检索结果-内蒙古大学图书馆

中华消化杂志 1998年第2期18卷 72-75页

作者：程慧玉张忠兵李石张兴荣朱玉平第二军医大学长征医院消化内科第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的建立胃癌组织细胞自杀基因体外前药转换基因治疗方法。方法和结果首先将含ＣＤ基因的重组逆转录病毒载体ｐＣＤ２在ＰＡ３１７细胞中包装、筛选、收获病毒上清及进行病毒滴度测定后，体外转导Ｍ８５胃癌细胞，以ＰＣＲ方法证明ＣＤ... 详细信息

目的建立胃癌组织细胞自杀基因体外前药转换基因治疗方法。方法和结果首先将含ＣＤ基因的重组逆转录病毒载体ｐＣＤ２在ＰＡ３１７细胞中包装、筛选、收获病毒上清及进行病毒滴度测定后，体外转导Ｍ８５胃癌细胞，以ＰＣＲ方法证明ＣＤ基因稳定整合到宿主细胞基因组中，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析了ＣＤ基因的表达；转基因胃癌细胞在前药５－ＦＣ作用下呈现明显的选择性生长抑制效应。且观察到强效的“旁观者效应”。结论为胃癌组织基因治疗提供了极有意义的资料。

关键词：胃肿瘤基因疗法胞嘧啶脱氨酶

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裸鼠体内组织特异性胞嘧啶脱氨酶抗人类肿瘤的基因治疗

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第二军医大学学报 1998年第4期19卷 319-322页

作者：曹广文崔龙高军戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科

目的：研究组织特异性表达的胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）基因在裸鼠体内对人类大肠癌和肝细胞癌的治疗作用。方法：将ＣＤ基因修饰的大肠癌ＬｏＶｏ细胞移植到裸鼠体内，观察对全身给予５－氟胞嘧啶（５－ＦＣ）的反应，用含ＣＤ基因的重组病... 详细信息

目的：研究组织特异性表达的胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）基因在裸鼠体内对人类大肠癌和肝细胞癌的治疗作用。方法：将ＣＤ基因修饰的大肠癌ＬｏＶｏ细胞移植到裸鼠体内，观察对全身给予５－氟胞嘧啶（５－ＦＣ）的反应，用含ＣＤ基因的重组病毒产生细胞和５－ＦＣ治疗人肝癌裸鼠模型，并用ＰＣＲ法确定体内基因转移效果，骨髓涂片检查体内基因治疗对造血细胞的影响。结果：转ＣＤ基因对ＬｏＶｏ细胞的致瘤性无影响，全身给予５－ＦＣ治疗６０ｄ，转ＣＤ基因的大肠癌肿瘤明显缩小；ＣＥＡ启动子调控的ＣＤ（ＣＥＡ／ＣＤ）基因修饰的ＬｏＶｏ细胞形成的肿瘤在５－ＦＣ作用下消退。重组病毒在体内可以感染肿瘤、骨髓细胞，给予５－ＦＣ后取得了一定的抗肝细胞癌效果。ＣＥＡ／ＣＤ治疗组未发现明显的骨髓抑制，而ＬＴＲ调控ＣＤ的治疗组出现了明显的骨髓抑制。结论：组织特异性转录调控序列调控的ＣＤ基因体内基因治疗，较普通启动子调控的ＣＤ基因具有明显的安全性和有效性。

关键词：大肠肿瘤肝肿瘤胞嘧啶脱氨酶基因治疗裸鼠

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酪氨酸酶启动子调控的CD基因治疗恶性黑色素瘤

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第二军医大学学报 1998年第3期19卷 205-208页

作者：曹广文戚中田潘欣张晓琴高军崔龙孔宪涛第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科第二军医大学长征医院实验诊断科

目的：克隆酪氨酸酶（Ｔｙｒ）启动子并探索其调控细菌胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）在黑色素瘤基因治疗中的应用价值。方法：用ＰＣＲ法从小鼠恶性黑色素瘤细胞Ｂ１６基因组中克隆Ｔｙｒ启动子片段并与正常序列比较，并于逆转录病毒载体Ｇ１Ｎ... 详细信息

目的：克隆酪氨酸酶（Ｔｙｒ）启动子并探索其调控细菌胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）在黑色素瘤基因治疗中的应用价值。方法：用ＰＣＲ法从小鼠恶性黑色素瘤细胞Ｂ１６基因组中克隆Ｔｙｒ启动子片段并与正常序列比较，并于逆转录病毒载体Ｇ１Ｎａ中调控ＣＤ基因（ＴｙｒＣＤ）。测体外表达和体内抗肿瘤作用。结果：来源于Ｂ１６基因组的Ｔｙｒ启动子重要反式作用位点未见突变。该Ｔｙｒ启动子可使ＣＤ基因在Ｂ１６中特异表达。转ＴｙｒＣＤ的Ｂ１６可以抑制亲代细胞的成瘤作用。含ＴｙｒＣＤ的重组病毒可在体内感染黑色素瘤细胞和骨髓细胞。体内注射５氟胞嘧啶后可使黑色素瘤消退，并对骨髓细胞有保护作用。结论：来源于正常组织或肿瘤组织的Ｔｙｒ启动子指导的ＣＤ基因在恶性黑色素瘤ｉｎｖｉｖｏ基因治疗方面是安全。

关键词：酪氨酸酶胞嘧啶脱氨酶黑色素瘤基因治疗

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假单孢杆菌外毒素基因的克隆及用于裸鼠大肠癌基因治疗

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第二军医大学学报 1998年第2期19卷 106-109页

作者：曹广文戚中田粟山茂树潘欣张晓琴杜平第二军医大学基础医学部微生物学教研室日本奈良医科大学第三内科

目的：建立假单孢杆菌外毒素Ａ（ＰＥＡ）基因的组织特异性抗大肠癌基因疗法。方法：用ＰＣＲ法从绿脓杆菌基因组ＤＮＡ中克隆ＰＥＡⅡ＋Ⅲ区基因，引入Ｋｏｚａｋ序列、终止信号和酶切位点，测序。构建ＰＥＡ基因转录受人癌胚抗原（Ｃ... 详细信息

目的：建立假单孢杆菌外毒素Ａ（ＰＥＡ）基因的组织特异性抗大肠癌基因疗法。方法：用ＰＣＲ法从绿脓杆菌基因组ＤＮＡ中克隆ＰＥＡⅡ＋Ⅲ区基因，引入Ｋｏｚａｋ序列、终止信号和酶切位点，测序。构建ＰＥＡ基因转录受人癌胚抗原（ＣＥＡ）启动子调控的逆转录病毒载体。共转染法体外研究ＰＥＡ基因表达对报告基因表达的特异抑制作用。用ＤＮＡ体内直接转染法于裸鼠体内观察ＰＥＡ基因的抗人类肿瘤作用。结果：所克隆的ＰＥＡ序列与已报道序列基本相同。ＣＥＡ启动子调控的ＰＥＡ基因可在大肠癌细胞中特异性抑制荧光素酶基因表达，在裸鼠体内对人大肠癌模型的直接转染能特异抑制人大肠肿瘤的生长。结论：ＰＥＡⅡ＋Ⅲ区基因作为治疗基因。

关键词：假单孢杆菌外毒素大肠肿瘤基因疗法

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酪氨酸酶启动子调控的CD基因治疗恶生黑色素瘤

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第二军医大学学报 1998年第3期19卷 205-208页

作者：曹广文戚中田潘欣张晓琴高军崔龙孔宪涛第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的:克隆酪氨酸酶(Tyr)启动子并探索其调控细菌胞嘧啶脱氨酶(CD)在黑色素瘤基因治疗中的应用价值。方法:用PCR法从小鼠恶性黑色素瘤细胞B16基因组中克隆Tyr启动子片段并与正常序列比较,并于逆转录病毒载体G1Na中调控CD基因(TyrCD)。测... 详细信息

目的:克隆酪氨酸酶(Tyr)启动子并探索其调控细菌胞嘧啶脱氨酶(CD)在黑色素瘤基因治疗中的应用价值。方法:用PCR法从小鼠恶性黑色素瘤细胞B16基因组中克隆Tyr启动子片段并与正常序列比较,并于逆转录病毒载体G1Na中调控CD基因(TyrCD)。测体外表达和体内抗肿瘤作用。结果:来源于B16基因组的Tyr启动子重要反式作用位点未见突变。该Tyr启动子可使CD基因在B16中特异表达。转TyrCD的B16可以抑制亲代细胞的成瘤作用。含TyrCD的重组病毒可在体内感染黑色素瘤细胞和骨髓细胞。体内注射5氟胞嘧啶后可使黑色素瘤消退,并对骨髓细胞有保护作用。结论:来源于正常组织或肿瘤组织的Tyr启动子指导的CD基因在恶性黑色素瘤in vivo基因治疗方面是安全、有效的。

关键词：胞密啶脱氨酶黑色素瘤基因治疗酪氨酸酶

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鼻咽癌组织中BHRF1基因的研究

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第二军医大学学报 1998年第1期19卷 85-86页

作者：黄海潘星华周水淼李兆基温武余龙孔宪涛孙喜元傅强第二军医大学长海医院耳鼻咽喉科第二军医大学基础医学部生物学教研室复旦大学遗传学研究所基因工程国家重点实验室第二军医大学长征医院临床免疫中心

目的：探讨鼻咽癌组织中ＥＢ病毒基因ＢＨＲＦ１的存在和表达与癌细胞分化及其患者预后间的关系。方法：利用斑点杂交技术检测鼻咽未分化癌、低分化及高分化鳞癌中ＢＨＲＦ１的存在和表达情况，并且观察患者对放疗的效果。结果：ＢＨＲ... 详细信息

目的：探讨鼻咽癌组织中ＥＢ病毒基因ＢＨＲＦ１的存在和表达与癌细胞分化及其患者预后间的关系。方法：利用斑点杂交技术检测鼻咽未分化癌、低分化及高分化鳞癌中ＢＨＲＦ１的存在和表达情况，并且观察患者对放疗的效果。结果：ＢＨＲＦ１的存在与表达与鼻咽癌的分化无关，但其表达可导致癌细胞对辐射敏感性的下降（Ｐ＜０．０１）。结论：ＢＨＲＦ１在鼻咽癌细胞中的表达可增强其抵抗辐射诱发细胞凋亡的能力，这在鼻咽癌诊断、治疗和预后判断上具有重要意义。

关键词： EB病毒基因鼻咽肿瘤细胞分化

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严重烧伤大鼠血浆及部分神经核团精氨酸加压素含量的变化

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第二军医大学学报 1998年第S1期19卷 43-43页

作者：陈秀青程大胜黄爱军王成海第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

精氨酸加压素（ＡＶＰ）对中度（可逆性）烫伤休克大鼠的心功能有明显的抑制作用，给予ＡＶＰ受体拮抗剂能改善休克状态，提高存活率［１］。本实验应用放射免疫分析法观察烫伤休克大鼠血浆及部分神经核团ＡＶＰ含量的变化规律。１材料... 详细信息

精氨酸加压素（ＡＶＰ）对中度（可逆性）烫伤休克大鼠的心功能有明显的抑制作用，给予ＡＶＰ受体拮抗剂能改善休克状态，提高存活率［１］。本实验应用放射免疫分析法观察烫伤休克大鼠血浆及部分神经核团ＡＶＰ含量的变化规律。１材料和方法ＳＤ大鼠，体质量２００～３０...

关键词：休克精氨酸加压素烧伤

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BHRF1基因表达对CNE2细胞生长的影响

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第二军医大学学报 1998年第2期19卷 131-133页

作者：黄海潘星华余龙孔宪涛周水淼李兆基傅强孙喜元第二军医大学长海医院耳鼻咽喉科第二军医大学基础医学部生物学教研室复旦大学遗传学研究所基因工程国家重点实验室第二军医大学长征医院临床免疫中心实验室

目的：观察ＥＢ病毒基因ＢＨＲＦ１的表达对鼻咽癌细胞生存能力的影响。方法：通过构建携有ＢＨＲＦ１的高表达载体，并转染低分化鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２细胞。检测转染后癌细胞周期各时相分布的改变和在缺乏营养条件下的生长情况。结果... 详细信息

目的：观察ＥＢ病毒基因ＢＨＲＦ１的表达对鼻咽癌细胞生存能力的影响。方法：通过构建携有ＢＨＲＦ１的高表达载体，并转染低分化鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２细胞。检测转染后癌细胞周期各时相分布的改变和在缺乏营养条件下的生长情况。结果：ＢＨＲＦ１的表达能使Ｇ１期细胞百分比升高，Ｓ期细胞百分比下降，癌细胞在缺血清条件下生存时间延长。结论：ＢＨＲＦ１的表达能促使鼻咽癌细胞周期的重新分布。

关键词： EB病毒鼻咽肿瘤细胞凋亡 BHRF1基因

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TRAIL诱导突变细胞凋亡的分子机理——免疫监督机制的新模型

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中国肿瘤生物治疗杂志 1998年第3期5卷 231-234页

作者：王梁华第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

Burnet提出免疫监督学说已经快三十年了,现在对这一理论的理解已经深入至分子水平,如MHC、TCR分子在免疫监督中的作用.随着TNF超家族和TNF受体超家族研究的深入,尤其是FasL、TNF-α和它们的受体Fas、TNFR1结构和功能及它们的信号转导途... 详细信息

Burnet提出免疫监督学说已经快三十年了,现在对这一理论的理解已经深入至分子水平,如MHC、TCR分子在免疫监督中的作用.随着TNF超家族和TNF受体超家族研究的深入,尤其是FasL、TNF-α和它们的受体Fas、TNFR1结构和功能及它们的信号转导途径的逐步阐明,免疫监督已从细胞免疫水平向分子免疫水平过渡.本文在国内外对TRAIL及其受体研究的基础上,提出了一个免疫监督的新模型:突变细胞比正常细胞缺少某些细胞膜表面信号从而被机体凋亡信号所识别,机体利用凋亡信号诱导突变细胞凋亡的方式清除它们.这一机制的提出可能会补充免疫监督学说.

关键词： TRAIL 免疫监督模型免疫监督分子肿瘤免疫

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逆转录病毒介导的脑源性神经营养因子在大鼠成肌细胞中表达及分泌

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第二军医大学学报 1997年第3期18卷 219-221页

作者：曲伸何晓龙王成海路长林第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的：研究经逆转录病毒载体的介导将脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）ｃＤＮＡ导入大鼠成肌细胞，为体内移植治疗打下基础。方法：采用电穿孔法将重组大鼠ＢＤＮＦｃＤＮＡ导入ＰＡ３１７包装细胞，获取高滴度的病毒上清转染成肌细胞。... 详细信息

目的：研究经逆转录病毒载体的介导将脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）ｃＤＮＡ导入大鼠成肌细胞，为体内移植治疗打下基础。方法：采用电穿孔法将重组大鼠ＢＤＮＦｃＤＮＡ导入ＰＡ３１７包装细胞，获取高滴度的病毒上清转染成肌细胞。Ｇ４１８筛选转染的成肌细胞，采用Ｎｏｒｔｈｅｍ杂交和ＰＣ１２细胞存活检测。结果：证实转染细胞内有ＢＤＮＦｍＲＮＡ的表达并具有促进细胞存活的生物学活性。结论：ＢＤＮＦｃＤＮＡ可在真核细胞内表达并具有生物学效应，可用于神经系统基因治疗的研究。

关键词：逆转录病毒神经营养因子脑源性成肌细胞

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