检索结果-内蒙古大学图书馆

生理学报 2003年第4期55卷 442-448页

作者：周萍吴胜英于澄钒王华唐朝枢林丽袁文俊第二军医大学基础医学部生理学教研室第二军医大学基础医学部生理学教研室北京 100034 北京大学附属第一医院心血管研究所北京 100083 北京 100034 北京大学医学部生理和病理生理学系上海 200433

在正常Langendorff灌流与缺血-再灌注(停灌20 min-复灌20 min)离体大鼠心脏模型,观察尾加压素Ⅱ(urotensin Ⅱ,UⅡ)对冠脉流量、心功能和心肌代谢的影响以及心肌UⅡ受体的功能,以探讨UⅡ的心脏效应。对正常心脏给予0.1、1和10 nmol/L U... 详细信息

在正常Langendorff灌流与缺血-再灌注(停灌20 min-复灌20 min)离体大鼠心脏模型,观察尾加压素Ⅱ(urotensin Ⅱ,UⅡ)对冠脉流量、心功能和心肌代谢的影响以及心肌UⅡ受体的功能,以探讨UⅡ的心脏效应。对正常心脏给予0.1、1和10 nmol/L UⅡ各5 min,然后换洗5 min,对停灌缺血-再灌注心脏在再灌注期给予1或10nmol/L UⅡ。监测心率、左室内压和左室内压升降的最大变化率等心功能指标,计算冠脉流量,测定冠脉流出液中总蛋白和肌红蛋白含量以及乳酸脱氢酶(LDH)活性。灌流结束后,测定心肌丙二醛(MDA)含量和质膜UⅡ结合位点(放射性配基结合法)。结果如下:(1)正常心脏灌流UⅡ后,冠脉流量和心功能呈浓度依赖下降,换洗后没有完全恢复。心肌蛋白、肌红蛋白和LDH漏出随UⅡ浓度的增加而增加,换洗后迅速减少。UⅡ组心肌MDA含量与对照组差异无显著性。(2)缺血-再灌注后,冠脉流量显著减少,心功能显著抑制,再灌注期心肌蛋白、肌红蛋白和LDH明显漏出;给予UⅡ后,上述变化增强,且高浓度组更强,与对照组差异有显著性(P<<0.01),再灌注后心肌MDA含量亦显著高于对照(P<0.01)。(3)缺血-再灌注心肌质膜UⅡ受体的B显著高于正常对照心肌(14.65±1.78vs20.53±1.98 fmol/mg pr,P<0.01),Kd值变化无统计学意义。上述结果表明,在正常

关键词：病理学尾加压素Ⅱ 心脏离体灌流缺血-再灌注大鼠

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N-硝基-L-精氨酸对阿片类物质耐受及依赖形成的影响

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中华麻醉学杂志 2003年第6期23卷 451-453页

作者：万兴旺黄矛何雅琴万莉李万亥由振东路长林第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作信号转导研究中心上海市200438 第二军医大学基础医学部新药评价中心第二军医大学长海医院药学部第二军医大学药学院药理学教研室第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的研究N-硝基-L-精氨酸(NO2Arg)对阿片类物质耐受及依赖形成的影响。方法采用剂量递增法建立大鼠吗啡身体依赖模型;用热辐射甩尾法测定大鼠痛阈值的方法监测吗啡耐药程度。身体依赖程度采用皮下注射纳洛酮4 mg·kg-1激发后,测定... 详细信息

目的研究N-硝基-L-精氨酸(NO2Arg)对阿片类物质耐受及依赖形成的影响。方法采用剂量递增法建立大鼠吗啡身体依赖模型;用热辐射甩尾法测定大鼠痛阈值的方法监测吗啡耐药程度。身体依赖程度采用皮下注射纳洛酮4 mg·kg-1激发后,测定大鼠60 min内可数和不可数戒断症状评分的方法进行;小鼠精神依赖采用条件性位置偏爱模型进行评价。结果 NO2Arg可剂量依赖性抑制吗啡耐受的形成。NO2Arg 5 mg·kg-1可显著抑制吗啡依赖大鼠大多数戒断症状。NO2Arg 4 mg·kg-1可使吗啡、二氢埃托啡精神依赖小鼠在偏爱侧停留时间分别由(6.1±2.0)min、(8.0±0.7)min显著增加到(9.3±1.1)min、(9.5±1.2)min 。结论NO2Arg可显著抑制吗啡耐受及依赖的形成,并可逆转已形成的精神依赖性。

关键词：阿片类物质依赖 N-硝基-L-精氨酸吗啡精神依赖戒断症状

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普鲁泊福对GABA_A受体结合功能的影响

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第二军医大学学报 2003年第9期24卷 985-988页

作者：曹云飞马蓓杨立群俞卫锋第二军医大学东方肝胆外科医院麻醉科上海200438 第二军医大学基础医学部生理学教研室

目的 :观察普鲁泊福对离体小鼠脑细胞膜GABAA 受体结合功能的影响。方法 :采用放射配体受体结合分析法 ,测定普鲁泊福对小鼠脑细胞膜3 H GABA特异性结合以及GABAA 受体饱和曲线的影响。结果 :特异性结合试验显示 ,与对照组相比 ,1 0～... 详细信息

目的 :观察普鲁泊福对离体小鼠脑细胞膜GABAA 受体结合功能的影响。方法 :采用放射配体受体结合分析法 ,测定普鲁泊福对小鼠脑细胞膜3 H GABA特异性结合以及GABAA 受体饱和曲线的影响。结果 :特异性结合试验显示 ,与对照组相比 ,1 0～ 30 0 μmol/L浓度组的普鲁泊福明显增强3 H GABA与脑细胞膜GABAA 受体的特异性结合 ,并呈浓度依赖性 (P <0 .0 5 ) ,而浓度低于 1 0 μmol/L的普鲁泊福无明显增强作用 (P >0 .0 5 )。GABAA 受体饱和试验显示 ,普鲁泊福组 (1 0 μmol/L)的饱和曲线解离常数Kd2 值明显低于对照组 (P <0 .0 1 ) ,但 2组的Kd1 、Bmax1 及Bmax2 值相比无统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论 :临床相关浓度的普鲁泊福可显著增强内源性GABA与GABAA 受体的结合功能 ,其主要机制是通过提高GABA低亲和力结合位点的亲和性而起作用的。

关键词：普鲁泊福 GABAA受体结合功能放射配体受体结合分析法小鼠麻醉药

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糖皮质激素对人卵巢癌细胞系(3AO)的诱导分化作用

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上海医学 2003年第4期26卷 265-267页

作者：徐明娟崔英方国恩宋亮年王昭梅第二军医大学长海医院妇产科上海200433 第二军医大学基础医学部病理生理学教研室

目的　观察不同浓度的地塞米松 (Dex)对人卵巢癌细胞系 ( 3AO)增殖及分化的影响 ,在 3AO细胞中是否有糖皮质激素受体 (GR)的表达。方法　以不同浓度Dex( 1× 10 -10 ～ 1× 10 -6 mol/L)处理培养 3AO细胞后 ,采用活细胞计数法... 详细信息

目的　观察不同浓度的地塞米松 (Dex)对人卵巢癌细胞系 ( 3AO)增殖及分化的影响 ,在 3AO细胞中是否有糖皮质激素受体 (GR)的表达。方法　以不同浓度Dex( 1× 10 -10 ～ 1× 10 -6 mol/L)处理培养 3AO细胞后 ,采用活细胞计数法观察细胞增殖情况 ,采用氨基安替比林法测定碱性磷酸酶 (AKP)活性 ;采用酶联免疫法测定 3AO细胞分化标志抗原CA12 5水平的变化 ;测定GR拮抗剂RU486作用于 3AO细胞后能否阻断糖皮质激素的效应 ,用放射配体结合分析法和定量RT PCR法检测 3AO细胞中GR的表达。结果　Dex对 3AO细胞的增殖有明显抑制作用 ,1× 10 -6 mol/LDex作用 5d后活细胞计数为对照组的 5 6.78% ,同时伴有细胞形态的变化 ;Dex还可使 3AO细胞AKP活性增高 ,这种作用具有时间和剂量依赖性 ;1× 10 -6 ～ 1× 10 -10 mol/LDex作用于3AO细胞后 ,明显抑制卵巢癌细胞标志抗原CA12 5的表达 ;RU486可完全阻断Dex对 3AO细胞活性的诱导作用 ;在细胞中存在高亲和力、低容量GR。结论　Dex对 3AO细胞有明显的增殖抑制和诱导分化作用 ,在 3AO细胞中存在GR ,Dex调节

关键词：糖皮质激素人卵巢癌细胞系诱导分化地塞米松酶联免疫法卵巢肿瘤肿瘤标志抗原

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地塞米松对人卵巢癌细胞糖皮质激素受体的调节

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上海医学 2003年第1期26卷 53-55页

作者：徐明娟方国恩崔英宋亮年王昭梅第二军医大学长海医院妇产科上海200433 第二军医大学基础医学部病理生理学教研室

目的　观察地塞米松调节人卵巢癌细胞系 3AO细胞增殖分化的作用机制及 3AO细胞中糖皮质激素受体 (GR)的表达。方法　①采用氨基安替比林法测定糖皮质激素受体拮抗剂 (RU 4 86 )作用 3AO细胞后阻断糖皮质激素的效应 ;②采用放射配体结合... 详细信息

目的　观察地塞米松调节人卵巢癌细胞系 3AO细胞增殖分化的作用机制及 3AO细胞中糖皮质激素受体 (GR)的表达。方法　①采用氨基安替比林法测定糖皮质激素受体拮抗剂 (RU 4 86 )作用 3AO细胞后阻断糖皮质激素的效应 ;②采用放射配体结合分析法检测 3AO细胞中GR的表达 ;③采用定量RT PCR法检测地塞米松对 3AO细胞中GR的调节作用。结果　①RU 4 86可完全阻断地塞米松对 3AO细胞活性的诱导作用 ;②3AO细胞中存在高亲和力、低容量糖皮质激素受体 ;③地塞米松使GR结合活性明显降低 ,且具有时间依赖性。结论　 3AO细胞中存在GR ,地塞米松调节 3AO细胞增殖分化的作用由GR介导 ,地塞米松可向下调节 3AO细胞GR的结合活性。

关键词：糖皮质激素糖皮质激素受体卵巢癌地塞米松

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长期面神经损伤后其运动神经元睫状神经营养因子的表达

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临床耳鼻咽喉科杂志 2003年第2期17卷 102-104,T003页

作者：郑宏良周水淼李兆基陈世彩黄益灯严进由振东路长林王成海上海第二军医大学长海医院耳鼻咽喉科上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的 :探讨长期面神经损伤后其运动神经元睫状神经营养因子 (CNTF)的表达及分布。方法 :以犬单侧面神经损伤为实验模型 ,采用原位杂交及免疫组织化学技术 ,结合图像分析技术测定面神经核CNTFmRNA及其蛋白表达呈阳性反应的神经元胞体灰... 详细信息

目的 :探讨长期面神经损伤后其运动神经元睫状神经营养因子 (CNTF)的表达及分布。方法 :以犬单侧面神经损伤为实验模型 ,采用原位杂交及免疫组织化学技术 ,结合图像分析技术测定面神经核CNTFmRNA及其蛋白表达呈阳性反应的神经元胞体灰度、体积及数量。结果 :疑核运动神经元能自分泌CNTF ,神经损伤 3周内神经元CNTF基因表达强度及反应的胞体数明显下降 ,而CNTF蛋白表达增强 ,但表达的胞体数无改变 ;4周后前两项指标迅速增高 ,而CNTF表达强度恢复正常 ,反应的胞体数无变化 ;6周后 3指标均始终低于健侧。12～ 32周各项指标均趋向稳定。结论 :长期面神经损伤面神经核仍保持较高水平的CNTF表达。

关键词：面神经神经再生神经生长因子

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人胚胎生殖系细胞分离与体外培养的初步研究

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第二军医大学学报 2003年第9期24卷 941-943页

作者：刘善荣刘厚奇汤淑萍惠宁冀凯宏熊俊蒋正戚中田第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 长海医院妇产科基础医学部微生物学教研室

目的:初步探讨人胚胎生殖系细胞的分离与体外培养.方法:体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织,按单纯机械分离、酶消化分离、二者结合法及是否有饲养层将组织分为5种不同的方式培养后,用碱性磷酸酶标记,计数阳性克隆并进行比较.结果:酶消... 详细信息

目的:初步探讨人胚胎生殖系细胞的分离与体外培养.方法:体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织,按单纯机械分离、酶消化分离、二者结合法及是否有饲养层将组织分为5种不同的方式培养后,用碱性磷酸酶标记,计数阳性克隆并进行比较.结果:酶消化法培养所获得的克隆较单纯机械分离方法多,原代培养时种植到饲养层上效果较好.将分离到的组织用0.25%胰酶消化3 min,种植到丝裂霉素C处理过的小鼠胚胎成纤维细胞上培养3 d,挑取克隆传代,在第10天形成30.7 个阳性克隆,显著高于其他方法获得的阳性克隆数.用碱性磷酸酶标记的细胞(克隆)具有多样性,细胞胞体为圆形,分为有突起和无突起两种;阳性细胞克隆呈圆球形、条带形和块形,与周围细胞分界清楚.结论:人胚胎体内的微环境限制生殖系细胞的体外扩增培养,原代培养需要在饲养层上进行且宜用酶消化法尽早传代.

关键词：胚胎生殖系细胞细胞分离体外培养碱性磷酸酶

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脂质体介导胶质细胞源性神经营养因子基因转染对大鼠脊髓损伤后神经功能的影响

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上海医学 2003年第1期26卷 48-50页

作者：鲁凯伍陈哲宇侯铁胜傅强李明曹莉金大地第一军医大学南方医院脊柱骨病科广州510515 第二军医大学基础医学部神经生物教研室第二军医大学长海医院骨科

目的　探讨阳离子脂质体介导的胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)基因体内转染对大鼠脊髓损伤后后肢运动功能恢复的影响。方法　雄性成年SD大鼠 30只 ,随机均分为绿色荧光蛋白 (GFP)对照组及GDNF治疗组。采用改良Nystr m法经后路压迫大... 详细信息

目的　探讨阳离子脂质体介导的胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)基因体内转染对大鼠脊髓损伤后后肢运动功能恢复的影响。方法　雄性成年SD大鼠 30只 ,随机均分为绿色荧光蛋白 (GFP)对照组及GDNF治疗组。采用改良Nystr m法经后路压迫大鼠胸段脊髓模型 ,以直接注射法将脂质体DC Chol和重组质粒 pEGFP GDNFcDNA混合后注入大鼠损伤脊髓。HE染色观察伤后 4周伤段脊髓残存组织的面积 ,采用斜板试验和运动功能评分观察大鼠后肢运动功能的恢复情况。结果　大鼠脊髓损伤后 1～ 4周 ,GDNF治疗组后肢运动功能评分明显高于GFP对照组 ,两组间差异有显著性 (P <0 .0 5 )。伤后 4周 ,GDNF组伤段残存脊髓组织的面积大于对照组 (P <0 .0 1)。结论　脂质体介导GDNF基因体内转染能明显减少脊髓损伤后伤区的坏死和萎缩。

关键词：胶质细胞源性神经营养因子脊髓损伤功能脂质体基因治疗

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人胃癌相关蛋白VRG107基因的扩增及组织表达初步研究

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第二军医大学学报 2003年第12期24卷 1373-1374页

作者：吴浩焦炳华娄永华史薇郭兴中第二军医大学基础医学部新药评价中心上海200433 基础医学部生物化学与分子生物学教研室

以正常人肝脏cDNA文库为模板,采用PCR方法扩增出编码胃癌相关蛋白VRG107基因片段,应用半定量RT-PCR和Northern印迹分析研究它在人体组织中表达的分布。结果表明VRG107基因编码区为297 bp,与文献报道完全相同。该基因在肝、胃、结肠、肾... 详细信息

以正常人肝脏cDNA文库为模板,采用PCR方法扩增出编码胃癌相关蛋白VRG107基因片段,应用半定量RT-PCR和Northern印迹分析研究它在人体组织中表达的分布。结果表明VRG107基因编码区为297 bp,与文献报道完全相同。该基因在肝、胃、结肠、肾、乳腺等多种组织(包括肿瘤组织)中均有不同程度的表达。在肝癌组织中表达量明显少于癌旁组织(P<0.01),而在结肠癌组织中表达也少于癌旁组织。提示VRG107基因是一个组织分布广泛的基因,在部分肿瘤组织中表达量明显减少。

关键词：人胃癌 VRG107基因基因扩增基因表达癌组织

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人糖皮质激素受体GRα基因表达载体的构建和GRα蛋白的表达

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第二军医大学学报 2003年第10期24卷 1055-1055,1067页

作者：凌昌全俞超芹李敏张亚妮孙卫民第二军医大学长海医院中医科上海200433 第二军医大学海军医学系军队卫生学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部免疫学教研室上海200433

目前检测糖皮质激素受体采用的是放射配体法[1,2],存在着放射污染、实验结果不稳定、需血量大(6～7 ml)等问题,因此建立一种简便、无放射污染、需血量少、易于推广的检测方法显得很重要.而ELISA检测法基本符合以上条件.要建立ELISA检测... 详细信息

目前检测糖皮质激素受体采用的是放射配体法[1,2],存在着放射污染、实验结果不稳定、需血量大(6～7 ml)等问题,因此建立一种简便、无放射污染、需血量少、易于推广的检测方法显得很重要.而ELISA检测法基本符合以上条件.要建立ELISA检测法,首先须表达糖皮质激素受体蛋白.人糖皮质激素受体(hGR)有hGRα和hGRβ两种不同的蛋白,hGRα可与糖皮质激素结合而发挥生理作用,而hGRβ不能与糖皮质激素结合,因此无生理活性[3,4].目前hGRα蛋白的表达多采用真核细胞表达,此种表达方式虽能保持蛋白的天然空间结构而具有生理活性,但要大量制备并纯化却存在困难.本研究拟构建可诱导的hGRα基因表达载体,并大量表达hGRα蛋白,为hGRα ELISA检测法的建立奠定基础.

关键词：人糖皮质激素受体基因表达载体蛋白表达

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