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Envision法免疫组织化学染色研究重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子的抗肿瘤活性

中华临床医药杂志（北京） 2003年第9期4卷 6-8页

作者：肖扬焦炳华朱玉平彭艳王梁华娄永华解放军第118医院肝病科325000 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室200433

目的：研究重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子(vascular endothelial growth inhibitor，VEGI)的抗肿瘤活性及其机制。方法：用重组人可溶性VEGI治疗荷S180肉瘤小鼠；第VIII因子相关抗原(FVIII RAg)标记肿瘤血管内皮细胞，用免疫组... 详细信息

目的：研究重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子(vascular endothelial growth inhibitor，VEGI)的抗肿瘤活性及其机制。方法：用重组人可溶性VEGI治疗荷S180肉瘤小鼠；第VIII因子相关抗原(FVIII RAg)标记肿瘤血管内皮细胞，用免疫组化Envision法检测瘤内微血管密度。结果：重组人可溶性VEGI显著抑制S180肉瘤生长，肿瘤微血管密度大大减低。结论：VEGI具有较强的抗肿瘤活性，其机制可能是通过抗新生血管形成介导的。

关键词： Envision法免疫组织化学染色研究重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子抗肿瘤活性

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N-硝基-L-精氨酸抑制大鼠吗啡身体依赖的强啡肽机制

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解放军药学学报 2003年第5期19卷 327-330页

作者：黄矛万兴旺何雅琴李万亥由振东路长林中国人民解放军第二军医大学基础医学部新药评价中心上海200433 中国人民解放军第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作生物信号转导研究中心上海200433 中国人民解放军第二军医大学药学院药理教研室上海200433 中国人民解放军第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

目的　研究N 硝基 L 精氨酸 (NO2 Arg)在抑制吗啡身体依赖形成中的作用及探讨强啡肽在该过程中的可能作用。方法　采用剂量递增皮下注射吗啡法建立大鼠吗啡身体依赖模型 ;身体依赖程度采用皮下注射 5mg·kg-1 纳洛酮激发戒断症状... 详细信息

目的　研究N 硝基 L 精氨酸 (NO2 Arg)在抑制吗啡身体依赖形成中的作用及探讨强啡肽在该过程中的可能作用。方法　采用剂量递增皮下注射吗啡法建立大鼠吗啡身体依赖模型 ;身体依赖程度采用皮下注射 5mg·kg-1 纳洛酮激发戒断症状并对大鼠 6 0min内可数和不可数的戒断症状评分的方法进行 ;采用放射免疫法分别测定大鼠脑各分区、垂体、脊髓和血浆内免疫活性强啡肽A(ir-Dyn)的含量。结果　NO2 Arg可剂量相关性地抑制吗啡身体依赖的形成 ,其中 5mg·kg-1 NO2 Arg可显著抑制吗啡依赖大鼠大多数戒断症状 ;NO2 Arg处理可显著升高吗啡依赖大鼠脊髓、纹状体、垂体及血浆内ir-Dyn的水平。该作用可被特异性κ -受体阻滞剂norbinaltorphimine (nor-BNI)所拮抗。结论　NO2 Arg剂量相关性地抑制吗啡身体依赖的形成。

关键词：吗啡依赖身体依赖 N-硝基-L-精氨酸强啡肽一氧化氮

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改革数学理论课教学的探讨

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数理医药学杂志 2003年第1期16卷 95-95页

作者：祝国强第二军医大学基础医学部数理教研室上海200433

本文对课程中教员的备课及课堂教学作了认真的探讨,对学员的学习方法作了客观的分析,对数学教学改革提出了积极的建议.

本文对<数理统计>课程中教员的备课及课堂教学作了认真的探讨,对学员的学习方法作了客观的分析,对数学教学改革提出了积极的建议.

关键词：数学理论课教学改革

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一种新的钙依赖性磷脂结合蛋白——Annexin32对血凝及血栓形成的影响

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中国科学（C辑） 2002年第2期32卷 172-176页

作者：张毅陈蕊雯孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室

通过探讨一种新的钙依赖性磷脂结合蛋白Annexin32对家兔凝血时间和兔、大鼠血栓形成的影响,对其主要药效学进行了研究,并与普通肝素进行了比较.兔、大鼠静脉给药,检测用药后不同时间家兔白陶土部分凝血活酶时间（KPTT）、体外血栓形成... 详细信息

通过探讨一种新的钙依赖性磷脂结合蛋白Annexin32对家兔凝血时间和兔、大鼠血栓形成的影响,对其主要药效学进行了研究,并与普通肝素进行了比较.兔、大鼠静脉给药,检测用药后不同时间家兔白陶土部分凝血活酶时间（KPTT）、体外血栓形成和大鼠体内血栓形成的变化.结果显示,按1mg/kg静脉注射Annexin32后,KPTT明显延长（P<0.01）,但小于肝素延长幅度,体外血栓形成仪测定显示血栓长度、重量均明显减少（P<0.01）,大鼠体内血栓重量明显降低（P<0.01）,提示Annexin32具有抗血栓形成的功能,并有对凝血系统影响小的特征.

关键词：钙依赖性磷脂结合蛋白 Annexin32 血凝时间血栓形成药效学生理功能凝血指标溶栓药物

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镉中毒大鼠睾丸与肝脏金属硫蛋白表达的时相研究

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生物化学与生物物理进展 2002年第5期29卷 811-815页

作者：任绪义周雍张建鹏冯伟华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

啮齿目动物睾丸对镉毒性较肝脏更敏感 .为阐明睾丸的镉毒性分子机制 ,比较了肝脏与睾丸金属硫蛋白(MT)表达的时相变化 .mRNA采用RT PCR技术分析并用光密度扫描定量 ;蛋白质定量用ELISA方法 .结果显示 ,睾丸中存在MT ,镉中毒后MT1与MT2m... 详细信息

啮齿目动物睾丸对镉毒性较肝脏更敏感 .为阐明睾丸的镉毒性分子机制 ,比较了肝脏与睾丸金属硫蛋白(MT)表达的时相变化 .mRNA采用RT PCR技术分析并用光密度扫描定量 ;蛋白质定量用ELISA方法 .结果显示 ,睾丸中存在MT ,镉中毒后MT1与MT2mRNA明显升高 ,但MT没有相应增加 ;肝脏镉中毒后MTmRNA与MT均明显升高 .结果提示 :镉虽然能诱导睾丸MTmRNA的转录 ,但没有促进其MT的合成。

关键词：镉中毒大鼠睾丸肝脏金属硫蛋白表达时相研究

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乙肝表面抗原核酸疫苗的构建及其与宿主染色体整合的可能性分析

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第二军医大学学报 2002年第8期23卷 816-818页

作者：周凤娟胡振林戴建新孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :构建乙肝表面抗原 DNA疫苗 ,并探讨其在实验动物体内整合到宿主细胞基因组上的可能性。方法 :采用PCR法扩增乙肝病毒的 S基因片段后装入 p VAX载体 ,并以此为候选疫苗免疫 (BAL B/c)小鼠 ,在不同时间、不同部位取其组织抽提基因... 详细信息

目的 :构建乙肝表面抗原 DNA疫苗 ,并探讨其在实验动物体内整合到宿主细胞基因组上的可能性。方法 :采用PCR法扩增乙肝病毒的 S基因片段后装入 p VAX载体 ,并以此为候选疫苗免疫 (BAL B/c)小鼠 ,在不同时间、不同部位取其组织抽提基因组 DNA,用 PCR检测 DNA整合情况。结果 :构建了乙肝核酸疫苗 p VAX- HBs Ag。免疫接种该疫苗第 3周时在小鼠肌肉、肝脏、脾脏、胸腺均有不同量的游离质粒存在 ;第 6周除在股四头肌可检测到外 ,其余组织中均为阴性 ;第 12、18周时检测所有组织中均为阴性。结论 :构建的 p VAX- HBs Ag DNA疫苗在小鼠体内无染色体整合。

关键词：乙型肝炎表面抗原核酸疫苗 DNA疫苗宿主染色体整合

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影响核酸疫苗应用研究的若干问题

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第二军医大学学报 2002年第4期23卷 353-354页

作者：孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

核酸疫苗又称基因疫苗或DNA疫苗,这种核酸既是载体又能在真核细胞中表达抗原,刺激机体产生特异而有效的免疫应答,尤其是能诱导产生具细胞毒杀伤性功能的T淋巴细胞,可有效预防病毒、细胞内寄生细菌和寄生虫所引起的传染病.核酸疫苗由于... 详细信息

核酸疫苗又称基因疫苗或DNA疫苗,这种核酸既是载体又能在真核细胞中表达抗原,刺激机体产生特异而有效的免疫应答,尤其是能诱导产生具细胞毒杀伤性功能的T淋巴细胞,可有效预防病毒、细胞内寄生细菌和寄生虫所引起的传染病.核酸疫苗由于具有可诱发全面的免疫应答、提供同种异株交叉保护作用、能制备抗多种病原体的多价疫苗、兼有预防和治疗的作用等优点,且制备简单、成本较低、容易储存运输,自上世纪90年代初问世以来,已在多种疾病[1～3]的防治研究中显示出巨大的应用潜力.在美国,目前乙肝病毒、HIV 核酸疫苗、流感DNA疫苗、单纯疱疹病毒DNA疫苗已进入Ⅱ期临床研究,疟疾DNA 疫苗已进入Ⅲ期临床研究.在我国,某些兽用疫苗也已进入应用研究阶段.然而核酸疫苗是一个新生事物,围绕着增强核酸疫苗的免疫效果和安全性、改善纯化工艺等国际热点问题,在理论上还没有真正得到解决.这些问题大大限制了核酸疫苗的推广应用.

关键词：核酸疫苗免疫应答安全性应用研究免疫效果

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膜联蛋白32与低分子质量单链尿激酶融合基因的构建及高效表达

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第二军医大学学报 2002年第4期23卷 378-380页

作者：颜宏利孙树汉陈蕊雯杨湘越第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的：构建膜联蛋白32（annexin32，Anx32）和低相对分子质量单链尿激酶（ScuPA32k）的融合基因，并在大肠杆菌系统内作表达。方法：利用重叠区扩增法进行基因拼接，然后在谷胱甘肽S转移酶原核表达系统内表达，Western印迹验证表达产物... 详细信息

目的：构建膜联蛋白32（annexin32，Anx32）和低相对分子质量单链尿激酶（ScuPA32k）的融合基因，并在大肠杆菌系统内作表达。方法：利用重叠区扩增法进行基因拼接，然后在谷胱甘肽S转移酶原核表达系统内表达，Western印迹验证表达产物。结果：重叠区扩增得到 1．8 kb融合基因，该基因在原核表达系统内得到高效表达，表达量占菌体总蛋白的 26％，Western印迹证明表达产物正确。结论：用重叠区扩增法进行基因拼接快速、简便。

关键词：膜联蛋白32 低相对分子质量单链尿激酶基因拼接基因表达重叠区扩增法大肠杆菌

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肿瘤基因治疗研究若干新进展

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第二军医大学学报 2002年第11期23卷 1258-1260页

作者：贺艳王水良孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

肿瘤是严重危害人类健康的重大疾病,在其发病的分子机制逐渐被人们认识以及基因治疗的措施日趋可行的同时, 肿瘤基因治疗吸引了越来越多的注意。本文就肿瘤免疫基因治疗、抑癌基因治疗、诱导凋亡基因治疗及载体靶向性研究等方面的研究... 详细信息

肿瘤是严重危害人类健康的重大疾病,在其发病的分子机制逐渐被人们认识以及基因治疗的措施日趋可行的同时, 肿瘤基因治疗吸引了越来越多的注意。本文就肿瘤免疫基因治疗、抑癌基因治疗、诱导凋亡基因治疗及载体靶向性研究等方面的研究进展作一综述。

关键词：肿瘤基因治疗病毒载体综述文献

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高密度培养大肠杆菌生产重组钩端螺旋体DNA疫苗

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第二军医大学学报 2002年第8期23卷 828-829页

作者：林懿陈祖欢郭瀛军孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :高密度、高质粒拷贝数培养大肠杆菌生产重组 DNA疫苗 pc D- fla B。方法 :应用 FU S- 5 L自控发酵罐 ,采用补料分批培养技术 ,控制补料的补加使溶氧控制在 30 %～ 6 0 % ,p H控制在 7左右 ,培养中后期采用 4 2℃培养以提高质粒... 详细信息

目的 :高密度、高质粒拷贝数培养大肠杆菌生产重组 DNA疫苗 pc D- fla B。方法 :应用 FU S- 5 L自控发酵罐 ,采用补料分批培养技术 ,控制补料的补加使溶氧控制在 30 %～ 6 0 % ,p H控制在 7左右 ,培养中后期采用 4 2℃培养以提高质粒拷贝数。结果 :重组菌 *** DH5α/ pc DNA 3- fla B发酵液光密度 (D6 0 0 )达到 4 5。经纯化后最终质粒 DNA得率为 5 0 m g/ L。质粒没有发生丢失现象。结论 :本实验为钩端螺旋体 DNA疫苗的大规模生产奠定了基础。

关键词：钩端螺旋体 DNA疫苗大肠杆菌

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