检索结果-内蒙古大学图书馆

中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会

作者：李文林苏娟陶欣荣姚玉成王新民李建秀胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室

利用两步胶原酶消化法,从倒千里光碱损伤的小鼠再生肝脏中分离并建立克隆化的上皮样肝祖细胞系(livei progenitor cell lines,LEPCs)。该细胞系不仅表达肝干细胞／卵园细胞的标志分子,如 CK19,c-kit,Thy-1;而且在体外具有双向分化潜能。... 详细信息

利用两步胶原酶消化法,从倒千里光碱损伤的小鼠再生肝脏中分离并建立克隆化的上皮样肝祖细胞系(livei progenitor cell lines,LEPCs)。该细胞系不仅表达肝干细胞／卵园细胞的标志分子,如 CK19,c-kit,Thy-1;而且在体外具有双向分化潜能。当LEPCs在Matrigel中聚团生长时,添加50ng／ml 的表皮细胞生长因子可使LEPCs定向分化为成熟的肝细胞;而在20ng／ml的肝细胞生长因子的作用下LEPCs向胆管细胞分化。当把LEPCs移植到四氯化碳损伤的小鼠肝脏后,LEPCs可以在小鼠肝脏实质中整合并分化为成熟的肝细胞。以上结果表明LEPCs具有肝干细胞的基本特征。该细胞系的建立不仅为研究肝脏发育过程的分子机制提供了良好的细胞模型,而且可以用于研究肝干细胞在肝脏相关疾病细胞治疗方面的潜在应用价值。

关键词：肝干细胞双向分化

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小胶质细胞蛋白质组三维分离方法的建立

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第二军医大学学报 2005年第6期26卷 687-689页

作者：蒋平彭艳倪健向正华焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 上海富纯中南生物技术有限公司上海201203

目的:建立基于二维液相色谱法的三维分离小胶质细胞蛋白质组的方法。方法:将小胶质细胞裂解后制备全细胞蛋白,在传统的一维HPCF、二维HPRP分离后,增加了三维SDSPAGE电泳,对小胶质细胞实现了三维分离。结果:经过优化后的三维分离,小胶质... 详细信息

目的:建立基于二维液相色谱法的三维分离小胶质细胞蛋白质组的方法。方法:将小胶质细胞裂解后制备全细胞蛋白,在传统的一维HPCF、二维HPRP分离后,增加了三维SDSPAGE电泳,对小胶质细胞实现了三维分离。结果:经过优化后的三维分离,小胶质细胞全蛋白按照pH值由高到低的顺序分为34个组分,其中pH8.5～4.0的部分包含16个组分,每一个组分又包含若干种蛋白质。结论:同传统的二维液相色谱分离方法相比,改进后的三维分离方法对小胶质细胞全蛋白具有更彻底、更好的分离效果,为后续的质谱鉴定提供了分离度更好的样品。

关键词：小胶质细胞分离方法蛋白质组三维 SDS-PAGE电泳液相色谱法细胞蛋白分离效果质谱鉴定二维组分 pH值改进后分离度传统

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肝癌细胞中存在SP细胞

肝癌细胞中存在SP细胞

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中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会

作者：张朵朱海英谢东莆胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室

SP细胞是指能够将进入细胞核的荧光染料Hoechst33342排出胞外的一类细胞。它是1996年 Goodell等在研究造血干细胞时发现的。现已在多种生物的多种组织中检测到有SP细胞的存在,并且它们在表面分子标志以及功能方面与相应的组织干细胞具... 详细信息

SP细胞是指能够将进入细胞核的荧光染料Hoechst33342排出胞外的一类细胞。它是1996年 Goodell等在研究造血干细胞时发现的。现已在多种生物的多种组织中检测到有SP细胞的存在,并且它们在表面分子标志以及功能方面与相应的组织干细胞具有一致性。癌干细胞是指异体移植后能够重新形成肿瘤组织,并且具有自我更新和分化潜能的一类肿瘤细胞。目前在乳腺癌细胞系、脑瘤细胞系、肺癌细胞系以及原代分离的胶质瘤细胞中都检测到了SP细胞的存在,推测它可能是一类癌于细胞。在本研究中,不仅在药物诱导的小鼠肝癌组织中检测到了SP细胞的存在,而且在人肝癌细胞系P2-HCC和PRIM-HCC1中也检测到了SP细胞的存在。进一步的研究结果显示:P2-HCC中的 sP细胞比non-SP细胞具有更高的增殖能力,并且SP细胞可以进行不对称分裂,即SP细胞可以增殖形成SP细胞和non-SP细胞。此外还发现具有SP细胞的肝癌细胞系P2-HCC在多方面表现了癌干细胞的特性,例如具有强大的肿瘤形成能力以及分化潜能等。本课题的研究为研究肿瘤细胞中的sP 细胞与癌干细胞的关系以及肝癌干细胞的存在提供了一个很好的实验基础。

关键词：肝癌细胞 HCC

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中国人HNPCC家系中hMSH2基因新突变及其功能分析

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第二军医大学学报 2005年第8期26卷 888-891页

作者：金黑鹰颜宏利宋立华崔龙丁义江孙树汉南京中医药大学附属南京市中医院全国肛肠医疗中心南京210001 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433 上海交通大学食品科学与工程系上海201101 第二军医大学长海医院肛肠外科上海200433

目的:报道1个在中国人遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)家系中发现的基因突变,并对其功能进行分析。方法:抽提1组符合Amsterdam标准的HNPCC家系先证者和其他家系成员的基因组DNA,PCR扩增先证者hMLH119个外显子和hMSH216个外显子,利用变... 详细信息

目的:报道1个在中国人遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)家系中发现的基因突变,并对其功能进行分析。方法:抽提1组符合Amsterdam标准的HNPCC家系先证者和其他家系成员的基因组DNA,PCR扩增先证者hMLH119个外显子和hMSH216个外显子,利用变性高效液相技术(dHPLC)筛查,对异常峰型利用DNA测序方法检测基因突变。发现先证者hMSH2基因存在错义突变后,对家系中其他成员和50名散发性大肠癌患者和100名正常成年人进行相同位点的检测,以判定是单核苷酸多态性位点(SNP)还是突变。利用5对微卫星标记对该家系中的2例肿瘤进行微卫星不稳定分析,免疫组化检测蛋白表达,利用同源建模方法对发现的突变位点进行功能分析,以研究突变的病理意义。结果:在该家系的2例结肠癌患者中均发现hMSH2基因第13外显子2108位出现CA的错义突变,导致703位Ser变异为Tyr,即C.2108C>A(***703Tyr),微卫星结果显示2例肿瘤均为微卫星高度不稳定(MSIH),肿瘤免疫组化结果显示hMSH1基因表达正常而hMSH2基因不表达。同源建模发现该位点与目前报道的hMSH2基因突变不同,突变位于第Ⅳ结构域,Ser突变为Tyr后空间位阻增大,影响了蛋白的正常折叠和功能。结论:Ser703Tyr是中国人HNPCC的一个新的病理性突变。

关键词：结直肠肿瘤,遗传性非息内性 hMSH2 突变

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黄素单核苷酸对羟自由基损伤的大鼠肝线粒体复合物Ⅰ的保护作用

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第二军医大学学报 2005年第10期26卷 1136-1139页

作者：龙建纲王学敏高宏翔刘志缪明永刘健康中国科学院营养科学研究所上海200031 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:观察黄素单核苷酸(FMN)对羟自由基(OH·)损伤线粒体酶复合物1(complexⅠ)的作用,分析FMN与complexⅠ的相互作用机制。方法:差速离心法分离大鼠肝线粒体,OH·体外损伤线粒体,氧电极法测定线粒体耗氧速率,比色法检测线粒体co... 详细信息

目的:观察黄素单核苷酸(FMN)对羟自由基(OH·)损伤线粒体酶复合物1(complexⅠ)的作用,分析FMN与complexⅠ的相互作用机制。方法:差速离心法分离大鼠肝线粒体,OH·体外损伤线粒体,氧电极法测定线粒体耗氧速率,比色法检测线粒体complexⅠ动力学参数及线粒体内MDA、GSH含量及SOD活性。结果:OH·损伤后,线粒体3态、4态(state3,state4)耗氧速率、complexⅠ最大反应速度(Vm)降低(P<0.05),但呼吸控制率(respiratorycontrolratio,RCR)、磷氧比(P/O)及complexⅠ米氏常数(Km)不变,线粒体中GSH含量下降(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05),MDA含量升高。损伤线粒体补充FMN165ng/ml可部分恢复complexⅠ呼吸途径state3耗氧速率(P<0.05),补充FMN82.5～165ng/mg可显著提高OH·损伤的线粒体复合物Ⅰ的Vm(P<0.05)。损伤线粒体补充较低剂量的FMN(FMN<82.5ngFMN/ml),线粒体中GSH、SOD、MDA含量不发生变化,在补充较高剂量FMN(>165ngFMN/ml)时,SOD活性升高(P<0.05),但线粒体MDA含量升高(P<0.05)、GSH含量下降(P<0.05)。结论:FMN能够提高氧化损伤线粒体复合物Ⅰ活性,促进complexⅠ呼吸途径的state3耗氧速率。FMN不能直接清除OH·及自由基,可能通过保护complexⅠ中的酶结合/活性位点免受OH·等自由基攻击从而维持酶活性。

关键词：黄素单核苷酸羟自由基肝线粒体酶复合物Ⅰ

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丙二醛对大鼠肝线粒体呼吸功能及相关脱氢酶活性影响

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第二军医大学学报 2005年第10期26卷 1131-1135页

作者：龙建纲王学敏高宏翔刘昌盛刘志缪明永刘健康中国科学院营养科学研究所上海200031 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:探索脂质氧化终产物丙二醛(MDA)在体外对线粒体呼吸链复合物及线粒体内关键酶活性的影响。方法:采用不同浓度MDA体外干预大鼠肝线粒体,氧电极法检测线粒体呼吸控制率(RCR)、磷氧比(P/O),测定呼吸链复合物及α酮戊二酸脱氢酶、丙酮... 详细信息

目的:探索脂质氧化终产物丙二醛(MDA)在体外对线粒体呼吸链复合物及线粒体内关键酶活性的影响。方法:采用不同浓度MDA体外干预大鼠肝线粒体,氧电极法检测线粒体呼吸控制率(RCR)、磷氧比(P/O),测定呼吸链复合物及α酮戊二酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶活性。结果:线粒体经MDA作用后,以苹果酸/谷氨酸或琥珀酸作底物,线粒体两条呼吸途径对MDA呈现不同的耐受力,前者在MDA100μmol/L时RCR显著降低(P<0.05),400μmol/L时P/O降低(P<0.05);后者MDA浓度达到400和800μmol/L时,线粒体P/O及RCR值显著降低(P<0.05)。丙酮酸脱氢酶及α酮戊二酸脱氢酶分别在50μmol/L和100μmol/L时活性下降(P<0.05),而MDA浓度达到1mmol/L时,苹果酸脱氢酶活性降低(P<0.05)。呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ分别在MDA400和800μmol/L时最大反应速度(Vm)降低(P<0.05),但MDA(0～3.2mmol/L)对呼吸链复合物Ⅲ、Ⅳ的Vm及米氏常数(Km)没有影响。结论:MDA对线粒体呼吸链及α酮戊二酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶存在不同程度的损伤作用,不同酶对MDA损伤的敏感程度有所差异,本研究中相关酶受MDA损伤的次序可能是:丙酮酸脱氢酶、α酮戊二酸脱氢酶、呼吸链复合物Ⅰ、呼吸链复合物Ⅱ、苹果酸脱氢酶、呼吸链复合物Ⅲ、Ⅳ。

关键词：丙二醛肝线粒体脱氢酶

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探讨课堂教学中学生的主体作用与教师的主导作用

探讨课堂教学中学生的主体作用与教师的主导作用

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首届大学数学课程报告论坛

作者：祝国强滕海英黄平第二军医大学基础医学部数理教研室上海 200433

在“数理统计”课程的教学过程中，开展“充分发挥课堂教学中学生的主体作用和教师的主导作用”的教改实验。强调教师是课堂教学的主导。要引导学生理解所授课程内容，启迪学生的思维;学生是课堂教学的主体，要积极发挥学生学习的主观... 详细信息

在“数理统计”课程的教学过程中，开展“充分发挥课堂教学中学生的主体作用和教师的主导作用”的教改实验。强调教师是课堂教学的主导。要引导学生理解所授课程内容，启迪学生的思维;学生是课堂教学的主体，要积极发挥学生学习的主观能动性，使学生由原来的“要我学”转变为“我要学”，真正成为学习的主人，从而提高课堂教学的效率。

关键词：大学数学教学数理统计课程课堂教学教师角色主体作用主导作用教学改革

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新现和再现虫媒病及其媒介

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国外医学（寄生虫病分册） 2005年第3期32卷 125-128页

作者：朱淮民第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

大规模的经济建设,造成生态环境破坏,人类与动物密切接触机会的增加及科学技术的进步,使得人们对病原体的认知水平不断提高,出现了一些新现虫媒传染病;另一方面,已经认知的并通过大规模防治得到明显或有效控制的虫媒病的流行出现了一些... 详细信息

大规模的经济建设,造成生态环境破坏,人类与动物密切接触机会的增加及科学技术的进步,使得人们对病原体的认知水平不断提高,出现了一些新现虫媒传染病;另一方面,已经认知的并通过大规模防治得到明显或有效控制的虫媒病的流行出现了一些新的问题。这些问题给公共卫生体系提出严峻的挑战。

关键词：虫媒病媒介生态环境破坏公共卫生体系虫媒传染病经济建设科学技术密切接触认知水平有效控制病原体规模出现

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利用真菌分生孢子筛选抗真菌活性的海洋微生物

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第二军医大学学报 2005年第11期26卷 1300-1301页

作者：宋志刚许强芝鲁心安刘小宇杨妤艾峰焦炳华华东师范大学生命科学学院上海200062 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:建立筛选抗真菌活性化合物的96孔板方法,筛选海洋活性菌株。方法:利用96孔板培养真菌孢子,将样品加入到真菌培养基中,在适宜条件下培养,通过显微镜来检测菌丝的生长情况,判断样品是否有抗真菌活性,筛选活性菌株。结果:通过对我国... 详细信息

目的:建立筛选抗真菌活性化合物的96孔板方法,筛选海洋活性菌株。方法:利用96孔板培养真菌孢子,将样品加入到真菌培养基中,在适宜条件下培养,通过显微镜来检测菌丝的生长情况,判断样品是否有抗真菌活性,筛选活性菌株。结果:通过对我国东海海洋微生物的筛选,从541株微生物中找到了25株具有抗黄瓜黑星病菌的活性菌株。结论:本生物检测模型方便、快速、费用低,并且可以进行高通量筛选、相关性好,是一种抗真菌天然产物的理想筛选模型。

关键词：抗真菌药黄瓜黑星病菌筛选

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人层黏连蛋白α4链LG2组件单克隆抗体的制备

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第二军医大学学报 2005年第8期26卷 958-959页

作者：张艳宇张玉静朱世成金华许金波陆一鸣军事医学科学院输血研究所北京100850 吉林大学生物化学教研室长春130062 军事医学科学院放射医学研究所北京100850 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

层黏连蛋白（laminin，LN）为基底膜结构成分之一，它参与细胞分化和细胞内信号转导，对细胞的生长、分化和组织的发育和修复有很重要的作用。本研究探讨采用基因免疫技术制备LG2组件的单克隆抗体．为后续实验对LNα4链LG组件进行体外... 详细信息

层黏连蛋白（laminin，LN）为基底膜结构成分之一，它参与细胞分化和细胞内信号转导，对细胞的生长、分化和组织的发育和修复有很重要的作用。本研究探讨采用基因免疫技术制备LG2组件的单克隆抗体．为后续实验对LNα4链LG组件进行体外重组奠定实验基础。

关键词：层黏连蛋白α4链 LG2组件抗体,单克隆

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