检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2000年第7期21卷 621-624页

作者：余科炜叶晓健冯红曲伸李家顺路长林武警上海总队医院骨科上海201103 第二军医大学长征医院骨科上海200003 第二军医大学长海医院药学部长海医院内分泌科基础医学部神经生物学教研室

目的 :采用神经电生理检查方法 ,观察逆转录病毒载体介导脑源性神经营养因子 ( BDNF)基因修饰成肌细胞对损伤脊髓的治疗作用。方法 :3 0只 SD大鼠在 T9水平制成脊髓横断损伤模型 ,并随机分为基因细胞组 ( A组 )、成肌细胞组 ( B组 )及... 详细信息

目的 :采用神经电生理检查方法 ,观察逆转录病毒载体介导脑源性神经营养因子 ( BDNF)基因修饰成肌细胞对损伤脊髓的治疗作用。方法 :3 0只 SD大鼠在 T9水平制成脊髓横断损伤模型 ,并随机分为基因细胞组 ( A组 )、成肌细胞组 ( B组 )及损伤对照组 ( C组 ) ,每组 10只大鼠。术后 3个月 ,采用皮质体感诱发电位 ( CSEP)和运动诱发电位 ( MEP)等电生理检测技术 ,观察轴突是否有再生及其神经功能恢复程度。结果 :( 1) A组中 3只大鼠损伤 3个月后出现 CSEP波 ,5只出现 MEP波 ,B,C组动物未发现电生理信号恢复 ;( 2 )重新出现的 CSEP或 MEP信号均较损伤前波幅减低 ,潜伏期延长。结论

关键词：脊髓损伤基因修饰成肌细胞移植电生理

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人血管内皮生长因子裸质粒DNA心肌注射促进缺血心肌侧支循环形成的研究

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临床心血管病杂志 2001年第8期17卷 367-368,372页

作者：陈少萍顾洪边长勇秦永文张国元第二军医大学长海医院心内科上海200433 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室第二军医大学长征医院心内科

目的 :观察人血管内皮生长因子 (h VEGF)裸质粒 DNA直接心肌注射对大鼠急性心肌缺血后侧支循环形成的影响。方法 :建立大鼠左冠状动脉结扎的急性心肌缺血模型 ,取缺血边缘区以先期构建的真核表达质粒 pc DNA3/ h VEGF1 6 5和真核载体 pc... 详细信息

目的 :观察人血管内皮生长因子 (h VEGF)裸质粒 DNA直接心肌注射对大鼠急性心肌缺血后侧支循环形成的影响。方法 :建立大鼠左冠状动脉结扎的急性心肌缺血模型 ,取缺血边缘区以先期构建的真核表达质粒 pc DNA3/ h VEGF1 6 5和真核载体 pc DNA3的 DNA分别多点心肌注射。给药后 4周先行大鼠冠状动脉造影 ,再取材分别行苏木精 -伊红染色、平滑肌肌动蛋白 (SMA)染色和 Northern Blot分析。结果 :给药后 4周冠状动脉造影示治疗组左室造影剂聚集较对照组明显增加 ;SMA染色示治疗组新生血管数目明显多于对照组 ;Northern Blot分析显示治疗组 VEGF m RNA表达较对照组明显增强。结论 :pc DNA3/ h V EGF1 6 5裸质粒 DNA心肌注射能转染心肌细胞并持续表达至少 4周。

关键词：心肌缺血血管内皮生长因子基因治疗侧支循环 DNA hVEGF 裸质粒

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高密度发酵制备重组人可溶性TRAIL

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第二军医大学学报 2002年第2期23卷 132-135页

作者：王梁华朱玉平娄永华周劲松彭玉珍球谊焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 上海恰尔生物技术有限公司

目的 :利用原核重组表达技术 ,完成人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL ,又称凋亡素 2配体 ,Apo- 2 L )的中试。方法 :可溶性 TRAIL编码基因插入改建的 p BV 2 2 0载体 ;在发酵过程中 ,控制溶解氧在 30 %～ 5 0 % ,30℃生长 6... 详细信息

目的 :利用原核重组表达技术 ,完成人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL ,又称凋亡素 2配体 ,Apo- 2 L )的中试。方法 :可溶性 TRAIL编码基因插入改建的 p BV 2 2 0载体 ;在发酵过程中 ,控制溶解氧在 30 %～ 5 0 % ,30℃生长 6 h,4 2℃诱导培养 4 h;菌体上清行金属亲和层析。结果 :发酵液中最终菌体密度 D(6 0 0 )达 8.0 (相当于每升发酵液含 15 g湿菌体 ) ,TRAIL占菌体总蛋白的 4 0 %左右 ,含量超过 0 .6 g/ L。其中 ,所表达的 TRAIL 2 0 %～ 30 %在上清而直接有活性 ,70 %～ 80 %呈包涵体。上清用亲和层析一步使其纯度达 70 %以上 ;包涵体超声破菌后经两次洗涤 ,纯度达到 80 %以上。　结论 :TRAIL

关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体重组蛋白质发酵分批补料重组人可溶性TRAIL

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外参照PCR及其产物酶联杂交定量检测HBV DNA

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第二军医大学学报 2000年第2期21卷 120-123页

作者：缪晓辉戚中田孔宪涛第二军医大学长征医院感染科上海200003 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200003 长征医院实验诊断科

目的 :建立一种敏感、特异和精确的乙型肝炎病毒 (HBV )基因 PCR及其产物的酶联杂交定量分析技术。方法 :(1)常规 PCR法扩增 HBV DNA质粒和血清 HBV DNA,引物 (SP1 ,SP2 )为一对 HBV DNA S区基因特异引物 ,扩增片段长 319bp,SP2 的 5′... 详细信息

目的 :建立一种敏感、特异和精确的乙型肝炎病毒 (HBV )基因 PCR及其产物的酶联杂交定量分析技术。方法 :(1)常规 PCR法扩增 HBV DNA质粒和血清 HBV DNA,引物 (SP1 ,SP2 )为一对 HBV DNA S区基因特异引物 ,扩增片段长 319bp,SP2 的 5′端用生物素修饰。扩增条件经过严格优化组合 ,以最大限度减少非特异片段 ,包括引物二聚体的产生。设定 5个不同梯度的 HBV DNA外参照管 ,制作标准曲线。 (2 )酶联杂交分析 :PCR产物经 10 0℃解链并稀释后 ,与捕获探针 (长 2 0 nt,3′端用氨基修饰 ,借氨基与 DNA- BINDTM反应板结合 )杂交 ;用亲和素 -碱性磷酸酶及相应显色系统检测杂交信号。结果 :目的片段含量较低的 PCR产物 ,在琼脂糖凝胶电泳时未见光带 ,但可被后续的酶联杂交检出 ,故灵敏度可超过普通 PCR定性法。结论 :本定量方法操作相对简单 ,结果数据化 ,不受主观因素干扰 ,灵敏度很高 ,而且省时、省材。

关键词：聚合酶链反应乙型肝炎 HBV DNA

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梭曼诱发惊厥后大鼠脑内兴奋性氨基酸的变化

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第三军医大学学报 2000年第1期22卷 22-25页

作者：景德强陈尔瑜余争平程天民第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038 第二军医大学解剖学教研室上海200433 第三军医大学预防医学系防原医学教研室全军复合伤研究所重庆400038

目的 :对脑内兴奋性氨基酸的变化进行定位研究。方法 :应用Beckman 6300氨基酸分析仪和601黄金系统色谱工作站 ,对梭曼惊厥后不同时相大鼠的新鲜脑组织进行定位检测。结果 :梭曼诱发惊厥后脑内谷氨酸和天门冬氨酸的水平显著降低 ,谷氨... 详细信息

目的 :对脑内兴奋性氨基酸的变化进行定位研究。方法 :应用Beckman 6300氨基酸分析仪和601黄金系统色谱工作站 ,对梭曼惊厥后不同时相大鼠的新鲜脑组织进行定位检测。结果 :梭曼诱发惊厥后脑内谷氨酸和天门冬氨酸的水平显著降低 ,谷氨酸下降最明显的是惊厥30min后的大脑皮质和海马 ,分别是正常组的53.2 %和52.6 % ,小脑的嗅球内谷氨酸水平显著下降 ,天门冬氨酸更易受梭曼中毒的影响 ,惊厥后5、30、90min3个时点测定的6个脑区(纹状体、大脑皮质、海马、中脑、小脑、间脑和嗅球)中均显著下降。结论 :梭曼中毒后脑内谷氨酸和天门冬氨酸水平显著降低 ,递质耗竭是递质活动增加的征象 ,因此 ,谷氨酸和天门冬氨酸递质活动增加可能在梭曼中毒性惊厥的发生和维持中起重要作用。

关键词：梭曼惊厥谷氨酸脑兴奋性氨基酸大鼠

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侧脑室注射生长抑素对大鼠痛阈和电针镇痛作用的影响

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第二军医大学学报 1996年第4期17卷 362-365页

作者：刘玲爱宋朝佑王静明余静林葆城中国人民解放军北京医学高等专科学校生理学教研室上海第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的：观察脑内生长抑素（ＳＳ）对痛阈和针刺镇痛的影响。方法：以钾离子透入引起大鼠甩尾为测痛方法，侧脑室注射生长抑素（ＳＳ）、生长抑素的耗竭剂半胱胺（ＣＳＨ）和抗生长抑素血清（ＡＳＳＳ），电针刺激大鼠足三里。结果：侧脑... 详细信息

目的：观察脑内生长抑素（ＳＳ）对痛阈和针刺镇痛的影响。方法：以钾离子透入引起大鼠甩尾为测痛方法，侧脑室注射生长抑素（ＳＳ）、生长抑素的耗竭剂半胱胺（ＣＳＨ）和抗生长抑素血清（ＡＳＳＳ），电针刺激大鼠足三里。结果：侧脑室注射ＳＳ使大鼠痛阈升高并使电针镇痛的效应增强；侧脑室分别注射ＣＳＨ和ＡＳＳＳ使大鼠痛阈降低并使电针镇痛的效应减弱。结论：无论外源性还是内源性ＳＳ都参与痛觉的调制并在电针镇痛过程中发挥重要的作用。

关键词：生长抑素半胱胺痛阈电针镇痛侧脑室

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原发性肝癌患者肝组织中HCV　RNA和HCV抗原的定位

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第二军医大学学报 1995年第2期16卷 123-126页

作者：崔晓红戚中田宋艳斌潘卫王一丛文铭张秀忠李淋郝连杰吴孟超第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院肝胆外科同济医科大学同济医院临床免疫室

分别用原位杂交（ＩＳＨ）和过氧化物酶与抗过氧化物酶复合物（ＰＡＰ）法检测了７３例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者肝组织切片中的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ和ＨＣＶ抗原（ＨＣＶＡｇ）以及乙型肝炎病毒的表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和核心... 详细信息

分别用原位杂交（ＩＳＨ）和过氧化物酶与抗过氧化物酶复合物（ＰＡＰ）法检测了７３例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者肝组织切片中的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ和ＨＣＶ抗原（ＨＣＶＡｇ）以及乙型肝炎病毒的表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和核心抗原（ＨＢｃＡｇ）。结果显示：ＨＣＶＲＮＡ，ＨＣＶＡｇ，ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的检出率分别为２６．０％，２８．８％，７５．３％和２６．。％；ＨＣＶ阳性的肝细胞多呈散在型分布，可见有水肿变性并伴周围炎细胞浸润，ＨＣＶ染色颗粒既可见于肝细胞浆也可见于细胞核；ＨＣＶ标志物（ＨＣＶＭ）的检出与ＨＢＶ的感染状况无显著相关。提示：ＨＣＶ可在ＨＣＣ患者的肝细胞浆和核中存在并表达，ＨＣＶ感染可能在我国ＨＣＣ的发生中起一定的病原学作用。

关键词：肝肿瘤丙型肝炎病毒原位杂交免疫酶技术 RNA

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刺鼠信号蛋白对自体移植皮片中黑素细胞功能的影响

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第二军医大学学报 2006年第9期27卷 969-972页

作者：薛春雨邢新李蠡张敬德蒋平龚志锦第二军医大学长海医院整形外科上海200433 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 长海医院病理科

目的:通过检测刺鼠信号蛋白对自体移植皮片中黑素细胞功能的影响,进一步认识自体移植皮片过度色素沉着的原因。方法:建立过度色素沉着的自体移植皮片动物模型,皮片下分别注射刺鼠信号蛋白和生理盐水(对照组)。利用RT-PCR方法检测刺鼠信... 详细信息

目的:通过检测刺鼠信号蛋白对自体移植皮片中黑素细胞功能的影响,进一步认识自体移植皮片过度色素沉着的原因。方法:建立过度色素沉着的自体移植皮片动物模型,皮片下分别注射刺鼠信号蛋白和生理盐水(对照组)。利用RT-PCR方法检测刺鼠信号蛋白作用后自体移植皮片(n=12)黑素细胞中酪氨酸酶mRNA的表达,银染-丽春红染色后检测皮片中黑色素的含量,并与对照组(n=13)及正常豚鼠皮肤(n=5)相比较。结果:经刺鼠信号蛋白作用后,皮片中酪氨酸酶mRNA表达和黑素含量均明显减少,与对照组皮片和正常豚鼠皮肤相比其差异具有显著性意义(P<0.01)。结论:刺鼠信号蛋白在自体移植皮片中,能竞争性拮抗α-黑素细胞刺激素的黑素合成作用,使皮片着色能力降低。进一步证明了皮片移植后表皮细胞中α-黑素细胞刺激素的表达上调是皮片呈过度色素沉着的重要原因。

关键词：刺鼠信号蛋白 α-黑素细胞刺激素酪氨酸酶皮肤移植色素沉着过多

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抗人肝癌单克隆抗体在裸鼠移植瘤中的免疫定位

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第二军医大学学报 1995年第2期16卷 127-129页

作者：施乐华吴孟超陈汉陶文照强美玉谢弘王根风王放第二军医大学长海医院肝胆外科第二军医大学基础医学部病理解剖学教研室第二军医大学海军医学系放射医学教研室中科院上海细胞生物学研究所

以１３１Ⅰ标记抗人肝癌单克隆抗体（Ｈｅｐａｍａ－Ⅰ，以下简称［１３１Ⅰ］－Ｈｅｐ）及正常小鼠ＩｇＧ（以下简称［１３１Ⅰ］－ｍＩｇＧ）进行裸鼠人原发性肝癌移植瘤的肿瘤定位显像研究。每鼠从尾静脉注射１．１１×１０７Ｂ... 详细信息

以１３１Ⅰ标记抗人肝癌单克隆抗体（Ｈｅｐａｍａ－Ⅰ，以下简称［１３１Ⅰ］－Ｈｅｐ）及正常小鼠ＩｇＧ（以下简称［１３１Ⅰ］－ｍＩｇＧ）进行裸鼠人原发性肝癌移植瘤的肿瘤定位显像研究。每鼠从尾静脉注射１．１１×１０７Ｂｑ，注入后２４，４８，９６，１６８ｈ行全身γ照相，观察肿瘤摄取标记抗体的能力，并计算生物半衰期，同时定期测定肿瘤与各器官组织的放射性比值（Ｔ／ＮＴ）。结果：［１３１Ⅰ］－Ｈｅｐ能选择性地积聚于肿瘤组织，其摄取率高于［［１３１Ⅰ］－ｍＩｇＧ（Ｐ＜０．０５），Ｔ／ＮＴ值在注入后９６ｈ最高，［１３１Ⅰ］－Ｈｅｐ的体内存留时间明显长于［１３１Ⅰ］－ｍＩｇＧ。提示Ｈｅｐａｍａ－Ⅰ在裸鼠体内对人肝癌细胞具有较高的亲和力，是一种有用的导向载体。

关键词：单克隆抗体肝肿瘤放射性核素成像

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表达红色荧光蛋白DsRed报告基因的逆转录病毒载体的构建和在肝干细胞体内示踪中的应用

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第二军医大学学报 2005年第3期26卷 240-242页

作者：李文林苏娟陶欣荣 Joseph T Lau 胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室 The Department of Molecular and Cellular Biology Roswell Park Cancer InstituteElm and Carlton StreetsBuffaloNY 14263USA

目的:建立表达红色荧光蛋白DsRed的逆转录病毒载体,并对肝原始细胞进行体外标记和体内示踪研究。方法:将pDsRed1 1载体中的DsRed片段克隆到逆转录病毒载体pLNCG C1中构建了pLNCG DsRed载体。将该载体导入Phoenix包装细胞,进而采用乒乓... 详细信息

目的:建立表达红色荧光蛋白DsRed的逆转录病毒载体,并对肝原始细胞进行体外标记和体内示踪研究。方法:将pDsRed1 1载体中的DsRed片段克隆到逆转录病毒载体pLNCG C1中构建了pLNCG DsRed载体。将该载体导入Phoenix包装细胞,进而采用乒乓转染的方法感染包装细胞PT67,获得高滴度稳定产毒的PT67 细胞系。结果:利用PT67 细胞系产生的病毒上清可以高效的感染体外培养的肝原始细胞系。将这些DsRed标记的肝原始细胞移植到小鼠损伤肝脏中,4周后可以在再生肝脏中清晰地观察到具有红色荧光的外源细胞。结论:由于肝脏组织没有红色自发荧光,用DsRed标记肝原始细胞进行肝内示踪时背景干扰小。

关键词：红色荧光蛋白基因.报告逆转录病毒载体肝干细胞

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