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第二届中国药物毒理学年会（2012）

作者：郑怡文毕洁马玺里田逸君张天宝袁伯俊第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室

目的研究SD孕鼠在致畸敏感期接触新型外用避孕药顶体酶抑制剂南德士后,对胎鼠有无致畸性以及对子代的发育、行为及生殖功能的影响。方法南德士的临床拟用途径为经阴道给药,考虑到这种非常规给药途径的特殊性以及避孕药应用的特殊时效性... 详细信息

目的研究SD孕鼠在致畸敏感期接触新型外用避孕药顶体酶抑制剂南德士后,对胎鼠有无致畸性以及对子代的发育、行为及生殖功能的影响。方法南德士的临床拟用途径为经阴道给药,考虑到这种非常规给药途径的特殊性以及避孕药应用的特殊时效性,不宜在围产期经阴道给药方式进行生殖毒性研究,因此本研究将胚胎-胎仔发育毒性试验与围产期毒性试验相结合,在SD孕鼠妊娠第6至第15天采用阴道给药的方式给予4、10和25mg·kg剂量的南德上以及溶剂对照品,妊娠第20天剖杀部分孕鼠并观察胎鼠有无外观、骨骼及内脏畸形;另一部分孕鼠待其自然分娩后观察南德士对F1代仔鼠的生理发育、运动能力、神经系统发育以及生殖能力的影响。结果南德上在4、10和25mg·kg剂量下对孕鼠增重、黄体数、着床率、活胎率、死胎率、吸收胎率均无明显影响,对胎鼠的外观、内脏畸形率、性别比例、活胎的体重、身长以及枕骨、颈椎、胸椎、胸骨、腰椎、肋骨、骶椎、尾椎、掌骨、指骨、跖骨、趾骨等骨骼的发育亦未观察到明显的影响;受试物各剂量组仔鼠出生后体重变化与溶剂对照组相比其差异均无统计学意义;仔鼠的出毛、耳廓分离、门齿萌出、张耳、睁眼、睾丸下降、阴道开口时间等生理发育指标的成熟时间,以及运动、平面翻正、负趋地性、悬崖回避、触须定位、空中翻正、视觉定位和听觉惊愕反射等各项发射发育指标的成熟时间与溶剂对照组相比均无显著差异,同时各受试剂量组仔鼠的学习和记忆能力以及生殖行为、交配率、受孕率也未见明显的改变。结论 Sd孕鼠妊娠第6至第15天经阴道给予4、10和25mg·kg1剂量的新型外用避孕药南德士未观察到明显的母体毒性、胚胎毒性、胎儿毒性和致畸作用;对F1代仔鼠的生理发育、反射发育、学习记忆能力和生殖能力亦无明显影响。

关键词：避孕药顶体酶抑制剂南德士发育毒性围产期

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红景天苷注射液遗传毒性的研究

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药学服务与研究 2009年第4期9卷 279-282页

作者：朱玉平张天宝万旭英马玺里田逸君郑怡文朱江波第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的:检测红景天苷注射液的遗传毒性。方法:应用微生物回复突变实验(Ames实验,5 000、500、50、5.0、0.5μg/皿)、体外培养CHO细胞染色体畸变实验(2 0001、000、500μg/mL)和小鼠骨髓微核实验法(1 500、750、375μg/kg)检测红景天苷注... 详细信息

目的:检测红景天苷注射液的遗传毒性。方法:应用微生物回复突变实验(Ames实验,5 000、500、50、5.0、0.5μg/皿)、体外培养CHO细胞染色体畸变实验(2 0001、000、500μg/mL)和小鼠骨髓微核实验法(1 500、750、375μg/kg)检测红景天苷注射液的遗传毒性。结果:红景天苷注射液对鼠伤寒沙门菌无致突变性,对体外培养CHO细胞染色体无致畸变作用,对ICR小鼠无诱发骨髓嗜多染红细胞微核的效应,三个实验结果均呈阴性。结论:红景天苷注射液不具有遗传毒性。

关键词：红景天苷注射液遗传毒性试验 Ames实验染色体畸变实验微核实验

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一株产新型大环内酯海洋芽孢杆菌的鉴定及生物活性初步研究

一株产新型大环内酯海洋芽孢杆菌的鉴定及生物活性初步研究

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第二届中国生物产业大会

作者：杨桥张晓玲朱玉平韩文菊卢小玲张文俊高云缪辉南焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 中国水产科学研究院东海水产研究所上海200090 第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433 上海海洋大学食品学院上海200090

当前,陆地微生物资源的日益枯竭,加上抗生素的滥用使得病原微生物获得耐药性的速度远快于人类从陆地微生物中获得新型抗生素的速度,因此,寻求和开发新的微生物药物资源,对于新型抗生素的发现和耐药性感染疾病的治疗,有着重要的现实意义... 详细信息

当前,陆地微生物资源的日益枯竭,加上抗生素的滥用使得病原微生物获得耐药性的速度远快于人类从陆地微生物中获得新型抗生素的速度,因此,寻求和开发新的微生物药物资源,对于新型抗生素的发现和耐药性感染疾病的治疗,有着重要的现实意义.特殊的生存环境,赋予了海洋微生物独特的基因资源和可产生陆地微生物不具有的特殊化学结构及活性化合物的能力,使得海洋微生物药物资源的研发已成为了海洋药物和生物技术领域的国际热点和前沿.本研究室自中国东海30米深海泥分离筛选到一株抗菌及抑癌作用显著的革兰氏阳性菌株.经形态学及培养特征观察，生理生化指标测定及16SrRNA序列分子鉴定,并就生物活性进行初步探讨.

关键词：芽孢杆菌海洋微生物大环内酯生物活性抗菌素

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生物技术发明的可专利性策略研究

生物技术发明的可专利性策略研究

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第二届中国生物产业大会

作者：杨桥张晓玲朱玉平韩文菊张文俊缪辉南冯伟华焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 中国水产科学研究院东海水产研究所上海200090 第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433 上海海洋大学食品学院上海200090

当今,生物技术已广泛渗透到医药卫生,科学研究及工农业生产等领域的诸多方面.在改善人类赖以生存的物质要素的同时,不但催生了规模日渐扩大的生物技术产业,也使生物技术发明及其保护日益受到人们的关注.从中国专利法对生物技术领域不同... 详细信息

当今,生物技术已广泛渗透到医药卫生,科学研究及工农业生产等领域的诸多方面.在改善人类赖以生存的物质要素的同时,不但催生了规模日渐扩大的生物技术产业,也使生物技术发明及其保护日益受到人们的关注.从中国专利法对生物技术领域不同发明主题的保护策略分析来看，中国专利法目前在对新兴的生物技术领域的发明主题的专利保护方面，采取了相对保守的策略，对本领域的重要发明主题转基因动物和植物及基因诊断和治疗方法均不授予专利权.采取这种策略的一种潜在理由可能是目前中国在本领域的科研水平还相对低下，给予专利保护的结果实际上主要保护的是目前递交发明专利申请占多数比例的外国人.

关键词：生物技术可专利性专利保护

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sHsps在小鼠正常肢和短肢发育过程中的表达

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第二军医大学学报 2005年第5期26卷 509-514页

作者：朱勇飞朱江波周宏元张天宝第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的研究小分子热休克蛋白基因(sHsps)在小鼠胚胎前肢正常和异常发育过程中的表达情况。方法在GD10(查到阴栓之日为GD0)经口一次分别给予实验组孕鼠80mg/kg的视黄酸,对照组孕鼠给予等体积的植物油,并分别于GD11～GD18取两组胎鼠的前肢,... 详细信息

目的研究小分子热休克蛋白基因(sHsps)在小鼠胚胎前肢正常和异常发育过程中的表达情况。方法在GD10(查到阴栓之日为GD0)经口一次分别给予实验组孕鼠80mg/kg的视黄酸,对照组孕鼠给予等体积的植物油,并分别于GD11～GD18取两组胎鼠的前肢,利用RT PCR方法半定量检测15种Hsps的表达丰度。结果正常肢除Hspb4在GD12才开始表达外,其余在GD11～GD18均有表达;Hsp10、Hsp20、Hspb2、Hspb3表达丰度基本恒定;Hsp22、Hsp30随胚龄的增加而表达增高;Hsp25起初表达较高,以后下降并恒定在较低的水平;Hspb4在GD15、Hspb9在GD11和GD14出现高峰。多数基因在GD11～GD18的表达丰度实验组明显高于对照组。某些基因在正常和异常肢发育过程中表达明显不同,如Hsp25在实验肢和对照肢除表达趋势不同外,GD11～GD12对照肢表达丰度高于实验肢,而GD14～GD18则实验肢的表达丰度高于对照肢;实验肢Hspb7在GD11～GD12不表达,GD13开始表达,GD15后逐渐下降;实验肢Hspb10仅在GD12～GD16表达,其余胚龄不表达。结论不同Hsps的表达特点有所不同,多数Hsps在短肢异常发育中表达比正常肢明显升高,部分Hsps与正常肢发育表达模式明显不同。

关键词：热休克蛋白基因视黄酸胚胎肢发育

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基于荧光素酶报告基因的MCF7细胞雌激素样物质检测方法的建立

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第二军医大学学报 2005年第9期26卷 1022-1025页

作者：赵海涛张天宝朱江波朱玉平万旭英王征马玺里第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的:建立基于报告基因的MCF7细胞体外雌激素样物质检测方法,并研究2,2-双(对氯苯基)-1,1,1-三氯乙烷(2,4-DDT)和甲氧氯(METH)的雌激素样作用。方法:合成人雌激素反应元件(ERE)核心片段并将其插入pGL3-promoter载体的多克隆位点,构建成... 详细信息

目的:建立基于报告基因的MCF7细胞体外雌激素样物质检测方法,并研究2,2-双(对氯苯基)-1,1,1-三氯乙烷(2,4-DDT)和甲氧氯(METH)的雌激素样作用。方法:合成人雌激素反应元件(ERE)核心片段并将其插入pGL3-promoter载体的多克隆位点,构建成雌激素反应元件ERE调控的报告质粒pERE-Luc,用脂质体转染法将pERE-Luc及内对照质粒phRL-SV40瞬时转染MCF7细胞,用17β-雌二醇(E2)及受体拮抗剂三苯氧胺(TAM)等处理后检测报告基因荧光素酶的表达,并用雌激素样物质2,4-DDT和METH对方法的有效性进行验证。结果:构建了ERE调控的报告质粒pERE-Luc,转染pERE-Luc的MCF7细胞报告基因的表达与E2呈明显的剂量反应关系,1×10-11mol/L E2可引起报告基因表达,至1×10-9mol/L可达到最大表达值,而未转染pERE-Luc时与E2无明显反应,TAM可以显著抑制E2引起的报告基因的表达。验证结果表明,2,4-DDT浓度>1×10-7mol/L及METH浓度>1×10-6mol/L时可产生雌激素样活性,2,4-DDT的雌激素样活性强于METH。结论:建立的基于荧光素酶报告基因的体外雌激素样物质检测方法有效可靠,以此方法检测2,4-DDT和METH显示有明显的雌激素样活性作用。

关键词：雌激素样活性基因报告荧光素酶

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甲基N-硝基亚硝基胍和视黄酸致ICR小鼠腭裂发育模型的建立

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第二军医大学学报 2005年第1期26卷 58-60页

作者：朱江波印木泉陈蓉芳郭苗莉张天宝第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的:建立发生率较高、畸形类型明确、易于获得并可用于不同类型化学物致腭裂发生机制研究的动物模型。方法:采用致突变性化合物甲基N 硝基亚硝基胍(MNNG)和非致突变性致畸物视黄酸(RA)作用于ICR小鼠(对照组采用溶剂),观察不同剂量和不... 详细信息

目的:建立发生率较高、畸形类型明确、易于获得并可用于不同类型化学物致腭裂发生机制研究的动物模型。方法:采用致突变性化合物甲基N 硝基亚硝基胍(MNNG)和非致突变性致畸物视黄酸(RA)作用于ICR小鼠(对照组采用溶剂),观察不同剂量和不同给药时间的胚鼠腭裂畸形发生率,确定诱导腭裂发生的最佳作用条件,并通过光镜、电镜等手段对其畸形特征作进一步分析。结果:孕10 d一次给予40 mg/kg MNNG所致腭裂的发生率为55.2%,一次给予80 mg/kg RA腭裂发生率几乎达100%;光镜结果显示这2种化学物诱导的腭裂均为小腭;电镜结果表明孕16 d对照组腭中嵴上皮细胞表面有大量的丝状伪足而实验组中则无。结论:成功建立了可供两类不同腭裂发生分子机制研究的动物模型,为进一步研究腭裂畸形的分子机制奠定了基础。

关键词：腭裂动物模型甲基N-硝基亚硝基胍视黄酸发育

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化学物质诱发的小鼠肢体畸形动物模型的建立

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第二军医大学学报 2003年第6期24卷 658-660页

作者：陈蓉芳张天宝印木泉朱江波郭苗莉第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的 :建立发生率稳定、畸形类型特异和易于获得的化学物质所致小鼠肢体畸形动物模型。方法 :采用致突变性致畸物 N-甲基 - N'-硝基 - N-甲基亚硝基胍 (N- m ethyl- N'- nitro- N- nitrosoguanidine,MNNG)作为受试物 ,观察不... 详细信息

目的 :建立发生率稳定、畸形类型特异和易于获得的化学物质所致小鼠肢体畸形动物模型。方法 :采用致突变性致畸物 N-甲基 - N'-硝基 - N-甲基亚硝基胍 (N- m ethyl- N'- nitro- N- nitrosoguanidine,MNNG)作为受试物 ,观察不同剂量和不同给药时间的胎鼠畸形率、畸形类型及特征。结果 :孕期第 12天一次给予 MNNG4 0 m g/ kg时 ,胎鼠畸形类型主要为肢体畸形 ,肢体畸形率以活胎计为 33.7% (31/ 92 ) ,以窝计为 81.8% (9/ 11) ,肢体畸形占畸形胎鼠的构成比为 10 0 %。畸形类型以短指 (趾 )和缺指 (趾 )最常见。四肢畸形的发生率和严重程度存在不对称性 ,依次为左后 >左前 >右后 >右前。掌跖骨缺失和骨化不全发生率较高 ,此外还有胫腓骨的缺失和骨化不全 ,特别是大体形态所见短肢是胫腓骨缺失所致。结论 :成功建立了小鼠肢体畸形动物模型。

关键词：肢体畸形动物模型化学物质诱发分子机制发育

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3种磨损颗粒对体外原代培养人成骨细胞的作用

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第三军医大学学报 2003年第24期25卷 2237-2239页

作者：王文良吴岳嵩焦炳华杨柳许建中娄永华第三军医大学附属西南医院骨科重庆400038 第二军医大学附属长海医院骨科上海200433 第二军医大学基础医学部分子毒理学教研室上海200433

目的　比较 3种不同磨损颗粒对体外原代培养人成骨细胞的作用。方法　PE颗粒、TI 6Al 4V颗粒、Co Cr Mo颗粒加入体外原代培养的人成骨细胞 ,噻唑蓝 (MTT)比色试验检测细胞存活和生长。用酶联免疫检测仪在 490nm波长处测定其吸光度值 ,... 详细信息

目的　比较 3种不同磨损颗粒对体外原代培养人成骨细胞的作用。方法　PE颗粒、TI 6Al 4V颗粒、Co Cr Mo颗粒加入体外原代培养的人成骨细胞 ,噻唑蓝 (MTT)比色试验检测细胞存活和生长。用酶联免疫检测仪在 490nm波长处测定其吸光度值 ,可间接反映活细胞数量。结果　不同浓度、不同磨损颗粒对原代培养成骨细胞成活无明显影响。结论　不同浓度、不同磨损颗粒对原代培养成骨细胞成活无明显影响。

关键词：磨损颗粒成骨细胞人工关节无菌性松动细胞培养

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人支气管上皮细胞c-Ha-ras^(V12G)基因转染细胞系促癌剂检测模型的建立

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第二军医大学学报 2002年第1期23卷 54-56页

作者：吴涛印木泉第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的 :建立一个新的促癌剂检测模型。方法 :采用电穿孔法 ,将人类突变的 c- Ha- ras V1 2 G基因转入人支气管上皮细胞BEAS- 2 B中 ,将获得的 G418抗性 (G418r)单克隆细胞株用佛波醇酯 (PMA)处理 ,并选用克隆形成率、锚着独立性生长及... 详细信息

目的 :建立一个新的促癌剂检测模型。方法 :采用电穿孔法 ,将人类突变的 c- Ha- ras V1 2 G基因转入人支气管上皮细胞BEAS- 2 B中 ,将获得的 G418抗性 (G418r)单克隆细胞株用佛波醇酯 (PMA)处理 ,并选用克隆形成率、锚着独立性生长及血清抗性等表型改变对受试细胞进行了恶性程度检测。结果 :(1)在促癌剂 PMA作用下 ,BEAS- 2 B基因转染细胞发生了恶性转化 ;(2 )表达突变 ras基因的上皮细胞 ,在大剂量 PMA(>1μmol)的急性刺激 (2 4h)下 ,可诱导细胞死亡 ;(3)随着细胞恶性程度的增加 ,某些促癌剂的促细胞分化作用将减弱 ,并有生长刺激作用。结论 :该模型可用于促癌剂的检测及促癌作用机制研究。

关键词：基因转染细胞佛波醇酯促癌剂支气管上皮细胞

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