检索结果-内蒙古大学图书馆

伯氏疟原虫RC株和N株感染小鼠IFN-γ mRNA的表达及其对致病的影响

第二军医大学学报 2005年第5期26卷 515-518页

作者：陈克强朱淮民宋关鸿第二军医大学基础医学部病原生物学教研室

目的探讨伯氏疟原虫RC株和N株感染小鼠IFNγmRNA的表达及其对疟疾致病的影响。方法应用RT PCR技术,比较伯氏疟原虫RC株和N株感染后ICR小鼠脑、肝、脾组织IFNγmRNA表达的差异,并探讨其与原虫血症、体温和体质量等病理学参数之间的关系... 详细信息

目的探讨伯氏疟原虫RC株和N株感染小鼠IFNγmRNA的表达及其对疟疾致病的影响。方法应用RT PCR技术,比较伯氏疟原虫RC株和N株感染后ICR小鼠脑、肝、脾组织IFNγmRNA表达的差异,并探讨其与原虫血症、体温和体质量等病理学参数之间的关系。结果N株感染小鼠后第10天,平均原虫血症达到(64.00±7.51)%,平均体质量降至(97.60±4.59)%,平均体温降至(27.87±2.95)℃,感染小鼠开始死亡;第12天小鼠全部死亡。RC株感染小鼠后第24天,平均原虫率达(61.10±6.56)%;第26天平均体质量和平均体温降至最低点;随后原虫率逐渐下降,第30天体质量和体温开始回升;感染后第36天,绝大多数感染鼠外周血涂片不能检出疟原虫,平均体质量和平均体温恢复正常;感染RC株小鼠的病死率仅为25%。感染N株小鼠在感染前期,肝、脾组织IFNγmRNA的转录明显增强,但持续时间较短;感染RC株小鼠在感染期间,肝和脾脏一直有IFNγmRNA转录,直到原虫被清除,小鼠完全康复。整个实验期间,正常对照小鼠肝和脾脏均未检测到IFNγmRNA。结论由N株和RC株疟原虫感染诱导小鼠肝、脾IFNγmRNA的表达可能具有不同的机制;RC株疟原虫感染可诱导小鼠肝、脾持续表达IFNγmRNA,对减轻疟原虫感染所造成的损害和感染鼠的康复有重要意义。

关键词：伯氏疟原虫 RC株 N株疟疾干扰素

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胰十二指肠同源盒基因-1逆转录病毒表达载体的构建及其在肝干细胞中的稳定表达

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第二军医大学学报 2006年第8期27卷 834-836页

作者：金彩霞李文林朱吉田棣张南胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室

目的:通过克隆胰十二指肠同源盒基因-1(pancreatic duodenal homeobox-1,PDX-1),构建表达PDX-1的逆转录病毒表达载体和稳定表达PDX-1的肝原始细胞系(liver epithelial progenitor cells,LEPCs),以研究肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。方法:通过PCR方法克隆PDX-1基因全长,将其构建到pMSCVpuro逆转录病毒载体中获得pMSCV PDX-1 puro载体。将该载体导入Phoenix包装细胞系,进而采用乒乓转染的方法感染包装细胞PT67,获得高滴度稳定产毒的PT67细胞系。结果:成功构建了pMSCV PDX-1 puro载体,并转染PT67细胞。利用PT67细胞系产生的病毒上清可以高效的感染体外培养的肝干细胞LEPCs,获得稳定表达PDX-1基因的LEPCs(LEPCs PDX-1)。结论:PDX-1逆转录病毒表达载体的成功构建和稳定表达PDX-1的肝干细胞系的获得为研究LEPCs向胰腺细胞的转分化奠定了基础。

关键词：胰十二指肠同源盒基因-1 逆转录病毒科肝干细胞

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庚型肝炎病毒全基因转基因小鼠的制备与遗传

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第二军医大学学报 2002年第11期23卷 1175-1178页

作者：胡卫江王宏卫戚中田李建秀胡以平第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 基础医学部细胞生物学教研室

目的:利用显微注射方法产生整合庚型肝炎病毒(HGV)全基因的转基因小鼠,并研究HGV基因的遗传特性。方法:将含有HGV全长基因的载体线性化后,将目的基因DNA溶于显微注射用缓冲液,依常规方法进行显微注射,得到仔鼠后用PCR及基因组DNA South... 详细信息

目的:利用显微注射方法产生整合庚型肝炎病毒(HGV)全基因的转基因小鼠,并研究HGV基因的遗传特性。方法:将含有HGV全长基因的载体线性化后,将目的基因DNA溶于显微注射用缓冲液,依常规方法进行显微注射,得到仔鼠后用PCR及基因组DNA Southern印迹法鉴定。阳性小鼠即为建立者(founder)小鼠,将founder小鼠与正常小鼠交配得到F代小鼠,随后将F1代阳性鼠与正常小鼠交配得到F2代小鼠。结果:共得到5只founder小鼠,其中4只与正常小鼠交配,得到F1代小鼠共41只,其中29只为阳性,阳性率为71％。F2代小鼠共21只,其中16只为阳性,阳性率为76％。结论:得到了整合有HGV全长基因的转基因小鼠,并证明HGV基因可以在转基因小鼠体内稳定传递。

关键词：制备庚型肝炎病毒转基因小鼠遗传学动物模型

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人睫状神经营养因子结构和功能的研究

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第二军医大学学报 1997年第5期18卷 401-405页

作者：何成陈江野路长林许家军陈哲宇第二军医大学基础医学部神经生物学教研室中国科学院上海生化所第二军医大学基础医学部解剖学教研室

目的：制备高活性的重组人睫状神经营养因子（ｈＣＮＴＦ），并研究其生物学功能。方法：应用大肠杆菌表达ｈＣＮＴＦ，用片段插入和缺失法研究其结构与功能关系；切断大鼠坐骨神经，局部及皮下给予ＣＮＴＦ，应用辣根过氧化物酶逆行追... 详细信息

目的：制备高活性的重组人睫状神经营养因子（ｈＣＮＴＦ），并研究其生物学功能。方法：应用大肠杆菌表达ｈＣＮＴＦ，用片段插入和缺失法研究其结构与功能关系；切断大鼠坐骨神经，局部及皮下给予ＣＮＴＦ，应用辣根过氧化物酶逆行追踪技术显示再生轴突通过修复部位的胞体。结果：ｈＣＮＴＦ分子中α－螺旋结构的维持对其生物活性十分重要，Ｃ端松散结构对其生物活性贡献不大，Ｄ螺旋中后段可能与生物活性有密切关系；与对照组相比，ＣＮＴＦ组脊髓标记胞体显著增加。结论：本研究为获得高活性、低副作用的ＣＮＴＦ提供了理论依据；所获ｈＣＮＴＦ能明显促进周围神经运动轴突的再生。

关键词：睫状神经营养因子基因重组基因突变 CNTF

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乙肝全基因组转基因小鼠肝组织病理及部分免疫学特征

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武汉大学学报（医学版） 2012年第4期33卷 462-465,502页

作者：胡新根訾晓渊张红霞胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:研究C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系乙型肝炎转基因小鼠肝脏的组织病理学及部分免疫学特征。方法:通过对130例SPF级乙型肝炎转基因小鼠和30例同龄正常C57BL/6小鼠肝组织进行免疫组织化学染色、HE染色和浸银染色分析,... 详细信息

目的:研究C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系乙型肝炎转基因小鼠肝脏的组织病理学及部分免疫学特征。方法:通过对130例SPF级乙型肝炎转基因小鼠和30例同龄正常C57BL/6小鼠肝组织进行免疫组织化学染色、HE染色和浸银染色分析,研究转基因小鼠HBsAg的表达以及病理改变情况。选取15例肝组织有单个核细胞浸润的转基因小鼠检测白细胞分化抗原的表达情况。结果:60.77%(79/130)的转基因小鼠肝脏组织中出现了不同程度的肝组织病理性改变,包括肝细胞变性、单个核细胞浸润和纤维组织增生,且与月龄正相关,而与性别、病毒蛋白的表达无相关性。选取出现单个核细胞浸润的肝组织进行免疫组织化学检测发现,肝组织中浸润的单个核细胞大多为CD3+、CD4+T细胞。结论:C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系乙肝全基因组转基因小鼠肝脏产生类似慢性无症状HBV携带者的病理学变化,病理改变与病毒蛋白表达无相关性,与小鼠月龄呈正相关性。

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠病理学免疫组织化学

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蛛网膜下腔注射强啡肽A_（1－13）致大鼠部分可逆性瘫痪

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第二军医大学学报 1994年第4期15卷 306-309页

作者：李明洪新如吴岳嵩刘植珊王成海第二军医大学长海医院骨科第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

大鼠蛛网膜下腔注射强啡肽Ａ１－１３后产生剂量相关、部分可逆性后肢瘫痪，而蛛网膜下腔注射μ受体激动剂ＤＡＧＯ、δ受体激动剂ＤＡＤＬ不产生后肢功能障碍。结果提示：强啡肽Ａ在脊髓继发性损伤中起了较为重要的作用，其致瘫作用可... 详细信息

大鼠蛛网膜下腔注射强啡肽Ａ１－１３后产生剂量相关、部分可逆性后肢瘫痪，而蛛网膜下腔注射μ受体激动剂ＤＡＧＯ、δ受体激动剂ＤＡＤＬ不产生后肢功能障碍。结果提示：强啡肽Ａ在脊髓继发性损伤中起了较为重要的作用，其致瘫作用可能系强啡肽Ａ与ｋ受体相互作用的结果。

关键词：强啡呔阿片受体脊髓损伤瘫痪

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人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因Oct4的克隆及其在大肠杆菌中的表达(英文)

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第二军医大学学报 2003年第9期24卷 937-940页

作者：刘善荣王庆敏杨玲汤淑萍惠宁蒋正戚中田刘厚奇第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室第二军医大学长海医院妇产科第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的 :克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。方法 :取 4～ 6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜 ,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建成 pGEX5T Oct4重组质粒。β硫... 详细信息

目的 :克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。方法 :取 4～ 6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜 ,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建成 pGEX5T Oct4重组质粒。β硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导使该基因在k80 2菌中表达。结果 :用PCR方法扩增获得大小约 1 .1kb条带 ;全自动测序与GenBank中登录的序列 97%同源。获得了pGEX5T Oct4重组子并在k80 2菌中获得了表达 ,SDS PAGE分析有一特异性的 6 2 0 0 0条带。结论 :扩增和克隆了人胚生殖系细胞多能性调节蛋白Oct4全长cDNA并在大肠杆菌中获得表达。

关键词：人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因 Oct4 克隆基因克隆基因表达

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高表达ABCG2基因对人原发性肝癌细胞SP表型的影响

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中国生物制品学杂志 2012年第8期25卷 973-976页

作者：陈雪松张朵张红霞胡以平朱海英第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的研究高表达ABCG2基因对人原发性肝癌细胞SP表型的影响。方法构建pMSCVpuro-ABCG2逆转录病毒质粒,并转染至病毒包装细胞PT67中,将获得的病毒上清液感染人原发性肝癌non-SP(Side population)细胞,筛选稳定感染的细胞系non-SP-ABCG2和n... 详细信息

目的研究高表达ABCG2基因对人原发性肝癌细胞SP表型的影响。方法构建pMSCVpuro-ABCG2逆转录病毒质粒,并转染至病毒包装细胞PT67中,将获得的病毒上清液感染人原发性肝癌non-SP(Side population)细胞,筛选稳定感染的细胞系non-SP-ABCG2和non-SP-puro,RT-PCR法检测细胞中ABCG2基因的转录水平,Western blot法检测细胞中ABCG2蛋白的表达水平,显微镜观察细胞形态的变化,Hoechst33342染色分析细胞的SP表型。结果逆转录病毒质粒pMSCVpuro-ABCG2经双酶切及测序证实构建正确;non-SP-ABCG2细胞中ABCG2基因的转录和蛋白表达水平均较空载体pMSCVpuro转染的细胞non-SP-puro明显提高;non-SP-ABCG2细胞的形态发生改变,成梭形生长,偶见小三角样细胞,细胞生长缓慢,细胞间排列不紧密,并出现了SP表型。结论 ABCG2基因的高表达与细胞SP表型的形成具有一定的相关性,并能影响细胞的基本形态。

关键词： ABCG2基因 SP表型肝癌细胞系生物学特性

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重组人胶质细胞源性神经营养因子对大鼠周围神经再生的作用

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第二军医大学学报 2001年第3期22卷 239-241,F003页

作者：陈哲宇郑兴东李建红路长林何成第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433 科研部

目的 :研究胶质细胞源性神经营养因子 (glial cell line- derived neurotrophic factor,GDNF)对周围神经再生的作用。方法 :硅胶管套接大鼠切断了的坐骨神经 ,术中一次性将 GDNF、生理盐水 (SAL )分别加入硅胶管中。术后 4周 ,应用溃变... 详细信息

目的 :研究胶质细胞源性神经营养因子 (glial cell line- derived neurotrophic factor,GDNF)对周围神经再生的作用。方法 :硅胶管套接大鼠切断了的坐骨神经 ,术中一次性将 GDNF、生理盐水 (SAL )分别加入硅胶管中。术后 4周 ,应用溃变神经纤维染色法、辣根过氧化物酶 (horseradish peroxidase,HRP)逆行追踪技术观察 GDNF对轴突再生的影响。结果 :与 SAL组相比 ,GDNF组溃变神经纤维面积明显减少 ,SAL组溃变纤维面积百分率为 17.3% ,GDNF组为 1.9% (P<0 .0 1) ;GDNF组脊髓 HRP标记胞体显著增加 ,SAL 组标记胞体数的百分率为 43.5 % ,GDNF组为 6 8.3% (P<0 .0 1)。结论 :外源性 GDNF能明显促进周围神经再生。

关键词：神经生长因子坐骨神经神经再生周围神经损伤 GDNF

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脑源性神经营养因子基因治疗对大鼠脑内多巴胺含量的影响

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中国神经科学杂志 1998年第4期14卷 205-208页

作者：曲伸侍坚何晓龙由振东王成海路长林第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

采用脑源性神经营养因子（BDNF）基因工程成肌细胞纹状体内移植观察其对帕金森病（PD）大鼠脑内纹状体多巴胺含量的影响，结果发现：基因工程成肌细胞脑内移植可使纹状体多巴胺含量明显增加，并可维持达两月之久，这为帕金森病的治疗提... 详细信息

采用脑源性神经营养因子（BDNF）基因工程成肌细胞纹状体内移植观察其对帕金森病（PD）大鼠脑内纹状体多巴胺含量的影响，结果发现：基因工程成肌细胞脑内移植可使纹状体多巴胺含量明显增加，并可维持达两月之久，这为帕金森病的治疗提供了一种新的有效的治疗方法。

关键词：帕金森病脑源性神经生长因子多巴胺基因治疗

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