检索结果-内蒙古大学图书馆

蛋白激酶与蛋白磷酸酶在细胞增殖分化中的机制研究

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第二军医大学学报 2004年第5期25卷 550-552页

作者：刘善荣刘厚奇戚中田赵兰娟王凤玫冯根生第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 基础医学部微生物学教研室 Burnham Institute

细胞生长发育和癌变过程中有众多复杂的信号转导途径以及信号分子参与,其中最基本的生化反应过程是系列蛋白质(信号分子)的磷酸化.

关键词：蛋白激酶蛋白磷酸酶细胞增殖细胞分化

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人胃癌相关蛋白VRG107基因的扩增及组织表达初步研究

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第二军医大学学报 2003年第12期24卷 1373-1374页

作者：吴浩焦炳华娄永华史薇郭兴中第二军医大学基础医学部新药评价中心上海200433 基础医学部生物化学与分子生物学教研室

以正常人肝脏cDNA文库为模板,采用PCR方法扩增出编码胃癌相关蛋白VRG107基因片段,应用半定量RT-PCR和Northern印迹分析研究它在人体组织中表达的分布。结果表明VRG107基因编码区为297 bp,与文献报道完全相同。该基因在肝、胃、结肠、肾... 详细信息

以正常人肝脏cDNA文库为模板,采用PCR方法扩增出编码胃癌相关蛋白VRG107基因片段,应用半定量RT-PCR和Northern印迹分析研究它在人体组织中表达的分布。结果表明VRG107基因编码区为297 bp,与文献报道完全相同。该基因在肝、胃、结肠、肾、乳腺等多种组织(包括肿瘤组织)中均有不同程度的表达。在肝癌组织中表达量明显少于癌旁组织(P<0.01),而在结肠癌组织中表达也少于癌旁组织。提示VRG107基因是一个组织分布广泛的基因,在部分肿瘤组织中表达量明显减少。

关键词：人胃癌 VRG107基因基因扩增基因表达癌组织

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受四环素系统调控的DT_(390)-VEGF_(165)融合基因对胃癌细胞的杀伤效应

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第二军医大学学报 2001年第7期22卷 695-696页

作者：潘欣潘卫戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

严格控制毒素基因的转录是肿瘤基因治疗发展的一个方向.我们曾经报道DT390- VEGF165或DT390-VEGFexon7融合基因真核表达载体在脂质体介导下转染胃癌细胞SGC7901可以观察到明显的杀伤效应[1].为了控制毒素基因的表达,我们在真核表达载体... 详细信息

严格控制毒素基因的转录是肿瘤基因治疗发展的一个方向.我们曾经报道DT390- VEGF165或DT390-VEGFexon7融合基因真核表达载体在脂质体介导下转染胃癌细胞SGC7901可以观察到明显的杀伤效应[1].为了控制毒素基因的表达,我们在真核表达载体中引入了四环素tet-off调控系统,转基因后结果显示:虽然存在漏表达,但四环素系统对控制毒素基因的表达可以发挥一定的作用.

关键词：血管内皮细胞生长因子基因真核表达载体胃肿瘤 DNA

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严重急性呼吸综合征相关冠状病毒基因组研究的新技术——RNA干扰

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第二军医大学学报 2003年第6期24卷 581-584页

作者：戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

最近 ,严重急性呼吸综合征 (SARS)在全世界约 30个国家和地区散发或流行 ,众多实验室由此展开了针对 SARS病原体的国际联合攻关。目前 ,已经确认其病原体是一种新型冠状病毒 (命名为 SARS- Co V) ,而且该病毒的全基因组测序已经完成。... 详细信息

最近 ,严重急性呼吸综合征 (SARS)在全世界约 30个国家和地区散发或流行 ,众多实验室由此展开了针对 SARS病原体的国际联合攻关。目前 ,已经确认其病原体是一种新型冠状病毒 (命名为 SARS- Co V) ,而且该病毒的全基因组测序已经完成。采用现代分子病毒学实验技术对 SARS病毒的功能基因组进行深入研究 ,有重要的理论和实际意义。作为一种崭新的基因沉默技术 ,RNA干扰无疑将在 SARS病毒基因组研究中发挥重要的作用。

关键词：严重急性呼吸综合征非典型肺炎冠状病毒基因组 RNA干扰测序现代分子病毒学实验技术

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庚型肝炎病毒全基因组cDNA噬菌体随机展示肽库的构建与鉴定

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第二军医大学学报 2000年第9期21卷 842-845页

作者：吴晓兰潘卫戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

目的 :构建能用于抗原表位筛选的庚型肝炎病毒 (HGV)全基因组 c DNA噬菌体随机展示肽库。方法 :将 DNase 部分消化的 HGV全基因组 c DNA随机片段 ,克隆到噬菌粒载体 p CANTAB5 X中 ,使 HGV抗原以融合蛋白的形式随机展示于噬菌体表面 ,... 详细信息

目的 :构建能用于抗原表位筛选的庚型肝炎病毒 (HGV)全基因组 c DNA噬菌体随机展示肽库。方法 :将 DNase 部分消化的 HGV全基因组 c DNA随机片段 ,克隆到噬菌粒载体 p CANTAB5 X中 ,使 HGV抗原以融合蛋白的形式随机展示于噬菌体表面 ,并用原位杂交、限制性酶切及 DNA测序等方法鉴定所建文库的随机性和完整性。结果 :所建肽库的容量为5 .34× 10 4个菌落形成单位 ,滴度为 1.41× 10 1 4 TU/ ml。原位杂交结果证明在 HGV基因组的不同区域均有阳性菌落 ,酶切鉴定和 DNA测序结果显示插入片段的长度和片段来源区域具有随机性。结论 :所建肽库具有良好的完整性、随机性及实用性 ,为进一步研究奠定了基础。

关键词：噬菌体随机肽展示肽库庚型肝炎 HGV cDNA

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庚型肝炎病毒NS5非结构蛋白在昆虫细胞中的表达

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第二军医大学学报 2000年第1期21卷 16-19页

作者：任浩朱分禄朱诗应宋燕斌戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

目的：研制特异的抗ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ抗体诊断试剂。方法：ＰＣＲ扩增ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＮＳ５基因片段并定向克隆至转座载体ｐＦａｓｔＢａｃＨＴａ，转化ＤＨ１０Ｂａｃ感受态细胞，３７℃振荡培养４ｈ使发生转座，于三抗选... 详细信息

目的：研制特异的抗ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ抗体诊断试剂。方法：ＰＣＲ扩增ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＮＳ５基因片段并定向克隆至转座载体ｐＦａｓｔＢａｃＨＴａ，转化ＤＨ１０Ｂａｃ感受态细胞，３７℃振荡培养４ｈ使发生转座，于三抗选择平皿筛选重组ｂａｃｍｉｄ。脂质体介导转染ｓｆ９细胞，将转染上清再次感染ｓｆ９细胞，以批量表达ＮＳ５重组蛋白。利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ方法分析、检测重组蛋白。结果：序列测定证实克隆的基因片段是ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ的ＮＳ５基因片段，且阅读框架正确。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析显示在相对分子质量４．１５×１０４处有重组蛋白的表达条带，薄层扫描占总蛋白量的１１．７％。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ发现重组蛋白可与ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ阳性患者混合血清发生较强的免疫反应。结论：ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＮＳ５重组蛋白可以用于ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ感染的检测。

关键词： NS5蛋白庚型肝炎 GBV-C/HGV 基因表达

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HGV RNA基因组感染HepG2细胞的研究

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微生物学通报 2002年第1期29卷 60-64页

作者：任浩朱分禄戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

　为了观察HGV　RNA基因组在HepG2细胞中的复制和表达并建立HGV感染的细胞模型,体外转录制备HGV RNA基因组,Lipofectamin介导转染HepG2细胞。取HGV RNA阳性培养上清液传代感染HepG2细胞,采用RT-PCR、免疫组化和Western blot等技术检测HG... 详细信息

　为了观察HGV　RNA基因组在HepG2细胞中的复制和表达并建立HGV感染的细胞模型,体外转录制备HGV RNA基因组,Lipofectamin介导转染HepG2细胞。取HGV RNA阳性培养上清液传代感染HepG2细胞,采用RT-PCR、免疫组化和Western blot等技术检测HGV在HepG2细胞中的复制和表达。HepG2细胞在转染后24h便可在培养上清液中检测到HGV负链RNA,传代感染的细胞及培养上清液中可检测到HGV正、负链RNA。在90d内传代20余次,均能检测到HGV的复制。免疫组化和Western　blot可检测到HGV E2蛋白在感染细胞中的表达。HGV感染细胞经冻存后复苏,仍能检测到 HGV RNA。故 HGV RNA基因组能够在HepG2细胞中复制和表达,此细胞模型有可能用于HGV的复制与感染防治的研究。

关键词：庚型肝炎病毒 HGV RNA基因组 HepG2细胞复制表达

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庚型肝炎病毒研究现状与展望

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第二军医大学学报 2000年第9期21卷 802-805页

作者：戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

病原微生物是人类健康的大敌,1977年至1997年的20年中,人类先后发现并鉴定的重要致病微生物就有近30种,包括埃博拉病毒、汉坦病毒、大肠杆菌O157、艾滋病毒、霍乱弧菌 O139等,学术界将这类微生物所致的疾病称为'新现传染病'(eme... 详细信息

病原微生物是人类健康的大敌,1977年至1997年的20年中,人类先后发现并鉴定的重要致病微生物就有近30种,包括埃博拉病毒、汉坦病毒、大肠杆菌O157、艾滋病毒、霍乱弧菌 O139等,学术界将这类微生物所致的疾病称为'新现传染病'(emerging infectious disea ses).由于对这类病原微生物本身及其致病机制了解甚少,加之人群缺乏免疫力及有效的防治方法,这类新的病原体常引起严重的传染性疾病,造成巨大的社会影响和经济损失.庚型肝炎病毒(hepatitis G virus,HGV)被认为是这类病原微生物之一.

关键词：庚型肝炎庚型肝炎病毒 HGV 病原微生物

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生长抑素对急性胃粘膜损伤保护作用的实验研究

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第二军医大学学报 1997年第1期18卷 50-52页

作者：李平许国铭王成海第二军医大学长海医院消化内科上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的:探讨生长抑素（SS）对胃粘膜的保护作用。方法：在用无水乙醇致大鼠急性胃粘膜损伤之前，静脉滴注SS和静注抗SS血清，观察溃疡指数和胃粘膜损伤程度的变化。结果：SS组、抗SS血清组与对照组大鼠的溃疡指数分别是17．40±3.58... 详细信息

目的:探讨生长抑素（SS）对胃粘膜的保护作用。方法：在用无水乙醇致大鼠急性胃粘膜损伤之前，静脉滴注SS和静注抗SS血清，观察溃疡指数和胃粘膜损伤程度的变化。结果：SS组、抗SS血清组与对照组大鼠的溃疡指数分别是17．40±3.58、36．65±3．47、28．55±3．75，SS组的溃疡指数非常显著低于对照组（P＜0．01）；抗SS血清组的溃疡指数显著高于对照组（P＜0．05）。大鼠胃粘膜损伤程度SS组明显轻于对照组（P＜0．05）；抗SS血清组明显重于对照组（P＜0．05）；SS组非常显著轻于抗SS血清组（P＜0．01）。结论：SS对胃粘膜有保护作用。

关键词：急性胃粘膜损伤保护作用生长抑素

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普鲁泊福对大鼠急性脊髓损伤的治疗作用

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第二军医大学学报 2004年第11期25卷 1212-1215页

作者：夏建华石学银曹莉刘刚张琪王亚华第二军医大学长征医院麻醉科第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

目的 :研究普鲁泊福对大鼠急性脊髓损伤的治疗作用及其机制。方法 :SD大鼠 6 0只 ,随机分为假手术组、损伤组和普鲁泊福组 (n=2 0 )。采用改良的 Allen's打击法致伤大鼠脊髓 ,假手术组仅做椎板切除术。普鲁泊福组在脊髓损伤后 30 mi... 详细信息

目的 :研究普鲁泊福对大鼠急性脊髓损伤的治疗作用及其机制。方法 :SD大鼠 6 0只 ,随机分为假手术组、损伤组和普鲁泊福组 (n=2 0 )。采用改良的 Allen's打击法致伤大鼠脊髓 ,假手术组仅做椎板切除术。普鲁泊福组在脊髓损伤后 30 min以 6 0 mg/ (kg· h)的速度持续输注 1%的普鲁泊福 1h,其余两组以相同的方法给予 0 .9%的生理盐水。应用斜板试验和 BBB(Basso,Beattie and Bresnahan)评分法进行后肢运动功能评价 ,分别采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法测定血浆超氧化物歧化酶 (SOD)活力和丙二醛 (MDA)含量变化 ,同时观察组织形态学变化。结果 :普鲁泊福组行为学评分明显高于损伤组(P<0 .0 5 ) ;与假手术组相比 ,损伤组血浆 MDA含量升高 ,SOD活力降低 ,而与损伤组相比 ,普鲁泊福组血浆 MDA含量降低 ,SOD活力升高 ;损伤组脊髓病理变化较重 ,可见大量神经元坏死 ,普鲁泊福组神经元坏死较轻。结论 :普鲁泊福对大鼠急性脊髓损伤有较好的治疗作用 ,其机制与抗氧化作用有关。

关键词：普鲁泊福脊髓损伤超氧化物歧化酶丙二醛

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