检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 1996年第5期17卷 401-407页

作者：潘星华傅继梁第二军医大学基础医学部生物学教研室

目的：阐明ＨＬＡⅡ类基因在中华民族中的流动轨迹和规律，并探索某些ＨＬＡ等位基因的起源。方法：对中华民族１１群体和５个参考群体的ＨＬＡⅡ类７个多态座位的遗传结构进行聚类分析和频率分布的比较。结果和结论：初步揭示了自北向... 详细信息

目的：阐明ＨＬＡⅡ类基因在中华民族中的流动轨迹和规律，并探索某些ＨＬＡ等位基因的起源。方法：对中华民族１１群体和５个参考群体的ＨＬＡⅡ类７个多态座位的遗传结构进行聚类分析和频率分布的比较。结果和结论：初步揭示了自北向南流动的可能起源于白人或黑人的基因谱（如ＤＱＡｌ＊０５０１，ＤＱＢｌ＊０５０１等）和自南向北流动的可能起源于东南亚黄种人的基因谱（如ＤＱＡｌ＊０６０１，ＤＲＢｌ＊１２０２等）；提出存在一类可能起源于中华民族某个大陆群体的ＨＬＡ基因（分别如ＤＱＢｌ＊０３０３及ＤＲＢｌ＊０９０１，＊１５０１等）；并发现ＨＬＡ基因在中华民族各群体之间的融合深刻而普遍，但傣、布依等部分少数民族与外界仍有一定程度的隔离；结果也支持中华民族包含南北两大群体的观点。认为群体迁移、融合而产生的基因流动是ＨＬＡ基因频率变化的主要动力，但隔离导致的遗传漂变以及自然选择也有重要影响。

关键词：基因中华民族 HLAⅡ类基因遗传结构聚类分析

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rhG-CSF cDNA高表达质粒的构建及其在COS7细胞中的表达

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第二军医大学学报 1997年第4期18卷 313-315页

作者：陈坚曹韫旭陆德如第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室第二军医大学基础医学部生物学教研室

目的：构建一个能在哺乳动物细胞中高表达人粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）ｃＤＮＡ的重组质粒。方法：利用化学合成引物，进行ＰＣＲ，对人Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ５＇ＡＵＧ侧翼序列进行翻译优化突变。测序确证后，重组入表达载体ｐＥ... 详细信息

目的：构建一个能在哺乳动物细胞中高表达人粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）ｃＤＮＡ的重组质粒。方法：利用化学合成引物，进行ＰＣＲ，对人Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ５＇ＡＵＧ侧翼序列进行翻译优化突变。测序确证后，重组入表达载体ｐＥＤ，构建成质粒ｐＥＤ－ＧＣＳＦ，用ＤＥＡＥ－Ｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ７细胞，ＥＬＩＳＡ法定量测定ｒｈＧ－ＣＳＦ表达水平。结果：转染ＣＯＳ７细胞后４８ｈ收集的上清ｒｈＧ－ＣＳＦ表达量为５２ｎｇ／ｍｌ，７２ｈ为２３０ｎｇ／ｍｌ，显示ｒｈＧ－ＣＳＦ获得了暂时性高表达。结论：ｐＥＤ－ＧＣＳＦ是一个能在哺乳动物细胞中高效表达ｒｈＧ－ＣＳＦ的真核表达质粒。

关键词：基因重组 G-CSF 多肽生长因子

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电针刺激大鼠足三里穴对视上核、室旁核催产素神经元的影响

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第二军医大学学报 1995年第1期16卷 37-40页

作者：何润昌范溥生王旭明何北平张忠义周世臣宋朝佑林葆城第二军医大学基础医学部解剖学教研室第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

用ＷＱ－９Ｅ钾离子透入仪筛选出对痛刺激敏感的ＳＤ大鼠８只，随机分成对照组及针刺组，每组４只。针刺鼠用ＷＱ－９Ｅ电针仪刺激两侧＂足三里＂穴，持续３０ｍｉｎ。所有动物同时用１％戊巴比妥钠腹腔内麻醉后开胸，用Ｂｏｕｉｎ液经... 详细信息

用ＷＱ－９Ｅ钾离子透入仪筛选出对痛刺激敏感的ＳＤ大鼠８只，随机分成对照组及针刺组，每组４只。针刺鼠用ＷＱ－９Ｅ电针仪刺激两侧＂足三里＂穴，持续３０ｍｉｎ。所有动物同时用１％戊巴比妥钠腹腔内麻醉后开胸，用Ｂｏｕｉｎ液经心灌注固定，开颅取脑，作连续冰冻切片（片厚４０μｍ），隔片取一。所有切片均按Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇｅｒ（ＰＡＰ）法进行免疫细胞化学反应，ＤＡＢ呈色，封片后直接连ＩＢＭ２８６－ＣＡＰ５３０图像分析系统对视上核，室旁核催产素免疫反应阳性物质作定量测定。结果显示：针刺鼠下丘脑视上核，室旁核催产素免疫反应阳性物质的总面积比对照鼠分别增加了４４．１％、４７．３％（Ｐ＜０．０１）。提示，催产素免疫反应阳性物质的增加与电针刺激足三里穴有关，催产素可能参与电针镇痛的中枢调节过程。

关键词：电针视上核室旁核催产素免疫细胞化学

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白血病抑制因子受体α亚基胞内区远膜端对HL-60细胞增殖分化的影响

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中华血液学杂志 2004年第11期25卷 679-682页

作者：杨玲刘善荣汤淑萍王凤玫刘厚奇第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433

目的　探讨白血病抑制因子 (LIF)受体α亚基胞内区远膜端对HL 60细胞增殖分化的影响。方法　构建LIF受体α亚基胞内区远膜端 (gp190CT3 )真核表达载体 ,利用脂质体转染HL 60细胞 ,G418筛选阳性细胞株 ,免疫组化检测其表达。倒置显微镜... 详细信息

目的　探讨白血病抑制因子 (LIF)受体α亚基胞内区远膜端对HL 60细胞增殖分化的影响。方法　构建LIF受体α亚基胞内区远膜端 (gp190CT3 )真核表达载体 ,利用脂质体转染HL 60细胞 ,G418筛选阳性细胞株 ,免疫组化检测其表达。倒置显微镜观察野生型HL 60细胞及转染有gp190CT3的HL 60细胞的生长状态。以Westernblot及流式细胞仪分别检测野生型HL 60细胞及转染有gp190CT3的HL 60细胞中细胞增殖核抗原 (PCNA)及CD15水平。结果　转染有gp190CT3的HL 60细胞体积增大 ,与野生型HL 60细胞相比 ,转染有gp190CT3的HL 60细胞增殖速度减慢 ,PC NA的表达水平明显降低 ,而CD15水平明显升高 (转染有gp190CT3的HL 60细胞中CD15阳性细胞百分率为 89.98% ,野生型HL 60对照组中CD15阳性细胞百分率为 40 .79% )。结论　LIF受体α亚基胞内区远膜端参与LIF受体的信号转导 ,其效应是抑制细胞的增殖 ,促进细胞分化。

关键词： HL-60细胞转染受体α CT CD15 胞内区阳性细胞 α亚基增殖分化 LIF

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睫状神经营养因子对应激引起大鼠海马神经元损伤的保护作用及其机制的研究

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生理科学进展 2000年第2期31卷 131-134页

作者：严进第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

本实验用Nissl染色法、Bielschowsky Gros Lawrentjew染色法、常规透射电镜、行为活动测定、双侧海马微量给药、海马神经元原代培养、活细胞连续照相、全细胞膜片钳记录、细胞内游离Ca2 +浓度测定及P5 3蛋白免疫组化测定等方法 ,观察了... 详细信息

本实验用Nissl染色法、Bielschowsky Gros Lawrentjew染色法、常规透射电镜、行为活动测定、双侧海马微量给药、海马神经元原代培养、活细胞连续照相、全细胞膜片钳记录、细胞内游离Ca2 +浓度测定及P5 3蛋白免疫组化测定等方法 ,观察了睫状神经营养因子 (CNTF)对应激引起动物行为变化和海马神经元形态学变化的影响 ,探讨了CNTF的部分作用机制。结果表明 ,急性应激不引起大鼠海马神经元损伤 ,CNTF不能改善急性应激时的焦虑样行为。但CNTF可显著减轻慢性应激引起的大鼠海马神经元损伤 ,并改善慢性应激时的抑郁样行为。CNTF可能通过早期快速抑制谷氨酸 (Glu)膜电流、胞内游离钙 ( [Ca2 +]i)的升高 ,以及后期核内效应 ,发挥其保护神经元的作用。

关键词：应激睫状神经营养因子海马神经元形态学

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乳酸脱氢酶法检测恶性疟原虫融合蛋白-2.9免疫血清体外抑制效果

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2006年第3期24卷 223-225页

作者：曲莉潘卫庆第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

目的用乳酸脱氢酶(LDH)法检测恶性疟原虫融合蛋白(PfCP-2.9)免疫兔血清体外抑制恶性疟原虫生长的效果。方法将恶性疟原虫起始培养物的原虫率稀释为(0.4±0.1)%,红细胞压积为2%,使用不同浓度恶性疟原虫融合抗原PfCP-2.9免疫兔血清进... 详细信息

目的用乳酸脱氢酶(LDH)法检测恶性疟原虫融合蛋白(PfCP-2.9)免疫兔血清体外抑制恶性疟原虫生长的效果。方法将恶性疟原虫起始培养物的原虫率稀释为(0.4±0.1)%,红细胞压积为2%,使用不同浓度恶性疟原虫融合抗原PfCP-2.9免疫兔血清进行恶性疟原虫体外生长抑制试验,40～42h后分别用LDH检测法和传统镜检计数法检测原虫生长抑制率。结果PfCP-2.9免疫兔血清在体外对恶性疟原虫有较强的抑制作用。LDH测定法与传统镜检法测得体外恶性疟原虫抑制率相近(分别为97%和100%),两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论LDH法检测恶性疟原虫体外抑制试验是一种简单、可行的实验方法。

关键词：恶性疟原虫体外抑制试验乳酸脱氢酶

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组蛋白脱乙酰化酶HDAC1 cDNA的克隆及其酵母表达质粒的构建

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第二军医大学学报 1999年第4期20卷 205-208页

作者：陈坚张晓琴傅继梁第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：获得ＨＤＡＣ１的ｃＤＮＡ及构建酵母双杂合系统中的靶基因。方法：利用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从人Ｊｕｒｋａｔ细胞中扩增出一约１．４５ｋｂ的ＤＮＡ片段，作全自动测序，重组入ｐＬｅｘＡ载体，构建成ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１，并... 详细信息

目的：获得ＨＤＡＣ１的ｃＤＮＡ及构建酵母双杂合系统中的靶基因。方法：利用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从人Ｊｕｒｋａｔ细胞中扩增出一约１．４５ｋｂ的ＤＮＡ片段，作全自动测序，重组入ｐＬｅｘＡ载体，构建成ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１，并用醋酸锂法转化酵母菌ＥＧＹ４８，在选择性培养基上观察ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１在ＥＧＹ４８中的表达情况。结果：获得的１．４５ｋｂ的ＤＮＡ编码的氨基酸序列与文献报道的ＨＤＡＣ１一致，转化的酵母菌在选择性培养基ＳＤ／Ｇａｌ／Ｒａｆ／－Ｕｒａ／－Ｈｉｓ／上培养３ｄ后，长出约１ｍｍ大小的白色菌落。结论：获得了ＨＤＡＣ１的ｃＤＮＡ，ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１对ＥＧＹ４８没有毒性作用，也没有自身激活ＬａｃＺ功能，可作为酵母双杂合系统中的靶基因。

关键词：组蛋白脱乙酰化酶酵母双杂合系统质粒克隆

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TT型病毒基因组的克隆与进化分析

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微生物学报 2001年第4期41卷 408-414页

作者：任浩董辉朱分禄缪晓辉王文戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长征医院感染科

利用PCR方法从输血传播性病毒(transfusion transmitted virus,TTV)阳性标本中获得不同长度且重叠覆盖TTV基因组的DNA片段.将PCR扩增片段克隆到pT-Adv载体中,筛选获得阳性克隆.DNA序列测定结果表明所克隆的片段为TTV基因组序列.利用DNA... 详细信息

利用PCR方法从输血传播性病毒(transfusion transmitted virus,TTV)阳性标本中获得不同长度且重叠覆盖TTV基因组的DNA片段.将PCR扩增片段克隆到pT-Adv载体中,筛选获得阳性克隆.DNA序列测定结果表明所克隆的片段为TTV基因组序列.利用DNA片段中特有的限制性内切酶位点将TTV的DNA片段首尾相连,得到近全长的基因组克隆,命名为TTV021.对TTV021的核酸序列进行分析,TFV021长3 472 nt,存在2个阅读框架ORF1和ORF2,分别编码785和146个氨基酸.将TTV021与其它已知的TTV基因组全序列进行了同源性比较,并进行进化分析.结果表明,TTV021序列与TTV分离株CHN2、BDH1的遗传距离较近,而与其它分离株相对较远.

关键词：输血传播性病毒克隆同源性进化分析

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人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因Oct4的克隆及其在大肠杆菌中的表达(英文)

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第二军医大学学报 2003年第9期24卷 937-940页

作者：刘善荣王庆敏杨玲汤淑萍惠宁蒋正戚中田刘厚奇第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室第二军医大学长海医院妇产科第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的 :克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。方法 :取 4～ 6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜 ,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建成 pGEX5T Oct4重组质粒。β硫... 详细信息

目的 :克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。方法 :取 4～ 6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜 ,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建成 pGEX5T Oct4重组质粒。β硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导使该基因在k80 2菌中表达。结果 :用PCR方法扩增获得大小约 1 .1kb条带 ;全自动测序与GenBank中登录的序列 97%同源。获得了pGEX5T Oct4重组子并在k80 2菌中获得了表达 ,SDS PAGE分析有一特异性的 6 2 0 0 0条带。结论 :扩增和克隆了人胚生殖系细胞多能性调节蛋白Oct4全长cDNA并在大肠杆菌中获得表达。

关键词：人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因 Oct4 克隆基因克隆基因表达

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抗平颏海蛇短链神经毒素全人源单克隆抗体的筛选、制备及生物活性研究

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解放军医学杂志 2017年第7期42卷 612-616页

作者：胡适沈亚峰李天雷长海第二军医大学基础医学部生物物理学教研室上海200433

目的重组表达3种平颏海蛇短链神经毒素,利用噬菌体抗体库筛选制备全人源抗毒素单克隆抗体并评估其生物活性。方法以重组表达纯化的神经毒素蛋白作为抗原,从自主构建的噬菌体抗体库中筛选获得噬菌体抗体,经序列测定确定其抗体类型后构建... 详细信息

目的重组表达3种平颏海蛇短链神经毒素,利用噬菌体抗体库筛选制备全人源抗毒素单克隆抗体并评估其生物活性。方法以重组表达纯化的神经毒素蛋白作为抗原,从自主构建的噬菌体抗体库中筛选获得噬菌体抗体,经序列测定确定其抗体类型后构建完整抗体。利用真核表达系统表达纯化抗体后鉴定其抗原结合活性、生化特性及药代动力学特性。在体内验证抗体药物的抗毒素作用。结果经过4轮筛选,获得2株能同时结合3种神经毒素的噬菌体单链抗体,并将其制备成完整的抗体,进一步证实所获得的抗体可特异性结合3种抗原。2株全人源抗体均可拮抗神经毒素对昆明小鼠的致死作用。结论利用重组神经毒素和噬菌体抗体库技术成功获得了特异性抗平颏海蛇短链神经毒素的全人源治疗性抗体。

关键词：平颏海蛇短链神经毒素单克隆抗体全人源抗体抗毒素

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