检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2001年第3期22卷 248-251页

作者：王梁华朱玉平娄永华彭燕冯煜焦炳华第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的 :在甲醇营养型酵母 (Pichia)表达系统中表达重组人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (TRAIL ,凋亡素 - 2配体 )分子。方法 :人可溶性 TRAIL编码基因片段插入 p IC 3.5酵母表达载体 ,氯化锂转化酵母 GS115株 ,甲醇诱导表达 5 ... 详细信息

目的 :在甲醇营养型酵母 (Pichia)表达系统中表达重组人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (TRAIL ,凋亡素 - 2配体 )分子。方法 :人可溶性 TRAIL编码基因片段插入 p IC 3.5酵母表达载体 ,氯化锂转化酵母 GS115株 ,甲醇诱导表达 5 d,SDS- PAGE和 Western- blotting确认表达 ,L 92 9细胞鉴定活性。结果 :发现在酵母细胞中重组表达的 TRAIL在 SDS-PAGE上占总蛋白的 5 0 %以上 ,用抗人 TRAIL多抗可以确认表达了 TRAIL重组分子 ,杀伤肿瘤细胞的比活性较原核表达后复性的 TRAIL有明显提高 ,并能诱导几株肿瘤细胞 DNA片段化 ,说明 TRAIL可能已正确折叠并形成活性必需的高级结构。结论 :在 Pichia系统中正确表达了人可溶性 TRAIL分子。

关键词：重组人可溶性凋亡素-2 Pichia表达系统细胞毒甲醇营养型酵母

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四环素调控白喉毒素基因的重组逆转录病毒载体的构建

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第二军医大学学报 2001年第Z1期22卷 89-90页

作者：李玉光赵立军李强曹广文杨淑英陈秋莉潘卫戚中田刘忠令山东省济宁医学院附属医院呼吸内科济宁272129 第二军医大学长海医院呼吸内科第二军医大学长海医院呼吸内科第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学长海医院呼吸内科

　　将毒素基因导入肿瘤细胞内是肿瘤基因治疗一个较有前景的手段[1].白喉毒素(diphtheria toxin,DT)是由白喉杆菌分泌的一种单链多肽毒素,大多数哺乳类细胞均存在这种毒素的受体,其A片段(DTA)毒力特别强,它能催化不可逆转的ADP核糖酰基... 详细信息

　　将毒素基因导入肿瘤细胞内是肿瘤基因治疗一个较有前景的手段[1].白喉毒素(diphtheria toxin,DT)是由白喉杆菌分泌的一种单链多肽毒素,大多数哺乳类细胞均存在这种毒素的受体,其A片段(DTA)毒力特别强,它能催化不可逆转的ADP核糖酰基化,使肽链延长因子Ⅱ失活,从而抑制宿主细胞蛋白合成[2].Gossen等[3]提出了可调控型高表达系统(Tet系统),这为毒素基因治疗肿瘤开辟了新途径.Tet系统可分为 Tet-On和Tet-Off系统,前者的基因表达是在四环素加入后激活,而后者则是在四环素浓度逐渐降低的情况下激活.我们构建携带四环素系统调控的DTA基因的逆转录病毒载体,为进一步探讨肺癌的基因治疗奠定基础.……

关键词：白喉毒素四环素系统肺癌逆转录病毒载体

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人THANK基因的克隆和表达

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第二军医大学学报 2001年第7期22卷 645-647页

作者：吴东沈锋娄永华朱玉萍焦炳华吴孟超第二军医大学东方肝胆外科医院上海200438 第二军医大学础医学部分子毒理学教研室第二军医大学基础医学部分子毒理学教研室

目的 :克隆人 THANK基因全长及胞外区片段 ,将其胞外区在大肠杆菌中表达。方法 :采用 RT- PCR技术 ,从人白血病细胞系 HL - 6 0细胞总 RNA中扩增人 THANK c DNA ,并定向克隆于 p MD18- T载体 ,经测序证实 ,再亚克隆 THANK的胞外区片段... 详细信息

目的 :克隆人 THANK基因全长及胞外区片段 ,将其胞外区在大肠杆菌中表达。方法 :采用 RT- PCR技术 ,从人白血病细胞系 HL - 6 0细胞总 RNA中扩增人 THANK c DNA ,并定向克隆于 p MD18- T载体 ,经测序证实 ,再亚克隆 THANK的胞外区片段至 p ET表达载体 ,在大肠杆菌中进行表达。结果 :RT- PCR扩增出一个 85 8bp的 DNA片段 ,该片段与公布的人THANK基因序列一致。诱导后 THANK胞外区在大肠杆菌中可表达出相对分子质量为 2 .6万的蛋白质。结论 :成功地克隆了人 THANK基因 ,并在大肠杆菌中获得表达 ,为其功能的研究打下基础。

关键词：基因 THANK 聚合酶链反应克隆分子肿瘤坏死因子 TNF

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重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子的抗肿瘤活性

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第二军医大学学报 2001年第7期22卷 639-641页

作者：肖扬焦炳华朱玉平娄永华王路第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433 基础医学部微生物学教研室

目的 :检测重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子 (VEGI)的抗肿瘤活性。方法 :检测重组人可溶性 VEGI对建株人脐静脉内皮细胞 (ECV 30 4)、新生牛主动脉内皮细胞 (BAEC)增殖抑制的活性以及对荷 S180肉瘤小鼠的疗效。结果 :重组人可溶... 详细信息

目的 :检测重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子 (VEGI)的抗肿瘤活性。方法 :检测重组人可溶性 VEGI对建株人脐静脉内皮细胞 (ECV 30 4)、新生牛主动脉内皮细胞 (BAEC)增殖抑制的活性以及对荷 S180肉瘤小鼠的疗效。结果 :重组人可溶性 VEGI可以直接抑制 ECV30 4、BAEC的增殖 ,强烈抑制 S180肉瘤生长并延长 S180腹水瘤小鼠的寿命。结论 :重组人可溶性 VEGI可通过抑制新生血管形成用于肿瘤治疗。

关键词：血管内皮细胞生长抑制因子内皮新生血管生长抑制物抗肿瘤药 VEGI

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伯氏疟原虫氯喹抗性株红内期虫体的凋亡

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第二军医大学学报 2001年第6期22卷 515-518,R002页

作者：陈克强宋关鸿第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

目的 :研究伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)氯喹抗性 (RC)株红内期虫体细胞危机状态的性质。方法 :应用光学显微镜和透射电镜及基因组 DNA琼脂糖电泳技术 ,观察感染伯氏疟原虫 RC株或氯喹敏感 (N)株 ICR小鼠在原虫血症上升期和感染 RC... 详细信息

目的 :研究伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)氯喹抗性 (RC)株红内期虫体细胞危机状态的性质。方法 :应用光学显微镜和透射电镜及基因组 DNA琼脂糖电泳技术 ,观察感染伯氏疟原虫 RC株或氯喹敏感 (N)株 ICR小鼠在原虫血症上升期和感染 RC株小鼠自愈期虫体的显微及超微结构 ,以及基因组 DNA琼脂糖电泳图谱。结果 :在光镜下 ,原虫血症上升期的 RC株和 N株虫体结构无异常 ;而 RC株感染小鼠自愈期虫体密度下降 ,大部分虫体固缩 ,周围呈空泡状。在电镜下 ,原虫血症上升期的 RC株和 N株红内期虫体胞膜结构完整 ,核位于一侧 ,胞质内可见各种细胞器 ,代谢窗明显。 N株滋养体可见食物泡和疟色素。但 RC株感染小鼠自愈期红内期虫体呈球形或椭圆形 ;胞膜完整 ,核固缩 ,胞质浓缩 ,线粒体和膜状结构消失 ,未见代谢窗结构。原虫血症上升期的 RC株和 N株红内期虫体基因组 DNA电泳均为一条带 ,而 RC株感染小鼠自愈期红内期虫体基因组 DNA电泳呈典型的梯形条带。结论 :伯氏疟原虫

关键词：伯氏疟原虫氯喹细胞凋亡抗药性微生物

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伯氏疟原虫氯喹敏感株和抗性株感染 ICR鼠病理变化的比较研究(英文)

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第二军医大学学报 2001年第6期22卷 504-507,T001页

作者：陈克强宋关鸿第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

目的 :研究伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)的抗药性与致病力的关系。方法 :比较伯氏疟原虫氯喹敏感株 (N)和抗性株 (RC)感染 ICR鼠的肝、脾、脑、心、肺、肾等重要脏器病理组织学的动态变化。结果 :N株感染后 ,小鼠肝、脾有较多的疟... 详细信息

目的 :研究伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)的抗药性与致病力的关系。方法 :比较伯氏疟原虫氯喹敏感株 (N)和抗性株 (RC)感染 ICR鼠的肝、脾、脑、心、肺、肾等重要脏器病理组织学的动态变化。结果 :N株感染后 ,小鼠肝、脾有较多的疟色素沉着 ,肺脏呈郁血性水肿 ;脑微血管充血和阻塞 ;各脏器呈急性炎症的病理变化特点。 RC株感染后 ,小鼠肝、脾脏的病理组织学改变与原虫血症的变化有关。肺脏呈间质性肺炎 ,各脏器呈慢性增生性炎症的病理变化特点。结论 :N株致病力较强 ,感染后引起宿主死亡的主要原因是感染疟原虫的红细胞对脑微血管内皮细胞的粘附 ,造成微血管阻塞 ;RC株致病力较弱 ,宿主的应答反应在感染早期可能是 CD4+ Th1相关的迟发型超敏炎症反应 ,而感染后期是 CD4+ Th2辅助作用下的抗体依赖性的免疫应答。

关键词：伯氏疟原虫氯喹药物抗性病理组织学 ICR鼠

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重症脑型疟疾和促炎细胞因子

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第二军医大学学报 2001年第6期22卷 501-503页

作者：宋关鸿第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

在全世界感染性疾病中，疟疾发病率仅次于急性肺炎球菌呼吸道感染（3.5%）和结核病（2.8%），居第三位(2.3%)。全世界99个国家和地区的21.7亿人（占世界人口的40%以上）生活在不同程度的疟疾威胁之中。估计全世界每年有3 ～5亿疟疾临床... 详细信息

在全世界感染性疾病中，疟疾发病率仅次于急性肺炎球菌呼吸道感染（3.5%）和结核病（2.8%），居第三位(2.3%)。全世界99个国家和地区的21.7亿人（占世界人口的40%以上）生活在不同程度的疟疾威胁之中。估计全世界每年有3 ～5亿疟疾临床患者，每年有约150～270万患者死于疟疾。非洲每年约有100万人因疟疾死亡，其中大多数是婴儿和5岁以下儿童。在感染人的恶性疟原虫(Plasmodium falciparum) 、间日疟原虫（P. vivax）、三日疟原虫(P. malariae)和卵形疟原虫（P. ovale）中，恶性疟原虫对人的生命威胁最大。恶性疟原虫感染可迅速地引起多个重要脏器功能障碍，发生重症恶性疟疾。重症恶性疟疾患者的预后很差，即使用有效的抗疟药物和合理的临床治疗，病死率仍可达15%～2 0%。疟疾死亡患者几乎都是恶性疟原虫引起的重症恶性疟疾。重症恶性疟疾的临床表现很复杂，常见的有全身衰竭、意识障碍、呼吸窘迫、多发性惊厥、循环性虚脱、肺水肿、异常出血、黄疸、血红蛋白尿、恶性贫血等。在不同疟疾流行区和不同的人群中，重症恶性疟疾的高发人群和临床表现都很不同。脑型疟疾在所有的年龄组都可发生。

关键词：脑型疟疾炎性细胞因子临床表现红细胞滞留

来源：评论

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伯氏疟原虫氯喹抗性株红内期虫体在肝内的清除

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第二军医大学学报 2001年第6期22卷 512-514页

作者：严继舟宋关鸿第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

目的 :探讨伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)氯喹抗性 (RC)株红内期虫体在宿主体内消亡的机制。方法 :电镜观察感染伯氏疟原虫 RC株和药物敏感 (N)株小鼠肝脏内白细胞和疟原虫的相互作用。结果 :感染 N株小鼠的肝脏内未见白细胞增生、浸... 详细信息

目的 :探讨伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)氯喹抗性 (RC)株红内期虫体在宿主体内消亡的机制。方法 :电镜观察感染伯氏疟原虫 RC株和药物敏感 (N)株小鼠肝脏内白细胞和疟原虫的相互作用。结果 :感染 N株小鼠的肝脏内未见白细胞增生、浸润 ,感染 RC株小鼠肝脏的门管区和血窦内可见大量单核 -巨噬细胞和少量淋巴细胞及中性粒细胞增生、浸润 ,并伴有大量感染疟原虫的红细胞滞留。活化的单核 -巨噬细胞和感染疟原虫红细胞的表膜相互粘附 ,大量与吞噬细胞直接接触或未接触的感染疟原虫红细胞内的虫体出现危机状态 (crisis form )。偶见巨噬细胞吞噬游离的裂殖子 ,但未见吞噬整个感染疟原虫红细胞。结论 :宿主可能主要通过活化单核 -巨噬细胞诱导疟原虫发生危机状态 ,清除 RC株红内期疟原虫 ,而并非依赖白细胞直接吞噬。

关键词：伯氏疟原虫氯喹清除单核-巨噬细胞危机状态

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伯氏疟原虫氯喹敏感株和抗性株感染小鼠肝、肾、肺超微结构的比较

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第二军医大学学报 2001年第6期22卷 508-511页

作者：陈克强宋关鸿第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

目的 :研究伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)氯喹抗性 (RC)株与敏感 (N )株致病力和宿主对不同虫株感染反应的差异。方法 :比较伯氏疟原虫 RC株和 N株感染 ICR小鼠后期 ,肝、肾、肺等重要脏器超微结构的病理学改变。结果 :N株感染后... 详细信息

目的 :研究伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)氯喹抗性 (RC)株与敏感 (N )株致病力和宿主对不同虫株感染反应的差异。方法 :比较伯氏疟原虫 RC株和 N株感染 ICR小鼠后期 ,肝、肾、肺等重要脏器超微结构的病理学改变。结果 :N株感染后期 ,肝血窦、肾间质和毛细血管、肺泡毛细血管含有较多的感染疟原虫红细胞 ,肺泡壁毛细血管内皮细胞有较多的突起与疟原虫感染红细胞相接触。较多的肝细胞、肾小球旁细胞、肾小管上皮细胞、肺泡型和型细胞出现膜破溃 ,细胞器和胞质流失等不可逆的坏死性病变 ,一些肝血窦、肾小管和肺泡内可见多量的细胞碎片。 RC株感染后期 ,肝血窦、肾间质充血 ,含有较多的感染疟原虫红细胞。肝细胞、肾小管上皮细胞的病变以线粒体肿胀为主的变性 ,可见肝脏部分变性肝细胞出现恢复状态 ,肾小球毛细血管内皮细胞下、基膜、系膜区可见电子致密物沉着 ,肺泡隔内可见较多的单个核细胞。结论 :N株毒力较强 ,对宿主肝、肾和肺细胞超微结构的损害为不可逆的坏死性病变 ,呈急性变质性炎症过程 ;而 RC株毒力明显减弱 ,对宿主肝、肾和肺细胞超微结构的损害以变性为主。

关键词：伯氏疟原虫氯喹病理学超微结构抗药性微生物小鼠

来源：评论

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IFN-γ基因修饰对G422胶质母细胞瘤细胞致瘤性及荷瘤小鼠免疫功能的影响

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第二军医大学学报 2001年第8期22卷 721-723页

作者：岳志健洪波曹雪涛雷虹周晓平王文仲第二军医大学长海医院神经外科上海200433 第二军医大学基础医学部免疫学教研室

目的 :观察鼠干扰素 -γ( m IFN-γ)基因修饰的小鼠 G4 2 2胶质母细胞瘤细胞的致瘤性及免疫功能变化。方法 :通过重组腺病毒以 m IFN-γ基因转染 G4 2 2胶质母细胞瘤细胞 ,观察肿瘤的生长和荷瘤小鼠的存活期 ,采用 4 h5 1Cr释放法检测... 详细信息

目的 :观察鼠干扰素 -γ( m IFN-γ)基因修饰的小鼠 G4 2 2胶质母细胞瘤细胞的致瘤性及免疫功能变化。方法 :通过重组腺病毒以 m IFN-γ基因转染 G4 2 2胶质母细胞瘤细胞 ,观察肿瘤的生长和荷瘤小鼠的存活期 ,采用 4 h5 1Cr释放法检测荷瘤小鼠脾细胞诱导的 NK、LAK、CTL的杀伤活性 ,对治疗后的肿瘤进行常规病理分析。结果 :m IFN-γ基因修饰的 G4 2 2小鼠胶质母细胞瘤体内致瘤生长明显抑制 ( P<0 .0 1 ) ,其荷瘤小鼠生存时间长于对照组 ( P<0 .0 1 )。m IFN-γ组小鼠脾细胞的 LAK、CTL杀伤活性显著增强 ,肿瘤组织有灶性坏死 ,炎细胞浸润。结论 :m IFN-γ基因对胶质细胞瘤有一定治疗作用 ,其机制可能是增强了宿主的局部和全身抗肿瘤免疫反应。

关键词：神经胶质瘤腺病毒科干扰素Ⅱ型细胞毒性免疫功能基因治疗胶质母细胞瘤小鼠

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