检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2003年第6期30卷 965-968页

作者：任绪义周雍张建鹏仲燕冯伟华焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

啮齿目动物的睾丸较肝脏对镉毒性更为敏感 .为阐明不同组织细胞的镉毒性分子机制 ,对镉暴露大鼠睾丸支持细胞与肝脏金属硫蛋白基因 (MT )的表达及镉蓄积进行了时相研究 .成年雄性SD大鼠低剂量镉(4 0 μmol/kg)皮下注射后 ,立即进行睾丸... 详细信息

啮齿目动物的睾丸较肝脏对镉毒性更为敏感 .为阐明不同组织细胞的镉毒性分子机制 ,对镉暴露大鼠睾丸支持细胞与肝脏金属硫蛋白基因 (MT )的表达及镉蓄积进行了时相研究 .成年雄性SD大鼠低剂量镉(4 0 μmol/kg)皮下注射后 ,立即进行睾丸支持细胞和肝脏组织的分离 .采用RT PCR技术分析mRNA ,并用光密度扫描作半定量分析 ,蛋白质定量用ELISA方法 ,原子分光光度吸收法测定镉浓度 .结果显示 :镉暴露 1h后肝脏MTmRNA即有明显的诱导表达 ,3h达高峰 ;支持细胞也有明显的诱导表达 ,6h达高峰 .镉暴露后肝脏MT有明显的诱导表达 ,但睾丸支持细胞不但未见MT增加而且还稍有下降 .提示 :a 镉对MTmRNA的诱导表达具有时间依赖性和组织特异性 .b 镉虽然能诱导睾丸MT的转录 ,但没有促进其MT的合成。

关键词：金属硫蛋白镉睾丸支持细胞睾丸组织镉损伤

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镉中毒大鼠睾丸与肝脏金属硫蛋白表达的时相研究

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生物化学与生物物理进展 2002年第5期29卷 811-815页

作者：任绪义周雍张建鹏冯伟华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

啮齿目动物睾丸对镉毒性较肝脏更敏感 .为阐明睾丸的镉毒性分子机制 ,比较了肝脏与睾丸金属硫蛋白(MT)表达的时相变化 .mRNA采用RT PCR技术分析并用光密度扫描定量 ;蛋白质定量用ELISA方法 .结果显示 ,睾丸中存在MT ,镉中毒后MT1与MT2m... 详细信息

啮齿目动物睾丸对镉毒性较肝脏更敏感 .为阐明睾丸的镉毒性分子机制 ,比较了肝脏与睾丸金属硫蛋白(MT)表达的时相变化 .mRNA采用RT PCR技术分析并用光密度扫描定量 ;蛋白质定量用ELISA方法 .结果显示 ,睾丸中存在MT ,镉中毒后MT1与MT2mRNA明显升高 ,但MT没有相应增加 ;肝脏镉中毒后MTmRNA与MT均明显升高 .结果提示 :镉虽然能诱导睾丸MTmRNA的转录 ,但没有促进其MT的合成。

关键词：镉中毒大鼠睾丸肝脏金属硫蛋白表达时相研究

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四肢主要神经干羟脯氨酸和氨基己糖含量分析

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第二军医大学学报 1995年第1期16卷 60-62页

作者：纪荣明党瑞山杨向群姜关祥冯伟华第二军医大学基础医学部解剖学教研室第二军医大学基础医学部生物化学教研室

测定了１０例正常成年男性脑外伤死亡后２ｈ四肢１２条神经干内羟脯氨酸和氨基己糖的含量（μｍｏｌ／ｍｇ，ｘ±ｓ）分别为：正中神经８０．４±１１．２和６３．３±２１．０；肌皮神经１０８．２±１４．８和７０．... 详细信息

测定了１０例正常成年男性脑外伤死亡后２ｈ四肢１２条神经干内羟脯氨酸和氨基己糖的含量（μｍｏｌ／ｍｇ，ｘ±ｓ）分别为：正中神经８０．４±１１．２和６３．３±２１．０；肌皮神经１０８．２±１４．８和７０．２±２．７；尺神经１０４．８±３６．５和７１．１±２．２；桡神经９６．６±１７．２和６１．０±８．１；桡神经浅支１１５．７±７．０和７４．４±１７．９；前臂内侧皮神经１２７．４±１９．８和８７．２±５．９；坐骨神经８６．５±１３．４和７１．８±１４．５；股神经７８．０±１２．５和７０．９±２．６；胫神经６６．２±５．３和６８．６±３．７；腓总神经９７．７±１５．７和８５．９±１８．８；隐神经７３．９±８．３和６２．０±１３．３；腓肠神经１０８．３±２２．２和９４．５±２５．３。本研究结果提供了正常人四肢主要神经干内羟脯氨酸和氨基己糖的正常值，为研究周围神经损伤后的生化成分含量变化提供了依据。

关键词：脊神经羟脯氨酸氨基己糖含量测定神经损伤

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1，25（OH）_2D_3及其类似物调节人原始巨核白血病细胞系增殖分化的机制

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第二军医大学学报 1995年第6期16卷 507-512页

作者：宋亮年郭嘉程涛第二军医大学基础医学部病理生理学教研室第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室第二军医大学长海医院血液内科

１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３及其两种新型类似物（ＭＣ９０３和ＥＢ１０８９）对人原始巨核白血病细胞系ＨＩＭｅｇ的增殖分化过程有重要调节作用。本研究利用分子杂交及逆转录－聚合酶链反应首次证明，ＨＩＭｅｇ细胞中有１，２５（ＯＨ... 详细信息

１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３及其两种新型类似物（ＭＣ９０３和ＥＢ１０８９）对人原始巨核白血病细胞系ＨＩＭｅｇ的增殖分化过程有重要调节作用。本研究利用分子杂交及逆转录－聚合酶链反应首次证明，ＨＩＭｅｇ细胞中有１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３受体（ＶＤＲ）ｍＲＮＡ的表达，强烈提示１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３对ＨＩＭｅｇ细胞的作用是由ＶＤＲ介导的。同时还发现，１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３及其类似物、维甲酸在调节ＨＩＭｅｇ细胞增殖分化过程中，Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达水平迅速降低，６ｈ时已基本达到最低水平，提示这些作用因子对ＨＩＭｅｇ细胞的抑制增殖和诱导分化作用是和Ｃ－ｍｙｃ癌基因的表达改变密切相关的。

关键词： 1,25(OH)2D3 白血病巨核系诱导分化

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毛细管电泳技术和应用新进展

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化学研究与应用 2001年第1期13卷 4-9页

作者：毛煜徐建明第二军医大学基础医学部化学教研室上海200433

毛细管电泳 (CE)是当前分析化学前沿领域和研究重点之一。本文对毛细管电泳技术—分离模式、进样技术和检测器为线索对最近的研究进展进行了综述 ,探讨了各种模式和技术的分析效率。并介绍了 CE很有实用价值的几个方面的应用 ,包括在基... 详细信息

毛细管电泳 (CE)是当前分析化学前沿领域和研究重点之一。本文对毛细管电泳技术—分离模式、进样技术和检测器为线索对最近的研究进展进行了综述 ,探讨了各种模式和技术的分析效率。并介绍了 CE很有实用价值的几个方面的应用 ,包括在基因工程和单细胞分析中的突出表现。

关键词：毛细管电泳技术基因工程单细胞分析手性分离离子分析应用分离模式进样技术检测器

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中华民族11群体HLA　Ⅱ类基因遗传结构分析及流动轨迹探踪

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第二军医大学学报 1996年第5期17卷 401-407页

作者：潘星华傅继梁第二军医大学基础医学部生物学教研室

目的：阐明ＨＬＡⅡ类基因在中华民族中的流动轨迹和规律，并探索某些ＨＬＡ等位基因的起源。方法：对中华民族１１群体和５个参考群体的ＨＬＡⅡ类７个多态座位的遗传结构进行聚类分析和频率分布的比较。结果和结论：初步揭示了自北向... 详细信息

目的：阐明ＨＬＡⅡ类基因在中华民族中的流动轨迹和规律，并探索某些ＨＬＡ等位基因的起源。方法：对中华民族１１群体和５个参考群体的ＨＬＡⅡ类７个多态座位的遗传结构进行聚类分析和频率分布的比较。结果和结论：初步揭示了自北向南流动的可能起源于白人或黑人的基因谱（如ＤＱＡｌ＊０５０１，ＤＱＢｌ＊０５０１等）和自南向北流动的可能起源于东南亚黄种人的基因谱（如ＤＱＡｌ＊０６０１，ＤＲＢｌ＊１２０２等）；提出存在一类可能起源于中华民族某个大陆群体的ＨＬＡ基因（分别如ＤＱＢｌ＊０３０３及ＤＲＢｌ＊０９０１，＊１５０１等）；并发现ＨＬＡ基因在中华民族各群体之间的融合深刻而普遍，但傣、布依等部分少数民族与外界仍有一定程度的隔离；结果也支持中华民族包含南北两大群体的观点。认为群体迁移、融合而产生的基因流动是ＨＬＡ基因频率变化的主要动力，但隔离导致的遗传漂变以及自然选择也有重要影响。

关键词：基因中华民族 HLAⅡ类基因遗传结构聚类分析

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电针刺激大鼠足三里穴对视上核、室旁核催产素神经元的影响

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第二军医大学学报 1995年第1期16卷 37-40页

作者：何润昌范溥生王旭明何北平张忠义周世臣宋朝佑林葆城第二军医大学基础医学部解剖学教研室第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

用ＷＱ－９Ｅ钾离子透入仪筛选出对痛刺激敏感的ＳＤ大鼠８只，随机分成对照组及针刺组，每组４只。针刺鼠用ＷＱ－９Ｅ电针仪刺激两侧＂足三里＂穴，持续３０ｍｉｎ。所有动物同时用１％戊巴比妥钠腹腔内麻醉后开胸，用Ｂｏｕｉｎ液经... 详细信息

用ＷＱ－９Ｅ钾离子透入仪筛选出对痛刺激敏感的ＳＤ大鼠８只，随机分成对照组及针刺组，每组４只。针刺鼠用ＷＱ－９Ｅ电针仪刺激两侧＂足三里＂穴，持续３０ｍｉｎ。所有动物同时用１％戊巴比妥钠腹腔内麻醉后开胸，用Ｂｏｕｉｎ液经心灌注固定，开颅取脑，作连续冰冻切片（片厚４０μｍ），隔片取一。所有切片均按Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇｅｒ（ＰＡＰ）法进行免疫细胞化学反应，ＤＡＢ呈色，封片后直接连ＩＢＭ２８６－ＣＡＰ５３０图像分析系统对视上核，室旁核催产素免疫反应阳性物质作定量测定。结果显示：针刺鼠下丘脑视上核，室旁核催产素免疫反应阳性物质的总面积比对照鼠分别增加了４４．１％、４７．３％（Ｐ＜０．０１）。提示，催产素免疫反应阳性物质的增加与电针刺激足三里穴有关，催产素可能参与电针镇痛的中枢调节过程。

关键词：电针视上核室旁核催产素免疫细胞化学

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基于pMTR1质粒的转基因小鼠突变研究模型的建立

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第二军医大学学报 2000年第6期21卷 537-540页

作者：卢洋黎怀星李建秀傅继梁第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的 :建立在基因组中整合有 p MTR1质粒的 C5 7BL / 6转基因小鼠家系 ,为体内基因突变研究提供有效的动物模型。方法 :利用分子克隆技术构建 p MTR1质粒。将其线性化后 ,用显微注射法注射入 5 72只 C5 7BL / 6小鼠受精卵 ,再将它们分... 详细信息

目的 :建立在基因组中整合有 p MTR1质粒的 C5 7BL / 6转基因小鼠家系 ,为体内基因突变研究提供有效的动物模型。方法 :利用分子克隆技术构建 p MTR1质粒。将其线性化后 ,用显微注射法注射入 5 72只 C5 7BL / 6小鼠受精卵 ,再将它们分别移入 45只受体母鼠的输卵管中 ,共产仔 44只 ,存活 35只 ,采用 PCR,PCR- Southern和基因组 Southern杂交三级筛选法鉴定子代小鼠。以 4只经基因组 Southern杂交证实在基因组 DNA中整合有多拷贝结构完整的 p MTR1质粒的小鼠作Founder小鼠 ,进行转基因小鼠的建系工作。对每个 Founder小鼠已有的 F1代及 F2代转基因小鼠的基因组 DNA进行p MTR1质粒回收实验。结果 :从转基因小鼠基因组中可以回收出结构、功能完整的 p MTR1质粒。结论 :(1)建立了在基因组 DNA中整合有 p MTR1质粒的 C5 7BL / 6转基因小鼠家系 ;(2 )

关键词：转基因小鼠基因突变 PMTR1质粒

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pM CLacⅠ/Neo质粒的构建和基因突变研究的新策略

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第二军医大学学报 1999年第8期20卷 509-512页

作者：卢洋黎怀星傅继梁第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的：构建一个用于比较研究哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的不同突变机制的质粒载体。方法和结果：设计并构建一种具两个ｌａｃⅠ突变靶基因的突变研究载体：ｐＭＣＬａｃⅠ／Ｎｅｏ质粒。在该质粒中，一个ｌａｃⅠ靶基因受 ... 详细信息

目的：构建一个用于比较研究哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的不同突变机制的质粒载体。方法和结果：设计并构建一种具两个ｌａｃⅠ突变靶基因的突变研究载体：ｐＭＣＬａｃⅠ／Ｎｅｏ质粒。在该质粒中，一个ｌａｃⅠ靶基因受ＣＭＶ启动子的驱动而使其在人和哺乳动物细胞内能表达，而另一个ｌａｃⅠ靶基因则不能表达。将所获得的ｐＭＣＬａｃⅠ／Ｎｅｏ质粒经酶切鉴定后，再进行如下功能鉴定：一是分析两个ｌａｃⅠ靶基因在大肠杆菌细胞内的功能状态，结果显示这两个ｌａｃⅠ基因在ＤＨ５α宿主菌内功能正常；二是将其导入ＮＩＨ３Ｔ３细胞内，分析两个靶基因是否能模拟哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的功能状态。结果表明其中一个ｌａｃⅠ靶基因在ＮＩＨ３Ｔ３细胞中处于转录表达状态。结论：本研究构建了一种新型的突变研究载体，位于该载体上的两个ｌａｃⅠ靶基因能模拟人和哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的功能状态。

关键词：基因突变 lacⅠ基因质粒 DNA损伤沉默基因

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口蹄疫病毒融合表位基因在pET原核系统的高表达及产物的纯化

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第二军医大学学报 2003年第8期24卷 904-905页

作者：陈祖欢张洪英郭瀛军林懿朱维佳孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

构建口蹄疫融合表位基因 - SG表达载体 p ET- SG,转化重组子与 K80 2 ,新鲜过夜菌以 2 %接种量接种 2 YT培养液 ,37℃培养 2 h后用 IPTG诱导 ,每隔 1h取样 ,共 8h。根据 SDS- PAGE结果 ,口蹄疫融合表位基因 - SG在 p ET原核表达系统可... 详细信息

构建口蹄疫融合表位基因 - SG表达载体 p ET- SG,转化重组子与 K80 2 ,新鲜过夜菌以 2 %接种量接种 2 YT培养液 ,37℃培养 2 h后用 IPTG诱导 ,每隔 1h取样 ,共 8h。根据 SDS- PAGE结果 ,口蹄疫融合表位基因 - SG在 p ET原核表达系统可获得较高表达 ,用 IPTG诱导 4 h蛋白表达量最高 ,用 Ni+柱亲和层析可得到较纯蛋白。

关键词：口蹄疫病毒融合表位基因 pET原核系统基因表达纯化

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