理性应激引起的大鼠行为,血浆皮质酮及脑区氨基酸水平的变化

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第二军医大学学报 1997年第4期18卷 330-333页

作者：严进王春安陈宜张徐仁宝第二军医大学基础医学部生理学教研室第二军医大学基础医学部病理生理学教研室第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的：观察心理应激模型动物血浆皮质酮及视皮质、海马和下丘脑氨基酸和整体行为的变化。方法：以光－电击条件反射法建立心理应激动物模型，采用放射性配体蛋白竞争结合法、氨基酸自动分析法及旷场试验（Ｏｐｅｎ－ｆｉｅｌｄｔｅｓｔ... 详细信息

目的：观察心理应激模型动物血浆皮质酮及视皮质、海马和下丘脑氨基酸和整体行为的变化。方法：以光－电击条件反射法建立心理应激动物模型，采用放射性配体蛋白竞争结合法、氨基酸自动分析法及旷场试验（Ｏｐｅｎ－ｆｉｅｌｄｔｅｓｔ）分别测定大鼠心理应激时血浆皮质酮、脑区氨基酸水平和行为的变化。结果：在血浆皮质酮能够分化心理应激的实验参数条件下，电击刺激时，主要引起视皮质氨基酸水平的变化；而仅给予条件刺激（光）引起心理应激时，可在视皮质、海马和下丘脑３个脑区不同程度地出现谷氨酸、γ－氨基丁酸和牛磺酸水平的变化，并以海马最明显。同时动物运动行为减少，类似抑郁样表现。结论：心理应激反应时，谷氨酸、γ－氨基丁酸和牛磺酸等脑内氨基酸的变化，可能与心理应激引起的抑郁样行为有关。

关键词：心理应激皮质酮氨基酸

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四肢主要神经干羟脯氨酸和氨基己糖含量分析

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第二军医大学学报 1995年第1期16卷 60-62页

作者：纪荣明党瑞山杨向群姜关祥冯伟华第二军医大学基础医学部解剖学教研室第二军医大学基础医学部生物化学教研室

测定了１０例正常成年男性脑外伤死亡后２ｈ四肢１２条神经干内羟脯氨酸和氨基己糖的含量（μｍｏｌ／ｍｇ，ｘ±ｓ）分别为：正中神经８０．４±１１．２和６３．３±２１．０；肌皮神经１０８．２±１４．８和７０．... 详细信息

测定了１０例正常成年男性脑外伤死亡后２ｈ四肢１２条神经干内羟脯氨酸和氨基己糖的含量（μｍｏｌ／ｍｇ，ｘ±ｓ）分别为：正中神经８０．４±１１．２和６３．３±２１．０；肌皮神经１０８．２±１４．８和７０．２±２．７；尺神经１０４．８±３６．５和７１．１±２．２；桡神经９６．６±１７．２和６１．０±８．１；桡神经浅支１１５．７±７．０和７４．４±１７．９；前臂内侧皮神经１２７．４±１９．８和８７．２±５．９；坐骨神经８６．５±１３．４和７１．８±１４．５；股神经７８．０±１２．５和７０．９±２．６；胫神经６６．２±５．３和６８．６±３．７；腓总神经９７．７±１５．７和８５．９±１８．８；隐神经７３．９±８．３和６２．０±１３．３；腓肠神经１０８．３±２２．２和９４．５±２５．３。本研究结果提供了正常人四肢主要神经干内羟脯氨酸和氨基己糖的正常值，为研究周围神经损伤后的生化成分含量变化提供了依据。

关键词：脊神经羟脯氨酸氨基己糖含量测定神经损伤

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白血病抑制因子受体α亚基胞内区远膜端对HL-60细胞增殖分化的影响

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中华血液学杂志 2004年第11期25卷 679-682页

作者：杨玲刘善荣汤淑萍王凤玫刘厚奇第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433

目的　探讨白血病抑制因子 (LIF)受体α亚基胞内区远膜端对HL 60细胞增殖分化的影响。方法　构建LIF受体α亚基胞内区远膜端 (gp190CT3 )真核表达载体 ,利用脂质体转染HL 60细胞 ,G418筛选阳性细胞株 ,免疫组化检测其表达。倒置显微镜... 详细信息

目的　探讨白血病抑制因子 (LIF)受体α亚基胞内区远膜端对HL 60细胞增殖分化的影响。方法　构建LIF受体α亚基胞内区远膜端 (gp190CT3 )真核表达载体 ,利用脂质体转染HL 60细胞 ,G418筛选阳性细胞株 ,免疫组化检测其表达。倒置显微镜观察野生型HL 60细胞及转染有gp190CT3的HL 60细胞的生长状态。以Westernblot及流式细胞仪分别检测野生型HL 60细胞及转染有gp190CT3的HL 60细胞中细胞增殖核抗原 (PCNA)及CD15水平。结果　转染有gp190CT3的HL 60细胞体积增大 ,与野生型HL 60细胞相比 ,转染有gp190CT3的HL 60细胞增殖速度减慢 ,PC NA的表达水平明显降低 ,而CD15水平明显升高 (转染有gp190CT3的HL 60细胞中CD15阳性细胞百分率为 89.98% ,野生型HL 60对照组中CD15阳性细胞百分率为 40 .79% )。结论　LIF受体α亚基胞内区远膜端参与LIF受体的信号转导 ,其效应是抑制细胞的增殖 ,促进细胞分化。

关键词： HL-60细胞转染受体α CT CD15 胞内区阳性细胞 α亚基增殖分化 LIF

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睫状神经营养因子对应激引起大鼠海马神经元损伤的保护作用及其机制的研究

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生理科学进展 2000年第2期31卷 131-134页

作者：严进第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

本实验用Nissl染色法、Bielschowsky Gros Lawrentjew染色法、常规透射电镜、行为活动测定、双侧海马微量给药、海马神经元原代培养、活细胞连续照相、全细胞膜片钳记录、细胞内游离Ca2 +浓度测定及P5 3蛋白免疫组化测定等方法 ,观察了... 详细信息

本实验用Nissl染色法、Bielschowsky Gros Lawrentjew染色法、常规透射电镜、行为活动测定、双侧海马微量给药、海马神经元原代培养、活细胞连续照相、全细胞膜片钳记录、细胞内游离Ca2 +浓度测定及P5 3蛋白免疫组化测定等方法 ,观察了睫状神经营养因子 (CNTF)对应激引起动物行为变化和海马神经元形态学变化的影响 ,探讨了CNTF的部分作用机制。结果表明 ,急性应激不引起大鼠海马神经元损伤 ,CNTF不能改善急性应激时的焦虑样行为。但CNTF可显著减轻慢性应激引起的大鼠海马神经元损伤 ,并改善慢性应激时的抑郁样行为。CNTF可能通过早期快速抑制谷氨酸 (Glu)膜电流、胞内游离钙 ( [Ca2 +]i)的升高 ,以及后期核内效应 ,发挥其保护神经元的作用。

关键词：应激睫状神经营养因子海马神经元形态学

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乳酸脱氢酶法检测恶性疟原虫融合蛋白-2.9免疫血清体外抑制效果

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2006年第3期24卷 223-225页

作者：曲莉潘卫庆第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

目的用乳酸脱氢酶(LDH)法检测恶性疟原虫融合蛋白(PfCP-2.9)免疫兔血清体外抑制恶性疟原虫生长的效果。方法将恶性疟原虫起始培养物的原虫率稀释为(0.4±0.1)%,红细胞压积为2%,使用不同浓度恶性疟原虫融合抗原PfCP-2.9免疫兔血清进... 详细信息

目的用乳酸脱氢酶(LDH)法检测恶性疟原虫融合蛋白(PfCP-2.9)免疫兔血清体外抑制恶性疟原虫生长的效果。方法将恶性疟原虫起始培养物的原虫率稀释为(0.4±0.1)%,红细胞压积为2%,使用不同浓度恶性疟原虫融合抗原PfCP-2.9免疫兔血清进行恶性疟原虫体外生长抑制试验,40～42h后分别用LDH检测法和传统镜检计数法检测原虫生长抑制率。结果PfCP-2.9免疫兔血清在体外对恶性疟原虫有较强的抑制作用。LDH测定法与传统镜检法测得体外恶性疟原虫抑制率相近(分别为97%和100%),两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论LDH法检测恶性疟原虫体外抑制试验是一种简单、可行的实验方法。

关键词：恶性疟原虫体外抑制试验乳酸脱氢酶

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组蛋白脱乙酰化酶HDAC1 cDNA的克隆及其酵母表达质粒的构建

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第二军医大学学报 1999年第4期20卷 205-208页

作者：陈坚张晓琴傅继梁第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：获得ＨＤＡＣ１的ｃＤＮＡ及构建酵母双杂合系统中的靶基因。方法：利用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从人Ｊｕｒｋａｔ细胞中扩增出一约１．４５ｋｂ的ＤＮＡ片段，作全自动测序，重组入ｐＬｅｘＡ载体，构建成ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１，并... 详细信息

目的：获得ＨＤＡＣ１的ｃＤＮＡ及构建酵母双杂合系统中的靶基因。方法：利用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从人Ｊｕｒｋａｔ细胞中扩增出一约１．４５ｋｂ的ＤＮＡ片段，作全自动测序，重组入ｐＬｅｘＡ载体，构建成ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１，并用醋酸锂法转化酵母菌ＥＧＹ４８，在选择性培养基上观察ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１在ＥＧＹ４８中的表达情况。结果：获得的１．４５ｋｂ的ＤＮＡ编码的氨基酸序列与文献报道的ＨＤＡＣ１一致，转化的酵母菌在选择性培养基ＳＤ／Ｇａｌ／Ｒａｆ／－Ｕｒａ／－Ｈｉｓ／上培养３ｄ后，长出约１ｍｍ大小的白色菌落。结论：获得了ＨＤＡＣ１的ｃＤＮＡ，ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１对ＥＧＹ４８没有毒性作用，也没有自身激活ＬａｃＺ功能，可作为酵母双杂合系统中的靶基因。

关键词：组蛋白脱乙酰化酶酵母双杂合系统质粒克隆

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IFN-γ基因修饰对G422胶质母细胞瘤细胞致瘤性及荷瘤小鼠免疫功能的影响

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第二军医大学学报 2001年第8期22卷 721-723页

作者：岳志健洪波曹雪涛雷虹周晓平王文仲第二军医大学长海医院神经外科上海200433 第二军医大学基础医学部免疫学教研室

目的 :观察鼠干扰素 -γ( m IFN-γ)基因修饰的小鼠 G4 2 2胶质母细胞瘤细胞的致瘤性及免疫功能变化。方法 :通过重组腺病毒以 m IFN-γ基因转染 G4 2 2胶质母细胞瘤细胞 ,观察肿瘤的生长和荷瘤小鼠的存活期 ,采用 4 h5 1Cr释放法检测... 详细信息

目的 :观察鼠干扰素 -γ( m IFN-γ)基因修饰的小鼠 G4 2 2胶质母细胞瘤细胞的致瘤性及免疫功能变化。方法 :通过重组腺病毒以 m IFN-γ基因转染 G4 2 2胶质母细胞瘤细胞 ,观察肿瘤的生长和荷瘤小鼠的存活期 ,采用 4 h5 1Cr释放法检测荷瘤小鼠脾细胞诱导的 NK、LAK、CTL的杀伤活性 ,对治疗后的肿瘤进行常规病理分析。结果 :m IFN-γ基因修饰的 G4 2 2小鼠胶质母细胞瘤体内致瘤生长明显抑制 ( P<0 .0 1 ) ,其荷瘤小鼠生存时间长于对照组 ( P<0 .0 1 )。m IFN-γ组小鼠脾细胞的 LAK、CTL杀伤活性显著增强 ,肿瘤组织有灶性坏死 ,炎细胞浸润。结论 :m IFN-γ基因对胶质细胞瘤有一定治疗作用 ,其机制可能是增强了宿主的局部和全身抗肿瘤免疫反应。

关键词：神经胶质瘤腺病毒科干扰素Ⅱ型细胞毒性免疫功能基因治疗胶质母细胞瘤小鼠

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