检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 1996年第3期17卷 287-289页

作者：宋亮年第二军医大学基础医学部病理生理学教研室

用定量ＲＴ－ＰＣＲ法检测１，２５－二羟维生素Ｄ_３受体ｍＲＮＡ的表达宋亮年关键１，２５－二羟维生素Ｄ_３；１，２５－二羟维生素Ｄ_３受体；ｍＲＮＡ；基因表达ＲＴ－ＰＣＲ１，２５－二羟维生素Ｄ３［１，２５（ＯＨ）２Ｄ３］... 详细信息

用定量ＲＴ－ＰＣＲ法检测１，２５－二羟维生素Ｄ_３受体ｍＲＮＡ的表达宋亮年关键１，２５－二羟维生素Ｄ_３；１，２５－二羟维生素Ｄ_３受体；ｍＲＮＡ；基因表达ＲＴ－ＰＣＲ１，２５－二羟维生素Ｄ３［１，２５（ＯＨ）２Ｄ３］是维生素Ｄ３的激素形式，除了其重要...

关键词：二羟维生素D3 受体 mRNA 聚合酶链反应

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原发性肝癌癌旁组织CD44V　mRNA表达及其意义

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第二军医大学学报 1995年第3期16卷 228-230页

作者：刘鹏飞吴孟超陈汉钱光相傅继梁第二军医大学长海医院肝胆外科第二军医大学基础医学部生物学教研室

研究３１例原发性肝癌癌旁组织ＣＤ４４ＶｍＲＮＡ表达，发现癌旁组织ＣＤ４４ＶｍＲＮＡ表达高于癌组织者具有更强的侵袭转移能力。对于原发性肝癌侵袭转移情况的评估，癌旁组织ＣＤ４４ＶｍＲＮＡ的表达可能较单纯癌组织的表达更有意义。

关键词： CD44 肿瘤转移癌旁组织肝肿瘤 mRNA

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迷走神经背核微量注射生长抑素抑制大鼠胰腺外分泌功能

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中华消化杂志 2007年第4期27卷 268-269页

作者：陈小燕李兆申王伟忠邹晓平屠振兴第二军医大学附属长海医院消化科第二军医大学基础医学部生理学教研室

迷走神经背核（DMN）是重要的内脏运动核团，参与胰腺外分泌功能的调节。有研究表明，生长抑素（SS）不是通过迷走传入和传出神经纤维发挥抑制其胰腺外分泌功能的效应，而是在中枢发挥对胰腺外分泌功能的抑制作用。今研究采用人下合成... 详细信息

迷走神经背核（DMN）是重要的内脏运动核团，参与胰腺外分泌功能的调节。有研究表明，生长抑素（SS）不是通过迷走传入和传出神经纤维发挥抑制其胰腺外分泌功能的效应，而是在中枢发挥对胰腺外分泌功能的抑制作用。今研究采用人下合成生长抑素八肽奥曲肽，观察DMN注射SS对基础状态胰腺外分泌功能的影响。

关键词：胰腺外分泌功能迷走神经背核生长抑素微量注射大鼠八肽奥曲肽神经纤维抑制作用

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基于荧光素酶报告基因的MCF7细胞雌激素样物质检测方法的建立

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第二军医大学学报 2005年第9期26卷 1022-1025页

作者：赵海涛张天宝朱江波朱玉平万旭英王征马玺里第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的:建立基于报告基因的MCF7细胞体外雌激素样物质检测方法,并研究2,2-双(对氯苯基)-1,1,1-三氯乙烷(2,4-DDT)和甲氧氯(METH)的雌激素样作用。方法:合成人雌激素反应元件(ERE)核心片段并将其插入pGL3-promoter载体的多克隆位点,构建成... 详细信息

目的:建立基于报告基因的MCF7细胞体外雌激素样物质检测方法,并研究2,2-双(对氯苯基)-1,1,1-三氯乙烷(2,4-DDT)和甲氧氯(METH)的雌激素样作用。方法:合成人雌激素反应元件(ERE)核心片段并将其插入pGL3-promoter载体的多克隆位点,构建成雌激素反应元件ERE调控的报告质粒pERE-Luc,用脂质体转染法将pERE-Luc及内对照质粒phRL-SV40瞬时转染MCF7细胞,用17β-雌二醇(E2)及受体拮抗剂三苯氧胺(TAM)等处理后检测报告基因荧光素酶的表达,并用雌激素样物质2,4-DDT和METH对方法的有效性进行验证。结果:构建了ERE调控的报告质粒pERE-Luc,转染pERE-Luc的MCF7细胞报告基因的表达与E2呈明显的剂量反应关系,1×10-11mol/L E2可引起报告基因表达,至1×10-9mol/L可达到最大表达值,而未转染pERE-Luc时与E2无明显反应,TAM可以显著抑制E2引起的报告基因的表达。验证结果表明,2,4-DDT浓度>1×10-7mol/L及METH浓度>1×10-6mol/L时可产生雌激素样活性,2,4-DDT的雌激素样活性强于METH。结论:建立的基于荧光素酶报告基因的体外雌激素样物质检测方法有效可靠,以此方法检测2,4-DDT和METH显示有明显的雌激素样活性作用。

关键词：雌激素样活性基因报告荧光素酶

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可溶性血管内皮细胞生长抑制因子基因的克隆与表达

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第二军医大学学报 2000年第5期21卷 416-419页

作者：肖扬娄永华王路朱玉平焦炳华第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的 :对可溶性人血管内皮细胞生长抑制因子 (vascular endothelial growth inhibitor,VEGI)基因进行克隆和表达 ,检测表达产物对血管内皮细胞增殖的抑制活性。方法 :将可溶性人 VEGI基因克隆入载体 p U C19后测序 ;再将正确的 VEGI基... 详细信息

目的 :对可溶性人血管内皮细胞生长抑制因子 (vascular endothelial growth inhibitor,VEGI)基因进行克隆和表达 ,检测表达产物对血管内皮细胞增殖的抑制活性。方法 :将可溶性人 VEGI基因克隆入载体 p U C19后测序 ;再将正确的 VEGI基因亚克隆入表达载体 p PROEXHTb,IPTG诱导表达 ;初步纯化表达产物 ,检测对新生牛主动脉内皮细胞增殖抑制活性。结果 :可溶性人 VEGI可以直接抑制新生牛主动脉内皮细胞的增殖。结论 :VEGI是一种新的内皮细胞生长抑制因子 ,通过抑制新生血管形成可用于肿瘤治疗。

关键词：血管内皮细胞生长抑制因子基因克隆基因表达

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膜联蛋白32与低分子质量单链尿激酶融合基因的构建及高效表达

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第二军医大学学报 2002年第4期23卷 378-380页

作者：颜宏利孙树汉陈蕊雯杨湘越第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的：构建膜联蛋白32（annexin32，Anx32）和低相对分子质量单链尿激酶（ScuPA32k）的融合基因，并在大肠杆菌系统内作表达。方法：利用重叠区扩增法进行基因拼接，然后在谷胱甘肽S转移酶原核表达系统内表达，Western印迹验证表达产物... 详细信息

目的：构建膜联蛋白32（annexin32，Anx32）和低相对分子质量单链尿激酶（ScuPA32k）的融合基因，并在大肠杆菌系统内作表达。方法：利用重叠区扩增法进行基因拼接，然后在谷胱甘肽S转移酶原核表达系统内表达，Western印迹验证表达产物。结果：重叠区扩增得到 1．8 kb融合基因，该基因在原核表达系统内得到高效表达，表达量占菌体总蛋白的 26％，Western印迹证明表达产物正确。结论：用重叠区扩增法进行基因拼接快速、简便。

关键词：膜联蛋白32 低相对分子质量单链尿激酶基因拼接基因表达重叠区扩增法大肠杆菌

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成纤维细胞介导的人IL-10基因疗法的实验研究

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第二军医大学学报 1998年第6期19卷 533-535页

作者：陈敏亮林子豪曹雪涛章卫平陶群鞠佃文雷虹吴宏宋慧锋第二军医大学长征医院整形外科第二军医大学基础医学部免疫学教研室

目的：建立ＩＬ－１０基因疗法的实验模型，并动态观察其体内ＩＬ－１０分泌水平。方法和结果：构建携带鼠ＩＬ－１０基因的重组逆转录病毒载体，体外转染小鼠ＮＩＨ３Ｔ３成纤维细胞，筛选到１株高分泌ＩＬ－１０的细胞克隆株；将此阳... 详细信息

目的：建立ＩＬ－１０基因疗法的实验模型，并动态观察其体内ＩＬ－１０分泌水平。方法和结果：构建携带鼠ＩＬ－１０基因的重组逆转录病毒载体，体外转染小鼠ＮＩＨ３Ｔ３成纤维细胞，筛选到１株高分泌ＩＬ－１０的细胞克隆株；将此阳性克隆株移植到小鼠腹腔内，可在小鼠血清中检测出ＩＬ－１０的活性。

关键词：白细胞介素10 成纤维细胞基因治疗

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lacⅠ 靶基因突变子的一种正向选择系统的建立

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第二军医大学学报 1999年第10期20卷 713-715页

作者：黎怀星卢洋姚真真傅继梁第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的：建立一种能正向选择ｌａｃⅠ靶基因突变子的选择系统。方法：比较了分别携带有ｌａｃⅠ－／ｌａｃＺα型质粒和ｌａｃⅠ＋／ｌａｃＺα型质粒的ＤＨ１０Ｂ菌在ＬＢ完全培养基、以葡萄糖为碳源的Ｍ９基本培养基和以乳糖为碳源... 详细信息

目的：建立一种能正向选择ｌａｃⅠ靶基因突变子的选择系统。方法：比较了分别携带有ｌａｃⅠ－／ｌａｃＺα型质粒和ｌａｃⅠ＋／ｌａｃＺα型质粒的ＤＨ１０Ｂ菌在ＬＢ完全培养基、以葡萄糖为碳源的Ｍ９基本培养基和以乳糖为碳源的Ｍ９／Ｌ基本培养基内的生长情况。结果：组成型ＤＨ１０Ｂ菌在Ｍ９／Ｌ固体培养基中只需培养２３ｈ便可观察到生长，而诱导型ＤＨ１０Ｂ菌则需培养８８ｈ才可观察到生长，但在ＬＢ和Ｍ９培养基内两者的生长速度却相同；当将少量的组成型ＤＨ１０Ｂ菌与大量的诱导型ＤＨ１０Ｂ菌混合接种于Ｍ９／Ｌ固体培养基上培养时，Ｍ９／Ｌ固体培养基能从约２．７×１０６的ｌａｃⅠ＋型ＤＨ１０Ｂ菌中将少量的ｌａｃⅠ－型ＤＨ１０Ｂ菌筛选出来。结论：本研究建立了一种在特定时间内只选择生长携带有ｌａｃⅠ－／ｌａｃＺα型质粒的ＤＨ１０Ｂ菌落。

关键词：正向选择 lacⅠ靶基因基因突变子

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视黄酸对人原始巨核白血病细胞系糖皮质激素受体表达的调节

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第二军医大学学报 1994年第6期15卷 507-510页

作者：宋亮年第二军医大学基础医学部病理生理学教研室

糖皮质激素对人原始巨核白血病细胞系（ＨＩＭｅｇ）的增殖分化过程有调节作用，且由糖皮质激素受体（ＧＲ）介导。用放射配体结合分析法及分子杂交进一步研究了视黄酸对ＨＩＭｅｇ细胞ＧＲ的表达调节作用。结果表明，视黄酸可使ＧＲ结... 详细信息

糖皮质激素对人原始巨核白血病细胞系（ＨＩＭｅｇ）的增殖分化过程有调节作用，且由糖皮质激素受体（ＧＲ）介导。用放射配体结合分析法及分子杂交进一步研究了视黄酸对ＨＩＭｅｇ细胞ＧＲ的表达调节作用。结果表明，视黄酸可使ＧＲ结合活性明显提高，且具有时间依赖性，２４ｈ后约提高２倍：以［３２Ｐ］标记的ＧＲｃＤＮＡ片段为探针，用ｄｏｔｂｌｏｔ杂交分析表明，视黄酸亦可使ＧＲｍＲＮＡ水平升高，表明视黄酸对ＧＲ结合活性的影响至少部分地发生于ｍＲＮＡ水平。为进一步阐明视黄酸对ＧＲ调节的可能意义，还观察了糖皮质激素与视黄酸联合应用对ＨＩＭｅｇ细胞增殖过程的影响，发现二者具有相加作用，提示视黄酸对ＧＲ的调节作用具有生物学意义。

关键词：糖皮质激素视黄酸受体白血病巨核细胞系

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应用酵母单杂交系统筛选CpG免疫激活序列的特异性结合蛋白

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第二军医大学学报 2001年第6期22卷 542-545,T002页

作者：胡振林孙树汉戴建新周凤娟第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :寻找与 Cp G免疫激活序列 (imm unostimulatory sequence,ISS)有选择性相互作用的蛋白 ,以进一步探讨其分子作用机制。方法 :采用酵母单杂交系统 ,以 4重复的 ISS为“诱饵”,对人骨髓细胞 c DNA文库进行初步筛选 ,并对部分阳性... 详细信息

目的 :寻找与 Cp G免疫激活序列 (imm unostimulatory sequence,ISS)有选择性相互作用的蛋白 ,以进一步探讨其分子作用机制。方法 :采用酵母单杂交系统 ,以 4重复的 ISS为“诱饵”,对人骨髓细胞 c DNA文库进行初步筛选 ,并对部分阳性克隆以电泳迁移率变动分析 (EMSA )进行验证。结果 :已获得 4个双阳性克隆 ,其中两个编码功能未知的蛋白 ,而另外两个均属抗体轻链 ,分别与抗 DNA抗体和抗乙肝表面抗原抗体 (HBs Ab)高度同源 ;EMSA发现 HBs Ab可在偏酸 p H条件下 (p H6 .4和 5 .8时 )特异性地与含 ISS的寡核苷酸 (Cp G- ODN)结合。结论 :HBs Ab可与

关键词： CpG免疫激活序列酶母单杂交系统免疫球蛋白特异性结合蛋白

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