检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学通报 2004年第6期31卷 53-56页

作者：张兴群王梁华焦炳华袁勤生华东理工大学生物反应器国家重点实验室第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海200433

以补料分批发酵方式在 3 7L发酵罐上实现了人破骨细胞形成抑制因子活性域多肽(OCIFAD)的高密度发酵融合表达。通过参数控制。发酵液最终OD6 0 0 达 1 2 5 (相当于 35g湿菌体 L) ,表达量占菌体总蛋白 40 %左右 ,含量超过 0 6g L ,并且... 详细信息

以补料分批发酵方式在 3 7L发酵罐上实现了人破骨细胞形成抑制因子活性域多肽(OCIFAD)的高密度发酵融合表达。通过参数控制。发酵液最终OD6 0 0 达 1 2 5 (相当于 35g湿菌体 L) ,表达量占菌体总蛋白 40 %左右 ,含量超过 0 6g L ,并且 90 %呈可溶性而直接具有生物学活性。直链淀粉树脂亲和层析法一步纯化 ,纯度达 90

关键词：破骨细胞形成抑制因子融合蛋白发酵补料-分批培养

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基因芯片技术在脑创伤研究中的应用

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医学综述 2004年第12期10卷 736-739页

作者：蒋平吕军焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

基因芯片(gene chip)是将大量的靶基因片段用点样仪有序地、高密度地(点与点之间的距离一般<500μm)固定在玻璃、硅等固相载体上的一项技术。它将待测样品用荧光染料标记成探针与芯片杂交，杂交后的信号用激光扫描仪检测，计算机分... 详细信息

基因芯片(gene chip)是将大量的靶基因片段用点样仪有序地、高密度地(点与点之间的距离一般<500μm)固定在玻璃、硅等固相载体上的一项技术。它将待测样品用荧光染料标记成探针与芯片杂交，杂交后的信号用激光扫描仪检测，计算机分析检测结果，可获得类似于传统的点杂交的分子杂交数据，比较各组织间靶基因表达谱的差异，以达到快速、高效、高通量及平行性地分析生物信息的目的。

关键词：脑创伤和损伤基因芯片表达谱芯片 mRNA 法医学

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HBV基因疫苗诱导正常及HBV转基因小鼠产生体液免疫应答

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第二军医大学学报 2004年第1期25卷 47-50页

作者：余宏宇陈新龙宋维余永伟张乐之胡以平第二军医大学长征医院病理科上海200003 长海医院烧伤科长征医院贵宾诊疗科长海医院病理科长海医院实验诊断科基础医学部细胞生物学教研室

目的 :用乙型肝炎病毒 (HBV)蛋白基因真核表达载体诱导正常小鼠及 HBV转基因小鼠产生特异性体液免疫应答 ,以探讨其预防及治疗 HBV慢性感染的可行性。方法 :将 HBV S2 .S基因的真核表达载体 p CMV- S2 .S(PS)和相应的空载体 pc D-NA3.0... 详细信息

目的 :用乙型肝炎病毒 (HBV)蛋白基因真核表达载体诱导正常小鼠及 HBV转基因小鼠产生特异性体液免疫应答 ,以探讨其预防及治疗 HBV慢性感染的可行性。方法 :将 HBV S2 .S基因的真核表达载体 p CMV- S2 .S(PS)和相应的空载体 pc D-NA3.0分别免疫正常 C5 7BL/ 6小鼠及同一品系 HBV转基因小鼠 (n=5 )。每只小鼠肌内注射纯化质粒 1 0 0 μg。用 EL ISA方法检测小鼠血清抗 HBs和抗 pre S2效价及 HBV转基因小鼠血清 HBs Ag和 HBe Ag的水平。注射基因疫苗后第 8周 ,活检取转基因小鼠肝脏组织 ,制备石蜡切片并行 H- E染色 ,光镜下观察其病理改变。结果 :PS诱导正常及转基因小鼠产生了抗 HBs及抗pre S2 ,并且抗 pre S2的出现早于抗 HBs约 1～ 2周。PS免疫 8周后 ,转基因小鼠血清 HBs Ag和 HBe Ag为阴性。注射基因疫苗后第 8周病理检查转基因小鼠肝脏组织 ,肝细胞出现程度不同的广泛浊肿和水样变性 ,而相应的对照组无明显改变。免疫前后肝组织内单个核淋巴细胞数量无显著变化。结论 :研究表明 HBV中蛋白基因疫苗能够有效诱导 HBs Ag特异性的体液免疫应答 ,能够清除转基因小鼠血清中的 HBs Ag和 HBe Ag;初步的实验结果为研制治疗

关键词： HBV 基因疫苗转基因小鼠体液免疫免疫应答乙型肝炎病毒

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玄参中苯丙素苷XS-8对兔血小板cAMP和兔血浆中PGI_2/TXA_2的影响

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第二军医大学学报 2004年第8期25卷 920-921页

作者：黄才国李医明贺祥魏善建姜华第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海200433 中国科学院上海药物研究所新药研究国家重点实验室上海201203

玄参属(Scrophularia L.)是玄参科(Scrophulariaceae)的一个大属,世界上共有200种以上,我国约有40种[1].玄参属有许多药材作为民间药物治疗各种疾病[2].我们对玄参的化学成分进行了较为系统的分离,发现其主要成分为环烯醚萜苷和苯丙素苷... 详细信息

玄参属(Scrophularia L.)是玄参科(Scrophulariaceae)的一个大属,世界上共有200种以上,我国约有40种[1].玄参属有许多药材作为民间药物治疗各种疾病[2].我们对玄参的化学成分进行了较为系统的分离,发现其主要成分为环烯醚萜苷和苯丙素苷.药理实验中证实苯丙素苷能抑制血小板聚集和大鼠中性白细胞花生四烯酸(AA)代谢物白三烯(LTB4)的生成[3].本研究在此基础上,进一步探讨苯丙素苷抗血小板聚集的作用机制.

关键词：玄参苯丙素苷 XS-8 血小板 cAMP 血浆 PGI2/TXA2

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可溶性TRAIL蛋白的高密度培养及补料策略研究

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生物工程学报 2004年第3期20卷 408-413页

作者：章越沈亚领夏小霞孙爱友魏东芝周劲松张国钧王梁华焦炳华华东理工大学生物化学研究所生物反应器工程国家重点实验室上海200237 上海恰尔生物技术有限公司上海200336 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

采用分批补料的方法高密度培养重组大肠杆菌C6 0 0 pBV TRAIL制备人可溶性TRAIL蛋白 ,优化发酵工艺 ,探索简单高效的分离纯化方法并测定蛋白生物活性。通过比较几种不同的补料策略 :间歇流加、DO stat、pH stat,摸索了一种流加策略 ,即... 详细信息

采用分批补料的方法高密度培养重组大肠杆菌C6 0 0 pBV TRAIL制备人可溶性TRAIL蛋白 ,优化发酵工艺 ,探索简单高效的分离纯化方法并测定蛋白生物活性。通过比较几种不同的补料策略 :间歇流加、DO stat、pH stat,摸索了一种流加策略 ,即DO stat pH stat组合流加 ,有效的避免了发酵过程中 ,尤其是诱导表达阶段乙酸积累的增加 ,使TRAIL蛋白在高密度培养条件下 ,得到高效表达。菌体密度最终达到 30 0g L(WCW )以上 ,可溶性TRAIL蛋白占菌体总蛋白的 4 2 % ,含量为 1 1g L。在整个发酵过程中 ,乙酸浓度接近于 0 ,且未使用任何特殊手段 ,如纯氧、加压等 ,简化了发酵工艺 ,降低了发酵成本 ,为TRAIL的工业化生产创造了条件。

关键词：重组大肠杆菌分批补料发酵 TRAIL 分离纯化

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疟色素及其与氯喹作用机制相关的研究进展

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国外医学（寄生虫病分册） 2004年第4期31卷 147-150页

作者：许晶朱淮民钱锋第二军医大学军医七年制2001级第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

多种机制参与了疟原虫对氯喹的抗药性。通过对疟色素形成、作用、氯喹抗疟作用以及氯喹抗性产生及与疟色素关系等方面的综述 ,力求对氯喹抗性的产生提出较全面的解释 ,为氯喹抗性机制研究提供参考。

关键词：疟色素氯喹作用机制抗药性疟原虫

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海洋微生物抗肿瘤研究进展

海洋微生物抗肿瘤研究进展

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全国首届海洋生物化学与分子生物学学术会议暨全国第五届海洋生命活性物质与天然生化药物学术研讨会

作者：杨好许强芝焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海 200433

自从美国1967年提出“向海洋寻求药物”的口号，“蓝色药物”引起了各国的重视，短短几十年便有一万多种新化合物被发现，其中两百多种已申请专利，最初研究的焦点主要在海藻和软体动物身上，并且得到了许多极具潜力的先导化合物，但海... 详细信息

自从美国1967年提出“向海洋寻求药物”的口号，“蓝色药物”引起了各国的重视，短短几十年便有一万多种新化合物被发现，其中两百多种已申请专利，最初研究的焦点主要在海藻和软体动物身上，并且得到了许多极具潜力的先导化合物，但海洋动植物资源有限，分离纯化复杂，难以工业化生产等弊端一直是阻碍海洋药物研究进一步开展的棘手问题，而海洋中种类最为多样的海洋微生物以其代谢产物多样和可培养逐渐吸引研究者的目光，尤其在抗肿瘤活性方面。有学者预言最有前途的抗肿瘤药物来自海洋，而海洋微生物在此领域有着巨大的潜力。本文介绍了海洋微生物的多样性和异质性，简述了海洋细菌来源的抗肿瘤活性物质：别单孢菌属、土壤杆菌属、芽饱杆菌属、假单孢菌属等。并对海洋放线菌来源的抗肿瘤活性物质、海洋藻青菌来源的抗肿瘤活性物质进行了分析。研究发现与陆地微生物不同，海洋真菌而并非放线菌成为海洋微生物抗癌药物的主要来源。

关键词：海洋微生物海洋药物软体动物抗肿瘤活性海洋放线菌海洋真菌

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玄参中苯丙素苷对大鼠肝损伤细胞凋亡的影响

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中西医结合肝病杂志 2004年第3期14卷 160-161页

作者：黄才国李医明贺祥魏善建焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海200433 上海药物研究所

目的 :观察玄参中苯丙素苷对大鼠肝损伤细胞凋亡的影响。方法 :采用D 氨基半乳糖 (D Gal)造成大鼠急性肝损伤模型 ,观察玄参中苯丙素苷对此模型肝细胞凋亡及相关基因表达的影响。结果 :玄参中苯丙素苷明显抑制模型肝细胞凋亡 ,上调bcl ... 详细信息

目的 :观察玄参中苯丙素苷对大鼠肝损伤细胞凋亡的影响。方法 :采用D 氨基半乳糖 (D Gal)造成大鼠急性肝损伤模型 ,观察玄参中苯丙素苷对此模型肝细胞凋亡及相关基因表达的影响。结果 :玄参中苯丙素苷明显抑制模型肝细胞凋亡 ,上调bcl 2蛋白表达 ,下调Fas/FasL的表达。结论 :玄参中苯丙素苷抗肝损伤细胞凋亡可能与其调控肝细胞凋亡相关基因有关。

关键词：玄参苯丙素苷大鼠肝损伤细胞凋亡药效学

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HCV结构蛋白重组杆状病毒表达载体的构建

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嘉兴学院学报 2004年第3期16卷 101-103页

作者：李菲朱诗应嘉兴学院生物与化学工程学院浙江嘉兴314001 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

丙型肝炎病毒 ( HCV)结构蛋白的核心蛋白 ( C)和包膜蛋白 2 ( E2 )含有多个 T细胞表位和中和抗体表位 ,可诱导机体产生保护性免疫应答。该实验用 PCR扩增 HCV结构区基因 ,克隆到载体 p Fast Bac1中 ,构建了重组杆状病毒表达载体 p FB1 -... 详细信息

丙型肝炎病毒 ( HCV)结构蛋白的核心蛋白 ( C)和包膜蛋白 2 ( E2 )含有多个 T细胞表位和中和抗体表位 ,可诱导机体产生保护性免疫应答。该实验用 PCR扩增 HCV结构区基因 ,克隆到载体 p Fast Bac1中 ,构建了重组杆状病毒表达载体 p FB1 -CEE,为

关键词：丙型肝炎病毒结构蛋白杆状病毒表达栽体克隆

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噬菌体展示重组人淋巴毒素突变体库及受体亲和筛选

噬菌体展示重组人淋巴毒素突变体库及受体亲和筛选

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第14次全国干扰素及细胞因子学术会议

作者：沈毅珺潘卫许燕王征杨彤谭靖伟吴劲松吴芳曹峰刘彦君第二军医大学基础医学部微生物学教研室(上海) 上海复旦张江生物医药股份有限公司(上海) 第二军医大学基础医学部微生物学教研室(上海) 上海复旦张江生物医药股份有限公司(上海)

淋巴毒素(Lymphotoin,LT)通过TNFR1受体传递凋亡信号,从而发挥抗肿瘤活性.对LT的受体结合区域进行多点随机突变,利用噬菌体展示重组人淋巴毒素(rhLT)R46,S106,L130三点随机突变组合文库和S106~F110区域随机突变体库.噬菌体库与固相比TN... 详细信息

淋巴毒素(Lymphotoin,LT)通过TNFR1受体传递凋亡信号,从而发挥抗肿瘤活性.对LT的受体结合区域进行多点随机突变,利用噬菌体展示重组人淋巴毒素(rhLT)R46,S106,L130三点随机突变组合文库和S106~F110区域随机突变体库.噬菌体库与固相比TNFR1受体进行亲和筛选,富集了能与TNFR1受体结合的rhLT突变体.随机挑选20个单克隆噬菌体进行ELISA受体结合鉴定,其中80﹪的克隆与TNFR1受体特异性结合,25﹪的克隆与TNFR1受体的结合能力高于野生型序列的rhLT.将结合力高的4个突变体克隆于pET32a(+)载体,经过大肠杆菌表达和纯化操作后检测这些突变体蛋白与TNFR1受体的结合活性和对L929细胞的杀伤活性,发现3个克隆的受体结合性质与其展示于噬菌体上时基本吻合,其中C199克隆与TNFR1的结合活性比野生型序列的rhLT提高了近30﹪,且其对L929细胞的杀伤活性提高了近90﹪.应用噬菌体展示技术对淋巴毒素进行体外进化研究的尝试为下一步的蛋白结构和功能研究提供了思路,可成为大分子药物开发的有效工具.

关键词：淋巴毒素随机突变噬菌体展示亲和筛选抗肿瘤活性

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