检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2001年第4期41卷 408-414页

作者：任浩董辉朱分禄缪晓辉王文戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长征医院感染科

利用PCR方法从输血传播性病毒(transfusion transmitted virus,TTV)阳性标本中获得不同长度且重叠覆盖TTV基因组的DNA片段.将PCR扩增片段克隆到pT-Adv载体中,筛选获得阳性克隆.DNA序列测定结果表明所克隆的片段为TTV基因组序列.利用DNA... 详细信息

利用PCR方法从输血传播性病毒(transfusion transmitted virus,TTV)阳性标本中获得不同长度且重叠覆盖TTV基因组的DNA片段.将PCR扩增片段克隆到pT-Adv载体中,筛选获得阳性克隆.DNA序列测定结果表明所克隆的片段为TTV基因组序列.利用DNA片段中特有的限制性内切酶位点将TTV的DNA片段首尾相连,得到近全长的基因组克隆,命名为TTV021.对TTV021的核酸序列进行分析,TFV021长3 472 nt,存在2个阅读框架ORF1和ORF2,分别编码785和146个氨基酸.将TTV021与其它已知的TTV基因组全序列进行了同源性比较,并进行进化分析.结果表明,TTV021序列与TTV分离株CHN2、BDH1的遗传距离较近,而与其它分离株相对较远.

关键词：输血传播性病毒克隆同源性进化分析

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人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因Oct4的克隆及其在大肠杆菌中的表达(英文)

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第二军医大学学报 2003年第9期24卷 937-940页

作者：刘善荣王庆敏杨玲汤淑萍惠宁蒋正戚中田刘厚奇第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室第二军医大学长海医院妇产科第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的 :克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。方法 :取 4～ 6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜 ,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建成 pGEX5T Oct4重组质粒。β硫... 详细信息

目的 :克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。方法 :取 4～ 6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜 ,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建成 pGEX5T Oct4重组质粒。β硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导使该基因在k80 2菌中表达。结果 :用PCR方法扩增获得大小约 1 .1kb条带 ;全自动测序与GenBank中登录的序列 97%同源。获得了pGEX5T Oct4重组子并在k80 2菌中获得了表达 ,SDS PAGE分析有一特异性的 6 2 0 0 0条带。结论 :扩增和克隆了人胚生殖系细胞多能性调节蛋白Oct4全长cDNA并在大肠杆菌中获得表达。

关键词：人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因 Oct4 克隆基因克隆基因表达

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抗平颏海蛇短链神经毒素全人源单克隆抗体的筛选、制备及生物活性研究

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解放军医学杂志 2017年第7期42卷 612-616页

作者：胡适沈亚峰李天雷长海第二军医大学基础医学部生物物理学教研室上海200433

目的重组表达3种平颏海蛇短链神经毒素,利用噬菌体抗体库筛选制备全人源抗毒素单克隆抗体并评估其生物活性。方法以重组表达纯化的神经毒素蛋白作为抗原,从自主构建的噬菌体抗体库中筛选获得噬菌体抗体,经序列测定确定其抗体类型后构建... 详细信息

目的重组表达3种平颏海蛇短链神经毒素,利用噬菌体抗体库筛选制备全人源抗毒素单克隆抗体并评估其生物活性。方法以重组表达纯化的神经毒素蛋白作为抗原,从自主构建的噬菌体抗体库中筛选获得噬菌体抗体,经序列测定确定其抗体类型后构建完整抗体。利用真核表达系统表达纯化抗体后鉴定其抗原结合活性、生化特性及药代动力学特性。在体内验证抗体药物的抗毒素作用。结果经过4轮筛选,获得2株能同时结合3种神经毒素的噬菌体单链抗体,并将其制备成完整的抗体,进一步证实所获得的抗体可特异性结合3种抗原。2株全人源抗体均可拮抗神经毒素对昆明小鼠的致死作用。结论利用重组神经毒素和噬菌体抗体库技术成功获得了特异性抗平颏海蛇短链神经毒素的全人源治疗性抗体。

关键词：平颏海蛇短链神经毒素单克隆抗体全人源抗体抗毒素

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硝酸银耳蜗光镜制片改做透射电镜样品的方法

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第二军医大学学报 2003年第9期24卷 936-936,940页

作者：张琰敏刁明芳颜永碧第二军医大学基础医学部生理学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室

耳蜗标本的电镜制备难度较大，很难做出理想的标本。有关显示和制作耳蜗电镜标本方面的文章虽有很多，但大疗分资料是描述如何修正耳蜗螺旋器方向的定向、定位。本文介绍了同一份耳蜗标本，光镜观察与电镜观察相结合的样品制备方法。

关键词：硝酸银耳蜗光镜制片透射电镜

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1，25（OH）_2D_3及其类似物调节人原始巨核白血病细胞系增殖分化的机制

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第二军医大学学报 1995年第6期16卷 507-512页

作者：宋亮年郭嘉程涛第二军医大学基础医学部病理生理学教研室第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室第二军医大学长海医院血液内科

１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３及其两种新型类似物（ＭＣ９０３和ＥＢ１０８９）对人原始巨核白血病细胞系ＨＩＭｅｇ的增殖分化过程有重要调节作用。本研究利用分子杂交及逆转录－聚合酶链反应首次证明，ＨＩＭｅｇ细胞中有１，２５（ＯＨ... 详细信息

１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３及其两种新型类似物（ＭＣ９０３和ＥＢ１０８９）对人原始巨核白血病细胞系ＨＩＭｅｇ的增殖分化过程有重要调节作用。本研究利用分子杂交及逆转录－聚合酶链反应首次证明，ＨＩＭｅｇ细胞中有１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３受体（ＶＤＲ）ｍＲＮＡ的表达，强烈提示１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３对ＨＩＭｅｇ细胞的作用是由ＶＤＲ介导的。同时还发现，１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３及其类似物、维甲酸在调节ＨＩＭｅｇ细胞增殖分化过程中，Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达水平迅速降低，６ｈ时已基本达到最低水平，提示这些作用因子对ＨＩＭｅｇ细胞的抑制增殖和诱导分化作用是和Ｃ－ｍｙｃ癌基因的表达改变密切相关的。

关键词： 1,25(OH)2D3 白血病巨核系诱导分化

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骨骼肌兴奋-收缩偶联超微结构瞬时变化研究

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第二军医大学学报 1999年第3期20卷 151-153页

作者：杨勇骥雷长海吴越沙继宏叶煦亭余宏宇夏金辉第二军医大学基础医学部生物物理研究所第二军医大学卫生勤务学系计算机教研室第二军医大学基础医学部病理解剖学教研室第二军医大学基础医学部生理学教研室

目的：从毫秒级功能变化水平实时观察骨骼肌在潜伏期内的细胞超微结构形态变化。方法：采用双向红外线探测器－计算机控制的电刺激与超低温快速冷冻固定同步技术，对电刺激后的蟾蜍腓肠肌组织作快速冷冻固定，采用透射电镜对该肌在电刺... 详细信息

目的：从毫秒级功能变化水平实时观察骨骼肌在潜伏期内的细胞超微结构形态变化。方法：采用双向红外线探测器－计算机控制的电刺激与超低温快速冷冻固定同步技术，对电刺激后的蟾蜍腓肠肌组织作快速冷冻固定，采用透射电镜对该肌在电刺激后０．８，５．６，８．４ｍｓ及静息期的超微结构变化进行对比研究。结果：骨骼肌组织处于静息期时，其肌膜与肌纤维的间隙较宽，受电刺激后０．８ｍｓ开始至８．４ｍｓ，肌膜与肌细胞间的间隙大大变窄。并发现骨骼肌组织在电刺激后０．８，５．６及８．４ｍｓ时肌浆网前端的膜产生两个圆孔，而当骨骼肌处于静息期时肌浆网膜并无此形态结构。结论：当骨骼肌兴奋－收缩偶联发生时，肌膜在产生去极化的同时产生位移，并与肌纤维的间距发生改变；骨骼肌收缩时肌浆网膜出现小孔。

关键词：骨骼肌兴奋-收缩偶联超微结构

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封闭近交群体内等位墓因纯化的数学模型

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第二军医大学学报 2000年第4期21卷 387-390页

作者：徐玲玲方影祝国强第二军医大学基础医学部数理教研室上海200433

目的：试建立线性代数模型，以拟合封闭近交群体内等位基因纯化的过程。方法：通过考察与性染色体Ｘ连锁的等位基因频率的变化规律，获得邻近两代（第ｎ－１代和第ｎ代）自交对基因型概率之间的关系为Ｘ^（ｎ）＝ＭＸ^（ｎ－１）。经矩... 详细信息

目的：试建立线性代数模型，以拟合封闭近交群体内等位基因纯化的过程。方法：通过考察与性染色体Ｘ连锁的等位基因频率的变化规律，获得邻近两代（第ｎ－１代和第ｎ代）自交对基因型概率之间的关系为Ｘ^（ｎ）＝ＭＸ^（ｎ－１）。经矩阵相似变换，求得系数矩阵Ｍ的特征值、特征向量和可逆矩阵Ｐ。结果：第ｎ代自交对各种基因型的概率与起始状态基因型的概率之间的关系为Ｘ^（ｎ）＝Ｐ·Ｄ~ｎ·Ｐ^(－１)·Ｘ^（０），当ｎ→∞时，杂合自交对的基因型概率全为零，而只有纯合自交对的基因型概率非零，即自交对的等位基因都趋于纯化，只留下（Ａ，ＡＡ）和（ａ，ａａ）型。结论：线性代数模型定量地模拟了封闭近交群体内等位基因逐步纯化的过程，同时能客观分析不同自交代之间的生物数学特征及内在联系，根据模型还能由初始条件预报纯化基因型的频率。

关键词：数学模型封闭近交群体等位基因纯化

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改变血压波动性对靶器官损伤的影响

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第二军医大学学报 1998年第6期19卷 515-518页

作者：刘建国龚侃程勇楚正绪苏定冯第二军医大学基础医学部药理学教研室

目的：用抗高血压药尼群地平（Ｎｉｔ）及肼屈嗪（Ｈｙｄ）研究血压波动性（ＢＰＶ）的改变与靶器官损伤（ＴＯＤ）的关系。方法：将自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）随机分３组，一组为对照组，另两组分别用Ｎｉｔ及Ｈｙｄ治疗１６周。记录... 详细信息

目的：用抗高血压药尼群地平（Ｎｉｔ）及肼屈嗪（Ｈｙｄ）研究血压波动性（ＢＰＶ）的改变与靶器官损伤（ＴＯＤ）的关系。方法：将自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）随机分３组，一组为对照组，另两组分别用Ｎｉｔ及Ｈｙｄ治疗１６周。记录２４ｈ血压，计算出ＢＰＶ；取心、脑、肾和脾做大体标本，行光镜、电镜病理检查，参照ＴＯＤ半量化指标对损伤程度评分，所得分数与ＢＰＶ作相关性分析。结果：两个治疗组血压基本相近，比对照组明显下降；ＢＰＶ：Ｎｉｔ组＜对照组＜Ｈｙｄ组；ＴＯＤ：Ｎｉｔ组＜对照组＜Ｈｙｄ组；直线相关分析显示ＢＰＶ的大小与ＴＯＤ程度呈正相关。结论：（１）ＢＰＶ与ＴＯＤ之间呈正相关，降低ＢＰＶ对靶器官有保护作用；（２）抗高血压治疗时，为了减轻ＴＯＤ程度，在降低血压的同时，应考虑降低ＢＰＶ。

关键词：血压波动性靶器官损伤高血压 TOD 降压药

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皮质酮－牛血清白蛋白偶联皮质酮对下丘脑薄片升压素释放的快速影响

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第二军医大学学报 1995年第4期16卷 304-307页

作者：刘秀王春安陈宜张第二军医大学基础医学部生理学教研室

利用离体孵育脑薄片和放射免疫测定孵育液内精氨酸升压素（ＡＶＰ）的方法，探讨了皮质酮（Ｂ）及牛血清白蛋白偶联皮质酮（Ｂ－ＢＳＡ）对大鼠下丘脑薄片（含室旁核和视上核）释放ＡＶＰ的快速影响。结果：（１）Ｂ和Ｂ－ＢＳＡ在２０... 详细信息

利用离体孵育脑薄片和放射免疫测定孵育液内精氨酸升压素（ＡＶＰ）的方法，探讨了皮质酮（Ｂ）及牛血清白蛋白偶联皮质酮（Ｂ－ＢＳＡ）对大鼠下丘脑薄片（含室旁核和视上核）释放ＡＶＰ的快速影响。结果：（１）Ｂ和Ｂ－ＢＳＡ在２０ｍｉｎ内均可明显地抑制ＡＶＰ的释放，在１０－７～１０（－４）ｍｏｌ／Ｌ范围内均呈剂量－效应关系；但在每一剂量，Ｂ－ＢＳＡ的快速抑制效应均弱于Ｂ；（２）ＲＵ４８６对Ｂ和Ｂ－ＢＳＡ的快速抑制效应都有部分的阻断作用；但阻断Ｂ－ＢＳＡ效应的最小剂量比阻断Ｂ者高一个数量级；（３）孵育液Ｃａ^（２＋）浓度升高，Ｂ和Ｂ－ＢＳＡ的快速抑制效应均明显增强；孵育液中无Ｃａ^（２＋）则Ｂ和Ｂ－ＢＳＡ的快速抑制效应有所减弱；但Ｂ－ＢＳＡ效应的变化幅度不及Ｂ大。结果表明：（１）Ｂ与牛血清白蛋白共价偶联后，其快速抑制大鼠下丘脑薄片释放ＡＶＰ的效应有所减弱；（２）Ｂ的快速抑制效应是由非基因组机制介导的，其作用可能是影响Ｃａ^（２＋）跨细胞膜流动的结果。

关键词：下丘脑精氨酸升压素皮质酮钙离子

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糖皮质激素对大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞内游离钙浓度的快速影响

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第二军医大学学报 1998年第3期19卷 231-233页

作者：宋玲陈宜张第二军医大学基础医学部生理学教研室

目的：探讨糖皮质激素（ＧＣ）快速抑制肾上腺髓质嗜铬细胞（ＡＭＣＣ）受刺激后分泌的机制。方法：用Ｆｕｒａ－２作Ｃａ２＋指示剂，观察ＧＣ对乙酰胆碱（ＡＣｈ）刺激引起的ＡＭＣＣ内游离钙（［Ｃａ２＋］ｉ）浓度升高的影响，并用... 详细信息

目的：探讨糖皮质激素（ＧＣ）快速抑制肾上腺髓质嗜铬细胞（ＡＭＣＣ）受刺激后分泌的机制。方法：用Ｆｕｒａ－２作Ｃａ２＋指示剂，观察ＧＣ对乙酰胆碱（ＡＣｈ）刺激引起的ＡＭＣＣ内游离钙（［Ｃａ２＋］ｉ）浓度升高的影响，并用放射免疫方法测定了ＧＣ对ＡＣｈ刺激后ＡＭＣＣ的环核苷酸含量的影响。结果：ＧＣ对ＡＣｈ引起的ＡＭＣＣ的［Ｃａ２＋］ｉ升高有快速抑制作用，但对ＡＣｈ刺激引起的环核苷酸含量升高无明显作用。

关键词：肾上腺髓质嗜铬细胞糖皮质激素钙离子

来源：评论

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