检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2004年第8期25卷 862-864页

作者：彭艳郑颖蒋平何玮侯彦强周聪郭春香倪健焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 上海富纯中南生物技术有限公司上海201203 第二军医大学长征医院实验诊断科上海200003

目的:建立一种利用二维液相色谱法分离肿瘤细胞全细胞裂解液的方法。方法:将肿瘤细胞裂解样品用初始缓冲液置换后,进行一维色谱聚焦分离,然后先对二维色谱条件进行优化和重现性分析,再将一维收集的pH值8.5-4.0之间的组分分别进行二维反... 详细信息

目的:建立一种利用二维液相色谱法分离肿瘤细胞全细胞裂解液的方法。方法:将肿瘤细胞裂解样品用初始缓冲液置换后,进行一维色谱聚焦分离,然后先对二维色谱条件进行优化和重现性分析,再将一维收集的pH值8.5-4.0之间的组分分别进行二维反相HPLC分离,利用ProteoVue软件将UV图转换成胶图。结果:一维色谱聚焦分离pH值8.5-4.0之间的组分共收集到16个,每个组分的二维UV图转换成pI／UV胶图。结论:二维液相色谱分离法是一种有效的分离肿瘤细胞裂解液的方法。

关键词：蛋白质组肿瘤细胞二维液相色谱分离

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脊髓损伤后自主神经反射异常大鼠心脏和肠系膜前动脉α-肾上腺素能受体的表达

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第二军医大学学报 2006年第2期27卷 156-159页

作者：石学银邹最李盈科徐振东周运恒于军刘刚第二军医大学长征医院麻醉科上海200003 复旦大学附属华山医院麻醉科上海200040 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:观察高位脊髓横切(spinal cord transection,SCT)慢性期自主神经反射异常(autonomic dysreflexia,AD)大鼠心脏和肠系膜前动脉α-肾上腺素能受体(-αAR)各亚型mRNA表达量,探讨AD的可能机制。方法:暴露大鼠脊髓,横切T4节段,术后4周... 详细信息

目的:观察高位脊髓横切(spinal cord transection,SCT)慢性期自主神经反射异常(autonomic dysreflexia,AD)大鼠心脏和肠系膜前动脉α-肾上腺素能受体(-αAR)各亚型mRNA表达量,探讨AD的可能机制。方法:暴露大鼠脊髓,横切T4节段,术后4周用自制导管刺激直肠,观察升压反应,挑选发生AD的大鼠(AD组,n=16),取其心脏和肠系膜前动脉及其分支,实时定量PCR测定α1A-,α1B-,α1D-,α2A-,α2B-,α2C-AR mRNA的表达量,与只暴露脊髓、不进行横切的大鼠(假手术组,n=16)进行比较。结果:与假手术组相比,AD组大鼠心脏α1A-AR mRNA(P<0.05)、α1B-AR mRNA(P<0.01)表达下调,而α1D-ARmRNA表达量未见明显改变;肠系膜前动脉α1A、-α1D、-α2B-AR mRNA(P<0.01)、α2C-AR mRNA(P<0.05)表达上调,而α1B-、α2A-AR mRNA表达量未见明显改变。结论:大鼠SCT慢性期AD的发生可能与心脏α1A-、α1B-AR,肠系膜前动脉α1A-、α1D-、α2B-、α2C-AR的异常表达有关。

关键词：脊髓损伤自主神经反射异常受体肾上腺素能α 心脏肠系膜动脉基因表达

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温血停搏液控制性再灌注减轻缺血心肌再灌注损伤的实验研究

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第二军医大学学报 1997年第1期18卷 38-40页

作者：陈龙胡寿鹏张荣良张宝仁朱家麟陈如坤陈克明杨林南京军区福州总医院胸心外科福州350001 南京军区福州总医院胸心外科第二军医大学长海医院胸心外科第二军医大学基础医学部生物化学教研室

目的:观察含甘露醇的温血停搏液控制性再灌注对缺血再灌注心肌的保护作用。方法：利用猎体外循环模型，心脏低温停搏60min，干恢复正常血液灌注前从主动脉根部以5～6kPa的压力注入37℃含甘露醇的低钾温血停搏液50ml。测定心肌力学各指... 详细信息

目的:观察含甘露醇的温血停搏液控制性再灌注对缺血再灌注心肌的保护作用。方法：利用猎体外循环模型，心脏低温停搏60min，干恢复正常血液灌注前从主动脉根部以5～6kPa的压力注入37℃含甘露醇的低钾温血停搏液50ml。测定心肌力学各指标、心肌ATP及水含量。结果：急性心肌缺血再灌注后心功能明显减退，心肌水含量增加，心肌ATP含量恢复受限，出现再灌注损伤；而用温血停搏液控制性再灌注可减轻缺血心肌的再灌注损伤。结论：温血停搏液控制性再灌注可防止再灌注的缺血心肌暴发性水肿，增加心肌能量储备，有利于心功能恢复，减轻再灌注心肌的进一步损伤。

关键词：心肌缺血再灌注损伤温血停搏液心肌保护

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海螵蛸多糖的提取分离及活性组分CPS-1的纯化

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第二军医大学学报 2006年第1期27卷 17-21页

作者：魏江洲张建鹏刘军华王顺春冯伟华焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 上海中医药大学中药研究所上海201203

目的:从海洋中草药海螵蛸(乌贼骨)中提取分离得到多糖活性物质。对粗多糖中主要的活性组分CPS-1进行纯化,得到成分相对均一的天然活性多糖。方法:用热水抽提法提取海螵蛸多糖粗品,并对提取工艺进行正交设计,优化提取方法。对粗品组分进... 详细信息

目的:从海洋中草药海螵蛸(乌贼骨)中提取分离得到多糖活性物质。对粗多糖中主要的活性组分CPS-1进行纯化,得到成分相对均一的天然活性多糖。方法:用热水抽提法提取海螵蛸多糖粗品,并对提取工艺进行正交设计,优化提取方法。对粗品组分进行总糖量测定。用DEAE-Sepharose F.F柱及Sepharose CL-6B柱对海螵蛸多糖粗品进行分离。通过活性检测实验确定活性部分。最后使用Sephacryl S-300柱进一步纯化。用HPLC来检测精品多糖的纯度。标准曲线法测定相对分子质量。结果:成功得到海螵蛸粗多糖。经过离子交换柱DEAE-Sepharose Fast Flow和Sepharose CL-6B柱及分子筛Sephacr-yl S-300柱的进一步分离纯化和活性跟踪,最后得到相对均一的活性精品多糖CPS-1,其含糖量达93.6%,相对分子质量为1×106。结论:不同的提取条件影响海螵蛸多糖的得率。不同性质的分离材料能够将相对分子质量及电荷有差异的多糖分离,达到分离的目的。精品多糖CPS-1是从海洋中草药海螵蛸中得到的均一多糖组分。

关键词：海螵蛸多糖类分离提纯 CPS-1

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血管内皮生长因子基因治疗兔下肢缺血的实验研究

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第二军医大学学报 2000年第5期21卷 447-449页

作者：顾洪陈少萍张电波王官将毛积芳第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 长海医院心血管内科长征医院放射科

目的 :了解血管内皮生长因子 (VEGF)基因治疗兔下肢缺血模型后新生血管和侧支循环形成状况。方法 :构建h VEGF1 6 5 的真核表达载体 ,通过直接肌肉注射将 h VEGF1 6 5 基因转染缺血部位肌细胞 ,经颈总动脉插管行下肢血管造影。结果 :V... 详细信息

目的 :了解血管内皮生长因子 (VEGF)基因治疗兔下肢缺血模型后新生血管和侧支循环形成状况。方法 :构建h VEGF1 6 5 的真核表达载体 ,通过直接肌肉注射将 h VEGF1 6 5 基因转染缺血部位肌细胞 ,经颈总动脉插管行下肢血管造影。结果 :VEGF治疗组在质粒转染后 2和 4周动脉血管造影显示 ,新生血管数目和侧枝血管形成较对照组明显增加。结论 :肌细胞能够吸收裸露的 VEGF c DNA质粒并获得局部高效表达。

关键词：侧支循环血管内皮生长因子基因治疗下肢缺血

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黄素单核苷酸对羟自由基损伤的大鼠肝线粒体复合物Ⅰ的保护作用

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第二军医大学学报 2005年第10期26卷 1136-1139页

作者：龙建纲王学敏高宏翔刘志缪明永刘健康中国科学院营养科学研究所上海200031 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:观察黄素单核苷酸(FMN)对羟自由基(OH·)损伤线粒体酶复合物1(complexⅠ)的作用,分析FMN与complexⅠ的相互作用机制。方法:差速离心法分离大鼠肝线粒体,OH·体外损伤线粒体,氧电极法测定线粒体耗氧速率,比色法检测线粒体co... 详细信息

目的:观察黄素单核苷酸(FMN)对羟自由基(OH·)损伤线粒体酶复合物1(complexⅠ)的作用,分析FMN与complexⅠ的相互作用机制。方法:差速离心法分离大鼠肝线粒体,OH·体外损伤线粒体,氧电极法测定线粒体耗氧速率,比色法检测线粒体complexⅠ动力学参数及线粒体内MDA、GSH含量及SOD活性。结果:OH·损伤后,线粒体3态、4态(state3,state4)耗氧速率、complexⅠ最大反应速度(Vm)降低(P<0.05),但呼吸控制率(respiratorycontrolratio,RCR)、磷氧比(P/O)及complexⅠ米氏常数(Km)不变,线粒体中GSH含量下降(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05),MDA含量升高。损伤线粒体补充FMN165ng/ml可部分恢复complexⅠ呼吸途径state3耗氧速率(P<0.05),补充FMN82.5～165ng/mg可显著提高OH·损伤的线粒体复合物Ⅰ的Vm(P<0.05)。损伤线粒体补充较低剂量的FMN(FMN<82.5ngFMN/ml),线粒体中GSH、SOD、MDA含量不发生变化,在补充较高剂量FMN(>165ngFMN/ml)时,SOD活性升高(P<0.05),但线粒体MDA含量升高(P<0.05)、GSH含量下降(P<0.05)。结论:FMN能够提高氧化损伤线粒体复合物Ⅰ活性,促进complexⅠ呼吸途径的state3耗氧速率。FMN不能直接清除OH·及自由基,可能通过保护complexⅠ中的酶结合/活性位点免受OH·等自由基攻击从而维持酶活性。

关键词：黄素单核苷酸羟自由基肝线粒体酶复合物Ⅰ

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丙二醛对大鼠肝线粒体呼吸功能及相关脱氢酶活性影响

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第二军医大学学报 2005年第10期26卷 1131-1135页

作者：龙建纲王学敏高宏翔刘昌盛刘志缪明永刘健康中国科学院营养科学研究所上海200031 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:探索脂质氧化终产物丙二醛(MDA)在体外对线粒体呼吸链复合物及线粒体内关键酶活性的影响。方法:采用不同浓度MDA体外干预大鼠肝线粒体,氧电极法检测线粒体呼吸控制率(RCR)、磷氧比(P/O),测定呼吸链复合物及α酮戊二酸脱氢酶、丙酮... 详细信息

目的:探索脂质氧化终产物丙二醛(MDA)在体外对线粒体呼吸链复合物及线粒体内关键酶活性的影响。方法:采用不同浓度MDA体外干预大鼠肝线粒体,氧电极法检测线粒体呼吸控制率(RCR)、磷氧比(P/O),测定呼吸链复合物及α酮戊二酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶活性。结果:线粒体经MDA作用后,以苹果酸/谷氨酸或琥珀酸作底物,线粒体两条呼吸途径对MDA呈现不同的耐受力,前者在MDA100μmol/L时RCR显著降低(P<0.05),400μmol/L时P/O降低(P<0.05);后者MDA浓度达到400和800μmol/L时,线粒体P/O及RCR值显著降低(P<0.05)。丙酮酸脱氢酶及α酮戊二酸脱氢酶分别在50μmol/L和100μmol/L时活性下降(P<0.05),而MDA浓度达到1mmol/L时,苹果酸脱氢酶活性降低(P<0.05)。呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ分别在MDA400和800μmol/L时最大反应速度(Vm)降低(P<0.05),但MDA(0～3.2mmol/L)对呼吸链复合物Ⅲ、Ⅳ的Vm及米氏常数(Km)没有影响。结论:MDA对线粒体呼吸链及α酮戊二酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶存在不同程度的损伤作用,不同酶对MDA损伤的敏感程度有所差异,本研究中相关酶受MDA损伤的次序可能是:丙酮酸脱氢酶、α酮戊二酸脱氢酶、呼吸链复合物Ⅰ、呼吸链复合物Ⅱ、苹果酸脱氢酶、呼吸链复合物Ⅲ、Ⅳ。

关键词：丙二醛肝线粒体脱氢酶

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大鼠脑外伤时嘌呤受体P2X4受体的表达

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解剖学杂志 2003年第3期26卷 203-208页

作者：向正华吕军蒋平焦炳华 Burnstock G 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 英国伦敦大学学院自主神经科学研究所

目的:观察大鼠脑外伤后嘌呤受体亚型P2X4的表达水平。方法:免疫组织化学和半定量RT-PCR。结果:脑外伤后P2X4受体表达水平迅速升高,并在损伤后较长的时间内维持高的表达水平;脑外伤早期,损伤区P2X4免疫反应阳性细胞主要是圆形细胞,中后... 详细信息

目的:观察大鼠脑外伤后嘌呤受体亚型P2X4的表达水平。方法:免疫组织化学和半定量RT-PCR。结果:脑外伤后P2X4受体表达水平迅速升高,并在损伤后较长的时间内维持高的表达水平;脑外伤早期,损伤区P2X4免疫反应阳性细胞主要是圆形细胞,中后期主要以具有突起的细胞为主。结论:脑外伤早期,损伤区P2X4受体免疫反应阳性细胞主要为小胶质细胞,中后期可能星形胶质细胞为多;由此推测P2X4参与脑外伤时大脑生理或病理生理功能的调节。

关键词：大鼠脑外伤嘌呤受体 P2X4 免疫组织化学细胞免疫反应 RT-PCR

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曲美他嗪对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

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第二军医大学学报 2003年第3期24卷 324-326页

作者：赵艳芳秦永文王学敏缪明永解放军第81医院心血管内科南京210002 第二军医大学长海医院心血管内科上海200433 第二军医大学基础医学部生物化学教研室

目的 :探讨曲美他嗪 (trimetazidine ,TMZ)对心肌缺血再灌注损伤 (RI)的保护作用及其机制。方法 :5 0只SD雄性大鼠随机分为假手术组、生理盐水组和药物组 (TMZ 5或 10mg/kg) ,共 4组 ,假手术组只开胸 ,不结扎冠脉。余 3组制作RI模型 ,... 详细信息

目的 :探讨曲美他嗪 (trimetazidine ,TMZ)对心肌缺血再灌注损伤 (RI)的保护作用及其机制。方法 :5 0只SD雄性大鼠随机分为假手术组、生理盐水组和药物组 (TMZ 5或 10mg/kg) ,共 4组 ,假手术组只开胸 ,不结扎冠脉。余 3组制作RI模型 ,缺血前分别静脉注射TMZ(5或 10mg/kg)及等量生理盐水 ,在缺血 30min及再灌注 4 0min时分别测定血清肌酸磷酸激酶 (CK) ,再灌注 4 0min时测定RI区心肌丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽 (GSH)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH Px)等变化。结果 :药物组在缺血 30min时及再灌注 4 0min时的血清CK较生理盐水组显著降低。与假手术组相比 ,生理盐水组及药物组的MDA显著增高 ,SOD、GSH及GSH Px显著降低 ;与生理盐水组比较 ,药物组的MDA显著降低 ,SOD、GSH及GSH Px显著增高。结论 :TMZ能抑制心肌细胞缺血及再灌注时心肌酶的漏出 ,对心肌缺血及缺血再灌注损伤具有一定的保护作用。其机制可能是通过提高体内自由基清除剂GSH的含量及SOD、GSH Px的活力。

关键词：曲美他嗪心肌缺血再灌注损伤氧自由基

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极地真菌Geomyces sp.3-1次级代谢产物的研究

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天然产物研究与开发 2017年第4期29卷 590-594页

作者：李云海王晓丽卢小玲于豪冰刘小宇第二军医大学海洋生物医药研究中心第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 浙江海洋大学海洋科学与技术学院舟山316022

采用硅胶柱层析、ODS反相硅胶柱层析、凝胶柱层析和高效液相HPLC等色谱技术,对极地真菌Geomyces sp.3-1的发酵液提取物进行分离纯化,共得到8个化合物,通过波谱解析结合理化性质并比较相关文献,确定化合物为:paulownin(1)、demethylincis... 详细信息

采用硅胶柱层析、ODS反相硅胶柱层析、凝胶柱层析和高效液相HPLC等色谱技术,对极地真菌Geomyces sp.3-1的发酵液提取物进行分离纯化,共得到8个化合物,通过波谱解析结合理化性质并比较相关文献,确定化合物为:paulownin(1)、demethylincisterol A3(2)、ergosta-7,22-dienen-3,6-dione(3)、citreoanthrasteroid B(4)、19-norergosta-5,7,9,22-tetraene-3β-ol(5)、(22E)-5α,8α-epidioxyergosta-6,22-dien-3β-ol(6)、(3β,5α,6β,22E)-6-methoxyergosta-7,22-diene-3,5-diol(7)和ergosta-7,22-dien-3β-ol(8)。其中,化合物2~7均是首次从Geomyces属真菌中获得,化合物2有较好的抗菌和细胞毒活性。

关键词：极地真菌地丝霉属次级代谢产物生物学活性

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