检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 1997年第4期18卷 330-333页

作者：严进王春安陈宜张徐仁宝第二军医大学基础医学部生理学教研室第二军医大学基础医学部病理生理学教研室第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的：观察心理应激模型动物血浆皮质酮及视皮质、海马和下丘脑氨基酸和整体行为的变化。方法：以光－电击条件反射法建立心理应激动物模型，采用放射性配体蛋白竞争结合法、氨基酸自动分析法及旷场试验（Ｏｐｅｎ－ｆｉｅｌｄｔｅｓｔ... 详细信息

目的：观察心理应激模型动物血浆皮质酮及视皮质、海马和下丘脑氨基酸和整体行为的变化。方法：以光－电击条件反射法建立心理应激动物模型，采用放射性配体蛋白竞争结合法、氨基酸自动分析法及旷场试验（Ｏｐｅｎ－ｆｉｅｌｄｔｅｓｔ）分别测定大鼠心理应激时血浆皮质酮、脑区氨基酸水平和行为的变化。结果：在血浆皮质酮能够分化心理应激的实验参数条件下，电击刺激时，主要引起视皮质氨基酸水平的变化；而仅给予条件刺激（光）引起心理应激时，可在视皮质、海马和下丘脑３个脑区不同程度地出现谷氨酸、γ－氨基丁酸和牛磺酸水平的变化，并以海马最明显。同时动物运动行为减少，类似抑郁样表现。结论：心理应激反应时，谷氨酸、γ－氨基丁酸和牛磺酸等脑内氨基酸的变化，可能与心理应激引起的抑郁样行为有关。

关键词：心理应激皮质酮氨基酸

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rhG-CSF cDNA高表达质粒的构建及其在COS7细胞中的表达

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第二军医大学学报 1997年第4期18卷 313-315页

作者：陈坚曹韫旭陆德如第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室第二军医大学基础医学部生物学教研室

目的：构建一个能在哺乳动物细胞中高表达人粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）ｃＤＮＡ的重组质粒。方法：利用化学合成引物，进行ＰＣＲ，对人Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ５＇ＡＵＧ侧翼序列进行翻译优化突变。测序确证后，重组入表达载体ｐＥ... 详细信息

目的：构建一个能在哺乳动物细胞中高表达人粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）ｃＤＮＡ的重组质粒。方法：利用化学合成引物，进行ＰＣＲ，对人Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ５＇ＡＵＧ侧翼序列进行翻译优化突变。测序确证后，重组入表达载体ｐＥＤ，构建成质粒ｐＥＤ－ＧＣＳＦ，用ＤＥＡＥ－Ｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ７细胞，ＥＬＩＳＡ法定量测定ｒｈＧ－ＣＳＦ表达水平。结果：转染ＣＯＳ７细胞后４８ｈ收集的上清ｒｈＧ－ＣＳＦ表达量为５２ｎｇ／ｍｌ，７２ｈ为２３０ｎｇ／ｍｌ，显示ｒｈＧ－ＣＳＦ获得了暂时性高表达。结论：ｐＥＤ－ＧＣＳＦ是一个能在哺乳动物细胞中高效表达ｒｈＧ－ＣＳＦ的真核表达质粒。

关键词：基因重组 G-CSF 多肽生长因子

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人睫状神经营养因子结构和功能的研究

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第二军医大学学报 1997年第5期18卷 401-405页

作者：何成陈江野路长林许家军陈哲宇第二军医大学基础医学部神经生物学教研室中国科学院上海生化所第二军医大学基础医学部解剖学教研室

目的：制备高活性的重组人睫状神经营养因子（ｈＣＮＴＦ），并研究其生物学功能。方法：应用大肠杆菌表达ｈＣＮＴＦ，用片段插入和缺失法研究其结构与功能关系；切断大鼠坐骨神经，局部及皮下给予ＣＮＴＦ，应用辣根过氧化物酶逆行追... 详细信息

目的：制备高活性的重组人睫状神经营养因子（ｈＣＮＴＦ），并研究其生物学功能。方法：应用大肠杆菌表达ｈＣＮＴＦ，用片段插入和缺失法研究其结构与功能关系；切断大鼠坐骨神经，局部及皮下给予ＣＮＴＦ，应用辣根过氧化物酶逆行追踪技术显示再生轴突通过修复部位的胞体。结果：ｈＣＮＴＦ分子中α－螺旋结构的维持对其生物活性十分重要，Ｃ端松散结构对其生物活性贡献不大，Ｄ螺旋中后段可能与生物活性有密切关系；与对照组相比，ＣＮＴＦ组脊髓标记胞体显著增加。结论：本研究为获得高活性、低副作用的ＣＮＴＦ提供了理论依据；所获ｈＣＮＴＦ能明显促进周围神经运动轴突的再生。

关键词：睫状神经营养因子基因重组基因突变 CNTF

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人乙型肝炎病毒(ayw型)全基因组转基因小鼠病理学观察

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第二军医大学学报 1997年第3期18卷 205-207页

作者：余宏宇雷章恒龚志锦沙继宏杨勇骥潘星华王肖鹏傅继梁胡以平第二军医大学基础医学部病理解剖学教研室第二军医大学基础医学部生物学教研室和医学分子遗传学开放实验室第二军医大学基础医学部电镜室

目的：观察乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ａｙｗ亚型全基因组转基因小鼠的肝、肾等组织的病理改变。方法：选取２４只１３～２５周龄的清洁级ＩＣＲ品系ＨＢＶ转基因小鼠及１５只正常ＩＣＲ小鼠为对照进行病理大体观察，并重点取肝、肾、脾、... 详细信息

目的：观察乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ａｙｗ亚型全基因组转基因小鼠的肝、肾等组织的病理改变。方法：选取２４只１３～２５周龄的清洁级ＩＣＲ品系ＨＢＶ转基因小鼠及１５只正常ＩＣＲ小鼠为对照进行病理大体观察，并重点取肝、肾、脾、肺、心、脑、睾丸（卵巢）、唾液腺、肌肉和皮肤等组织，切片ＨＥ染色后进行光镜和透射电镜形态观察。结果：上述两种清洁级小鼠大体和光镜下各器官和组织未见有明显病变；两种小鼠移入普通级环境下饲养４周后肝脏等器官发生机会性感染的机会相似；透射电镜下所有被检转基因小鼠的部分肝细胞扩张的滑面内质网等处有ＨＢｓＡｇ样颗粒和Ｄａｎｅ样颗粒，部分转基因小鼠之肾小管上皮细胞内见类似病毒颗粒；肝、肾细胞内未见其他亚微病理损害。结论：所建成的ＨＢＶ转基因小鼠既能在肝（其次肾）细胞内产生ＨＢＶ样病毒颗粒，但又不产生明显病理损害。

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠病理学动物模型

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中国人丙型肝炎病毒囊膜蛋白2HVR_1 cDNA的序列分析

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第二军医大学学报 1997年第3期18卷 208-211页

作者：方芳潘卫崔晓红宋艳斌朱诗应戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：了解中国ＨＣＶ流行株高变区１（ＨＶＲ１）的特点。方法：对来自山东（ＳＤ）、上海（ＳＨ）两地患者血清ＲＮＡ进行逆转录－巢式ＰＣＲ，扩增ＨＣＶ囊膜蛋白２基因片段，用ＰＣＲ直接测序法对该片段进行序列测定。结果：（１）... 详细信息

目的：了解中国ＨＣＶ流行株高变区１（ＨＶＲ１）的特点。方法：对来自山东（ＳＤ）、上海（ＳＨ）两地患者血清ＲＮＡ进行逆转录－巢式ＰＣＲ，扩增ＨＣＶ囊膜蛋白２基因片段，用ＰＣＲ直接测序法对该片段进行序列测定。结果：（１）扩增片段（命名为Ｐ３８８）对应于日本ＨＣＶ－Ｊ株序列核苷酸１４３９～１８２６位（氨基酸位３７１～４９８）；（２）中国人ＨＣＶＨＶＲ１位于氨基酸位３８４～４１０，与发表的ＨＣＶＩＩ型ＨＶＲ１的氨基酸位点相同；（３）与ＨＣＶ－Ｊ、美国ＨＣＶ－１及已发表的中国河北、上海株相比，ＳＤ、ＳＨ株Ｐ３８８片段与ＨＣＶ－１株的核苷酸及氨基酸的异源性最高，比较各株ＨＶＲ１核苷酸序列也与上述结果一致；（４）ＨＶＲ１基因有义突变率相当高。结论：中国ＨＣＶ流行株存在ＨＶＲ１，其基因变异程度及有义突变率高，对研究ＨＣＶ感染及进行免疫预防有重要的意义。

关键词：丙型肝炎病毒囊膜蛋白2 DNA序列基因片段

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重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a突变区的氨基酸序列分析

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第二军医大学学报 1997年第4期18卷 309-312页

作者：缪为民陈建鹤王梁华周丙荣娄永华焦炳华第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：对重组人肿瘤坏死因子α衍生物３ａ（ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ）突变区进行氨基酸序列分析。方法：通过ＰＣＲ扩增，获得５＇端含ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ突变区的半分子。用融合蛋白表达系统对该半分子进行大肠杆菌表达。表达产物经亲... 详细信息

目的：对重组人肿瘤坏死因子α衍生物３ａ（ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ）突变区进行氨基酸序列分析。方法：通过ＰＣＲ扩增，获得５＇端含ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ突变区的半分子。用融合蛋白表达系统对该半分子进行大肠杆菌表达。表达产物经亲和层析法纯化，用Ⅹａ因子酶切，去除载体多肽，然后进行Ｎ末端２０个氨基酸顺序分析。结果和结论：氨基酸序列符合预想突变序列，即发生下列氨基酸替换：８０位Ｉｌｅ→Ｓｅｒ，９０位Ｌｙｓ→Ｈｉｓ，９２位Ａｓｎ→Ｖａｌ。

关键词：肿瘤坏死因子衍生物突变氨基酸顺序

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生长抑素对急性胃粘膜损伤保护作用的实验研究

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第二军医大学学报 1997年第1期18卷 50-52页

作者：李平许国铭王成海第二军医大学长海医院消化内科上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的:探讨生长抑素（SS）对胃粘膜的保护作用。方法：在用无水乙醇致大鼠急性胃粘膜损伤之前，静脉滴注SS和静注抗SS血清，观察溃疡指数和胃粘膜损伤程度的变化。结果：SS组、抗SS血清组与对照组大鼠的溃疡指数分别是17．40±3.58... 详细信息

目的:探讨生长抑素（SS）对胃粘膜的保护作用。方法：在用无水乙醇致大鼠急性胃粘膜损伤之前，静脉滴注SS和静注抗SS血清，观察溃疡指数和胃粘膜损伤程度的变化。结果：SS组、抗SS血清组与对照组大鼠的溃疡指数分别是17．40±3.58、36．65±3．47、28．55±3．75，SS组的溃疡指数非常显著低于对照组（P＜0．01）；抗SS血清组的溃疡指数显著高于对照组（P＜0．05）。大鼠胃粘膜损伤程度SS组明显轻于对照组（P＜0．05）；抗SS血清组明显重于对照组（P＜0．05）；SS组非常显著轻于抗SS血清组（P＜0．01）。结论：SS对胃粘膜有保护作用。

关键词：急性胃粘膜损伤保护作用生长抑素

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原发性肝癌CD44v mRNA表达与抑癌基因DCC mRNA表达、癌细胞DNA含量的关系

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第二军医大学学报 1997年第3期18卷 215-218页

作者：刘鹏飞吴孟超陈汉钱光相傅继梁第二军医大学东方肝胆外科医院第二军医大学基础医学部生物学教研室

目的：探讨原发性肝癌中ＣＤ４４ｖ表达与抑癌基因ＤＣＣ表达、癌细胞ＤＮＡ含量之间的关系。方法：应用ＲＴ－ＰＣＲ法检测３０例原发性肝癌中ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ和ＤＣＣｍＲＮＡ的表达情况，并根据ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ的表达情况取２... 详细信息

目的：探讨原发性肝癌中ＣＤ４４ｖ表达与抑癌基因ＤＣＣ表达、癌细胞ＤＮＡ含量之间的关系。方法：应用ＲＴ－ＰＣＲ法检测３０例原发性肝癌中ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ和ＤＣＣｍＲＮＡ的表达情况，并根据ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ的表达情况取２０例标本（阴性及微弱表达者１０例为Ⅰ组；高度表达者１０例为Ⅱ组）检测其癌细胞ＤＮＡ干系水平。结果：３０例受检标本中，ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ中度以上表达２３例（７６．６７％），ＤＣＣｍＲＮＡ表达缺失者１８例（６０％），且两者基本重合。在ＤＮＡ干系水平方面，Ⅰ组病例二倍体明显高于Ⅱ组病例，异倍体则明显低于Ⅱ组的病例（Ｐ＜０．０１）；转移相关的临床病理指标Ⅱ组亦较Ⅰ组为重。结论：在原发性肝癌的侵袭转移过程中，ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ的高表达与ＤＣＣｍＲＮＡ的表达缺失关系密切，两者间可能有协同关系。此外，ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ表达与肝癌细胞ＤＮＡ干系水平的变化一致，再次证实了ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ表达在肝癌侵袭转移中的重要性。

关键词：肝肿瘤细胞粘附分子 mRNA 抑癌基因 CD44V

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乙型肝炎病毒(ayw型)转基因小鼠的建立

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第二军医大学学报 1997年第3期18卷 201-204页

作者：雷章恒李建秀余宏宇王新民孙伟潘星华郝光荣王肖鹏傅继梁胡以平第二军医大学基础医学部生物学教研室和医学分子遗传学开放实验室第二军医大学基础医学部病理解剖学教研室第二军医大学实验动物中心

目的：建立遗传上稳定的、带有乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ａｙｗ亚型的转基因小鼠品系。方法：通过对受精卵显微注射进行基因转移的途径制备转基因小鼠，以ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、ＥＬＩＳＡ、组织切片免疫组化和透射电镜等方法，... 详细信息

目的：建立遗传上稳定的、带有乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ａｙｗ亚型的转基因小鼠品系。方法：通过对受精卵显微注射进行基因转移的途径制备转基因小鼠，以ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、ＥＬＩＳＡ、组织切片免疫组化和透射电镜等方法，分析所导入ＤＮＡ在转基因小鼠体内的功能情况。结果：得到２１只建立者小鼠，在它们的血清中检测到了ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的存在，还在肝细胞中观察到了ＨＢＶ样病毒颗粒。结论：ＨＢＶ基因组ＤＮＡ已经整合至小鼠的基因组，其中的基因能够表达，整个基因组ＤＮＡ还能复制，并被有效地包装。

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠动物模型

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重组人白血病抑制因子受体α亚基细胞外区的分子克隆

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第二军医大学学报 1997年第2期18卷 105-108页

作者：刘厚奇朱奎傅继梁第二军医大学基础医学部医学分子生物学开放实验室法国波尔多大学免疫学实验室第二军医大学基础医学部生物学教研室

目的：纯化可溶性白血病抑制因子（ＬＩＦ）受体，获得特异性免疫原并利用衰变加速因子（ＤＡＦ）的附膜特性探讨ＬＩＦ受体的生物特性和功能。方法：采用基因重组技术，将ＬＩＦ受体α亚基（ｇｐ１９０）细胞外区（ｇｐ１９０ｓｏｌ）... 详细信息

目的：纯化可溶性白血病抑制因子（ＬＩＦ）受体，获得特异性免疫原并利用衰变加速因子（ＤＡＦ）的附膜特性探讨ＬＩＦ受体的生物特性和功能。方法：采用基因重组技术，将ＬＩＦ受体α亚基（ｇｐ１９０）细胞外区（ｇｐ１９０ｓｏｌ）的Ｃ端与ＤＡＦＣ端３７个氨基酸连接，再将该重组基因载入ｐＧＥＸ５Ｔ表达系统。结果：在Ｅ．ｃｏｌｉＸＬ１中可高度表达一种Ｎ端为谷胱甘肽Ｓ转移酶和Ｃ端为１９０ｓｏｌＤＡＦ的融合重组蛋白。此蛋白在ＸＬ１中表达产物为不溶性包涵体，以变性剂８ｍｏｌ／Ｌ尿素溶解并复性后，可与交联在亲和层析柱上的谷胱甘肽（Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ）结合，从而一次性分离ＬＩＦ受体α亚基细胞外区。结论：大分子糖蛋白也能采用ｐＧＥＸ５Ｔ系统在大肠杆菌中表达，并通过谷胱甘肽亲和法纯化而作为免疫原。

关键词：白血病抑制因子受体分子克隆重组蛋白 GST

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