检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2000年第6期21卷 504-507页

作者：王庆敏陈蕊雯郭瀛军孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :研究猪囊尾蚴副肌球蛋白 (Ag B)核酸疫苗诱发的免疫应答。方法 :将 pc DNA3- Ag B核酸疫苗肌注 4～ 6周龄的昆明种小鼠 ,从 2周后开始用 EL ISA方法检测小鼠体内 Ig G和 Ig G2 a的水平。另外将该核酸疫苗注射 C5 7BL / 6小鼠 ,... 详细信息

目的 :研究猪囊尾蚴副肌球蛋白 (Ag B)核酸疫苗诱发的免疫应答。方法 :将 pc DNA3- Ag B核酸疫苗肌注 4～ 6周龄的昆明种小鼠 ,从 2周后开始用 EL ISA方法检测小鼠体内 Ig G和 Ig G2 a的水平。另外将该核酸疫苗注射 C5 7BL / 6小鼠 ,体外培养小鼠脾细胞 ,用刀豆蛋白 A (Con A)和特异性抗原刺激 ,EL ISA试剂盒检测细胞因子 IL - 2和 IL - 4的水平 ,并观察脾淋巴细胞增殖反应。另外 ,将该核酸疫苗肌注瘦型仔猪 ,进行攻击实验 ,计算相对保护率。结果 :注射疫苗后的第 3周起 ,Ig G即为阳性 ,持续升高至第 8周 ;从第 2周起 ,小鼠血清 Ig G2 a为阳性 ,第 4周达到高峰。细胞因子检测表明 ,IL- 2水平远远高于空载体对照组 ,而 IL- 4含量却与空载体对照组无显著差异 ;实验组刺激指数明显高于空载体对照组。副肌球蛋白核酸疫苗对仔猪的相对保护率为 80 %。结论 :猪囊尾蚴副肌球蛋白核酸疫苗在小鼠动物实验中引发了以 Th1型免疫应答占优势的全面免疫应答。pc DNA3- Ag B核酸疫苗对仔猪具有较好的免疫保护性。

关键词：猪囊尾蚴副肌球蛋白核酸类疫苗 Th1免疫应答

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新城疫病毒HN基因真核表达质粒的构建及其抗肿瘤作用的初步研究

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第二军医大学学报 2000年第6期21卷 515-518页

作者：魏林戴建新孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :构建新城疫病毒 (NDV )血凝素神经氨酸酶 (HN)基因真核表达质粒 ,并初步探索其在抗肿瘤治疗中的机制及应用价值。方法 :用 RT- PCR从 NDV中克隆 HN c DNA,并构建 HN的真核表达载体 ,转染 COS- 7细胞表达。注射至小鼠B16黑素瘤模... 详细信息

目的 :构建新城疫病毒 (NDV )血凝素神经氨酸酶 (HN)基因真核表达质粒 ,并初步探索其在抗肿瘤治疗中的机制及应用价值。方法 :用 RT- PCR从 NDV中克隆 HN c DNA,并构建 HN的真核表达载体 ,转染 COS- 7细胞表达。注射至小鼠B16黑素瘤模型 ,检测其抗肿瘤作用。结果 :成功地克隆了 NDV HN c DNA,所构建的 pc DNA3- HN有良好的表达 ,动物实验显示 ,pc DNA3- HN有增强荷瘤小鼠 CTL ,NK杀伤活性的作用。结论 :NDV HN的真核表达质粒具有增强荷瘤小鼠抗肿瘤CTL ,NK细胞反应的作用。

关键词：新城疫病毒抗肿瘤作用 HN基因真核表达质粒

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睫状神经营养因子对应激引起大鼠海马神经元损伤的保护作用及其机制的研究

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生理科学进展 2000年第2期31卷 131-134页

作者：严进第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

本实验用Nissl染色法、Bielschowsky Gros Lawrentjew染色法、常规透射电镜、行为活动测定、双侧海马微量给药、海马神经元原代培养、活细胞连续照相、全细胞膜片钳记录、细胞内游离Ca2 +浓度测定及P5 3蛋白免疫组化测定等方法 ,观察了... 详细信息

本实验用Nissl染色法、Bielschowsky Gros Lawrentjew染色法、常规透射电镜、行为活动测定、双侧海马微量给药、海马神经元原代培养、活细胞连续照相、全细胞膜片钳记录、细胞内游离Ca2 +浓度测定及P5 3蛋白免疫组化测定等方法 ,观察了睫状神经营养因子 (CNTF)对应激引起动物行为变化和海马神经元形态学变化的影响 ,探讨了CNTF的部分作用机制。结果表明 ,急性应激不引起大鼠海马神经元损伤 ,CNTF不能改善急性应激时的焦虑样行为。但CNTF可显著减轻慢性应激引起的大鼠海马神经元损伤 ,并改善慢性应激时的抑郁样行为。CNTF可能通过早期快速抑制谷氨酸 (Glu)膜电流、胞内游离钙 ( [Ca2 +]i)的升高 ,以及后期核内效应 ,发挥其保护神经元的作用。

关键词：应激睫状神经营养因子海马神经元形态学

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一种简便的蛋白质N端氨基酸测定方法

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第二军医大学学报 2000年第3期21卷 253-253,262页

作者：张平武魏林项洪刚孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

蛋白质(或多肽)的两端氨基酸序列测定是分析未知蛋白质的结构和功能的基础.目前蛋白质N端序列分析的技术已较为成熟,可达20～40个氨基酸残基,但由于N端氨基酸序列分析成本高(1 400～4 000元/次),不大可能反复多次检测.有些多肽N端氨基... 详细信息

蛋白质(或多肽)的两端氨基酸序列测定是分析未知蛋白质的结构和功能的基础.目前蛋白质N端序列分析的技术已较为成熟,可达20～40个氨基酸残基,但由于N端氨基酸序列分析成本高(1 400～4 000元/次),不大可能反复多次检测.有些多肽N端氨基酸是封闭的,降解后才能进行氨基酸序列分析.如果事先知道N端氨基酸是否封闭,一方面有利于选择序列分析的方式(N端、C端或降解后测序),另一方面可节省费用,也利于测序结果的分析.一个结构未知的酵母分泌蛋白,其相对分子质量为7.9×104,我们在分析其结构时采用DNS-Cl法对其N端氨基酸进行了测定,知其N端未封闭,然后进行氨基酸序列分析,取得了很好的效果.

关键词：蛋白质 N端氨基酸序列分析 DNS-C1法测定

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乙肝核心抗原DNA疫苗的构建及其免疫原性分析

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第二军医大学学报 2000年第6期21卷 501-503页

作者：陈蕊雯林懿戴建新周凤娟孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :构建 HBV核心抗原 DNA疫苗 ,并探讨其在实验动物体内的表达及其免疫原性。方法 :采用 PCR法从 HBV全基因 DNA中获得核心抗原 DNA片段 ,并将其重组到 pc DNA3载体。以此为候选疫苗分别免疫小鼠和树 ,并检测其抗HBc Ig G。结果 :... 详细信息

目的 :构建 HBV核心抗原 DNA疫苗 ,并探讨其在实验动物体内的表达及其免疫原性。方法 :采用 PCR法从 HBV全基因 DNA中获得核心抗原 DNA片段 ,并将其重组到 pc DNA3载体。以此为候选疫苗分别免疫小鼠和树 ,并检测其抗HBc Ig G。结果 :构建了乙肝核心抗原候选核酸疫苗 pc DNA3- HBc。免疫接种该疫苗后第 2周抗 HBc Ig G水平开始升高 ,小鼠至第 9周 ,树至第 7周升至峰值。结论 :构建的 pc DNA3- HBc

关键词： DNA 乙型肝炎核心抗原乙型肝炎 HBV

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封闭近交群体内等位墓因纯化的数学模型

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第二军医大学学报 2000年第4期21卷 387-390页

作者：徐玲玲方影祝国强第二军医大学基础医学部数理教研室上海200433

目的：试建立线性代数模型，以拟合封闭近交群体内等位基因纯化的过程。方法：通过考察与性染色体Ｘ连锁的等位基因频率的变化规律，获得邻近两代（第ｎ－１代和第ｎ代）自交对基因型概率之间的关系为Ｘ^（ｎ）＝ＭＸ^（ｎ－１）。经矩... 详细信息

目的：试建立线性代数模型，以拟合封闭近交群体内等位基因纯化的过程。方法：通过考察与性染色体Ｘ连锁的等位基因频率的变化规律，获得邻近两代（第ｎ－１代和第ｎ代）自交对基因型概率之间的关系为Ｘ^（ｎ）＝ＭＸ^（ｎ－１）。经矩阵相似变换，求得系数矩阵Ｍ的特征值、特征向量和可逆矩阵Ｐ。结果：第ｎ代自交对各种基因型的概率与起始状态基因型的概率之间的关系为Ｘ^（ｎ）＝Ｐ·Ｄ~ｎ·Ｐ^(－１)·Ｘ^（０），当ｎ→∞时，杂合自交对的基因型概率全为零，而只有纯合自交对的基因型概率非零，即自交对的等位基因都趋于纯化，只留下（Ａ，ＡＡ）和（ａ，ａａ）型。结论：线性代数模型定量地模拟了封闭近交群体内等位基因逐步纯化的过程，同时能客观分析不同自交代之间的生物数学特征及内在联系，根据模型还能由初始条件预报纯化基因型的频率。

关键词：数学模型封闭近交群体等位基因纯化

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白血病抑制因子受体中gp130细胞内区诱导白血病细胞Meg-01内c-myc的表达

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第二军医大学学报 2000年第6期21卷 522-525页

作者：刘厚奇汤淑萍刘善荣胡世杰傅继梁第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 第二军医大学医学遗传学教研室

目的 :观察人白血病细胞系 Meg- 0 1白血病抑制因子 (L IF)受体α亚基 (gp190 )和另一亚基 gp130细胞内区与 c- m yc的关系 ,以探明白血病细胞过度增殖和晚期分化异常的机制。方法 :用基因重组技术将两基因细胞内区互换以构成两嵌合体... 详细信息

目的 :观察人白血病细胞系 Meg- 0 1白血病抑制因子 (L IF)受体α亚基 (gp190 )和另一亚基 gp130细胞内区与 c- m yc的关系 ,以探明白血病细胞过度增殖和晚期分化异常的机制。方法 :用基因重组技术将两基因细胞内区互换以构成两嵌合体受体 (190 /130 ,130 /190 ) ,并分别在 Meg- 0 1表达 ,其与野生型受体竞争性结合 L IF,用免疫组化和蛋白质印迹法分析受体细胞内区形成同源性二聚体 (190 cyt- 190 cyt,130 cyt- 130 cyt)后的细胞状况和细胞内 c- m yc的表达。结果 :转染 p ED 190 /130后用 L IF作用 6 h,Meg- 0 1细胞 c- myc表达量增加 ,细胞增殖明显 ;而另一嵌合体受体对 Meg- 0 1细胞 c- myc的表达无影响。结论 :L IF受体中 gp130亚基的细胞内区参与白血病 Meg- 0 1细胞内增殖信号的传递。

关键词：白血病抑制因子免疫受体信号传导

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新型血管内皮细胞抑制因子VEGI151的基因克隆表达及其活性

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2000年第5期32卷 485-489页

作者：王路潘卫朱分禄焦炳华娄永华肖扬戚中田卫生毒理学教研室!上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室!上海200433

血管内皮细胞生长抑制因子 (vascularendothelialcellgrowthinhibitor,VEGI)是近年发现的一类肿瘤坏死因子超家族成员 ,具有抑制内皮细胞增殖的作用。从人脐静脉内皮细胞株 (ECV30 4)克隆到其基因 ,构建N端缺失 2 3个氨基酸的表达载体 ... 详细信息

血管内皮细胞生长抑制因子 (vascularendothelialcellgrowthinhibitor,VEGI)是近年发现的一类肿瘤坏死因子超家族成员 ,具有抑制内皮细胞增殖的作用。从人脐静脉内皮细胞株 (ECV30 4)克隆到其基因 ,构建N端缺失 2 3个氨基酸的表达载体 ,并通过原核表达系统进行表达 (命名为VEGI151) ,表达量为 2 5 .5 % ,纯化后纯度达92 .5 %。通过生物学效应检测 ,发现VEGI151可明显抑制无血清培养基中内皮细胞的增殖 ,2 4h时VEGI151对内皮细胞的IC50 为 10mg/L ,0 .6 13mg/L时使内皮细胞在 36h内完全凋亡。通过检测体外培养肿瘤细胞 (A5 49、HepG2、Hela等 )的存活率 ,未发现明显的增殖或抑制效应。提示VEGI是一种主要作用于血管内皮细胞 ,在新生血管性疾病及肿瘤的治疗中有潜在的应用前景。

关键词：血管内皮细胞生长抑制因子(VEGI) 基因克隆表达内皮细胞生物学活性

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基因组文库及基因小库构建在基因克隆中的应用

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第二军医大学学报 2000年第3期21卷 299-300页

作者：张平武邹蓓艳王慧丽孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433 复旦大学遗传所

在基因克隆的方法选择中,构建基因组文库并筛选是克隆完整基因的经典方法, 但构建基因组文库技术复杂,步骤繁琐.若构建的文库不够大,常筛选不到所需的目的基因.因此我们尝试用另一种方法,即在试探性的Southern blot基础上构建基因小库,... 详细信息

在基因克隆的方法选择中,构建基因组文库并筛选是克隆完整基因的经典方法, 但构建基因组文库技术复杂,步骤繁琐.若构建的文库不够大,常筛选不到所需的目的基因.因此我们尝试用另一种方法,即在试探性的Southern blot基础上构建基因小库,从中筛选目的基因,可以大大减少筛库的工作量并提高筛到目的基因的成功率.现以克隆酵母Candida kefyr 的菊粉酶全基因为例将这两种方法加以比较.

关键词：基因组文库基因小库基因克隆

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K_(ATP)在腺苷降低去窦弓神经大鼠血压波动性中的作用

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第二军医大学学报 2000年第10期21卷 938-940页

作者：沈甫明苏定冯第二军医大学基础医学部药理学教研室上海200433

目的 :利用计算机化清醒自由活动大鼠血流动力学监测技术 ,分析 ATP敏感钾通道 ( KATP)在腺苷降低去窦弓神经( SAD)大鼠血压波动性 ( BPV)中的作用。方法 :观察腺苷、腺苷 A1 受体选择性激动剂 N6 -环戊基腺苷 ( CPA )、A2 受体选择性... 详细信息

目的 :利用计算机化清醒自由活动大鼠血流动力学监测技术 ,分析 ATP敏感钾通道 ( KATP)在腺苷降低去窦弓神经( SAD)大鼠血压波动性 ( BPV)中的作用。方法 :观察腺苷、腺苷 A1 受体选择性激动剂 N6 -环戊基腺苷 ( CPA )、A2 受体选择性激动剂 5′- N-环丙基 -酰氨羰基腺苷 ( CPCA)、 KATP选择性拮抗剂格列本脲、以及格列本脲阻断 KATP后 CPCA对 SAD大鼠BPV的影响。结果 :腺苷和 CPCA能显著降低 SAD大鼠的 BPV,CPA对此并无影响 ;格列本脲可降低 SAD大鼠的 BPV,并可阻断 CPCA降 SAD大鼠 BPV的作用。结论 :KATP状态对于 SAD大鼠高

关键词：去窦弓神经血压波动性 KATP敏感钾通道腺苷

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