检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 1996年第3期17卷 216-218页

作者：崔龙曹广文王元和屠岳孟荣贵高军仇小芳吴宗娣第二军医大学长海医院普通外科第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长征医院普通外科

目的：为使自杀基因在大肠癌细胞中特异性表达，以达到靶向基因治疗的目的，首先构建以ＣＥＡ基因转录调控序列驱动的重组逆转录病毒载体。方法：将目的基因片段ＨＳＶ－ｔｋ定向克隆入ｐＵＣ１１８质粒载体中，以相应的内切酶取出合适... 详细信息

目的：为使自杀基因在大肠癌细胞中特异性表达，以达到靶向基因治疗的目的，首先构建以ＣＥＡ基因转录调控序列驱动的重组逆转录病毒载体。方法：将目的基因片段ＨＳＶ－ｔｋ定向克隆入ｐＵＣ１１８质粒载体中，以相应的内切酶取出合适的酶切片段后，与来自ｐＣＥＡ４２４／２ＣＡＴ质粒的ＣＥＡ５＇转录调控序列相连接，克隆入逆转录病毒载体中。结果：经鉴定及筛选，构建成重组逆转录病毒载体Ｇ１ＣＥＡｔｋＮａ。结论：Ｇ１ＣＥＡｔｋＮａ的成功构建，为进一步研究大肠癌组织特异性基因治疗奠定了基础。

关键词：单纯疱疹病毒大肠肿瘤逆转录病毒病毒载体

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小鼠Alb　e／p序列与肝癌细胞核蛋白之间的相互作用

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海军军医大学学报 1996年第4期17卷 354-357页

作者：杨文国曹广文高军吴宗娣谢苏庆崔龙潘欣杜平戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科第二军医大学长海医院消化内科

目的：研究肝癌组织特异性基因治疗的机理。方法：从小鼠肝细胞、肝癌细胞和黑色素瘤细胞中分别提取核蛋白组分和胞浆蛋白，分别与小鼠白蛋白增强子／启动子（Ａｌｂｅ／ｐ）、白蛋白增强子（Ａｌｂｅ）和白蛋白启动子（Ａｌｂｐ）结合... 详细信息

目的：研究肝癌组织特异性基因治疗的机理。方法：从小鼠肝细胞、肝癌细胞和黑色素瘤细胞中分别提取核蛋白组分和胞浆蛋白，分别与小鼠白蛋白增强子／启动子（Ａｌｂｅ／ｐ）、白蛋白增强子（Ａｌｂｅ）和白蛋白启动子（Ａｌｂｐ）结合。结果：Ｂａｎｄ－Ｓｈｉｆｔ试验和竞争试验发现某些肝癌细胞核蛋白组分能与Ａｌｂｅ／ｐ特异结合，其中与Ａｌｂｅ和Ａｌｂｐ特异结合的核蛋白在不同的组分中，而肝癌细胞胞浆蛋白和黑色素瘤细胞核蛋白不能与Ａｌｂｅ／ｐ结合。结论：提示肝癌细胞核中能与Ａｌｂｅ和Ａｌｂｐ作用的核蛋白是应用Ａｌｂｅ／ｐ调控目的基因于肝癌细胞中特异表达的基础。

关键词：肝肿瘤核蛋白白蛋白增强子启动子

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晕船适应与不适应大鼠脑干蛋白质双向电泳图谱的比较与鉴定

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第二军医大学学报 2006年第4期27卷 382-385页

作者：苏波张建鹏冯伟华杜鹏任绪义郭俊生第二军医大学海军医学系军队卫生学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:建立晕船适应及不适应大鼠脑干总蛋白质的双向电泳图谱,鉴定差异表达蛋白,探讨晕船适应的可能机制。方法:30只大鼠根据模拟晕船刺激后异嗜高岭土量的增减分为不晕组(n=10)、晕船适应组(n=12)和不适应组(n=8),另设未接受模拟晕船刺... 详细信息

目的:建立晕船适应及不适应大鼠脑干总蛋白质的双向电泳图谱,鉴定差异表达蛋白,探讨晕船适应的可能机制。方法:30只大鼠根据模拟晕船刺激后异嗜高岭土量的增减分为不晕组(n=10)、晕船适应组(n=12)和不适应组(n=8),另设未接受模拟晕船刺激的正常大鼠作为空白对照组(n=10)。应用双向电泳技术,分离晕船适应组和不适应组大鼠脑干蛋白(n=6),肽指纹图谱鉴定两组间差异表达蛋白质。结果:模拟晕船刺激21 d后,与空白对照组相比,晕船适应组大鼠异嗜高岭土量经历了一个由少到多又逐渐回落的过程,不适应组大鼠异嗜高岭土量则始终维持在一个较高的水平(P<0.01或P<0.05)。获得了9个晕船适应相关蛋白质:硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅰ、硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ、低分子量神经丝蛋白、泛素羧基末端水解酶PGP9.5和谷氨酰胺合成酶上调;碳酸酐酶Ⅱ、磷酸丙糖异构酶Ⅰ、磷酸甘油酸变位酶B和线粒体电压依赖型阴离子通道下调。结论:大鼠对晕船适应后可诱导脑干蛋白质组表达的改变,主要与能量代谢、神经递质调节和氧化应激有关。

关键词：晕动病脑干蛋白质组双向电泳

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汉族人胶质细胞源性神经营养因子前体cDNA的核苷酸序列分析及其功能研究

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第二军医大学学报 2000年第5期21卷 401-405页

作者：陈哲宇黄爱军何成路长林吴祥甫第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433 中国科学院上海生物化学研究所

目的 :对汉族人胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)前体 c DNA进行核苷酸序列分析及功能研究。方法 :通过RT- PCR法扩增汉族人 GDNF前体 c DNA ,利用昆虫杆状病毒表达系统 (BES)表达此前体 c DNA,原代培养中脑多巴胺能神经元对表达产物... 详细信息

目的 :对汉族人胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)前体 c DNA进行核苷酸序列分析及功能研究。方法 :通过RT- PCR法扩增汉族人 GDNF前体 c DNA ,利用昆虫杆状病毒表达系统 (BES)表达此前体 c DNA,原代培养中脑多巴胺能神经元对表达产物进行活性测定。结果 :汉族人 GDNF前体 c DNA为截短的 5 5 5 bp的转录体 ,其在昆虫细胞中的分泌表达产物能促进多巴胺能神经元的存活和分化。结论 :汉族人 GDNF前体 c DNA序列与文献报道的 6 33 bp的序列相比缺失了 78个碱基 ,此 78个碱基的缺失并不影响人

关键词：胶质细胞源性神经营养因子基因克隆 cDNA 序列

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庆大霉素给药间隔与豚鼠耳、肾毒性的关系

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第二军医大学学报 2001年第1期22卷 61-64页

作者：刘皋林盛海峰邓渝林鲍晓梅史秀凤梁振福叶煦亭第二军医大学长征医院药学部上海200003 海军医学研究所神经生理学研究室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室

目的 :研究庆大霉素 (Gen)单剂量和多剂量给药与耳、肾毒性作用之间的相关性。方法 :32只豚鼠随机分成生理盐水对照 (C)组、单剂量 (S)组 (Gen,12 0 m g/ kg,1次 / d)、多剂量 (M)组 (Gen,6 0 m g/ kg,2次 / d)。应用 SC-声刺激器、听... 详细信息

目的 :研究庆大霉素 (Gen)单剂量和多剂量给药与耳、肾毒性作用之间的相关性。方法 :32只豚鼠随机分成生理盐水对照 (C)组、单剂量 (S)组 (Gen,12 0 m g/ kg,1次 / d)、多剂量 (M)组 (Gen,6 0 m g/ kg,2次 / d)。应用 SC-声刺激器、听觉脑干诱发电位 (ABR)检测及对耳蜗、近端肾小管上皮细胞的线粒体、肾小球基底膜等电镜观察 ,研究豚鼠电生理和组织学改变。应用荧光偏振免疫法检测不同时间血液中及实验后期外淋巴液中的药物浓度。结果 :生理测定 (如耳廓反射、ABR)、病理切片和电镜扫描观察表明 :(1)与 C组相比 ,S组和 M组均造成一定程度的耳、肾损伤 ,M组的毒性明显大于 S组 (P<0 .0 5 ) ,但随着用药天数的增加 ,S组动物的毒性逐日增强。 (2 ) S组与 M组动物 10 h后血清 Gen浓度分别为 3.0 4和 3.5μg/ m l,而同一时间测得的外淋巴液中浓度分别高达 2 6 .42和 2 6 .3μg/ ml。结论

关键词：庆大霉素剂量耳毒性肾毒性豚鼠给药间隔

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献血员中TT病毒感染的检测及序列分析

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第二军医大学学报 1999年第9期20卷 605-607,F003页

作者：任浩钱宝华朱分禄倪武戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学长海医院血库第二军医大学长征医院感染科

目的：研究ＡＬＴ正常的献血员中ＴＴＶ（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄｖｉｒｕｓ）的感染情况，探讨ＴＴＶ感染的传播途径和致病性。方法：设计ＴＴＶ保守区域的特异性引物，聚合酶链反应（Ｐ ... 详细信息

目的：研究ＡＬＴ正常的献血员中ＴＴＶ（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄｖｉｒｕｓ）的感染情况，探讨ＴＴＶ感染的传播途径和致病性。方法：设计ＴＴＶ保守区域的特异性引物，聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测１２０例ＡＬＴ正常的献血员，对１例ＴＴＶＤＮＡ阳性标本（ＴＴＶＤ０２６）进行ＰＣＲ产物测序，并与已知ＴＴＶ核苷酸序列比较同源性。结果：１２０例ＡＬＴ正常献血员中有２０例为ＴＴＶＤＮＡ阳性，感染率为１６．７％。同源性分析表明ＴＴＶＤ０２６与ＴＡ２７８，ＧＨ１，ＴＴＶＣＨＮ１和ＴＴＶＣＨＮ２的核苷酸同源性分别为９９％，９９％，９９％和８９％。结论：ＡＬＴ正常的献血员中存在ＴＴＶ的感染；ＴＴＶＤ０２６与ＴＴＶＴＡ２７８，ＧＨ１，ＴＴＶＣＨＮ１和ＴＴＶＣＨＮ２可能属于同一个基因型；输血可能是ＴＴＶ传播的主要途径。

关键词：肝炎病毒 TT病毒序列分析献血员 DNA病毒

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肝癌细胞核蛋白对白蛋白增强子／启动子序列的体外转录调控作用

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第二军医大学学报 1996年第4期17卷 350-353页

作者：曹广文高军谢苏庆杨文国崔龙潘欣杜平戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院消化内科第二军医大学长海医院普通外科

目的：研究肝癌细胞核蛋白调控白蛋白＂持家基因＂转录调控序列对目的基因转录的作用。方法：分别从小鼠肝癌细胞、肝细胞和黑色素瘤细胞中提取核蛋白组分，用于体外启动白蛋白增强子／启动子的转录作用。结果：发现某些肝癌细胞和肝细... 详细信息

目的：研究肝癌细胞核蛋白调控白蛋白＂持家基因＂转录调控序列对目的基因转录的作用。方法：分别从小鼠肝癌细胞、肝细胞和黑色素瘤细胞中提取核蛋白组分，用于体外启动白蛋白增强子／启动子的转录作用。结果：发现某些肝癌细胞和肝细胞核蛋白组分具有明显的转录作用，而细胞浆蛋白和其他肿瘤核蛋白组分没有转录作用，将同一肝癌细胞某些核蛋白组分合并可使转录活性增强。结论：本研究在基因转录调控水平部分解释了应用白蛋白增强子／启动子调控目的基因于肝癌细胞中特异表达的机理。

关键词：肝肿瘤核蛋白转录分析白蛋白增强子启动子

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神经生长因子对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑内ATP酶的影响

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第二军医大学学报 2002年第8期23卷 859-859,867页

作者：黄才国魏善建姜华贾瑞波焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 中国药科大学

缺血缺氧性脑损伤(HIE)在临床上致死率和致残率都很高,是严重威胁新生儿健康的疾病之一,而且病因相当复杂,其中脑内细胞膜酶活性的变化也是造成细胞膜损害的原因之一.神经生长因子(NGF)对损伤神经细胞具有修复作用,对缺血缺氧性脑损伤... 详细信息

缺血缺氧性脑损伤(HIE)在临床上致死率和致残率都很高,是严重威胁新生儿健康的疾病之一,而且病因相当复杂,其中脑内细胞膜酶活性的变化也是造成细胞膜损害的原因之一.神经生长因子(NGF)对损伤神经细胞具有修复作用,对缺血缺氧性脑损伤有一定的治疗作用[1].本文研究NGF对HIE模型大鼠细胞Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性的影响.

关键词：神经生长因子缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑内 ATP酶实验研究

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乙型肝炎病毒preS2蛋白在转基因小鼠肝脏中的表达

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第二军医大学学报 2003年第2期24卷 175-178页

作者：金艳花訾晓渊姚玉成熊俊李建秀苏小平王新民倪文君丛文铭杨康鹃胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 第二军医大学东方肝胆外科医院病理科延边大学医学院生物学教研室延吉133000

目的 :分析乙型肝炎病毒 pre S2蛋白在 3′末端缺失的 pre S/ S基因转基因小鼠肝脏中的分布及其病理学作用。方法 :采用原核显微注射法将质粒 pc DNA3.1- pre S/ St注射入小鼠受精卵雄原核 ,制备转基因小鼠。PCR法在基因组水平筛选 3′... 详细信息

目的 :分析乙型肝炎病毒 pre S2蛋白在 3′末端缺失的 pre S/ S基因转基因小鼠肝脏中的分布及其病理学作用。方法 :采用原核显微注射法将质粒 pc DNA3.1- pre S/ St注射入小鼠受精卵雄原核 ,制备转基因小鼠。PCR法在基因组水平筛选 3′末端缺失的 pre S/ S基因转基因小鼠首建者 (founder)及后代 ;免疫组织化学法在蛋白水平检测 pre S2蛋白在这些小鼠中的表达 ;H- E染色分析转基因小鼠肝组织的病理学变化。结果 :经原核显微注射法将目的片段注射入受精卵雄原核后 ,共出生 15只新生小鼠 ,其中存活 7只 ,经 PCR检测后获得 2只 founder转基因小鼠 ,命名为 C5 7- Tg N (pre S/ St) SMMU。免疫组织化学检测发现转基因小鼠肝细胞质中有 pre S 2蛋白表达 ,H- E染色发现转基因小鼠肝组织中央静脉周围有淋巴细胞聚集。将这 2只转基因小鼠与正常同系异性小鼠交配 ,进行传代培育 ,PCR法筛选阳性转基因小鼠 ,目前已传至 F2 代。结论 :本研究成功建立了稳定遗传 3′末端缺失的 pre S/ S基因并表达 pre S2蛋白的转基因小鼠 C5 7- Tg N((pre S/ St) SMMU,它将是体内研究 3′末端缺失的 pre S/

关键词：乙型肝炎病毒 preS2蛋白转基因小鼠 preS/S基因肝

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假单孢杆菌外毒素基因的克隆及用于裸鼠大肠癌基因治疗

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第二军医大学学报 1998年第2期19卷 106-109页

作者：曹广文戚中田粟山茂树潘欣张晓琴杜平第二军医大学基础医学部微生物学教研室日本奈良医科大学第三内科

目的：建立假单孢杆菌外毒素Ａ（ＰＥＡ）基因的组织特异性抗大肠癌基因疗法。方法：用ＰＣＲ法从绿脓杆菌基因组ＤＮＡ中克隆ＰＥＡⅡ＋Ⅲ区基因，引入Ｋｏｚａｋ序列、终止信号和酶切位点，测序。构建ＰＥＡ基因转录受人癌胚抗原（Ｃ... 详细信息

目的：建立假单孢杆菌外毒素Ａ（ＰＥＡ）基因的组织特异性抗大肠癌基因疗法。方法：用ＰＣＲ法从绿脓杆菌基因组ＤＮＡ中克隆ＰＥＡⅡ＋Ⅲ区基因，引入Ｋｏｚａｋ序列、终止信号和酶切位点，测序。构建ＰＥＡ基因转录受人癌胚抗原（ＣＥＡ）启动子调控的逆转录病毒载体。共转染法体外研究ＰＥＡ基因表达对报告基因表达的特异抑制作用。用ＤＮＡ体内直接转染法于裸鼠体内观察ＰＥＡ基因的抗人类肿瘤作用。结果：所克隆的ＰＥＡ序列与已报道序列基本相同。ＣＥＡ启动子调控的ＰＥＡ基因可在大肠癌细胞中特异性抑制荧光素酶基因表达，在裸鼠体内对人大肠癌模型的直接转染能特异抑制人大肠肿瘤的生长。结论：ＰＥＡⅡ＋Ⅲ区基因作为治疗基因。

关键词：假单孢杆菌外毒素大肠肿瘤基因疗法

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