检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2001年第1期22卷 36-39页

作者：贺祥王路潘卫曹明媚芮耀诚戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

目的 :将从人胎肝组织克隆的血管生成抑素 endostatin基因进行原核表达、纯化 ,检测重组 endostatin的生物学活性。方法 :利用原核表达载体 p BV 2 2 0在大肠杆菌 DH5α中表达 endostatin,利用肝素 Sepharose亲和层析及 Sephacryl S- 2... 详细信息

目的 :将从人胎肝组织克隆的血管生成抑素 endostatin基因进行原核表达、纯化 ,检测重组 endostatin的生物学活性。方法 :利用原核表达载体 p BV 2 2 0在大肠杆菌 DH5α中表达 endostatin,利用肝素 Sepharose亲和层析及 Sephacryl S- 2 0 0分子筛纯化 ;通过体外内皮细胞 (ECV30 4)增殖实验及体内鸡胚尿囊膜 (CAM)新生血管实验检测其抑制活性。结果 :Endo-statin在 DH5α中的表达率为 2 8.5 % ,纯化后纯度可达 90 .5 %。 Endostatin可明显抑制体外培养的内皮细胞增殖 ,IC5 0 为 72μg/ m l;2 0μg/ ml时使细胞于 48h发生明显凋亡 ;2 0 0μg/ ml的 endostatin可使 CAM新生血管化率下降 30 %。结论 :研究结果表明 endostatin对内皮细胞具有明显抑制作用。

关键词：血管生成抑素基因表达内皮细胞生物学效应 ENDOSTAIN 胶原蛋白

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四环素调控白喉毒素基因的重组逆转录病毒载体的构建

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第二军医大学学报 2001年第z1期22卷 89-90页

作者：李玉光赵立军李强曹广文杨淑英陈秋莉潘卫戚中田刘忠令山东省济宁医学院附属医院呼吸内科济宁272129 第二军医大学长海医院呼吸内科第二军医大学长海医院呼吸内科第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学长海医院呼吸内科

　　将毒素基因导入肿瘤细胞内是肿瘤基因治疗一个较有前景的手段[1].白喉毒素(diphtheria toxin,DT)是由白喉杆菌分泌的一种单链多肽毒素,大多数哺乳类细胞均存在这种毒素的受体,其A片段(DTA)毒力特别强,它能催化不可逆转的ADP核糖酰基... 详细信息

　　将毒素基因导入肿瘤细胞内是肿瘤基因治疗一个较有前景的手段[1].白喉毒素(diphtheria toxin,DT)是由白喉杆菌分泌的一种单链多肽毒素,大多数哺乳类细胞均存在这种毒素的受体,其A片段(DTA)毒力特别强,它能催化不可逆转的ADP核糖酰基化,使肽链延长因子Ⅱ失活,从而抑制宿主细胞蛋白合成[2].Gossen等[3]提出了可调控型高表达系统(Tet系统),这为毒素基因治疗肿瘤开辟了新途径.Tet系统可分为 Tet-On和Tet-Off系统,前者的基因表达是在四环素加入后激活,而后者则是在四环素浓度逐渐降低的情况下激活.我们构建携带四环素系统调控的DTA基因的逆转录病毒载体,为进一步探讨肺癌的基因治疗奠定基础.……

关键词：白喉毒素四环素系统肺癌逆转录病毒载体

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人胰高血糖素样肽-1 cDNA的克隆与表达

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第二军医大学学报 2001年第4期22卷 316-318页

作者：张志珍毛积芳窦鸿杨生生第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的 :克隆人胰高血糖素样肽 - 1(h GL P- 1) c DNA,构建原核表达质粒 p GEX- 4T- 3/ h GL P- 1c DNA,并诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶 - h GL P- 1(GST- h GL P- 1)融合蛋白。方法 :采用亚磷酸二酯法合成 6个 h GL P- 1c DNA的寡核苷酸片... 详细信息

目的 :克隆人胰高血糖素样肽 - 1(h GL P- 1) c DNA,构建原核表达质粒 p GEX- 4T- 3/ h GL P- 1c DNA,并诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶 - h GL P- 1(GST- h GL P- 1)融合蛋白。方法 :采用亚磷酸二酯法合成 6个 h GL P- 1c DNA的寡核苷酸片段 ,拼接成完整的 h GL P- 1c DNA ,克隆至 p BS SK(+ / - )载体中 ,经双酶切鉴定和测序后把 h GL P- 1c DNA定向插入融合基因表达载体 p GEX- 4T- 3的多克隆位点上 ,构建重组质粒 p GEX- 4T- 3/ h GL P- 1c DNA,并转化大肠杆菌 TG1。结果 :经限制性内切酶Bam H 、Xho 酶切和电泳 ,证明 h GL P- 1c DNA已插入到 p GEX- 4T- 3中并诱导表达出融合蛋白。结论 :成功诱导表达出融合蛋白 GST- h GL P- 1,为进一步获得大量可供实验研究和临床应用的重组 h GL P- 1创造条件。

关键词：胰高血糖素样肽-1 克隆分子基因表达糖尿病 cDNA

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负极性聚四氟乙烯驻极体对成纤维细胞凋亡的影响

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第二军医大学学报 2001年第5期22卷 409-411页

作者：江键宋诚荣崔黎丽王小平方影李莉叶熙亭第二军医大学基础医学部数理教研室上海200433 药学院无机化学教研室长征医院临床实验科基础医学部细胞生物学教研室

目的 :研究负电晕充电的聚四氟乙烯 (PTFE)驻极体对成纤维细胞凋亡的影响及其调控机制。方法 :选用 - 30 0、- 5 0 0和 - 10 0 0 V PTFE驻极体作用于成纤维细胞 2 4、48和 72 h,利用流式细胞仪和透射电子显微镜研究负极性驻极体对成纤... 详细信息

目的 :研究负电晕充电的聚四氟乙烯 (PTFE)驻极体对成纤维细胞凋亡的影响及其调控机制。方法 :选用 - 30 0、- 5 0 0和 - 10 0 0 V PTFE驻极体作用于成纤维细胞 2 4、48和 72 h,利用流式细胞仪和透射电子显微镜研究负极性驻极体对成纤维细胞凋亡的影响。结果 :- 30 0、- 5 0 0和 - 10 0 0 V驻极体作用成纤维细胞 2 4、48和 72 h以后 ,与对照组相比 ,成纤维细胞的凋亡量从 0 .5 %增至 10 % (部分可达 15 % ) ;驻极体作用成纤维细胞 48～ 72 h,出现细胞凋亡特有的形态学特征 ,即 :细胞异染色质边集 ,细胞裂解 ,可见凋亡小体。驻极体诱导成纤维细胞凋亡的效应与作用时间和场强呈正相关性 (P<0 .0 5 )。结论 :负极性驻极体有促进成纤维细胞凋亡的作用。

关键词：驻极体成纤维细胞细胞凋亡负极性聚四氟乙烯

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不同缺铁期大鼠耳蜗肌动蛋白的含量及分布

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第二军医大学学报 2001年第4期22卷 334-336页

作者：袁军孙爱华王锦玲樊荣焦西英林顺涨第二军医大学长征医院耳鼻咽喉科上海200003 第四军医大学西京医院耳鼻咽喉科基础医学部病原生物学教研室基础医学部全军神经生物学研究所

目的 :观察不同缺铁饲养期对大鼠耳蜗肌动蛋白含量及分布的影响 ,探讨铁缺乏致聋的发病机制。方法 :应用 SDS-PAGE蛋白电泳、双波长薄层扫描分析、免疫组织化学以及听性脑干诱发电位检测 ,观察比较铁缺乏 8周、12周的大鼠及正常大鼠耳... 详细信息

目的 :观察不同缺铁饲养期对大鼠耳蜗肌动蛋白含量及分布的影响 ,探讨铁缺乏致聋的发病机制。方法 :应用 SDS-PAGE蛋白电泳、双波长薄层扫描分析、免疫组织化学以及听性脑干诱发电位检测 ,观察比较铁缺乏 8周、12周的大鼠及正常大鼠耳蜗肌动蛋白含量与分布的变化。结果 :与正常对照大鼠比较 ,铁缺乏引起的感音神经性聋大鼠耳蜗肌动蛋白相对含量明显下降 (P<0 .0 1) ,免疫组化反应减弱 ;但不同缺铁期间耳聋大鼠耳蜗肌动蛋白变化比较无显著性差异 (P>0 .0 5 )。结论 :耳蜗内肌动蛋白相对含量减少和 (或 )免疫组化反应减弱与铁缺乏致聋存在密切关系 ;缺铁时间长短对大鼠耳蜗肌动蛋白含量及免疫组化反应无明显影响。

关键词：铁缺乏症耳聋耳蜗肌动蛋白类大鼠

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庆大霉素给药间隔与豚鼠耳、肾毒性的关系

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第二军医大学学报 2001年第1期22卷 61-64页

作者：刘皋林盛海峰邓渝林鲍晓梅史秀凤梁振福叶煦亭第二军医大学长征医院药学部上海200003 海军医学研究所神经生理学研究室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室

目的 :研究庆大霉素 (Gen)单剂量和多剂量给药与耳、肾毒性作用之间的相关性。方法 :32只豚鼠随机分成生理盐水对照 (C)组、单剂量 (S)组 (Gen,12 0 m g/ kg,1次 / d)、多剂量 (M)组 (Gen,6 0 m g/ kg,2次 / d)。应用 SC-声刺激器、听... 详细信息

目的 :研究庆大霉素 (Gen)单剂量和多剂量给药与耳、肾毒性作用之间的相关性。方法 :32只豚鼠随机分成生理盐水对照 (C)组、单剂量 (S)组 (Gen,12 0 m g/ kg,1次 / d)、多剂量 (M)组 (Gen,6 0 m g/ kg,2次 / d)。应用 SC-声刺激器、听觉脑干诱发电位 (ABR)检测及对耳蜗、近端肾小管上皮细胞的线粒体、肾小球基底膜等电镜观察 ,研究豚鼠电生理和组织学改变。应用荧光偏振免疫法检测不同时间血液中及实验后期外淋巴液中的药物浓度。结果 :生理测定 (如耳廓反射、ABR)、病理切片和电镜扫描观察表明 :(1)与 C组相比 ,S组和 M组均造成一定程度的耳、肾损伤 ,M组的毒性明显大于 S组 (P<0 .0 5 ) ,但随着用药天数的增加 ,S组动物的毒性逐日增强。 (2 ) S组与 M组动物 10 h后血清 Gen浓度分别为 3.0 4和 3.5μg/ m l,而同一时间测得的外淋巴液中浓度分别高达 2 6 .42和 2 6 .3μg/ ml。结论

关键词：庆大霉素剂量耳毒性肾毒性豚鼠给药间隔

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乙肝病毒adr型基因疫苗诱导小鼠体液免疫应答

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第二军医大学学报 2001年第9期22卷 891-893页

作者：景洪标余宏宇戴益民姚玉成第二军医大学长海医院病理科病理学教研室上海200433 第二军医大学长征医院病理科第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室

目的 :构建乙肝病毒 adr型基因疫苗 p CMVS2 - S,观察其免疫小鼠的特异性体液免疫应答。方法 :将构建的乙肝病毒基因疫苗注射于 C5 7BL/ 6小鼠胫骨前肌内 ,运用 EL ISA检测不同时间小鼠血清中抗 HBs抗体。结果 :注射基因疫苗 1周后 ,血... 详细信息

目的 :构建乙肝病毒 adr型基因疫苗 p CMVS2 - S,观察其免疫小鼠的特异性体液免疫应答。方法 :将构建的乙肝病毒基因疫苗注射于 C5 7BL/ 6小鼠胫骨前肌内 ,运用 EL ISA检测不同时间小鼠血清中抗 HBs抗体。结果 :注射基因疫苗 1周后 ,血清中抗 HBs抗体转阳 ,1个月后抗体达到高峰 ,并以高水平维持至少 2个月。结论 :基因疫苗 p CMVS2 - S能诱导 C5 7BL/ 6小鼠产生较好的体液免疫应答。

关键词：乙型肝炎病毒 adr型基因疫苗体液免疫应答小鼠

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人血管内皮生长因子裸质粒DNA心肌注射促进缺血心肌侧支循环形成的研究

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临床心血管病杂志 2001年第8期17卷 367-368,372页

作者：陈少萍顾洪边长勇秦永文张国元第二军医大学长海医院心内科上海200433 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室第二军医大学长征医院心内科

目的 :观察人血管内皮生长因子 (h VEGF)裸质粒 DNA直接心肌注射对大鼠急性心肌缺血后侧支循环形成的影响。方法 :建立大鼠左冠状动脉结扎的急性心肌缺血模型 ,取缺血边缘区以先期构建的真核表达质粒 pc DNA3/ h VEGF1 6 5和真核载体 pc... 详细信息

目的 :观察人血管内皮生长因子 (h VEGF)裸质粒 DNA直接心肌注射对大鼠急性心肌缺血后侧支循环形成的影响。方法 :建立大鼠左冠状动脉结扎的急性心肌缺血模型 ,取缺血边缘区以先期构建的真核表达质粒 pc DNA3/ h VEGF1 6 5和真核载体 pc DNA3的 DNA分别多点心肌注射。给药后 4周先行大鼠冠状动脉造影 ,再取材分别行苏木精 -伊红染色、平滑肌肌动蛋白 (SMA)染色和 Northern Blot分析。结果 :给药后 4周冠状动脉造影示治疗组左室造影剂聚集较对照组明显增加 ;SMA染色示治疗组新生血管数目明显多于对照组 ;Northern Blot分析显示治疗组 VEGF m RNA表达较对照组明显增强。结论 :pc DNA3/ h V EGF1 6 5裸质粒 DNA心肌注射能转染心肌细胞并持续表达至少 4周。

关键词：心肌缺血血管内皮生长因子基因治疗侧支循环 DNA hVEGF 裸质粒

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警惕机场疟疾

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国外医学（寄生虫病分册） 2001年第5期28卷 223-225页

作者：韦慧张龙兴第二军医大学基础医学部病原生物学教研室

由于旅游业和航空业的迅猛发展,地区和国际间人员的流动和交往范围越来越广,机场疟疾(airport malaria)也日益引起人们的注意。对于在机场及其附近的人群来说,如出现不明原因的发热性疾病,应进行多种途径的检查,以排除疟疾的可能性。本... 详细信息

由于旅游业和航空业的迅猛发展,地区和国际间人员的流动和交往范围越来越广,机场疟疾(airport malaria)也日益引起人们的注意。对于在机场及其附近的人群来说,如出现不明原因的发热性疾病,应进行多种途径的检查,以排除疟疾的可能性。本文就机场疟疾的流行病学,临床等方而作一概述。

关键词：机场疟疾发热流行病学临床表现媒介特征病原学免疫学诊断治疗

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恶性疟原虫AMA-1多态性及其在疫苗研制中的意义

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国外医学（寄生虫病分册） 2001年第4期28卷 156-159页

作者：聂本勇第二军医大学基础医学部病原生物学教研室

恶性疟原虫裂殖子顶端膜抗原1(AMA-1)是一种主要的无性血液期疟疾疫苗候选抗原。本文简述了AMA-1的生物学特性、结构及其在裂殖子入侵过程中的作用,对AMA-1的多态性特点和分布规律以及近期在疟疾复合多价疫苗研制中的应用情况进行了... 详细信息

恶性疟原虫裂殖子顶端膜抗原1(AMA-1)是一种主要的无性血液期疟疾疫苗候选抗原。本文简述了AMA-1的生物学特性、结构及其在裂殖子入侵过程中的作用,对AMA-1的多态性特点和分布规律以及近期在疟疾复合多价疫苗研制中的应用情况进行了综合分析。

关键词：恶性疟原虫裂殖子顶端膜抗原1 抗原多态性复合多价疫苗

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