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第二军医大学学报 2006年第8期27卷 885-887页

作者：王燕陈玉霞刁飞卢建第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433

目的:观察地塞米松对前列腺癌PC-3细胞中转录因子NF-κB及其下游靶基因cyclinD1的调节作用,探讨其抑制PC-3细胞增殖的可能机制。方法:MTT法检测地塞米松对PC-3细胞增殖的影响;转染和报告基因的方法比较多种肿瘤细胞中NF-κB的基础转录... 详细信息

目的:观察地塞米松对前列腺癌PC-3细胞中转录因子NF-κB及其下游靶基因cyclinD1的调节作用,探讨其抑制PC-3细胞增殖的可能机制。方法:MTT法检测地塞米松对PC-3细胞增殖的影响;转染和报告基因的方法比较多种肿瘤细胞中NF-κB的基础转录活性并检测地塞米松对PC-3细胞NF-κB转录活性的调节;Western印迹法检测地塞米松对PC-3细胞cyclinD1蛋白表达的影响。结果:地塞米松抑制PC-3细胞的增殖;PC-3细胞中NF-κB处于组成型激活状态,地塞米松抑制PC-3细胞中转录因子NF-κB的转录活性;地塞米松下调PC-3细胞中cyclinD1蛋白的表达。结论:地塞米松抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖,这可能与其抑制转录因子NF-κB的转录活性及其下游的靶基因cyclinD1的蛋白表达有关。

关键词：地塞米松前列腺肿瘤细胞增殖

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1,25-二羟维生素D_3对其D_3受体mRNA表达的细胞特异性调节

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第二军医大学学报 1997年第1期18卷 32-34页

作者：宋亮年第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433

目的:以人原始巨核白血病细胞系（HIMeg）和人骨肉瘤细胞系（HOS－8603）为细胞模型，研究1，25一二羟维生素D3[1，25（OH）2D3]对维生素D3受体（VDR）mRNA表达的调节作用。方法：VDRmRNA的检测采用定量逆转录．聚合酶链反应（RT－PCR... 详细信息

目的:以人原始巨核白血病细胞系（HIMeg）和人骨肉瘤细胞系（HOS－8603）为细胞模型，研究1，25一二羟维生素D3[1，25（OH）2D3]对维生素D3受体（VDR）mRNA表达的调节作用。方法：VDRmRNA的检测采用定量逆转录．聚合酶链反应（RT－PCR）。结果：HOS－8603细胞经1，25（OH）2D3处理0～24h后，VDRZRNA表达水平无明显变化；但是1，25（OH）2D3却可以使HIMeg细胞VDRmRNA水平明显降低，且具有时间依赖性，24h后达到最低水平，仅为对照组的15％。结论：1，25（OH）2D3对VDRmRNA表达的调节作用具有组织细胞特异性。

关键词：二羟维生素D3 受体 mRNA 基因表达

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核受体家族研究的进展

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第二军医大学学报 2001年第11期22卷 1053-1054页

作者：徐仁宝第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433

1 概述核受体(NR)家族是与类固醇激素受体同源的一类配体依赖性转录因子,其成员由三大类组成:类固醇激素受体、非类固醇激素受体和孤儿核受体.1999年为止已克隆的NR达65种,1999年由Nuclear Receptor Nomenclature Committee建议了命名原... 详细信息

1 概述核受体(NR)家族是与类固醇激素受体同源的一类配体依赖性转录因子,其成员由三大类组成:类固醇激素受体、非类固醇激素受体和孤儿核受体.1999年为止已克隆的NR达65种,1999年由Nuclear Receptor Nomenclature Committee建议了命名原则,即按其同源性,将NR分为6个亚家族(subfamily),以1,2,…表示,每个亚家族又分为几个组(group),以A,B,C…表示,每个组都有几个NR,以1,2,…表示,同型以下角a,b,c,…表示.

关键词：核受体配体依赖性转录因子核受体研究临床内分泌学

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碳水化合物反应元件结合蛋白条件性基因敲除小鼠模型的建立及鉴定

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第二军医大学学报 2019年第2期40卷 142-148页

作者：李昊师建辉魏纯纯麻献华陈玉霞章卫平海军军医大学(第二军医大学)基础医学院病理生理学教研室上海200433

目的建立转录因子碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)的条件性基因敲除小鼠模型,为研究ChREBP的体内生物学功能提供技术手段。方法和结果利用Cre/loxP基因打靶策略,通过构建基因打靶载体和基于胚胎干细胞(ES细胞)的基因同源重组,在ChR... 详细信息

目的建立转录因子碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)的条件性基因敲除小鼠模型,为研究ChREBP的体内生物学功能提供技术手段。方法和结果利用Cre/loxP基因打靶策略,通过构建基因打靶载体和基于胚胎干细胞(ES细胞)的基因同源重组,在ChREBP基因第8外显子的两侧分别引入loxP位点;将打靶成功的ES细胞显微注射至小鼠囊胚,然后植入假孕雌鼠子宫获得嵌合鼠,进一步获得可种系传代的ChREBP?ox/+小鼠;将ChREBP?ox/+小鼠与Alb-Cre小鼠交配,获得ChREBP的肝脏特异性基因敲除小鼠。结论建立了ChREBP条件性基因敲除小鼠模型,为揭示不同组织中ChREBP的生理功能和病理学意义提供了重要手段。

关键词：碳水化合物反应元件结合蛋白果糖代谢脂代谢基因敲除小鼠基因打靶

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糖皮质激素对人卵巢癌细胞系HO-8910细胞周期的影响

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第二军医大学学报 2003年第5期24卷 499-501页

作者：夏冰陈玉霞陈光椿卢建第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433

目的:观察糖皮质激素对人卵巢癌细胞HO-8910细胞周期的影响,并初步探讨其作用机制。方法:将1×10-7mol/L地塞米松(dexamethasone,Dex)和1×10-6mol/L糖皮质激素受体阻断剂RU486分别单用或合用处理HO-8910细胞,采用流式细胞术测... 详细信息

目的:观察糖皮质激素对人卵巢癌细胞HO-8910细胞周期的影响,并初步探讨其作用机制。方法:将1×10-7mol/L地塞米松(dexamethasone,Dex)和1×10-6mol/L糖皮质激素受体阻断剂RU486分别单用或合用处理HO-8910细胞,采用流式细胞术测定细胞周期,核素掺入半定量RT-PCR检测细胞周期蛋白激酶抑制剂p21/WAF1的表达水平。结果:Dex诱导HO-8910细胞发生G0/G1期停滞,并使p21/WAF1 mRNA表达上调;RU486可逆转Dex引起的p21/WAF1表达的变化。结论:p21/WAF1的表达上调可能参与糖皮质激素引起的HO-8910细胞G0/G1期停滞作用。

关键词：糖皮质激素人卵巢癌细胞系 HO-8910 细胞周期

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稳定表达糖皮质激素受体β的人骨肉瘤细胞系的建立

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第二军医大学学报 2002年第2期23卷 179-182页

作者：刘宇健陈玉霞宋亮年卢建第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433

目的 :建立稳定表达糖皮质激素受体β的细胞系。方法 :构建糖皮质激素受体β的真核表达载体 ,用L ipotransfectamine法转染人骨肉瘤细胞系 HOS- 86 0 3,经 G4 18筛选后得到稳定转染细胞株 ;用极限稀释法获取亚克隆细胞株 ;用定量 RT- ... 详细信息

目的 :建立稳定表达糖皮质激素受体β的细胞系。方法 :构建糖皮质激素受体β的真核表达载体 ,用L ipotransfectamine法转染人骨肉瘤细胞系 HOS- 86 0 3,经 G4 18筛选后得到稳定转染细胞株 ;用极限稀释法获取亚克隆细胞株 ;用定量 RT- PCR方法鉴定糖皮质激素受体β m RNA的表达。结果与结论 :建立了稳定表达糖皮质激素受体β的细胞株。

关键词：糖皮质激素β受体骨肉瘤基因转染聚合酶链反应

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PC-3细胞中雄激素受体突变体的表达和转录激活功能的研究

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第二军医大学学报 2005年第4期26卷 402-405页

作者：卢莹陈光椿李忆东卢建第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433

目的:探讨前列腺癌中发现的4 种雄激素受体(androgen receptor,AR)的点突变对AR转录激活功能的影响。方法:将野生型AR(wtAR)或AR突变体的表达载体与报告基因(pMMTV LUC)及内参照基因(pRLSV40 LUC)质粒共转染入PC 3细胞中,分别用雄激素... 详细信息

目的:探讨前列腺癌中发现的4 种雄激素受体(androgen receptor,AR)的点突变对AR转录激活功能的影响。方法:将野生型AR(wtAR)或AR突变体的表达载体与报告基因(pMMTV LUC)及内参照基因(pRLSV40 LUC)质粒共转染入PC 3细胞中,分别用雄激素受体的激动剂二氢睾酮(DHT)以及其他甾体激素(雌二醇及孕激素)处理细胞,24 h后用双荧光素酶报告基因分析系统检测报告基因的活性,同时用Western印迹法检测AR蛋白。结果:在DHT作用下,G142V、D221H突变体对报告基因的诱导水平高于wtAR,是wtAR的近1.30 倍(P<0.05),其余突变体与wtAR相比对报告基因的诱导水平无显著差异;在雌二醇(E2)与孕激素(PROG)作用下,E872Q对报告基因的诱导水平高于wtAR,分别为wtAR的1.27、1.47倍(P<0.05)。结论:G142V、D221H点突变使AR突变体转录激活功能增强,E872Q点突变可能影响了AR的配体结合特异性,上述结果有助于阐明前列腺癌由雄激素依赖性转为非依赖性的机制。

关键词：前列腺癌雄激素受体基因突变转录激活

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地塞米松对人肝癌细胞系酪氨酸转氨酶mRNA表达的影响

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第二军医大学学报 2002年第2期23卷 176-178页

作者：李忆东刘宇健卢建第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433

目的 :观察地塞米松 (Dex)对人肝癌细胞系 (SMMC- 772 1细胞 )酪氨酸转氨酶 m RNA表达的影响。方法 :采用定量逆转录 -多聚酶链反应 (RT- PCR)检测酪氨酸转氨酶 m RNA。结果 :Dex能够诱导 SMMC- 772 1细胞酪氨酸转氨酶 m RNA的表达 ,... 详细信息

目的 :观察地塞米松 (Dex)对人肝癌细胞系 (SMMC- 772 1细胞 )酪氨酸转氨酶 m RNA表达的影响。方法 :采用定量逆转录 -多聚酶链反应 (RT- PCR)检测酪氨酸转氨酶 m RNA。结果 :Dex能够诱导 SMMC- 772 1细胞酪氨酸转氨酶 m RNA的表达 ,且具有剂量依赖性和时间依赖性特点 ,但诱导倍数偏低。结论 :SMMC- 772

关键词：酷氨酸氨基转移酶肝肿瘤糖皮质激素类糖皮质激素受体地塞米松影响 mRNA

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稳定转染维生素D受体反义cDNA的人骨肉瘤细胞系的建立

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第二军医大学学报 2001年第3期22卷 242-244页

作者：陈玉霞刘宇健宋亮年第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433

目的 :建立稳定转染维生素 D受体 (VDR)反义 c DNA的人骨肉瘤细胞系。方法 :构建 VDR反义 c DNA的真核表达载体 ,用 L ipofectamine法转染人骨肉瘤细胞系 HOS- 86 0 3,经 G418筛选后获得稳定转染细胞株 ,并用免疫组化技术检测内源性 VD... 详细信息

目的 :建立稳定转染维生素 D受体 (VDR)反义 c DNA的人骨肉瘤细胞系。方法 :构建 VDR反义 c DNA的真核表达载体 ,用 L ipofectamine法转染人骨肉瘤细胞系 HOS- 86 0 3,经 G418筛选后获得稳定转染细胞株 ,并用免疫组化技术检测内源性 VDR蛋白的表达情况 ;采用瞬时转染报告基因技术从靶基因水平检测 VDRas3细胞内 VDR的转录激活功能。结果 :筛选出 6株抗 G418细胞克隆 (VDRas1～ 6 ) ,其中 VDRas3细胞内源性 VDR蛋白的表达量低于对照细胞。激素作用 72 h后 ,对照细胞的报告基因氯霉素乙酰转移酶 (CAT)转录活性增加约 3.5倍 ,而 VDRas3细胞 CAT的转录基本不受激素诱导。结论 :获得了稳定转染 VDR反义 c DNA的细胞系 ,为今后进一步研究 1,2 5 (OH) 2 D3及其类似物调节细胞增殖分化的分子机制提供了一个良好的细胞模型。

关键词：人骨肉瘤细胞受体维生素D 反义cDNA 基因转染

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人雄激素受体激素结合区cDNA片段在大肠杆菌中表达的影响因素

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第二军医大学学报 1997年第4期18卷 384-385页

作者：王志强王学敏毛积芳卢建第二军医大学基础医学部生物化学教研室第二军医大学基础医学部病理生理学教研室

人雄激素受体激素结合区ｃＤＮＡ片段在大肠杆菌中表达的影响因素王志强王学敏毛积芳卢建△人雄激素受体（ｈＡＲ）是类固醇激素受体超家族的成员之一，其分子为９１９个氨基酸残基组成的多肽链，分３个功能区：Ｎ端区、ＤＮＡ结合区和... 详细信息

人雄激素受体激素结合区ｃＤＮＡ片段在大肠杆菌中表达的影响因素王志强王学敏毛积芳卢建△人雄激素受体（ｈＡＲ）是类固醇激素受体超家族的成员之一，其分子为９１９个氨基酸残基组成的多肽链，分３个功能区：Ｎ端区、ＤＮＡ结合区和激素结合区。激素结合区由２４４个氨...

关键词：人雄激素受体激素结合区大肠杆菌基因表达

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