检索结果-内蒙古大学图书馆

乙型肝炎转基因小鼠品系C57-TgN(HBV adr2.0)SMMU的生物学特征

第二军医大学学报 2002年第11期23卷 1179-1183页

作者：訾晓渊姚玉成熊俊金艳花叶煦亭李建秀刘红朱海英王新民倪文君胡以平余宏宇丛文铭第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 长征医院病理科东方肝胆外科医院病理科

目的:评价乙肝转基因小鼠品系C57-TgN(HBV adr2.O)SMMU生物学特征的稳定性。方法:以F5代乙肝转基因小鼠C57-TgN(HBV adr2.O)SMMU为研究对象,采用基因组DNA PCR、血清ELISA检测、Western印迹分析、免疫组织化学、血清DNA PCR、透射电镜和... 详细信息

目的:评价乙肝转基因小鼠品系C57-TgN(HBV adr2.O)SMMU生物学特征的稳定性。方法:以F5代乙肝转基因小鼠C57-TgN(HBV adr2.O)SMMU为研究对象,采用基因组DNA PCR、血清ELISA检测、Western印迹分析、免疫组织化学、血清DNA PCR、透射电镜和H-E染色的方法分析HBV基因在转基因小鼠中的整合、表达、复制和组织学变化。结果:F1代乙肝转基因小鼠基因组中稳定整合有HBV基因,肝组织中可检测到HBsAg、HBcAg和X蛋白3种病毒蛋白,血清中HB-sAg和HBeAg的表达率分别为19.54％和3.39％,且在血清和肝组织中存在病毒DNA和病毒样颗粒;长期的病毒DNA整合、表达和复制可以引起转基因小鼠肝、肺等组织的病理性损伤。结论:乙肝转基因小鼠品系C57-TgN(HBV adr2.O:)SMMU具有基因组中稳定整合病毒DNA、血清和肝组织中有病毒蛋白表达和病毒复制的特征,并具有一定的组织学变化,作为生物医药研究的实验动物模型具有推广应用价值。

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠免疫组织化学病理学

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三叉神经痛患者血液P物质及其临床意义

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第二军医大学学报 2000年第1期21卷 81-83页

作者：赵云富姜晓钟胡世辉刘渊宋朝佑第二军医大学长征医院口腔科上海200003 湖北省宜昌市第一人民医院口腔科第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的：观察三叉神经痛发作时局部是否有Ｐ物质参与，加深对三叉神经痛发病机制的认识。方法：三叉神经痛患者１６例，正常自愿者１０名，用放射免疫测定法检测疼痛发作时患侧颈外静脉血、肘静脉血及术后患侧颈外静脉血中Ｐ物质含量，... 详细信息

目的：观察三叉神经痛发作时局部是否有Ｐ物质参与，加深对三叉神经痛发病机制的认识。方法：三叉神经痛患者１６例，正常自愿者１０名，用放射免疫测定法检测疼痛发作时患侧颈外静脉血、肘静脉血及术后患侧颈外静脉血中Ｐ物质含量，正常自愿者颈外静脉血中Ｐ物质的含量作为正常对照。结果：疼痛发作时患侧颈外静脉血中的Ｐ物质含量明显高于患者肘静脉血、术后患侧颈外静脉血及正常自愿者颈外静脉血中的Ｐ物质含量。结论：三叉神经痛发作时局部确有Ｐ物质参与。

关键词：三叉神经痛 P物质发病机制

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白蛋白/细胞角蛋白19启动子调控的红绿双色荧光蛋白报告载体的构建及其在肝干细胞分化研究中的应用

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第二军医大学学报 2005年第3期26卷 237-239页

作者：李文林苏娟陶欣荣 Joseph T Lau 胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室 The Department of Molecular and Cellular Biology Roswell Park Cancer InstituteElm and Carlton StreetsBuffaloNY 14263USA

目的:利用报告基因监测肝干细胞的分化走向。方法:通过PCR从小鼠基因组中克隆了细胞角蛋白19 启动子片段,构建了细胞角蛋白19启动子调控的绿色荧光蛋白(pCK19 EGFP)和白蛋白启动子调控的红色荧光蛋白报告载体(pAlbD sRed),并利用报告载... 详细信息

目的:利用报告基因监测肝干细胞的分化走向。方法:通过PCR从小鼠基因组中克隆了细胞角蛋白19 启动子片段,构建了细胞角蛋白19启动子调控的绿色荧光蛋白(pCK19 EGFP)和白蛋白启动子调控的红色荧光蛋白报告载体(pAlbD sRed),并利用报告载体标记的肝干细胞(liver epithelial progenitor cells,LEPCs)观察了悬浮培养时LEPCs的分化去向。结果:白蛋白/细胞角蛋白19启动子调控的红绿双色荧光蛋白报告载体可以实时地显示肝原始细胞在不同的诱导环境下的分化走向。结论:双色荧光蛋白报告载体的成功构建为研究LEPCs的分化、筛选可诱导LEPCs定向分化的分子提供了便捷的工具。

关键词：肝干细胞细胞分化白蛋白细胞角蛋白19 启动子红色荧光蛋白绿色荧光蛋白基因.报告

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IL－2和TNF特异性基因治疗后肝癌组织病理及免疫组化分析

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第二军医大学学报 1996年第6期17卷 509-512页

作者：曹广文余永伟沈茜杜平杨文国孔宪涛戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院病理诊断科第二军医大学长海医院实验诊断科第二军医大学长征医院临床免疫中心

目的：探讨ＴＮＦ和ＩＬ－２基因治疗后实验性肝癌瘤体内细胞水平的改变。方法：应用病理检查和免疫组化分析对ＩＬ－２和ＴＮＦ转基因治疗后的实验性肝癌病理改变及免疫细胞浸润进行分析。结果：发现受白蛋白增强子／启动子转录调控的... 详细信息

目的：探讨ＴＮＦ和ＩＬ－２基因治疗后实验性肝癌瘤体内细胞水平的改变。方法：应用病理检查和免疫组化分析对ＩＬ－２和ＴＮＦ转基因治疗后的实验性肝癌病理改变及免疫细胞浸润进行分析。结果：发现受白蛋白增强子／启动子转录调控的ＩＬ－２和ＴＮＦ基因在原位感染实验性肝癌可使肝癌逐渐缩小。ＴＮＦ基因可使肝癌组织内广泛出血坏死，Ｍａｃ－１＋炎细胞浸润为主；ＩＬ－２基因可使肝癌组织内大片坏死，Ｌｙｔ２＋炎细胞浸润，两组治疗后期均出现明显的纤维化。结论：ＩＬ－２或ＴＮＦ肝癌特异性原位基因治疗介导免疫抗肿瘤反应，但机理有所不同。

关键词：肝肿瘤基因治疗肿瘤坏死因子白细胞介素2

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丹参总酚酸抑制大鼠肾间质纤维化的初步观察

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第二军医大学学报 2006年第12期27卷 1295-1298页

作者：尚雁君黄才国蒋山好朱大元魏善建焦炳华李锴男张建荣第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海200433 中国科学院上海药物研究所上海201203 第四军医大学基础医学部病理学教研室西安710033 第二军医大学长海医院实验诊断科上海200433

目的观察丹参总酚酸对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响。方法将40只健康、雄性SD大鼠随机分为4组分别为UUO组、假手术组(SOR)、阳性对照依那普利(ACEI)组和丹参总酚酸样品(TSA)组,术前分别给UUO组和SOR组灌生理盐水,ACEI组... 详细信息

目的观察丹参总酚酸对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响。方法将40只健康、雄性SD大鼠随机分为4组分别为UUO组、假手术组(SOR)、阳性对照依那普利(ACEI)组和丹参总酚酸样品(TSA)组,术前分别给UUO组和SOR组灌生理盐水,ACEI组和丹参总酚酸组分别灌胃ACEI[6mg/(kg·d)]和丹参总酚酸[20mg/(kg·d)],连续8d。术后第7天分别处死各组大鼠用免疫组织化学方法测定TGF-β1的表达情况。行H-E和Masson染色,动态观察肾间质病理学改变。结果丹参总酚酸组和ACEI组TGF-β1的表达量与模型组(0.22±0.06)比较有明显的下降(P<0.05),结果分别是1.38±0.26和1.38±0.26。丹参总酚酸能显著减少UUO大鼠肾小管间质TGF-β1的表达,减轻胶原在肾间质的沉积,改善了肾脏病理改变。结论丹参总酚酸对UUO所致的大鼠肾脏纤维化的形成有明显的抑制作用,其作用可能跟降低TGF-β1的表达有关。

关键词：丹参总酚酸肾间质纤维化转化生长因子β1

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五种植物精油熏杀致倦库蚊的效果

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第二军医大学学报 2004年第10期25卷 1094-1096页

作者：杨频马雅军廉振民第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433 延安大学生命科学学院延安716000

目的 :考察菊科植物、芸香科植物、椒样薄荷、留兰香和香茅共 5种植物的精油对致倦库蚊的熏蒸杀虫效果。方法 :以三角瓶密闭熏蒸法测定 5种精油对致倦库蚊的熏杀效果。结果 :持续熏蒸不同时间后 ,5种精油对致倦库蚊的毒力有差异。在熏... 详细信息

目的 :考察菊科植物、芸香科植物、椒样薄荷、留兰香和香茅共 5种植物的精油对致倦库蚊的熏蒸杀虫效果。方法 :以三角瓶密闭熏蒸法测定 5种精油对致倦库蚊的熏杀效果。结果 :持续熏蒸不同时间后 ,5种精油对致倦库蚊的毒力有差异。在熏蒸 0 .5、4和 2 4 h后芸香科植物精油均毒力最大 ,其 L C50 分别为 0 .0 13、0 .0 5 5、0 .0 5 8。而菊科植物精油毒力最小 ,其 3个时间段的 L C50 分别为 0 .94 8、0 .4 2 7、1.711。用供试植物精油的 L C95剂量 (0 .5 h)熏蒸处理致倦库蚊 ,显示留兰香油的熏杀速度最快 ,其 L T50 值为 6 .0 87m in,而香茅油的最慢 ,为 2 1.14 3m in。结论 :5种植物精油对致倦库蚊均具有一定的熏杀活性 ,以芸香科植物精油和留兰香油的杀虫效果较好 ,为其现场实验提供了基础资料。

关键词：植物精油致倦库蚊熏蒸杀虫力芸香科植物油留兰香油

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东海洋山港沿岸土壤、海水样本中Ⅰ型PKS基因的初步筛选鉴定与功能分析

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微生物学通报 2008年第9期35卷 1359-1366页

作者：董晓毅王梁华孙铭娟宗英焦豫良焦炳华中国人民解放军第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

为考察土壤和海水中Ⅰ型聚酮合酶(polyketide synthase,PKS)基因的多样性和差异,本研究自行设计了一套针对PKS基因中酮缩合酶(ketosynthase,KS)片段的简并引物,使用PCR方法直接克隆东海洋山港沿岸土壤和海水DNA样本中的KS片段,去除重复... 详细信息

为考察土壤和海水中Ⅰ型聚酮合酶(polyketide synthase,PKS)基因的多样性和差异,本研究自行设计了一套针对PKS基因中酮缩合酶(ketosynthase,KS)片段的简并引物,使用PCR方法直接克隆东海洋山港沿岸土壤和海水DNA样本中的KS片段,去除重复序列后,共获得了23条不同的KS片段(长度为630bp^690bp),提交GenBank皆获登录号,其中19条来自土壤(DQ640993、DQ640997、DQ641926、DQ641927、DQ673137~DQ673151),4条来自海水(DQ673151,EF554859~EF554861),由核苷酸序列推断出的氨基酸序列保守,与GenBank中已知KS基因片段的相似度在45%到85%之间,种系发生分析表明,其中14条KS片段(来源于海水的KS片段皆在其中)应来源于典型的KS群,而剩余9条则来源于杂合的PKS/NRPS(Non-ribosomal peptide synthetase,非核糖体多肽合成酶)群。另外,几条KS基因特征明显,可用于进一步的研究。

关键词：未获得培养微生物聚酮合酶酮缩合酶土壤海水

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戊型肝炎病毒合成肽决定簇检测抗HEV的研究

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第二军医大学学报 1995年第2期16卷 110-114页

作者：潘卫俞超戚中田崔大敷宋燕斌崔恒苒周国明王锦红黄维德第二军医大学基础医学部微生物学教研室中国科学院上海生物化学研究所

利用３段分别代表ＨＥＶ３个基因区的合成多肽，研制成ＥＬＩＳＡ抗ＨＥＶ检测试剂。此试剂对ＩｇＧ及ＩｇＭ检出阳性率在急性ＮＡＮＢＮＣ肝炎患者中分别为５４．１％（５３／９８）和３３．７％（３３／９８），在其他疾病患者及正常... 详细信息

利用３段分别代表ＨＥＶ３个基因区的合成多肽，研制成ＥＬＩＳＡ抗ＨＥＶ检测试剂。此试剂对ＩｇＧ及ＩｇＭ检出阳性率在急性ＮＡＮＢＮＣ肝炎患者中分别为５４．１％（５３／９８）和３３．７％（３３／９８），在其他疾病患者及正常献血员中则分别为２．７％～６．３％和０％～２．６％。与Ｇｅｎｅｌａｂｓ重组抗原生产的检测试剂比较，两者有很好的一致性，其阳性符合率为９０．０％，阴性符合率为９８．５％，总符合率为９７．４％。对于急性戊型肝炎患者动态监测，７～２０ｄ内大部分患者能检出抗ＨＥＶＩｇＧ或ＩｇＭ。这些结果表明，利用ＨＥＶ合成肽能特异地检测戊肝病毒感染者的抗ＨＥＶＩｇＧ及ＩｇＭ，有助于临床诊断及流行病学调查。

关键词：戊型肝炎病毒合成多肽 ELISA

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应用加速器质谱技术检测体外细胞中^(14)C标记的苯并芘-DNA加合物

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第二军医大学学报 2002年第4期23卷 454-455页

作者：游冬青陈杞潘真韩玲蔡建明邹鲁峰孙红芳王海芳刘元方第二军医大学海军医学系放射医学教研室上海200433 基础医学部生物化学与分子生物学教研室北京大学技术物理系

DNA加合物是亲电化合物与DNA形成共价相联的结合物。在机体中被加合物修饰的DNA若无法修复和被错误修复，就有可能导致一系列细胞生物学行为的改变，并最终导致体细胞突变或恶性变。

关键词：加速器质谱仪 DNA加合物苯并花化学致癌机制体外细胞 ^14C标记

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庚型肝炎病毒NS3蛋白在杆状病毒载体中的表达及其抗原性研究

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第二军医大学学报 2000年第9期21卷 849-852页

作者：朱分禄任浩朱诗应谢南潘卫董辉戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 南昌市传染病医院中心实验室

目的 :利用 Bac- to- Bac HT杆状病毒系统在 Sf9昆虫细胞中表达庚型肝炎病毒 (HGV) NS3蛋白 ,并对表达产物的免疫原性进行研究。方法 :将 HGV NS3基因片段定向克隆至转座载体 p Fast Bac HTa,转化 DH10 Bac感受态细胞 ,37℃振荡培养 4... 详细信息

目的 :利用 Bac- to- Bac HT杆状病毒系统在 Sf9昆虫细胞中表达庚型肝炎病毒 (HGV) NS3蛋白 ,并对表达产物的免疫原性进行研究。方法 :将 HGV NS3基因片段定向克隆至转座载体 p Fast Bac HTa,转化 DH10 Bac感受态细胞 ,37℃振荡培养 4h使发生转座 ,用抗生素平皿筛选重组 bacmid。脂质体介导转染 Sf9昆虫细胞 ,待细胞形态明显改变后收获细胞和培养上清液 ,将上清液再次感染 Sf9细胞以大量表达 HGV NS3重组蛋白。利用 SDS- PAGE和 Western- blotting方法分析重组蛋白。结果 :SDS- PAGE分析发现表达产物在 Mr43810处有一条明显的蛋白带 ,占细胞总蛋白量的 30 %以上 ;应用 Ni- NTA亲和层析柱获得了纯化的重组蛋白 ;Western- blotting显示该抗原可与 HGV RNA阳性血清发生特异反应。结论 :获得了昆虫细胞内表达的 HGV NS3重组蛋白 ,并证明该蛋白有可能用于 HGV感染的抗体检测。

关键词：免疫原性杆状病毒载体庚型肝炎 NS3蛋白

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