检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 1997年第3期18卷 219-221页

作者：曲伸何晓龙王成海路长林第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的：研究经逆转录病毒载体的介导将脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）ｃＤＮＡ导入大鼠成肌细胞，为体内移植治疗打下基础。方法：采用电穿孔法将重组大鼠ＢＤＮＦｃＤＮＡ导入ＰＡ３１７包装细胞，获取高滴度的病毒上清转染成肌细胞。... 详细信息

目的：研究经逆转录病毒载体的介导将脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）ｃＤＮＡ导入大鼠成肌细胞，为体内移植治疗打下基础。方法：采用电穿孔法将重组大鼠ＢＤＮＦｃＤＮＡ导入ＰＡ３１７包装细胞，获取高滴度的病毒上清转染成肌细胞。Ｇ４１８筛选转染的成肌细胞，采用Ｎｏｒｔｈｅｍ杂交和ＰＣ１２细胞存活检测。结果：证实转染细胞内有ＢＤＮＦｍＲＮＡ的表达并具有促进细胞存活的生物学活性。结论：ＢＤＮＦｃＤＮＡ可在真核细胞内表达并具有生物学效应，可用于神经系统基因治疗的研究。

关键词：逆转录病毒神经营养因子脑源性成肌细胞

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人及大鼠胶质细胞源性神经营养因子cDNA的克隆与表达

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第二军医大学学报 1998年第1期19卷 17-19页

作者：陈哲宇何成王成海路长林第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的：克隆与表达人及大鼠胶质细胞源性神经营养因子（ＧＤＮＦ）ｃＤＮＡ。方法和结果：用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增了人及大鼠ＧＤＮＦ成熟序列的ｃＤＮＡ片段，并将人及大鼠ＧＤＮＦｃＤＮＡ重组到表达质粒ｐＢＰＬ... 详细信息

目的：克隆与表达人及大鼠胶质细胞源性神经营养因子（ＧＤＮＦ）ｃＤＮＡ。方法和结果：用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增了人及大鼠ＧＤＮＦ成熟序列的ｃＤＮＡ片段，并将人及大鼠ＧＤＮＦｃＤＮＡ重组到表达质粒ｐＢＰＬ中，分别在大肠杆菌中获得了较高表达。结论：人及大鼠ＧＤＮＦｃＤＮＡ的克隆与表达获得成功，为研究ＧＤＮＦ在神经损伤修复中的作用奠定了基础。

关键词： cDNA 克隆神经损伤修复 GDNF 基因表达

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一氧化氮和一氧化碳对胎盘促肾上腺皮质素释放素分泌的影响

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第二军医大学学报 1998年第4期19卷 333-336页

作者：倪鑫 Smith,R 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的：研究一氧化氮（ＮＯ）和一氧化碳（ＣＯ）及其细胞内信使ｃＧＭＰ对培养的胎盘细胞促肾上腺皮质素释放素（ＣＲＨ）分泌的调节作用。方法：采用细胞培养技术观察体外培养的胎盘细胞分别给予ＮＯ和ＣＯ的供体或前体、ＮＯ合酶和血... 详细信息

目的：研究一氧化氮（ＮＯ）和一氧化碳（ＣＯ）及其细胞内信使ｃＧＭＰ对培养的胎盘细胞促肾上腺皮质素释放素（ＣＲＨ）分泌的调节作用。方法：采用细胞培养技术观察体外培养的胎盘细胞分别给予ＮＯ和ＣＯ的供体或前体、ＮＯ合酶和血红素加氧酶的抑制剂以及鸟苷酸环化酶的抑制剂后，培养上清和细胞内ＣＲＨ含量的变化。ＣＲＨ含量的测定应用放射免疫分析技术。结果：ＮＯ供体硝普钠不仅可显著抑制ＣＲＨ的基础分泌，还可抑制由ＫＣｌ刺激所致的ＣＲＨ的释放。ＮＯ合酶的抑制剂Ｌ－硝基－精氨酸甲酯和鸟苷酸环化酶抑制剂ＬＹ８３５８３可逆转硝普钠对ＣＲＨ分泌的抑制作用，还可促进ＣＲＨ的基础分泌。ＣＯ前体Ｈｅｍｉｎ和血红素加氧酶的抑制剂ＺｎＰＰ９对ＣＲＨ的基础分泌和ＫＣｌ刺激引起的ＣＲＨ的释放均无影响。结论：外源性和内源性的ＮＯ均可抑制胎盘ＣＲＨ的分泌。ＮＯ抑制胎盘ＣＲＨ分泌的作用可能是由ｃＧＭＰ介导的。

关键词：一氧化氮一氧化碳胎盘 CRH

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强啡肽A_(1～13)与大鼠脑出血后脑水肿关系的实验研究

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第二军医大学学报 1998年第1期19卷 29-32页

作者：孙学军王成海路长林第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的：建立稳定的大鼠脑出血模型，研究强啡肽Ａ１～１３（ＤｙｎＡ１～１３）对大鼠胶原酶诱导的脑出血后脑水肿的影响，寻找治疗脑出血后脑水肿的特异性药物。方法：脑立体定位下，大鼠大脑尾核内微量注射０．４ＩＵ细菌胶原酶；一般... 详细信息

目的：建立稳定的大鼠脑出血模型，研究强啡肽Ａ１～１３（ＤｙｎＡ１～１３）对大鼠胶原酶诱导的脑出血后脑水肿的影响，寻找治疗脑出血后脑水肿的特异性药物。方法：脑立体定位下，大鼠大脑尾核内微量注射０．４ＩＵ细菌胶原酶；一般（ＨＥ）与神经元特殊（尼氏）染色后观察脑出血后病理改变；干湿质量法测定脑组织含水量。结果：大鼠尾核注射胶原酶可以造成稳定的大鼠脑实质出血，２４ｈ可形成脑血肿，其大小与注射剂量有关，脑出血后脑组织含水量与注射胶原酶的剂量呈正相关，ＤｙｎＡ１～１３可以减轻胶原酶诱导的脑出血后脑水肿，并与剂量有关。结论：脑实质内注射胶原酶可制备大鼠脑出血模型，ＤｙｎＡ１～１３对脑出血后脑水肿可能有一定的治疗作用。

关键词：脑出血脑水肿胶原酶强啡肽A

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脑缺血再灌流后大鼠海马脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子mRNA的表达

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第二军医大学学报 1998年第6期19卷 583-584页

作者：董艳何成由振东王成海路长林第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的：观察大鼠脑缺血再灌流损伤后脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）和睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）ｍＲＮＡ在海马中的分布及其表达。方法：大鼠颈总动脉夹闭造成脑缺血３０ｍｉｎ，于６，１２，２４，７２ｈ进行点杂交和原位杂交，７... 详细信息

目的：观察大鼠脑缺血再灌流损伤后脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）和睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）ｍＲＮＡ在海马中的分布及其表达。方法：大鼠颈总动脉夹闭造成脑缺血３０ｍｉｎ，于６，１２，２４，７２ｈ进行点杂交和原位杂交，７２ｈ时进行神经元尼氏小体染色。结果：脑缺血后，海马ＣＡ１区神经元大量死亡，ＢＤＮＦｍＲＮＡ表达于６ｈ开始增加，７２ｈ恢复正常。２４ｈ时齿状回ＢＤＮＦｍＲＮＡ表达高于ＣＡ１区。ＣＮＴＦｍＲＮＡ表达于１２ｈ开始持续增加。结论：脑缺血再灌流损伤后，海马ＢＤＮＦｍＲ－ＮＡ和ＣＮＴＦｍＲＮＡ的表达均增加。ＢＤＮＦ可能有利于齿状回神经元耐受缺血。

关键词：脑缺血海马 BDNF CNTF mRNA

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糖皮质激素对高钾诱导PC12细胞分泌儿茶酚胺的快速调节作用

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第二军医大学学报 2001年第11期22卷 1024-1026页

作者：娄淑杰陈菲陈宜张第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的 :分析糖皮质激素对高钾诱导 PC12细胞分泌儿茶酚胺的快速调节作用。方法 :采用高效液相色谱 -电化学法 ,检测 PC12细胞分泌的儿茶酚胺。结果 :(1)皮质酮可在 15 min内抑制高钾诱导的 PC12细胞分泌儿茶酚胺。 (2 )高钾持续刺激 PC1... 详细信息

目的 :分析糖皮质激素对高钾诱导 PC12细胞分泌儿茶酚胺的快速调节作用。方法 :采用高效液相色谱 -电化学法 ,检测 PC12细胞分泌的儿茶酚胺。结果 :(1)皮质酮可在 15 min内抑制高钾诱导的 PC12细胞分泌儿茶酚胺。 (2 )高钾持续刺激 PC12细胞的时间不同 ,皮质酮抑制分泌的作用发生改变。(3)地塞米松也可快速抑制高钾诱导 PC12细胞分泌儿茶酚胺 ,作用幅度与皮质酮接近。结论 :糖皮质激素可快速抑制高钾诱导的 PC12细胞分泌儿茶酚胺。

关键词：糖皮质激素儿茶酚胺 PC12细胞钾高效液相色谱

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基因治疗帕金森病大鼠脑内纹状体多巴胺含量的检测

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中华老年医学杂志 1999年第3期18卷 167-169页

作者：曲伸何小龙侍坚由振东王成海路长林第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的观察脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）基因工程成肌细胞脑内纹状体移植对帕金森病（ＰＤ）大鼠脑内纹状体多巴胺含量的影响。方法建立逆转录病毒介导的ＢＤＮＦ表达质粒，并转染成肌细胞进行ＰＤ大鼠脑内纹状体移植。结果细胞移植后... 详细信息

目的观察脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）基因工程成肌细胞脑内纹状体移植对帕金森病（ＰＤ）大鼠脑内纹状体多巴胺含量的影响。方法建立逆转录病毒介导的ＢＤＮＦ表达质粒，并转染成肌细胞进行ＰＤ大鼠脑内纹状体移植。结果细胞移植后第２和第８周，移植组毁损侧纹状体多巴胺含量〔分别为（９５７５３±８８９５）和（１０４０２９±１０４７８）ｐｇ／ｍｇ〕较对照组〔分别为（３３５９８±１０２４８）和（３２７８８±７０２３）ｐｇ／ｍｇ〕明显增加（均为Ｐ＜００１），并可维持２个月之久。结论脑源性神经营养因子基因工程成肌细胞脑内纹状体移植，可使脑内纹状体多巴胺含量明显增加，可能为帕金森病的治疗提供了一种新的治疗方法。

关键词：帕金森病多巴胺基因疗法 BDNF

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嗅鞘细胞移植联合应用GDNF对大鼠脊髓损伤的治疗作用

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第二军医大学学报 2002年第6期23卷 593-597,F004页

作者：曹莉叶俊丽刘丽陈菲陈哲宇李建红路长林何成第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

目的 :研究嗅鞘细胞 (OECs)移植并联合应用胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对脊髓损伤的保护和促进再生作用。方法 :建立成年 SD大鼠脊髓 T8半横断损伤模型 ,将体外培养纯化的 OECs植入脊髓损伤处 ,同时局部应用 GDNF。采用斜板试验和 ... 详细信息

目的 :研究嗅鞘细胞 (OECs)移植并联合应用胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对脊髓损伤的保护和促进再生作用。方法 :建立成年 SD大鼠脊髓 T8半横断损伤模型 ,将体外培养纯化的 OECs植入脊髓损伤处 ,同时局部应用 GDNF。采用斜板试验和 BBB联合功能评分观察大鼠运动功能恢复情况 ,并通过辣根过氧化物酶逆行示踪技术评价 OECs和 GDNF对神经元存活和纤维再生的影响。结果 :(1) OECs和 GDNF联合应用时对皮质和红核神经元有逆行性保护作用 ,可促进脊髓下行传导束再生 ,肢体运动功能恢复。 (2 ) OECs和 GDNF联合应用组对脊髓损伤的修复作用最强 ,高于 GDNF或 OECs单用组。结论 :联合应用 GDNF和 OECs在脊髓损伤修复治疗中具有协同作用。

关键词：嗅鞘细胞移植 GDNF 大鼠脊髓损伤治疗作用胶质细胞源性神经营养因子红核脊髓束皮质脊髓束

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用Fura-2测定单个巨噬细胞内游离钙的条件的优化

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第二军医大学学报 2002年第3期23卷 341-343页

作者：朱晓燕韩建中娄淑杰严进徐仁宝第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部基础医学部神经生物学教研室

Fura-2负载后用荧光显微镜成像系统研究单细胞内游离钙离子浓度([Ca~(2+)]i)应用已十分广泛，娄淑杰等用此方法检测了PC12细胞内的[Ca~(2+)]i，我们将娄淑杰等的方法应用于腹腔巨噬细胞（PEM），发现不尽理想，因此我们实验过程中对Fur... 详细信息

Fura-2负载后用荧光显微镜成像系统研究单细胞内游离钙离子浓度([Ca~(2+)]i)应用已十分广泛，娄淑杰等用此方法检测了PC12细胞内的[Ca~(2+)]i，我们将娄淑杰等的方法应用于腹腔巨噬细胞（PEM），发现不尽理想，因此我们实验过程中对Fura-2的浓度进行了调整，另外PEM作为参与炎症的非兴奋细胞，其活化对[Ca~(2+)]i有很大的影响，而细胞贴壁很可能导致活化，但测定方法又要求只能在贴壁细胞进行。因此，我们使用鼠尾胶缩短贴壁时间，并把检测用的PEM的贴壁时间控制在一定范围之内。取得了比较理想的结果。

关键词： Fura-2 巨噬细胞钙测定优化 PEM

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心理性应激引起的大鼠行为,血浆皮质酮及脑区氨基酸水平的变化

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第二军医大学学报 1997年第4期18卷 330-333页

作者：严进王春安陈宜张徐仁宝第二军医大学基础医学部生理学教研室第二军医大学基础医学部病理生理学教研室第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的：观察心理应激模型动物血浆皮质酮及视皮质、海马和下丘脑氨基酸和整体行为的变化。方法：以光－电击条件反射法建立心理应激动物模型，采用放射性配体蛋白竞争结合法、氨基酸自动分析法及旷场试验（Ｏｐｅｎ－ｆｉｅｌｄｔｅｓｔ... 详细信息

目的：观察心理应激模型动物血浆皮质酮及视皮质、海马和下丘脑氨基酸和整体行为的变化。方法：以光－电击条件反射法建立心理应激动物模型，采用放射性配体蛋白竞争结合法、氨基酸自动分析法及旷场试验（Ｏｐｅｎ－ｆｉｅｌｄｔｅｓｔ）分别测定大鼠心理应激时血浆皮质酮、脑区氨基酸水平和行为的变化。结果：在血浆皮质酮能够分化心理应激的实验参数条件下，电击刺激时，主要引起视皮质氨基酸水平的变化；而仅给予条件刺激（光）引起心理应激时，可在视皮质、海马和下丘脑３个脑区不同程度地出现谷氨酸、γ－氨基丁酸和牛磺酸水平的变化，并以海马最明显。同时动物运动行为减少，类似抑郁样表现。结论：心理应激反应时，谷氨酸、γ－氨基丁酸和牛磺酸等脑内氨基酸的变化，可能与心理应激引起的抑郁样行为有关。

关键词：心理应激皮质酮氨基酸

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