检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2002年第11期23卷 1172-1174页

作者：朱海英苏娟李文林姚玉成刘红王新民胡以平余宏宇第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 长征医院病理科

目的:探讨骨髓细胞在受致死剂量照射的受体鼠体内的多向分化潜能。方法:将C57-TgN(Mx-cre)雄性小鼠的骨髓细胞经尾静脉植入受致死剂量照射的雌性受体鼠,重建受体鼠骨髓,然后分别用PCR和免疫组化分析检测受体鼠的多个器官组织中sry及Mx-... 详细信息

目的:探讨骨髓细胞在受致死剂量照射的受体鼠体内的多向分化潜能。方法:将C57-TgN(Mx-cre)雄性小鼠的骨髓细胞经尾静脉植入受致死剂量照射的雌性受体鼠,重建受体鼠骨髓,然后分别用PCR和免疫组化分析检测受体鼠的多个器官组织中sry及Mx-cre基因的分布及表达情况。结果:PCR和免疫组化分析结果均显示,供体细胞的两个标志sry及Mx-cre在受体鼠的肝脏、肾脏、皮肤、脾脏等多个器官中都有表达。结论:骨髓细胞不仅可以重建受致死剂量照射受体鼠的造血系统,而且具有分化为肝脏、肾脏、皮肤、脾脏等组织细胞类型的多向潜能性。

关键词：骨髓细胞造血干细胞细胞分化

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干细胞样肝原始细胞的体外分化

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第二军医大学学报 2002年第11期23卷 1169-1171页

作者：熊俊姚玉成訾晓渊李文林朱海英王新民胡以平余宏宇第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 长征医院病理科

目的:探讨干细胞样肝原始细胞集落体外分化的潜能。方法:分离孕13.5 d的C57BL/6小鼠胎肝组织细胞并培养,第2天出现圆形或椭圆形干细胞样肝原始细胞集落,随机挑取边界清楚的细胞集落分别培养,利用倒置相差显微镜连续观察细胞生长过程中... 详细信息

目的:探讨干细胞样肝原始细胞集落体外分化的潜能。方法:分离孕13.5 d的C57BL/6小鼠胎肝组织细胞并培养,第2天出现圆形或椭圆形干细胞样肝原始细胞集落,随机挑取边界清楚的细胞集落分别培养,利用倒置相差显微镜连续观察细胞生长过程中的形态学变化并用显微摄影记录结果,最后利用免疫细胞化学分析鉴定分化后细胞的性质。结果:干细胞样肝原始细胞集落在体外培养时可形成类似肝小叶的形状,集落中央大部分细胞分化成双核细胞,集落周边细胞仍为单核细胞,但体积明显增大,整个集落中的细胞呈放射状排布。分化后,细胞群中的部分细胞表达成熟肝细胞标志白蛋白(albumin),少部分细胞表达胆管上皮细胞标志细胞角蛋白19(cytokeratin19,CK19),但所有细胞均不表达低分化肝细胞标志α-甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)。结论:干细胞样肝原始细胞在体外具有多向分化能力,可分化为表达成熟肝细胞和胆管上皮细胞标志的细胞。

关键词：干细胞样肝原始细胞肝干细胞细胞培养体外分化

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玄参中环烯醚萜Epibueropyridinium A对醛糖还原酶的抑制作用

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第二军医大学学报 2006年第7期27卷 760-762页

作者：黄才国魏善建刘军华第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海200433

目的:研究Epibueropyridium A对醛糖还原酶的抑制作用。方法:醛糖还原酶通过硫酸铵分级沉淀从牛眼晶状体中提取,在含有DL-甘油醛、醛糖还原酶、NADPH的反应体系中,加入一定浓度的Epibueropyridium A,通过340 nm处光密度的变化来反映Epib... 详细信息

目的:研究Epibueropyridium A对醛糖还原酶的抑制作用。方法:醛糖还原酶通过硫酸铵分级沉淀从牛眼晶状体中提取,在含有DL-甘油醛、醛糖还原酶、NADPH的反应体系中,加入一定浓度的Epibueropyridium A,通过340 nm处光密度的变化来反映Epibueropyridium A对酶活性的抑制作用。阳性对照为依帕司他,采用双倒数作图的方法确定抑制类型,二次作图法求Ki,以抑制剂浓度对抑制率作图求IC50。结果:Epibueropyridium A能显著抑制醛糖还原酶的活性,为竞争性抑制,其半数抑制剂量IC50为4.2μg/ml,Ki值为4.88μg/ml。结论:Epibueropyridium A是醛糖还原酶的竞争性抑制剂。

关键词： Epibueropyridium A 玄参醛糖还原酶酶抑制剂

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Mac-1在细胞内走向的直视研究

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中国科学（C辑） 2004年第3期34卷 263-270页

作者：严鸣毛积芳韦毅钟纪根杨生生徐仁宝第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部生化与分子生物学教研室上海200433 复旦大学生命科学院上海200433

分别构建荧光蛋白(FP,fluorescenceprotein)与Mac-1的两个亚基(CD11b,CD18)融合蛋白表达载体,并在鉴定pYFP-CD18和pCD11b-BFP共转染的CHO细胞(CHO-Mac-1-FP)表达的Mac-1-FP(Mac-1fusedwithfluorescenceprotein)具有与正常白细胞表达的野生型Mac-1基本一致的结构与功能的基础上,结合应用PE标记的CD11b单抗,通过激光共聚焦显微镜观测CD11b,CD18在PMA刺激和ICAM-1结合后于胞内的走向与归宿.结果显示:(ⅰ)在静态的细胞膜上看不到Mac-1,PMA活化后1h,胞膜上可见CD11b-PE和YFP-CD18群集,2h后内吞,内吞后YFP-CD18的荧光减弱,提示Mac-1有部分降解;24h后PMA再次活化,部分CD11b-PE与YFP-CD18可再次出现在膜上,说明Mac-1还可以被循环利用.(ⅱ)ICAM-1包被磁珠与Mac-1-FP-CHO细胞作用后,4h内粘附增加,同时伴有Mac-1-FP的群集,8h后粘附减少,同时伴有Mac-1-FP的荧光逐渐减弱,这一过程与PMA活化后Mac-1-FP的变化过程类似,提示ICAM-1作用后也可能出现内吞并降解.由以上结果可以得出结论,Mac-1活化后的走向是由胞浆内转位到质膜上,然后内吞,内吞后被降解或可被再利用,与此同时粘附活性亦发生相应的变化,提示受体介导性内吞是白细胞粘附活性降低的重要机制之一.

关键词： Mac-1 PMA ICAM-1 走向细胞白细胞免疫反应

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东海贻贝抗菌肽Myticin A基因的克隆表达及其生物学活性

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第二军医大学学报 2005年第1期26卷 65-68页

作者：仲燕刘军华张建鹏冯伟华焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海200433

目的:在毕赤酵母表达系统中表达贻贝抗菌肽Myticin A并检测其生物学活性。方法:提取贻贝总mRNA,逆转录合成cDNA,PCR扩增得到DNA片段。PCR产物与pMD18 T连接,得到阳性重组载体pMD18 Myticin A。Myticin A基因插入载体pPIC9K中,得到的重... 详细信息

目的:在毕赤酵母表达系统中表达贻贝抗菌肽Myticin A并检测其生物学活性。方法:提取贻贝总mRNA,逆转录合成cDNA,PCR扩增得到DNA片段。PCR产物与pMD18 T连接,得到阳性重组载体pMD18 Myticin A。Myticin A基因插入载体pPIC9K中,得到的重组载体pPIC9K Myticin A转化至宿主菌中。得到高抗性阳性菌株并进行诱导表达。发酵上清进行Tricine SDS PAGE分析并用CM sepharose柱和Sephadex G 25柱纯化,Western印迹法鉴定并检测生物学活性。结果:获得重组载体pPIC9K Myticin A。高抗性多拷贝阳性表达菌株GS115/pPIC9K Myticin A经甲醇诱导后,Tricine SDS PAGE证实其相对分子质量为4 500,表达量为14%以上,纯化后纯度达到90%以上。Western印迹法证实所表达样品为Myticin A。表达样品对巨大芽胞杆菌的生长有抑制作用,对小鼠成纤维细胞(L929)、胰腺癌细胞(SW1990)、结肠腺癌细胞(LoVo)的生长均有明显抑制作用。结论:应用毕赤酵母表达系统能较好地表达抗菌肽Myticin A,生物学活性研究证实其具有抗革兰阳性菌作用,明显抑制肿瘤细胞生长。

关键词：抗菌肽 Myticin A 贻贝重组质粒毕赤酵母基因表达

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早期补液对烧伤大鼠心脏心肌细胞及血管内皮细胞的影响

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第二军医大学学报 1999年第10期20卷 780-782页

作者：沙继宏叶煦亭唐洪泰郑尊杨勇骥第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 第二军医大学长海医院烧伤科

目的：研究烧伤后大鼠心脏心肌细胞、血管内皮细胞（ＥＣ）的变化及早期补液对它们的影响。方法：应用了常规电镜技术及过氧化氢细胞化学方法。结果：烧伤后０．５ｈ血管ＥＣ肿胀，烧伤后４ｈ血管ＥＣ可向血管腔伸出较长突起，血管... 详细信息

目的：研究烧伤后大鼠心脏心肌细胞、血管内皮细胞（ＥＣ）的变化及早期补液对它们的影响。方法：应用了常规电镜技术及过氧化氢细胞化学方法。结果：烧伤后０．５ｈ血管ＥＣ肿胀，烧伤后４ｈ血管ＥＣ可向血管腔伸出较长突起，血管腔外有明显渗出，心肌细胞线粒体明显肿胀。过氧化氢细胞化学反应为血管ＥＣ血管腔面有较多致密沉积物。烧伤后８ｈ心肌细胞及血管ＥＣ损伤进一步加重。补液组烧伤后１，４，８ｈ，心肌细胞及血管ＥＣ损伤明显减轻，过氧化氢细胞化学反应电子致密沉积物也较少。烧伤后８ｈ细胞损伤开始恢复，血管ＥＣ出现大量吞饮泡，血管外液体重吸收。结论：烧伤后心肌细胞及血管ＥＣ发生损伤，早期补液对损伤有明显减轻作用。

关键词：烧伤血管内皮细胞补液大鼠心肌细胞

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肿瘤与瘤周组织中生长抑素和巯基含量的变化

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第二军医大学学报 1996年第1期17卷 22-24页

作者：路红社赵孟尧王成海黄伟达第二军医大学长海医院神经外科第二军医大学基础医学部神经生物学教研室复旦大学生物化学系

目的：探讨肿瘤组织中生长抑素含量的变化与肿瘤的生长关系，并进一步对导致这些变化的原因进行研究。方法：采用生长抑素的放射免疫测定和巯基光吸收法，对Ｓ９１黑瘤、Ｌｅｗｉｓ肺癌和Ｓ１８０肉瘤等恶性肿病与瘤周组织中生长抑素与... 详细信息

目的：探讨肿瘤组织中生长抑素含量的变化与肿瘤的生长关系，并进一步对导致这些变化的原因进行研究。方法：采用生长抑素的放射免疫测定和巯基光吸收法，对Ｓ９１黑瘤、Ｌｅｗｉｓ肺癌和Ｓ１８０肉瘤等恶性肿病与瘤周组织中生长抑素与巯基含量进行测定。结果：发现所有肿瘤组织中的生长抑素含量均低于瘤周组织，而巯基的含量则完全相反。结论：生长抑素含量的降低参与了肿瘤的生长；生长抑素含量降低的原因，可能是含量高的巯基破坏了生长抑素分子结构中的双硫键。

关键词：生长抑素巯基肿瘤瘤周组织

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负极性聚四氟乙烯驻极体对成纤维细胞凋亡的影响

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第二军医大学学报 2001年第5期22卷 409-411页

作者：江键宋诚荣崔黎丽王小平方影李莉叶熙亭第二军医大学基础医学部数理教研室上海200433 药学院无机化学教研室长征医院临床实验科基础医学部细胞生物学教研室

目的 :研究负电晕充电的聚四氟乙烯 (PTFE)驻极体对成纤维细胞凋亡的影响及其调控机制。方法 :选用 - 30 0、- 5 0 0和 - 10 0 0 V PTFE驻极体作用于成纤维细胞 2 4、48和 72 h,利用流式细胞仪和透射电子显微镜研究负极性驻极体对成纤... 详细信息

目的 :研究负电晕充电的聚四氟乙烯 (PTFE)驻极体对成纤维细胞凋亡的影响及其调控机制。方法 :选用 - 30 0、- 5 0 0和 - 10 0 0 V PTFE驻极体作用于成纤维细胞 2 4、48和 72 h,利用流式细胞仪和透射电子显微镜研究负极性驻极体对成纤维细胞凋亡的影响。结果 :- 30 0、- 5 0 0和 - 10 0 0 V驻极体作用成纤维细胞 2 4、48和 72 h以后 ,与对照组相比 ,成纤维细胞的凋亡量从 0 .5 %增至 10 % (部分可达 15 % ) ;驻极体作用成纤维细胞 48～ 72 h,出现细胞凋亡特有的形态学特征 ,即 :细胞异染色质边集 ,细胞裂解 ,可见凋亡小体。驻极体诱导成纤维细胞凋亡的效应与作用时间和场强呈正相关性 (P<0 .0 5 )。结论 :负极性驻极体有促进成纤维细胞凋亡的作用。

关键词：驻极体成纤维细胞细胞凋亡负极性聚四氟乙烯

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原发性肝癌患者外周血CD44v　mRNA检测的临床意义

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第二军医大学学报 1996年第3期17卷 226-228页

作者：刘鹏飞吴孟超陈汉钱光相傅继梁第二军医大学长海医院肝胆外科研究所第二军医大学基础医学部生物学教研室

目的：检测原发性肝癌患者外周静脉血中游离肿瘤细胞表达的ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ，探讨其能否反映肿瘤的侵袭转移潜能。方法：应用敏感的ＲＴ－ＰＣＲ方法，通过合理的ＰＣＲ引物的设计，检测了１５例原发性肝癌患者术晨的外周静脉血中Ｃ... 详细信息

目的：检测原发性肝癌患者外周静脉血中游离肿瘤细胞表达的ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ，探讨其能否反映肿瘤的侵袭转移潜能。方法：应用敏感的ＲＴ－ＰＣＲ方法，通过合理的ＰＣＲ引物的设计，检测了１５例原发性肝癌患者术晨的外周静脉血中ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ，结果：从６例患者外周静脉血中选择性地检测出了游离肿瘤细胞表达的ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ．结论：外周静脉血中游离肿瘤细胞表达的ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ可能从一个侧面反映了肿瘤的侵袭转移潜能，此法有可能作为恶性肿瘤监测及诊断的辅助手段。

关键词：肝肿瘤原发性 CD44 肿瘤转移 mRNA 外周血

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骨髓基质细胞条件培养液对中脑神经干细胞分化的影响

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第二军医大学学报 2003年第3期24卷 295-297页

作者：顾平娄淑杰王铭维王彦永鲍璇何成路长林第二军医大学基础医学部神经生物学教研室河北医科大学第一医院神经内科石家庄050031 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室河北医科大学第一医院神经内科石家庄050031

目的 :探讨骨髓基质细胞条件培养液诱导中脑神经干细胞分化为高比例神经元的机制。方法 :采用骨髓基质细胞条件培养液培养中脑神经干细胞 7d ,通过免疫细胞化学染色方法鉴别和计数神经元的数量 ,并与自然分化组、骨髓基质细胞膜片段组... 详细信息

目的 :探讨骨髓基质细胞条件培养液诱导中脑神经干细胞分化为高比例神经元的机制。方法 :采用骨髓基质细胞条件培养液培养中脑神经干细胞 7d ,通过免疫细胞化学染色方法鉴别和计数神经元的数量 ,并与自然分化组、骨髓基质细胞膜片段组、骨髓基质细胞固定组以及骨髓基质细胞共培养组相比较。结果 :用成年大鼠骨髓基质细胞的条件培养液体外培养新生大鼠中脑神经干细胞 ,神经干细胞分化为神经元比例 [(40 .5± 14 .5 ) % ]明显高于自然分化组 [(16 .6± 10 .5 ) % ]、骨髓基质细胞膜片段组 [(2 0 .8± 12 .5 ) % ]以及骨髓基质细胞固定组 ,但与骨髓基质细胞共培养组 [(36 .1± 9.7) % ]相比无统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论

关键词：骨髓基质细胞条件液中脑神经干细胞分化

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