检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2002年第9期23卷 992-994页

作者：俞卫锋陆智杰孙卫民王振猛第二军医大学东方肝胆外科医院麻醉科上海200438 第二军医大学基础医学部免疫学教研室上海200438

目的 :探讨氟烷性肝炎免疫应答中抗体依赖细胞介导的细胞毒作用 (ADCC)对肝细胞的毒性作用。方法 :雄性Hartley豚鼠在 40 %O2 下吸入 1%氟烷 4h,诱导 1次 ,或按分组需要间隔 42 d后同上再吸入 1次 ,再隔 42 d后同上再吸入 1次 ,诱导 3... 详细信息

目的 :探讨氟烷性肝炎免疫应答中抗体依赖细胞介导的细胞毒作用 (ADCC)对肝细胞的毒性作用。方法 :雄性Hartley豚鼠在 40 %O2 下吸入 1%氟烷 4h,诱导 1次 ,或按分组需要间隔 42 d后同上再吸入 1次 ,再隔 42 d后同上再吸入 1次 ,诱导 3次。对照组只吸入 40 %O2 。分离淋巴细胞和肝 Kupffer细胞 ,两种细胞按一定的分类和比例混合培养 ,再加入含有特异性抗体和细胞因子的上清液 ,对照分析机体吸入氟烷后诱导免疫应答过程中 ,ADCC对肝细胞的毒性作用。结果 :氟烷诱导 3次豚鼠肝细胞毒性作用包括特异性抗体介导的 ADCC作用 ,氟烷诱导 1次豚鼠 ADCC作用仍需氟烷对离体肝细胞的再次诱导。 Kupffer细胞诱导淋巴细胞增殖生成的特异性抗体和分泌的细胞因子对肝细胞无毒性作用。结论 :体液免疫主要是ADCC,单纯的特异性抗体和细胞因子不能杀伤肝细胞。免疫应答反应的强弱与吸入氟烷有关。

关键词：肝炎氟烷吸入麻醉药肝毒性免疫细胞毒性

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白细胞介素6与早产诊断

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第二军医大学学报 2002年第7期23卷 796-797页

作者：朱萍沙金燕孙刚第二军医大学长海医院妇产科上海200433 第二军医大学长海医院基础医学部生理学教研室上海200433

宫内感染是引起早产的重要因素之一。近年的研究发现白细胞介素 6 (IL - 6 )与早产关系密切。羊水中 IL - 6作为一项敏感的生物指标可预测亚临床感染性早产 ,高水平羊水 IL - 6预示保胎失败 ;宫颈分泌物 IL - 6浓度的测定 ,可以非侵袭... 详细信息

宫内感染是引起早产的重要因素之一。近年的研究发现白细胞介素 6 (IL - 6 )与早产关系密切。羊水中 IL - 6作为一项敏感的生物指标可预测亚临床感染性早产 ,高水平羊水 IL - 6预示保胎失败 ;宫颈分泌物 IL - 6浓度的测定 ,可以非侵袭性预测内膜感染性早产 ,从而及时给予治疗。血清 IL - 6浓度升高 ,是预测早产和感染的一个可靠标志 ,并具有非侵入性和可重复性等优点。

关键词：白细胞介素6 早产诊断子宫内膜炎

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HBV adr亚型基因疫苗诱导小鼠产生特异性体液和细胞免疫应答

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第二军医大学学报 2002年第8期23卷 819-821,F004页

作者：余宏宇景洪标孙静何金戴益民刘会敏张佩华胡以平第二军医大学长征医院病理科上海200003 第二军医大学长海医院病理科第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室

目的 :构建乙型肝炎病毒 (HBV ) adr亚型基因疫苗 p CMV- S2 .S(PS) ,观察其诱导小鼠所产生的特异性体液和细胞免疫应答。方法 :将 PS注射于 C5 7BL / 6小鼠胫骨前肌内 ,应用 EL ISA方法检测不同时间小鼠血清中抗 HBs抗体以及采用 51Cr... 详细信息

目的 :构建乙型肝炎病毒 (HBV ) adr亚型基因疫苗 p CMV- S2 .S(PS) ,观察其诱导小鼠所产生的特异性体液和细胞免疫应答。方法 :将 PS注射于 C5 7BL / 6小鼠胫骨前肌内 ,应用 EL ISA方法检测不同时间小鼠血清中抗 HBs抗体以及采用 51Cr释放实验检测淋巴细胞杀伤功能。结果 :注射基因疫苗 1周后 ,血清中抗 HBs抗体转阳 ,4周后抗体达到高峰 ,并以高水平维持至少 8周 ;第 12周时 PS诱导小鼠产生了良好的 HBV特异的细胞免疫应答 (P<0 .0 5 )。结论 :所构建的 HBV adr亚型基因疫苗

关键词：乙型肝炎病毒基因疫苗体液免疫应答细胞免疫应答

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重组人肿瘤坏死因子a衍生物3a研究的综合报告

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第二军医大学学报 2002年第2期23卷 121-124页

作者：焦炳华娄永华王梁华朱玉平周丙荣第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 基础医学部微生物学教研室

目的 :将采用点突变技术获取的重组人肿瘤坏死因子α衍生物 3a(rh- TNFα- D3a)研究开发为临床新药。方法 :与野生型 TNFα比较 ,采用动物体内抑瘤试验测定其 ED50 ;急性毒性试验测定 L D50 ;长期毒性试验测定安全剂量并观察毒性反应发... 详细信息

目的 :将采用点突变技术获取的重组人肿瘤坏死因子α衍生物 3a(rh- TNFα- D3a)研究开发为临床新药。方法 :与野生型 TNFα比较 ,采用动物体内抑瘤试验测定其 ED50 ;急性毒性试验测定 L D50 ;长期毒性试验测定安全剂量并观察毒性反应发生的程度 ; 期临床试验观察人体可耐受的安全剂量 ; - 期临床试验观察其对肿瘤患者的临床疗效。结果 :rh- TNFα-D3a体内抑瘤的 ED50 为其野生型的 2 / 3;L D50 为野生型的 11倍 ;恒河猴长期毒性的安全剂量为日本同类产品 PT0 5 0的 6 4倍 ; 期临床试验表明 ,≤ 2× 10 6 IU/ (m2· d)× 7d为人体可耐受的安全剂量 ,本品与野生型药物比较 ,其毒性反应的发生率及反应程度远远降低 ; - 期临床试验表明 ,胸腔内注射对恶性胸水 ,静脉途径对多种实体瘤包括恶性淋巴瘤、乳腺癌、恶性黑素瘤和肾癌等均有较好的疗效。结论 :研制新一代高效。

关键词：抗肿瘤药临床试验重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a rh-TNFα-D3a

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重组人肿瘤坏死因子a衍生物3a的克隆与表达

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第二军医大学学报 2002年第2期23卷 125-128页

作者：娄永华焦炳华周丙荣王梁华余伟民朱玉平第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 基础医学部微生物学教研室

目的 :寻找具有更强抗肿瘤活性和 (或 )较低毒副作用的 TNFα突变蛋白。方法 :应用巨引物二轮 PCR技术对rh- TNFα的第 80、90和 92位氨基酸编码的密码子进行定点突变 ,经过 DNA序列测定证实 DNA突变准确后 ,将突变基因的c DNA插入 p B... 详细信息

目的 :寻找具有更强抗肿瘤活性和 (或 )较低毒副作用的 TNFα突变蛋白。方法 :应用巨引物二轮 PCR技术对rh- TNFα的第 80、90和 92位氨基酸编码的密码子进行定点突变 ,经过 DNA序列测定证实 DNA突变准确后 ,将突变基因的c DNA插入 p BL载体 ,转化大肠杆菌 DH5α,获得表达 rh- TNFα- D3a的工程菌。结果 :经巨引物二轮 PCR获得表达 TNFα突变蛋白的基因突变 ,经序列测定结果与设计一致 ,重组蛋白表达量占细菌总蛋白 18.0 % ,大部分为可溶性 ,占 rh- TNFα- D3a总量的 6 0 %以上。重组蛋白经纯化 ,纯度 >98%。 rh- TNFα- D3a对 L 92 9细胞表现出较高的细胞毒性 ,比活性大于 5× 10 8IU / mg。与野生型的 rh- TNFα相比 ,rh- TNFα- D3a的毒性降低为野生型的 1/ 10 ,同时其保留了 TNFα的抗肿瘤活性。结论 :rh- TNF-αD3a是一个毒性较低。

关键词：点突变聚合酶链反应重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a 克隆 rh-TNF α-D3a

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CNTF在周围神经损伤及再生中的表达和分布

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第二军医大学学报 2002年第6期23卷 605-607页

作者：郑宏良由振东周水淼李兆基路长林严进黄益灯王成海刘葛音第二军医大学长海医院耳鼻咽喉科上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的 :探讨周围神经损伤及修复后神经干睫状神经营养因子 (CNTF)的表达及分布。方法 :以犬喉返神经损伤及修复再生为实验模型 ,采用原位杂交及免疫组织化学技术 ,结合图像分析技术检测 CNTF m RNA及其蛋白反应产物的灰度及面积。结果 ... 详细信息

目的 :探讨周围神经损伤及修复后神经干睫状神经营养因子 (CNTF)的表达及分布。方法 :以犬喉返神经损伤及修复再生为实验模型 ,采用原位杂交及免疫组织化学技术 ,结合图像分析技术检测 CNTF m RNA及其蛋白反应产物的灰度及面积。结果 :正常神经 CNTF位于神经膜细胞中。神经切断后远段神经干 CNTF表达迅速下降 ,6周后消失。随着神经的再生CNTF表达逐渐增加 ,表达产物分布于包绕再生轴突及髓鞘的神经膜细胞质中 ,CNTF蛋白还出现于再生的轴突中。神经再生完成后 ,表达仍明显低于正常状态。近段神经干也出现类似远段的改变。结论 :再生神经 CNTF的表达呈下调型并与轴突再生有关 ;CNTF的重分布为神经再生提供合适的微环境。

关键词： CNTF 周围神经损伤神经再生神经生长因子睫状神经营养因子喉神经声带麻痹

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胶质细胞源性神经营养因子对大鼠脊髓损伤后前角神经元的保护作用

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中华创伤杂志 2002年第4期18卷 225-228页

作者：鲁凯伍陈哲宇侯铁胜傅强曹莉金大地第一军医大学附属南方医院脊柱骨病科广州510515 第二军医大学基础医学部神经生物教研室第二军医大学附属长海医院骨科

目的　研究胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对大鼠脊髓损伤后前角运动神经元的保护作用。　方法　雄性SD大鼠 4 5只随机分为等渗盐水组、GDNF组、神经生长因子 (NGF)组 ,每组 15只 ,采用改良Nystr¨om法后路压迫大鼠胸段脊髓模型 ... 详细信息

目的　研究胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对大鼠脊髓损伤后前角运动神经元的保护作用。　方法　雄性SD大鼠 4 5只随机分为等渗盐水组、GDNF组、神经生长因子 (NGF)组 ,每组 15只 ,采用改良Nystr¨om法后路压迫大鼠胸段脊髓模型 ,经蛛网膜下腔局部注射GDNF(1μg μl,10 μg d) 1周。伤后 1,2 ,4周应用尼氏染色、酶组织化学染色方法观察前角运动神经元存活数目及胆碱酯酶 (CHE)和酸性磷酸酶 (ACP)的变化。　结果　脊髓损伤后第 1,2周 ,GDNF组前角运动神经元存活数目 [(2 1.4± 3.8,2 0 .7± 3.6 )个前角视野 ]明显多于等渗盐水对照组的 (17.3± 2 .8,16 .5± 3.0 )个前角视野 (P <0 .0 1) ;GDNF组前角运动神经元中CHE灰度值 (6 5 .2± 2 3.8,98.7±31.6 )低于等渗盐水组 (94 .5± 35 .2 ,12 5 .6± 4 1.6 ) (P <0 .0 1) ;ACP灰度值 (74 .2± 2 5 .7,6 8.6±30 .6 )高于等渗盐水组 (5 8.5± 18.2 ,4 9.6± 2 1.6 ) (P <0 .0 1)。　结论　外源性GDNF能保护脊髓不完全性损伤后引起的运动神经元损害。

关键词：胶质细胞源性神经营养因子大鼠脊髓损伤前角神经元保护作用

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重组人内皮细胞抑制素腺病毒载体体外活性作用的研究

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第二军医大学学报 2002年第3期23卷 261-263页

作者：倪之嘉潘卫王元和戚中田傅宏傅志仁王强第二军医大学长征医院普通外科上海200003 第二军医大学长征医院基础医学部微生物学教研室

目的 :研究表达人内皮细胞抑制素 ( endostatin)的腺病毒载体的体外活性作用。方法 :用重组人内皮细胞抑制素腺病毒载体体外转染人结肠癌 SW62 0细胞 ,观察肿瘤细胞生长情况 ,并观察其上清对大鼠肺毛细血管内皮细胞、新生牛主动脉内皮... 详细信息

目的 :研究表达人内皮细胞抑制素 ( endostatin)的腺病毒载体的体外活性作用。方法 :用重组人内皮细胞抑制素腺病毒载体体外转染人结肠癌 SW62 0细胞 ,观察肿瘤细胞生长情况 ,并观察其上清对大鼠肺毛细血管内皮细胞、新生牛主动脉内皮细胞及人脐静脉内皮细胞生长的影响。结果 :MTT法检查证实重组腺病毒对结肠癌细胞生长无抑制 ,锥虫蓝染色证实转染的人结肠癌 SW62 0细胞上清对各种血管内皮细胞的生长均有较强的抑制作用。结论 :重组人内皮细胞抑制素腺病毒载体体外对各种血管内皮细胞生长均有较强的抑制作用。

关键词：重组人内皮细胞抑制素腺病毒科血管内皮体外活性

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乙型肝炎病毒x基因转基因小鼠模型的建立及培育

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第二军医大学学报 2002年第11期23卷 1184-1187页

作者：熊俊訾晓渊姚玉成金艳花李建秀朱海英王新民胡以平余宏宇第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 长征医院病理科

目的:建立可表达乙型肝炎病毒X蛋白的HBx基因(adr亚型)转基因小鼠模型,以研究x基因的功能。方法:采用基因重组技术构建含有CMV启动子和HBx基因(adr亚型)开放阅读框(ORF)的真核表达载体pcDNA3-HBx。该载体经Sal I限制性内切酶线性化后,... 详细信息

目的:建立可表达乙型肝炎病毒X蛋白的HBx基因(adr亚型)转基因小鼠模型,以研究x基因的功能。方法:采用基因重组技术构建含有CMV启动子和HBx基因(adr亚型)开放阅读框(ORF)的真核表达载体pcDNA3-HBx。该载体经Sal I限制性内切酶线性化后,琼脂糖电泳回收目的片段,用原核显微注射法将其注射入雄原核,制备转基因小鼠。复合PCR法在基因组水平筛选HBx基因转基因小鼠founder;免疫组织化学法在蛋白水平检测X蛋白在这些小鼠中的表达情况。结果:成功构建了HBx基因真核表达载体pcDNA3-HBx。经原核显微注射法将目的片段注射入受精卵雄原核后,出生并存活了11只新生鼠,经PCR检测后获得5只founder转基因小鼠,命名为C57-TgN(HBx)SMMU。免疫组织化学检测发现5只PCR阳性小鼠的肝细胞质中均有X蛋白的表达。将这5只转基因小鼠与正常同系异性小鼠交配,进行传代培育,复合PCR法筛选阳性转基因小鼠,目前已传至F4代。结论:本研究成功地产生了稳定遗传HBx基因并表达X蛋白的转基因小鼠C57-TgN(HBx)SMMU,它将有利于体内研究HBx基因在肝细胞癌发生中的作用。

关键词：乙型肝炎病毒 X蛋白转基因小鼠 HBx基因

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重组人可溶性THANK在大肠杆菌中的高效表达

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第二军医大学学报 2002年第2期23卷 143-146页

作者：娄永华焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的 :克隆人 THANK的全长基因及编码可溶性胞外区的基因 ,并在大肠杆菌中表达可溶性 THANK。方法 :采用RT- PCR从 PMA诱导的 HL 6 0细胞中克隆人 THANK全长编码基因 ,继以 PCR扩增出可溶性 THANK编码区基因 (134～2 85位氨基酸 ) ,PC... 详细信息

目的 :克隆人 THANK的全长基因及编码可溶性胞外区的基因 ,并在大肠杆菌中表达可溶性 THANK。方法 :采用RT- PCR从 PMA诱导的 HL 6 0细胞中克隆人 THANK全长编码基因 ,继以 PCR扩增出可溶性 THANK编码区基因 (134～2 85位氨基酸 ) ,PCR产物克隆于 p MD- 18T,经 DNA测序证实后亚克隆到 p ET- 11a中。重组质粒转化 BL 2 1,以 1m mol/ LIPTG进行诱导表达产物 ,SDS- PAGE分析表达产物 ,对重组蛋白经纯化复性后测定生物学活性。结果 :RT- PCR扩增出编码人 THANK全长编码基因及 PCR扩增出 THANK1 34 - 2 85基因的 c DNA ,经序列分析证实与文献报道完全一致。含有THANK1 34 - 2 85编码基因的表达载体 ,转化大肠杆菌后表达出相对分子质量约 180 0 0的重组蛋白。该重组蛋白经纯化后能够诱导 U937细胞凋亡。结论 :成功克隆了人 THANK基因 ,并在大肠杆菌中表达重组可溶性 THANK,该重组蛋白在实验条件下具有诱导 U937细胞凋亡的作用。

关键词： TNF超家族 RT-PCR 基因克隆基因表达肿瘤重组人可溶性THANK 大肠杆菌

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