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第二军医大学学报 2003年第2期24卷 155-158页

作者：熊俊訾晓渊姚玉成金艳花李建秀苏小平王新民倪文君丛文铭胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 第二军医大学东方肝胆外科医院病理科

目的 :研究乙型肝炎病毒 X蛋白致转基因小鼠的表型效应。方法 :采用免疫组织化学和组织病理学方法分析转基因小鼠中 X蛋白的表达部位及其病理学改变。结果 :免疫组织化学检测发现 X蛋白在转基因小鼠的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和皮肤组... 详细信息

目的 :研究乙型肝炎病毒 X蛋白致转基因小鼠的表型效应。方法 :采用免疫组织化学和组织病理学方法分析转基因小鼠中 X蛋白的表达部位及其病理学改变。结果 :免疫组织化学检测发现 X蛋白在转基因小鼠的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和皮肤组织中均有表达 ,从 F0 代到 F3代小鼠 ,X蛋白在肝细胞中的分布逐渐从细胞质向细胞核转移。病理学分析显示 ,表达 X蛋白的转基因小鼠出现了皮肤组织结构异常、肝组织和肺组织轻度变性等病理学变化。结论 :乙型肝炎病毒 x基因转基因小鼠的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和皮肤等组织中表达 X蛋白 ,部分转基因小鼠出现的皮肤组织、肝组织和肺组织病理性损伤可能与 X蛋白有关 ;各代转基因小鼠肝细胞中 X蛋白的分布具有规律性的变化 ,可用于研究

关键词：乙型肝炎病毒 x基因转基因小鼠病理学免疫组织化学

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内质网应激

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生理科学进展 2003年第4期34卷 333-335页

作者：林丽唐朝枢袁文俊第二军医大学基础医学部生理学教研室上海200433 北京大学医学部生理学与病理生理学系北京100083

内质网应激表现为内质网腔内错误折叠与未折叠蛋白聚集以及Ca2 +平衡紊乱 ,可激活未折叠蛋白反应、内质网超负荷反应和caspase 12介导的凋亡通路等信号途径 ,既能诱导糖调节蛋白(glucose regulatedprotein 78kD ,GRP78)、GRP94等内质网... 详细信息

内质网应激表现为内质网腔内错误折叠与未折叠蛋白聚集以及Ca2 +平衡紊乱 ,可激活未折叠蛋白反应、内质网超负荷反应和caspase 12介导的凋亡通路等信号途径 ,既能诱导糖调节蛋白(glucose regulatedprotein 78kD ,GRP78)、GRP94等内质网分子伴侣表达而产生保护效应 ,亦能独立地诱导细胞凋亡。内质网应激直接影响应激细胞的转归 ,如适应、损伤或凋亡。

关键词：内质网应激未折叠蛋白反应信号途径细胞凋亡

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Ir-MEK/ir-LEK在N-硝基-L-精氨酸抑制吗啡耐受形成中的作用

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中国药理学通报 2003年第1期19卷 119-120页

作者：万兴旺黄矛何雅琴万丽李万亥由振东路长林第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作生物信号转导研究中心上海200438 第二军医大学基础医学部新药评价中心上海200433 第二军医大学长海医院药学部上海200433 第二军医大学药学院药理学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

长期应用阿片类镇痛药将导致药物耐受。由于患者对阿片类药物耐受进而造成臧瘾所带来的公共卫生和社会问题日益突出~[1]。N-硝基-L-精氨酸（NO_[2]Arg）是一种经典的一氧化氮合成酶抑制剂~[2]。有研究表明NO_[2]Arg可抑制吗啡镇痛耐受... 详细信息

长期应用阿片类镇痛药将导致药物耐受。由于患者对阿片类药物耐受进而造成臧瘾所带来的公共卫生和社会问题日益突出~[1]。N-硝基-L-精氨酸（NO_[2]Arg）是一种经典的一氧化氮合成酶抑制剂~[2]。有研究表明NO_[2]Arg可抑制吗啡镇痛耐受的形成~[3]，然而关于其作用机制目前还未见文献报道。本文采用剂量递增法模拟临床阿片类药物耐受形成，利用放射免疫法测定大鼠积压脑分区、脊髓和血浆中甲硫脑啡肽（ir-MEK）、亮脑啡肽（ir-LEK）含量，以探讨内源性脑啡肽系统在NO_[2]Arg抑制吗啡镇痛耐受形成中的作用。

关键词： Ir-MEK/ir-LEK N-硝基-L-精氨酸吗啡耐受吗啡一氧化氮脑啡肽

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蛇床子素对新生大鼠颅盖骨成骨细胞功能的调节作用

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中国药理学通报 2003年第4期19卷 384-387页

作者：张巧艳秦路平田野苹郑汉臣黄宝康王寅刘祖德第二军医大学药学院生药学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部免疫学教研室上海200433 中国人民解放军455医院上海200052 第二军医大学长征医院骨科上海200003

目的　研究蛇床子素对成骨细胞功能的影响。方法　原代培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞 ,3H 胸腺嘧啶掺入法测定成骨细胞的增殖 ;Griess试剂法测定培养上清中NO的含量 ;小鼠胸腺细胞增殖法测定IL 1的含量 ;B9细胞增殖法测定IL 6的含量 ;RT ... 详细信息

目的　研究蛇床子素对成骨细胞功能的影响。方法　原代培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞 ,3H 胸腺嘧啶掺入法测定成骨细胞的增殖 ;Griess试剂法测定培养上清中NO的含量 ;小鼠胸腺细胞增殖法测定IL 1的含量 ;B9细胞增殖法测定IL 6的含量 ;RT PCR法检测IL 6的mRNA的表达。结果　蛇床子素抑制成骨细胞自发地或在炎性细胞因子及LPS刺激下产生NO、IL 1及IL 6和IL 6mRNA表达。结论　蛇床子素通过减少NO、IL 1和IL

关键词：蛇床子素骨质疏松成骨细胞一氧化氮细胞因子

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α黑素细胞刺激素对大鼠胶原性关节炎软骨破坏的抑制作用

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第二军医大学学报 2003年第7期24卷 791-794页

作者：许倬韩星海管剑龙闾坚强蔡青田野苹施冶青第二军医大学长海医院风湿免疫科上海200433 基础医学部免疫学教研室

目的 :研究 α黑素细胞刺激素 (α- melanocyte- stim ulating horm one,α- MSH)对大鼠胶原性关节炎 (collagen- inducedarthritis,CIA)软骨破坏的保护作用及其机制。方法 :建立大鼠 CIA动物模型 ,随机分为 3组 :正常对照组 ,CIA组和 ... 详细信息

目的 :研究 α黑素细胞刺激素 (α- melanocyte- stim ulating horm one,α- MSH)对大鼠胶原性关节炎 (collagen- inducedarthritis,CIA)软骨破坏的保护作用及其机制。方法 :建立大鼠 CIA动物模型 ,随机分为 3组 :正常对照组 ,CIA组和 α- MSH注射组 ,每组 8只。于致敏建模当天起连续腹腔注射 α- MSH或 PBS,比较各组大鼠组织病理学及 X线放射学表现。收集 CIA组牛型胶原 (b C )诱导的大鼠淋巴细胞和 L PS诱导的大鼠腹腔巨噬细胞 ,加入不同浓度的 α- MSH(10 - 1 2～ 10 - 6 mol/ L)后 ,分别培养 4 8h和 2 4 h收集上清 ,应用 EL ISA法测定 IL- 1β和 IL- 10含量 ,MTT法测定 TNF- α浓度 ,硝酸还原酶法测定一氧化氮 (NO)水平。结果 :α- MSH可改善关节炎大鼠病灶的病理及 X线表现 ,抑制关节软骨破坏。给予α- MSH后 ,CIA大鼠腹腔巨噬细胞和淋巴细胞上清中 IL - 1β、TNF-α及 NO水平明显下降 ,IL - 10含量则明显升高。结论 :α- MSH对关节炎大鼠软骨破坏具有抑制作用 ,其机制可能与调节细胞因子及

关键词：胶原性关节炎软骨破坏 α黑素细胞刺激素大鼠抑制作用关节软骨一氧化氮

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吗啡依赖及戒断对大鼠强啡肽原mRNA表达的影响

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中华精神科杂志 2003年第2期36卷 94-97页

作者：万兴旺黄矛何雅琴李万亥由振东路长林第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作信号转导研究中心上海200438 第二军医大学基础医学部新药评价中心上海200438 第二军医大学药学院药理学教研室上海200438 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200438

目的　研究吗啡依赖形成及戒断对大鼠强啡肽原mRNA表达的影响。方法　将 18只Sprague Dawley雄性大鼠随机分为吗啡依赖组、吗啡戒断组和空白对照组 ,每组 6只。采用皮下注射吗啡建立大鼠吗啡依赖模型 ,初剂量为 10mg/kg ,以后每天增加 5... 详细信息

目的　研究吗啡依赖形成及戒断对大鼠强啡肽原mRNA表达的影响。方法　将 18只Sprague Dawley雄性大鼠随机分为吗啡依赖组、吗啡戒断组和空白对照组 ,每组 6只。采用皮下注射吗啡建立大鼠吗啡依赖模型 ,初剂量为 10mg/kg ,以后每天增加 5mg/kg ,3次 /d ,连续 6天。应用放射性3 2 磷标记的三磷酸脱氧胞苷掺入标记探针法进行Northern印迹杂交技术检测三组大鼠强啡肽原mRNA的表达水平。结果　 (1)连续 6天给予吗啡 ,吗啡依赖组大鼠下丘脑 (2 3 88± 1 6 2 )、纹状体(19 87± 2 0 3)及脊髓 (13 36± 1 4 6 )的强啡肽原mRNA相对含量分别低于对照组 (分别为 34 36±1 4 6、31 2 4± 2 83和 2 7 6 0± 2 89;均P <0 0 1) ,海马 (2 9 6 7± 3 2 3)强啡肽原mRNA相对含量高于对照组 (2 5 87± 1 74 ,P <0 0 5 ) ;(2 )给予纳洛酮处理 6 0min后 ,下丘脑 (10 2 2± 1 2 2 )、纹状体(5 90± 0 84 )、脊髓 (2 99± 0 4 8)强啡肽原mRNA的相对含量低于吗啡依赖组 (均P <0 0 1) ,而垂体强啡肽原mRNA(2 6 72± 1 79)却高于吗啡依赖组 (11 6 0± 2 2 4 ,P <0 0 1)。结论　慢性给予吗啡可影响大鼠强啡肽原mRNA的表达 ,从而参与吗啡依赖形成和戒断反应。

关键词：吗啡依赖戒断大鼠强啡肽 mRNA 表达影响

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单克隆抗体诱发乙肝转基因小鼠肝组织损伤

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第二军医大学学报 2003年第2期24卷 164-167页

作者：胡卫江余宏宇姚玉成李建秀孙伟郝光荣胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 长征医院病理科第二军医大学实验动物中心

目的 :诱导整合有乙型肝炎病毒 (HBV)全基因组、无病理学反应的转基因小鼠产生病理学改变 ,建立研究急性肝炎发生机制及治疗药物筛选的转基因动物模型。方法 :采用尾静脉注射方法将 3种 HBV单克隆抗体 HBs Ab、HBe Ab、HBc Ab分别或混... 详细信息

目的 :诱导整合有乙型肝炎病毒 (HBV)全基因组、无病理学反应的转基因小鼠产生病理学改变 ,建立研究急性肝炎发生机制及治疗药物筛选的转基因动物模型。方法 :采用尾静脉注射方法将 3种 HBV单克隆抗体 HBs Ab、HBe Ab、HBc Ab分别或混合导入整合有 HBV全基因组的转基因小鼠体内 ,使之与体内的抗原结合产生免疫学反应 ,随后进行血清学及常规病理学的研究。结果 :3种单克隆抗体单独或混合处理均引起 HBV转基因小鼠肝细胞的病理学损伤 ,以 HBs Ab及 HBs Ab+HBc Ab混合处理组损伤较为严重 ;但小鼠血清转氨酶基本表现正常。结论 :体液免疫反应可以诱导 HBV转基因小鼠组织细胞发生损伤 ,并产生与急性肝炎相似症状的病理学改变 ,HBs Ab及 HBs Ab+HBc Ab处理的

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠动物模型单克隆抗体

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内源性阿片肽在正常妊娠和分娩中的变化

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第二军医大学学报 2003年第3期24卷 311-313页

作者：胡电古航洪新如刘彦金志军王成海曹立萍第二军医大学长征医院妇产科上海200003 长海医院妇产科第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的 :观察内源性阿片肽在正常妊娠及分娩各阶段含量的变化规律。方法 :采用神经肽放射免疫测定方法 ,测定5 0例正常未孕妇女 (对照组 )、4 5例正常妊娠妇女 (早孕、中孕及晚孕 3个时间段 )、4 5例正常平产妇女 (潜伏期、活跃期及分娩... 详细信息

目的 :观察内源性阿片肽在正常妊娠及分娩各阶段含量的变化规律。方法 :采用神经肽放射免疫测定方法 ,测定5 0例正常未孕妇女 (对照组 )、4 5例正常妊娠妇女 (早孕、中孕及晚孕 3个时间段 )、4 5例正常平产妇女 (潜伏期、活跃期及分娩即刻 3个时间段 )和 4 5例产后妇女 (2h、2 4h 2个时间点 )血浆中 3种内源性阿片肽 (β 内啡肽、强啡肽A1 13 及亮啡肽 )含量的变化。结果 :妊娠、分娩不同阶段 ,血浆中 3种内源性阿片肽含量均有不同程度的变化 ;β 内啡肽含量在妊娠期略有上升 ,分娩期开始显著增高 ,至分娩即刻升到最高 ,升高程度是 3种肽中最高的且产后 2 4h降至正常 ;强啡肽A1 13 含量从晚期妊娠开始显著升高 ,并上升至分娩即刻 ,分娩后渐下降 ,整个变化趋势平稳 ;亮啡肽含量在早孕时显著升高 ,而中、晚期降至正常 ,直至分娩即刻时再次显著升高 ,产后 2 4h继续上升至最高。结论 :内源性阿片肽在正常妊娠及分娩各时期有着重要的调节功能。

关键词： β-内啡肽强啡肽A1-13 亮啡肽内源性阿片肽妊娠分娩

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镉诱导大鼠睾丸三种类型细胞和肝脏金属硫蛋白基因表达的研究

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第二军医大学学报 2003年第2期24卷 184-187页

作者：张建鹏仲燕任绪义周雍冯伟华焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的 :啮齿类动物睾丸较肝脏对镉毒性更敏感。通过对镉诱导早期大鼠睾丸三种类型细胞 (支持细胞、间质细胞和生精细胞 )与肝脏金属硫蛋白 (MT)及其亚型 MT1、MT2表达的研究 ,阐明大鼠睾丸对镉毒性较肝脏更敏感的分子机制。方法 :采用半... 详细信息

目的 :啮齿类动物睾丸较肝脏对镉毒性更敏感。通过对镉诱导早期大鼠睾丸三种类型细胞 (支持细胞、间质细胞和生精细胞 )与肝脏金属硫蛋白 (MT)及其亚型 MT1、MT2表达的研究 ,阐明大鼠睾丸对镉毒性较肝脏更敏感的分子机制。方法 :采用半定量 RT- PCR、EL ISA、原子分光光度吸收法 ,观察镉处理后不同时相大鼠睾丸三种类型细胞与肝脏 MT基因表达的变化。结果 :睾丸组织中存在 MT。同时还发现 0 h对照组大鼠镉处理后肝脏 MT m RNA增加并保持较高的基础水平 ,3h达峰值后下降 ;而睾丸支持细胞和间质细胞则在 6 h达高峰。镉中毒大鼠睾丸支持细胞和肝脏 MT1m RNA的变化幅度要低于MT2 m RNA,而在间质细胞中则相反。此外 ,生精细胞 MT1m RNA在镉处理后 0～ 3h减少 ,然后增加 ,而 MT2 m RNA的变化则相反 ,而且它们的诱导变化幅度较其他细胞低。镉暴露后肝脏 MT m RNA和 MT均升高 ,但在睾丸三种类型细胞中 MT的表达并没有增加。结论 :镉诱导后 MT m RNA的表达具有细胞和时间依赖性 ;镉虽然能诱导睾丸 MT m RNA的转录但没有促进其 MT的合成。

关键词：金属硫蛋白镉睾丸支持细胞睾丸间质细胞生精细胞肝脏

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细菌双杂交系统在细胞外蛋白质相互作用中的应用

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第二军医大学学报 2003年第10期24卷 1095-1098页

作者：张弛王梁华罗以勤张兴群高云史薇包晨颖球谊焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:探索应用细菌双杂交系统在细胞外蛋白质之间相互作用的可行性。方法:应用Stratagene BacterioMatch two hy-brid system,以pTRG构建编码TRAIL细胞外可溶性区域序列融合表达质粒;以pBT构建编码DR4、DR5、OPG等的细胞外区域序列融合... 详细信息

目的:探索应用细菌双杂交系统在细胞外蛋白质之间相互作用的可行性。方法:应用Stratagene BacterioMatch two hy-brid system,以pTRG构建编码TRAIL细胞外可溶性区域序列融合表达质粒;以pBT构建编码DR4、DR5、OPG等的细胞外区域序列融合表达质粒。重组质粒分别相应共转化报告菌株XL1-Blue MRF,报道基因产物以抗羧苄青霉素和β-半乳糖苷酶活性作为转录激活的指标。结果:pTRG-TRAIL与pBT-DR4,pTRG-TRAIL与pBT-DR5及对照组分别共转化后在高浓度羧苄青霉素(500μg/ml以上)筛选下宿主菌呈转录激活状态,pTRG-TRAIL与pBT-OPG组共转化后在低浓度羧苄青霉素(250μg/ml以下)筛选下宿主菌呈转录激活状态,用X-Gal-PETG平皿可以进一步验证阳性克隆。对照组pTRG-TRAIL与pBT-LGF2,pBT-DR4、pBT-DR5或pBT-OPG与pTRG-Gal114组共转化后呈阴性。结论:所用的双杂交序列皆为编码这些蛋白质的细胞外区域,而这些蛋白质本身的相互作用已有其他报道验证,所以细菌双杂交系统可以用于细胞外蛋白质的相互作用研究。

关键词：细菌双杂交系统细胞外蛋白质相互作用临床应用可行性 TNF相关凋亡诱导配体质粒构建

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