检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2004年第1期25卷 61-62页

作者：曲莉张晓莉潘卫庆第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

以恶性疟原虫融合抗原 Pf CP- 2 .9免疫兔血清为待测血清 ,将起始原虫率从 1 %降至 0 .2 %～ 0 .5 % ,采用 2种方法作对比 ,即一组每 2 4 h更换培养液、加入免疫血清 ,另一组 72 h内不更换培养液也不加免疫血清试验方法。培养至 72 h,涂... 详细信息

以恶性疟原虫融合抗原 Pf CP- 2 .9免疫兔血清为待测血清 ,将起始原虫率从 1 %降至 0 .2 %～ 0 .5 % ,采用 2种方法作对比 ,即一组每 2 4 h更换培养液、加入免疫血清 ,另一组 72 h内不更换培养液也不加免疫血清试验方法。培养至 72 h,涂片 ,油镜下计数 ,计算原虫感染率和抑制率。结果 2组的抑制率相近 ,经统计分析无显著差异。测定不同剂量抗原免疫血清的抑制率 ,结果显示抑制率与免疫血清中特异抗体滴度呈正相关 ,2种方法的结果无显著差异。研究表明通过降低起始原虫率可将常规体外抑制实验由需每天换液改为 72

关键词：恶性疟原虫体外抑制实验融合抗原 PfCP-2.9 免疫血清

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游离细胞内抗原的免疫电镜胶金标记方法

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第二军医大学学报 2003年第1期24卷 10-10,17页

作者：颜永碧王英陆月良第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

免疫最镜胶金标记技术，经过20 多年的开发、探索，已经得到了广泛的发展与应用，特别是对于一些实质性组织细胞表面的标记，具有较好的标记效果~[1，2]。但是，如何做好游离细胞内的免疫最镜胶金标记，这方面的资料并不多。我们根据大... 详细信息

免疫最镜胶金标记技术，经过20 多年的开发、探索，已经得到了广泛的发展与应用，特别是对于一些实质性组织细胞表面的标记，具有较好的标记效果~[1，2]。但是，如何做好游离细胞内的免疫最镜胶金标记，这方面的资料并不多。我们根据大量的工作积累，将游离细胞内免疫最镜标记方法的应用体会总结如下，以便与同道们相互交流。

关键词：游离细胞内抗原胶体金显微镜检查免疫组织化学

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条件培养液改进小鼠胚胎干细胞嵌合体制备效率的观察

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第二军医大学学报 2005年第3期26卷 294-297页

作者：何志颖王新民李建秀李文林胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:探讨如何通过改善小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES)的培养条件来维持其未分化状态,提高嵌合体的制备效率。方法:以普通ES细胞培养液为对照,以TX WES培养液为ES细胞条件培养液分别对15 代以上的未工程化ES细胞和糖皮质激素受... 详细信息

目的:探讨如何通过改善小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES)的培养条件来维持其未分化状态,提高嵌合体的制备效率。方法:以普通ES细胞培养液为对照,以TX WES培养液为ES细胞条件培养液分别对15 代以上的未工程化ES细胞和糖皮质激素受体(GR)工程化ES细胞进行培养并筛选,通过囊胚注射制作嵌合体来比较2种不同培养液培养ES细胞后嵌合体制备效率的差别。结果:未工程化ES细胞以普通培养液培养其嵌合率为25.0%,以TX WES培养液培养其嵌合率提高到53.8%(P< 0.05);GR工程化ES细胞以普通培养液培养其嵌合率为15.0%,以TX WES培养液培养其嵌合率提高到52.3%(P<0.05)。结论:应用TX WES培养液改善小鼠ES细胞的培养条件可提高嵌合体的制备效率,该方法为基因剔除小鼠研究的顺利开展奠定了良好的基础。

关键词：胚胎干细胞 TX-WES培养液嵌合体

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转基因操作后小鼠受精卵的移植数量与其胚胎发育率的关系

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第二军医大学学报 2005年第3期26卷 298-299页

作者：李建秀胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:研究不同受精卵移植数量与小鼠胚胎发育率的关系,以提高转基因小鼠制备效率.方法:取正常(共966枚受精卵,分6组,每组10～12例)及已进行显微操作的小鼠受精卵(共2349枚受精卵,分为5组),移入假孕的受体小鼠输卵管内,统计分析其生产率... 详细信息

目的:研究不同受精卵移植数量与小鼠胚胎发育率的关系,以提高转基因小鼠制备效率.方法:取正常(共966枚受精卵,分6组,每组10～12例)及已进行显微操作的小鼠受精卵(共2349枚受精卵,分为5组),移入假孕的受体小鼠输卵管内,统计分析其生产率及得仔率.结果:正常组移植小鼠移植1～5,6～10,11～15,16～20卵组与移植21～25,26～30组比较得仔率高(P＜0.01).转基因组小鼠单侧输卵管内移卵11～15枚或16～20枚的组,其得仔率较其他(移植1～5、6～10、21～25枚各组)高(P＜0.01).结论:受精卵移植数量与转基因小鼠胚胎发育率有关,以一次移卵11～20枚效果最好.

关键词：受精卵移植数量胚胎发育率转基因小鼠

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基于Cre/loxP系统的糖皮质激素受体基因条件性打靶嵌合鼠的获得

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第二军医大学学报 2005年第3期26卷 290-293页

作者：何志颖姚玉成李建秀王新民胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:应用Cre/loxP系统建立诱导型糖皮质激素受体(GR)基因剔除小鼠模型,为在体内直接进行GR基因的研究提供条件。方法:针对GR基因第2外显子构建诱导型目标载体,将打靶载体电穿孔转染胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES),经Southern杂交... 详细信息

目的:应用Cre/loxP系统建立诱导型糖皮质激素受体(GR)基因剔除小鼠模型,为在体内直接进行GR基因的研究提供条件。方法:针对GR基因第2外显子构建诱导型目标载体,将打靶载体电穿孔转染胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES),经Southern杂交筛选发生正确同源重组的ES细胞,囊胚注射法制备嵌合体并进行生殖系检测及纯化建系。结果:成功构建了针对GR基因第2外显子的诱导型目标载体,转染ES细胞获得了工程化的ES细胞,经囊胚注射获得了由工程化的ES细胞和体细胞共同发育而来的嵌合体小鼠。结论:基于Cre/loxP系统的GR基因条件性打靶嵌合鼠的获得,为得到理想的诱导型GR基因剔除小鼠模型奠定了基础。

关键词：受估糖皮质激素嵌和体 Cre/loxP系统胚胎干细胞

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恶性疟原虫融合抗原PfCP-2.9在不同品系小鼠中的免疫特性(英文)

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第二军医大学学报 2004年第1期25卷 9-13页

作者：薛向阳张青锋邢金花潘卫庆第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

目的 :探讨恶性疟原虫融合抗原 Pf CP- 2 .9在不同品系小鼠 (BAL B/ ca、C5 7BL/ 6 J、C3H/ He、DBA/ 2 J及昆明种 )中的免疫原性和免疫反应特性。方法 :以 ISA72 0为佐剂 ,Pf CP- 2 .9抗原皮下免疫 5种品系小鼠 3次 ,间隔 3周。以 EL ... 详细信息

目的 :探讨恶性疟原虫融合抗原 Pf CP- 2 .9在不同品系小鼠 (BAL B/ ca、C5 7BL/ 6 J、C3H/ He、DBA/ 2 J及昆明种 )中的免疫原性和免疫反应特性。方法 :以 ISA72 0为佐剂 ,Pf CP- 2 .9抗原皮下免疫 5种品系小鼠 3次 ,间隔 3周。以 EL ISA检测免疫血清中特异性抗体的动态变化、Ig G抗体亚型及对融合抗原各组分的抗体水平 ,以间接荧光抗体实验分析免疫血清对恶性疟原虫天然抗原的识别情况。结果 :5种品系小鼠均能产生针对 Pf CP- 2 .9的免疫应答 ,3次免疫后血清中特异性抗体滴度达1 0 5以上。Pf CP- 2 .9所诱生的免疫血清不但能识别 MSP1 - 1 9和 AMA- 1 ( )两个主要片段 ,而且能识别恶性疟原虫天然抗原。所诱导的 4种 Ig G抗体亚型中 ,Ig G1和 Ig G2 a是免疫血清中主要的抗体类型。但特异性抗体水平及抗体亚型分布因遗传背景不同而异。结论 :融合蛋白 Pf CP- 2 .9在 5种不同品系小鼠中具有强的免疫原性。

关键词：恶性疟原虫融合抗原 PfCP-2.9 小鼠免疫特性免疫原性免疫反应

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伯氏疟原虫氯喹敏感株和抗性株感染小鼠肝、肾、肺超微结构的比较

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第二军医大学学报 2001年第6期22卷 508-511页

作者：陈克强宋关鸿第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

目的 :研究伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)氯喹抗性 (RC)株与敏感 (N )株致病力和宿主对不同虫株感染反应的差异。方法 :比较伯氏疟原虫 RC株和 N株感染 ICR小鼠后期 ,肝、肾、肺等重要脏器超微结构的病理学改变。结果 :N株感染后... 详细信息

目的 :研究伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)氯喹抗性 (RC)株与敏感 (N )株致病力和宿主对不同虫株感染反应的差异。方法 :比较伯氏疟原虫 RC株和 N株感染 ICR小鼠后期 ,肝、肾、肺等重要脏器超微结构的病理学改变。结果 :N株感染后期 ,肝血窦、肾间质和毛细血管、肺泡毛细血管含有较多的感染疟原虫红细胞 ,肺泡壁毛细血管内皮细胞有较多的突起与疟原虫感染红细胞相接触。较多的肝细胞、肾小球旁细胞、肾小管上皮细胞、肺泡型和型细胞出现膜破溃 ,细胞器和胞质流失等不可逆的坏死性病变 ,一些肝血窦、肾小管和肺泡内可见多量的细胞碎片。 RC株感染后期 ,肝血窦、肾间质充血 ,含有较多的感染疟原虫红细胞。肝细胞、肾小管上皮细胞的病变以线粒体肿胀为主的变性 ,可见肝脏部分变性肝细胞出现恢复状态 ,肾小球毛细血管内皮细胞下、基膜、系膜区可见电子致密物沉着 ,肺泡隔内可见较多的单个核细胞。结论 :N株毒力较强 ,对宿主肝、肾和肺细胞超微结构的损害为不可逆的坏死性病变 ,呈急性变质性炎症过程 ;而 RC株毒力明显减弱 ,对宿主肝、肾和肺细胞超微结构的损害以变性为主。

关键词：伯氏疟原虫氯喹病理学超微结构抗药性微生物小鼠

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干细胞:生物医药研究的新靶标

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第二军医大学学报 2002年第11期23卷 1161-1165页

作者：胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

曾几何时,我有过一个很朦胧的概念,即"个体生长发育和功能维持可能是通过干细胞在空间和时间上的有序增殖与分化来实现的".虽然,这一概念当时还未真正形成,而且也还没有明确的解释,但就目前来说,它与各相关学科的现有理论和... 详细信息

曾几何时,我有过一个很朦胧的概念,即"个体生长发育和功能维持可能是通过干细胞在空间和时间上的有序增殖与分化来实现的".虽然,这一概念当时还未真正形成,而且也还没有明确的解释,但就目前来说,它与各相关学科的现有理论和知识并不冲突,而且还显得十分吻合.

关键词：新靶标干细胞生物药学应用肿瘤

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重组恶性疟原虫红细胞结合抗原175功能区的制备及联合免疫

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第二军医大学学报 2004年第1期25卷 14-17页

作者：张冬梅潘卫庆第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

目的:全合成恶性疟原虫eba-175Ⅱf2基因并在毕氏酵母中进行高效分泌表达,用该重组蛋白与我室研制的疟疾疫苗候选抗原PfCP-2.9进行联合免疫以观察是否存在竞争性免疫抑制.方法:采用不对称PCR法拼接合成eba-175Ⅱf2基因(959 bp),用电转化... 详细信息

目的:全合成恶性疟原虫eba-175Ⅱf2基因并在毕氏酵母中进行高效分泌表达,用该重组蛋白与我室研制的疟疾疫苗候选抗原PfCP-2.9进行联合免疫以观察是否存在竞争性免疫抑制.方法:采用不对称PCR法拼接合成eba-175Ⅱf2基因(959 bp),用电转化方法将合成基因导入毕氏酵母中并进行诱导表达,采用离子交换层析和分子筛层析纯化EBA-175ⅡF2蛋白.结果:全合成eba-175Ⅱf2基因在毕氏酵母中高效分泌表达.重组EBA-175ⅡF2和PfCP-2.9联合免疫后,以ELISA 和IFA检测,针对2个蛋白联合免疫的抗体滴度明显高于2个蛋白单独免疫的滴度.结论:重组EBA-175ⅡF2和PfCP-2.9联合免疫时不存在竞争性免疫抑制,这2个重要的疟疾疫苗候选抗原具有潜在联合应用前景.

关键词：恶性疟原虫 175 000红细胞结合抗原免疫性

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幼龄和老龄大鼠液压脑损伤后NGF、Bcl-2、Bax蛋白的表达

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第二军医大学学报 2003年第5期24卷 496-498页

作者：高进喜卢亦成江基尧由振东何成第二军医大学长征医院神经外科上海200003 基础医学部神经生物学教研室

目的:研究衰老因素对神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和凋亡相关蛋白(Bcl-2和Bax)表达的影响,探讨老年颅脑损伤恢复不良的分子生物学机制。方法:采用侧方液压打击颅脑损伤模型,应用免疫组化方法和计算机显微图像分析技术,比较幼... 详细信息

目的:研究衰老因素对神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和凋亡相关蛋白(Bcl-2和Bax)表达的影响,探讨老年颅脑损伤恢复不良的分子生物学机制。方法:采用侧方液压打击颅脑损伤模型,应用免疫组化方法和计算机显微图像分析技术,比较幼龄(2～3个月)和老龄(15个月)大鼠脑损伤后12 h脑内NGF、Bcl-2、Bax蛋白表达水平的差异。结果:液压打击伤后NGF、Bcl-2、Bax蛋白在损伤侧大脑皮质、海马表达明显增强,老龄组大鼠伤侧皮质NGF蛋白表达和Bcl-2/Bax蛋白表达比率显著低于幼龄组(P<0.05)。结论:老龄和幼龄大鼠液压脑损伤后NGF、Bcl-2和Bax蛋白表达的差异提示老龄哺乳动物受损神经元修复和生存能力下降,为认识创伤性脑损伤后年龄相关性神经功能缺失的病理生理学机制提供了帮助。

关键词：衰老颅脑损伤神经生长因子 Bcl—2 Bax 凋亡相关基因

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