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第二军医大学学报 2005年第1期26卷 90-92页

作者：刘玉环王锡智蔡在龙俞超芹崔英沙金燕第二军医大学长海医院妇产科上海200433 长海医院泌尿外科基础医学部生物化学与分子生物学教研室长海医院中医科

PTEN基因是具有双重特异性磷酸酶功能的抑癌基因,其脂质磷酸酶活性降调PKB/Akt信号转导,使细胞周期阻滞在G1期,诱导其凋亡。已证实在人类许多恶性肿瘤中存在体细胞PTEN基因突变,如神经胶质细胞瘤、子宫内膜癌、前列腺癌、肾癌、乳腺癌... 详细信息

PTEN基因是具有双重特异性磷酸酶功能的抑癌基因,其脂质磷酸酶活性降调PKB/Akt信号转导,使细胞周期阻滞在G1期,诱导其凋亡。已证实在人类许多恶性肿瘤中存在体细胞PTEN基因突变,如神经胶质细胞瘤、子宫内膜癌、前列腺癌、肾癌、乳腺癌等。近年来的研究发现,PTEN基因种系突变与人类多种遗传性癌症综合征有关。本文概括介绍了PTEN基因种系突变与人类遗传性癌症综合征及其相关疾病的关系,重点介绍了考登综合征(Cowden syndrome, CS)、Bannayan Ri ley Ruvalcaba syndrome(BRRS)、Proteus syndrome (PS)、Proteus like syndromes(PS like)等疾病。随着对这些综合征认识的加深,应用基因突变分析作为分子诊断工具,将有可能对这些患者极其家庭成员进行疾病的早期诊断及必要的癌症监测。

关键词： PTEN基因基因突变遗传性癌症综合征

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肿瘤坏死因子α基因多态性对强直性脊柱炎发病易感性和临床病变程度的影响(英文)

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中国临床康复 2005年第22期9卷 252-254页

作者：韩星海陈蕊雯段世伟杨波蔡青林懿孙树汉解放军第二军医大学长海医院风湿免疫科上海市200433 解放军第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海市200433 上海交通大学生命科学研究中心中国科学院营养研究所上海市200031

背景:肿瘤坏死因子α基因多态性与强直性脊柱炎发生与发展的关系是近年强直性脊柱炎遗传学研究的热点。目的:探讨肿瘤坏死因子α基因启动子-238和-308位点多态性对强直性脊柱炎发病易感性和病变程度的影响。设计:病例-对照观察。单位:... 详细信息

背景:肿瘤坏死因子α基因多态性与强直性脊柱炎发生与发展的关系是近年强直性脊柱炎遗传学研究的热点。目的:探讨肿瘤坏死因子α基因启动子-238和-308位点多态性对强直性脊柱炎发病易感性和病变程度的影响。设计:病例-对照观察。单位:第二军医大学长海医院风湿免疫科。对象:随机选择1999-01/2003-12在第二军医大学长海医院风湿免疫科就诊的强直性脊柱炎患者108例,各对象间均无血缘关系。男女比为5.3∶1;年龄13～71(30±12)岁,根据骶髂关节破坏程度X射线片评估为Ⅰ～Ⅳ级。另从解放军上海血站(长海医院)随机选取100名健康献血者作为对照,年龄19～56(33±9)岁,男女比为4.9∶1,参与者均知情同意。方法:每例参与者取外周血,加乙二胺四乙酸A抗凝后进行肿瘤坏死因子-α基因启动子的聚合酶链反应扩增和纯化;对聚合酶链反应产物测序,并用Chromas1.62软件展示分析DNA测序结果。②以X射线骶髂关节片分级和肿瘤坏死因子α-308位点(G/C)和(G/A)的对应值评估其对疾病程度的影响。主要观察指标:以DNA直接测序法对-238和-308位点进行基因分型,并分析基因类型与疾病临床表现之间的关系。结果:①肿瘤坏死因子α-238G/G基因型和-238G/A基因型:强直性脊柱炎组有106例(98.1%)和2例(1.9%),正常对照组有95例(95.0%)和5例(5.0%),两组间比较无显著性差异。②肿瘤坏死因子α-308.1.1(G/G)基因型和-308.1.2(G/A)基因型:强直性脊柱炎组有89例(82.4%)和19例(17.6%),正常对照组中有85例(85.0%)和14例(14.0%)。两组比较亦无显著性差异。③根据骶髂关节X射线分级判定疾病严重程度与肿瘤坏死因子α-308位点G/G和G/A基因型之间的关系:强直性脊柱炎患者X射线片Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级时,(G/G)型为3/35/40/11例,(G/A)型为1/12/6/0例。两组差异比较意义显著(χ2GMH=4.77,P<0.05)。结论:在观察对象中未发现肿瘤坏死因子α基因启动子-238和-308位点多态性与强直性脊柱炎发病易感性相关,但根据骶髂关节损害程度X射线分级说明肿瘤坏死因子α基因启动子-308位点的多态性对强直性脊柱炎的严重程度有影响。

关键词：脊柱炎,强直性肿瘤坏死因子多态现象(遗传学) 基因疾病易感性

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变性高压液相层析技术在遗传性多囊肾病突变检测中的应用

变性高压液相层析技术在遗传性多囊肾病突变检测中的应用

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中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会

作者：张树忠胡以平梅长林第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海长征医院肾内科

常染色体显性遗传型多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)是一种十分常见、但目前尚缺乏有效治疗手段的遗传性肾脏疾病。其发病与Ⅰ、Ⅱ型致病基因(PKD1、PKD2) 突变有关,其中85％ADPKD的发生由PKD1异常所导... 详细信息

常染色体显性遗传型多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)是一种十分常见、但目前尚缺乏有效治疗手段的遗传性肾脏疾病。其发病与Ⅰ、Ⅱ型致病基因(PKD1、PKD2) 突变有关,其中85％ADPKD的发生由PKD1异常所导致。由于PKD1基因结构复杂及同源序列的干扰,使其突变检测不仅操作繁琐,而且影响了结果的准确性。本研究采用变性高压液相层析技术 (denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC)分别对涵盖PKD1全部编码区(含46 个外显子)的72组PCR扩增片段进行分析,结果分别从85位健康者和19个汉族人ADPKD家系的67位家庭成员中检测出9个正常多态性位点和11个致病突变,后者包括8个错义突变、2个无义突变和1个移码突变,有10个致病突变是新发现的。突变检出率达到57．89％。并发现检出的突变存在以下特点:(1)突变散布在PKD1各外显子内,未见突变热点出现;(2)突变以DNA碱基转换为主;(3)大多数突变位于基因中GC重复序列区附近;(4)均以杂合基因的形式存在,支持“二次打击”致病假说;(5)致病突变常引发编码氨基酸所带电荷与亲水性的改变;(6)PKD1突变位点可能影响起病时的表现症状,尤其是同一家系的个体间表现更为突出。总之,同以前采用单链构象多态性方法(SSCP)相比,DHPLC分析技术不仅操作周期短,而且突变检出率明显提高,随着该检测条件的进一步完善和检测费用的降低,有望成为进行ADPKD患者发病前基因突变检测,甚至产前诊断的有效常规途径。

关键词：多囊肾病高压液相层析突变检测 ADPKD

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减毒沙门菌体内介导基因转移对ACC-M抑制的实验研究

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口腔颌面外科杂志 2005年第2期15卷 145-148页

作者：江中明赵平曹志中刘军刘宏周中华吕春堂第二军医大学长海医院口腔科上海200433 第二军医大学基础医学部微生物教研室上海200433

目的:观察构建含有Tip30与人IFN-γ基因的真核表达及共表达质粒的重组减毒伤寒沙门菌对腺样囊性癌肺转移抑制作用。方法:4周龄BALB/Cnunu雄鼠25只,随机分成5组,每组5只,其中对照组5只(PBS)、单纯减毒沙门菌组5只(SL7207)、携带人IFN-γ... 详细信息

目的:观察构建含有Tip30与人IFN-γ基因的真核表达及共表达质粒的重组减毒伤寒沙门菌对腺样囊性癌肺转移抑制作用。方法:4周龄BALB/Cnunu雄鼠25只,随机分成5组,每组5只,其中对照组5只(PBS)、单纯减毒沙门菌组5只(SL7207)、携带人IFN-γ基因减毒沙门菌治疗组5只(SL7207/pCI-IFN)、携带Tip30基因减毒沙门菌治疗组5只(SL7207/pCI-Tip30)、携带Tip30与人IFN-γ基因的真核共表达质粒的重组减毒沙门菌治疗组5只(SL7207/pCI-Tip30/IFN),均于尾静脉接种高转移腺样囊性癌(ACC-M)细胞。10d后对照组裸鼠口服PBS,其余各治疗组口服相应的减毒沙门菌,隔周1次,共3次。检测:裸鼠肺转移肿瘤细胞内IFN-γ、Tip30的表达、肿瘤生长体积、瘤体重量、带瘤存活期。结果:在治疗组裸鼠肺转移肿瘤细胞胞浆内有对应表达IFN-γ、Tip30;各治疗组均较对照组肿瘤生长慢,肿瘤体积小,重量轻,抑瘤率高,带瘤存活期长;携带基因治疗组较SL7207治疗组肿瘤生长慢,肿瘤体积小,重量轻,抑瘤率高,带瘤存活期长;联合基因治疗组较单基因治疗组肿瘤生长慢,肿瘤体积小,重量轻,抑瘤率高,带瘤存活期长。结论:减毒伤寒沙门菌不仅能作为载体介导基因对腺样囊性癌肺转移有抑制作用,而且自身对腺样囊性癌肺转移也有抑制作用。联合基因较单基因抑制效果好,有协同作用。

关键词：介导基因转移 ACC-M 实验研究 IFN-γ基因减毒伤寒沙门菌腺样囊性癌 Tip30基因重组减毒沙门菌共表达质粒肿瘤生长体内转移抑制作用 BALB/C 肿瘤体积治疗组联合基因肺转移肿瘤存活期对照组抑瘤率肿瘤细胞

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携带野生型PTEN基因的重组腺病毒治疗子宫内膜癌的体外研究

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第二军医大学学报 2005年第9期26卷 997-1001页

作者：刘玉环杨培丽蔡在龙崔英俞超琴王锡智惠宁古航沙金燕第二军医大学长海医院妇产科上海200433 基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 长海医院中医科长海医院泌尿外科

目的:观察携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad-PTEN)体外转染子宫内膜癌细胞后的表达,并探讨其对肿瘤细胞产生抑制增殖、诱导凋亡的作用及机制。方法:细菌内同源重组方法构建Ad-PTEN,体外转染PTEN基因突变的子宫内膜腺癌RL95-2细胞中,X-... 详细信息

目的:观察携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad-PTEN)体外转染子宫内膜癌细胞后的表达,并探讨其对肿瘤细胞产生抑制增殖、诱导凋亡的作用及机制。方法:细菌内同源重组方法构建Ad-PTEN,体外转染PTEN基因突变的子宫内膜腺癌RL95-2细胞中,X-gal染色检测转染效率。应用RT-PCR、Western印迹、细胞免疫组化检测Ad-PTEN在RL95-2细胞中的转录及表达;应用细胞计数、MTT实验,观察Ad-PTEN对RL95-2细胞生长的影响;应用光镜、透射电镜观察外源性PTEN基因表达对RL95-2细胞形态学及超微结构的影响;应用流式细胞分析仪(FCM)检测Ad-PTEN对RL95-2细胞周期分布的影响、凋亡诱导作用及半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶casapase-3的激活。结果:外源性野生型PTEN基因经腺病毒介导成功转入RL95-2细胞,3种方法均检测出有PTENmRNA及PTEN蛋白的表达,当感染复数(MOI)为50时,体外转染效率达到100%。Ad-PTEN显著抑制RL95-2细胞生长并诱导其凋亡。此外,Ad-PTEN还能诱导RL95-2细胞周期G0/G1期阻滞以及caspase-3的激活。结论:重组腺病毒Ad-PTEN是高效的基因转移系统,能将PTEN目的基因转移到丧失该基因功能的子宫内膜癌RL95-2细胞中,对RL95-2细胞产生强有力的生长抑制及凋亡诱导作用,其机制可能包括细胞周期G0/G1阻滞及caspase-3蛋白酶的激活。

关键词：子宫内膜癌基因治疗 PTEN基因腺病毒细胞周期细胞凋亡体外研究

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数理诊断中的Bayes条件概率模型

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数理医药学杂志 2005年第2期18卷 100-101页

作者：祝国强杭国明滕海英黄平第二军医大学基础医学部数理教研室上海200433 复旦大学数学系

在疾病的数理诊断中 ,概率方法是常用的一种数学工具。介绍了 Bayes条件概率模型在数理诊断中的应用 ,并对计算的结果进行了详细的分析与讨论。

关键词： Bayes条件概率模型数理诊断癌症发病率

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海洋微生物抗肿瘤研究进展

海洋微生物抗肿瘤研究进展

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中国海洋生化学术会议

作者：杨妤许强芝焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室

自从美国1967年提出“向海洋寻求药物”的口号,“蓝色药物”引起了各国的重视,短短几十年便有一万多种新化合物被发现,其中两百多种已申请专利,最初研究的焦点主要在海藻和软体动物身上,并且得到了许多极具潜力的先导化合物,但海洋动植... 详细信息

自从美国1967年提出“向海洋寻求药物”的口号,“蓝色药物”引起了各国的重视,短短几十年便有一万多种新化合物被发现,其中两百多种已申请专利,最初研究的焦点主要在海藻和软体动物身上,并且得到了许多极具潜力的先导化合物,但海洋动植物资源有限,分离纯化复杂,难以工业化生产等弊端一直是阻碍海洋药物研究进一步开展的棘手问题,而海洋中种类最为多样的海洋微生物以其代谢产物多样和可培养逐渐吸引研究者的目光,尤其在抗肿瘤活性方面。有学者预言最有前途的抗肿瘤药物来自海洋,而海洋微生物在此领域有着巨大的潜力。

关键词：海洋微生物细胞毒性细胞毒作用化合物细胞毒活性肿瘤研究环缩二氨酸活性物质次级代谢产物乳腺肿瘤细胞海洋链霉菌人淋巴瘤细胞海洋细菌

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乙型肝炎病毒全基因组转基因小鼠的生物学特性

乙型肝炎病毒全基因组转基因小鼠的生物学特性

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第五届国际转基因动物学术研讨会

作者：訾晓渊朱海英王新民马凤云张树忠胡以平张南熊俊巴月姚玉成黄洁李文林李建秀叶煦亭第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

乙型肝炎病毒(HBV)可引起人类的急、慢性乙型肝炎,而且与肝硬化和肝细胞癌的发生有十分密切的关系,对人类的健康构成了严重的威胁.本研究利用我们实验室建立并优选的乙肝全基因组转基因小鼠C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系... 详细信息

乙型肝炎病毒(HBV)可引起人类的急、慢性乙型肝炎,而且与肝硬化和肝细胞癌的发生有十分密切的关系,对人类的健康构成了严重的威胁.本研究利用我们实验室建立并优选的乙肝全基因组转基因小鼠C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系为实验对象,从DNA、RNA、蛋白质、病毒学、病理学角度,综合研究了该品系转基因小鼠的生物学特性.

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠生物学特性

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国家自然科学基金委员会-加拿大魁北克医学研究基金会神经科学双边研讨会在上海召开

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第二军医大学学报 2005年第12期26卷 1346-1346页

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鲨鱼肝提取物促肝细胞增殖及对大鼠肝细胞线粒体的保护作用

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中国海洋药物 2005年第5期24卷 15-17页

作者：金艳黄才国范秋领冯波第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的研究鲨鱼肝提取物的促肝细胞增殖及对线粒体的保护作用。方法利用[3H]-TdR掺入的方法,测定HepG2细胞的增殖指数;利用D-半乳糖建立大鼠急性肝损伤模型,提取肝脏细胞线粒体,测定以苹果酸-谷氨酸,琥珀酸为底物,ADP诱导的氧消耗、呼吸... 详细信息

目的研究鲨鱼肝提取物的促肝细胞增殖及对线粒体的保护作用。方法利用[3H]-TdR掺入的方法,测定HepG2细胞的增殖指数;利用D-半乳糖建立大鼠急性肝损伤模型,提取肝脏细胞线粒体,测定以苹果酸-谷氨酸,琥珀酸为底物,ADP诱导的氧消耗、呼吸控制率(RCR)、ADP/O、氧化磷酸化率(OPR)等指标。结果与结论鲨鱼肝提取物能够提高肝源细胞的增殖指数并对线粒体具有明显的保护作用。

关键词： D-半乳糖急性肝损伤线粒体

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