检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2004年第3期25卷 301-303页

作者：马玉海张勇曹莉张少成潘永太麻文谦孙来卿路长林第二军医大学长海医院骨科上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的 :研究嗅鞘细胞 (OECs)移植对大鼠坐骨神经再生的作用。方法 :30只 SD大鼠随机分为 OECs组和对照组 ,每组 1 5只 ;切除 3m m右侧坐骨神经并用预先充填可吸收明胶的硅胶管套接修复 ,OECs组和对照组硅胶管内分别给予体外培养纯化的 O... 详细信息

目的 :研究嗅鞘细胞 (OECs)移植对大鼠坐骨神经再生的作用。方法 :30只 SD大鼠随机分为 OECs组和对照组 ,每组 1 5只 ;切除 3m m右侧坐骨神经并用预先充填可吸收明胶的硅胶管套接修复 ,OECs组和对照组硅胶管内分别给予体外培养纯化的 OECs和生理盐水 ;术后 4、8和 1 2周分别行电生理和组织学检查。结果 :术后 4、8和 1 2周 ,OECs组和对照组修复神经均有不同程度再生 ,OECs组运动神经传导速度、神经肌肉动作电位幅度、有髓神经纤维数目和直径均明显高于对照组(P<0 .0 5 )。结论 :外源性

关键词：嗅鞘细胞大鼠坐骨神经神经再生细胞移植

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一种改良的分离小分子蛋白质的电泳方法——Tricine-SDS-PAGE

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第二军医大学学报 1999年第9期20卷 696-697页

作者：蔡在龙陈世敏冯伟华周雍毛积芳第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室

蛋白质电泳是生物化学与分子生物学中的常规技术，蛋白质电泳结果的好坏，影响到整个实验结果和资料分析。以往蛋白质电泳通常用的是ＧｌｙＳＤＳＰＡＧＥ法［１］，这种方法简便、快速、价廉，并具有相对较高的分辨率，然而对于相... 详细信息

蛋白质电泳是生物化学与分子生物学中的常规技术，蛋白质电泳结果的好坏，影响到整个实验结果和资料分析。以往蛋白质电泳通常用的是ＧｌｙＳＤＳＰＡＧＥ法［１］，这种方法简便、快速、价廉，并具有相对较高的分辨率，然而对于相对分子质量为２万以下的蛋白质分离效果欠佳。我们结合文献［２，３］，通过探索，建立了一种有效分离小分子蛋白质、多肽的电泳方法，为小分子蛋白质、多肽的研究提供极大方便。１　材料和方法１．１　主要试剂和设备　Ｔｒｉｃｉｎｅ｛Ｎ［三（羟甲基）甲基］甘氨酸｝、尿素、Ｔｒｉｓ购自Ｓｉｇｍａ公司；丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺购自Ｓａｎｇｏｎ公司；垂直平板电泳槽购自中科院生物化学研究所；电泳仪Ｐｏｗ

关键词：蛋白质小分子蛋白分离电泳

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原发性肝癌CD44v mRNA表达与抑癌基因DCC mRNA表达、癌细胞DNA含量的关系

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第二军医大学学报 1997年第3期18卷 215-218页

作者：刘鹏飞吴孟超陈汉钱光相傅继梁第二军医大学东方肝胆外科医院第二军医大学基础医学部生物学教研室

目的：探讨原发性肝癌中ＣＤ４４ｖ表达与抑癌基因ＤＣＣ表达、癌细胞ＤＮＡ含量之间的关系。方法：应用ＲＴ－ＰＣＲ法检测３０例原发性肝癌中ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ和ＤＣＣｍＲＮＡ的表达情况，并根据ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ的表达情况取２... 详细信息

目的：探讨原发性肝癌中ＣＤ４４ｖ表达与抑癌基因ＤＣＣ表达、癌细胞ＤＮＡ含量之间的关系。方法：应用ＲＴ－ＰＣＲ法检测３０例原发性肝癌中ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ和ＤＣＣｍＲＮＡ的表达情况，并根据ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ的表达情况取２０例标本（阴性及微弱表达者１０例为Ⅰ组；高度表达者１０例为Ⅱ组）检测其癌细胞ＤＮＡ干系水平。结果：３０例受检标本中，ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ中度以上表达２３例（７６．６７％），ＤＣＣｍＲＮＡ表达缺失者１８例（６０％），且两者基本重合。在ＤＮＡ干系水平方面，Ⅰ组病例二倍体明显高于Ⅱ组病例，异倍体则明显低于Ⅱ组的病例（Ｐ＜０．０１）；转移相关的临床病理指标Ⅱ组亦较Ⅰ组为重。结论：在原发性肝癌的侵袭转移过程中，ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ的高表达与ＤＣＣｍＲＮＡ的表达缺失关系密切，两者间可能有协同关系。此外，ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ表达与肝癌细胞ＤＮＡ干系水平的变化一致，再次证实了ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ表达在肝癌侵袭转移中的重要性。

关键词：肝肿瘤细胞粘附分子 mRNA 抑癌基因 CD44V

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细胞因子对肾小球系膜细胞表面表达细胞间粘附分子1的影响

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第二军医大学学报 1998年第3期19卷 289-290页

作者：郭志勇梁嘉靖崔若兰第二军医大学长海医院肾内科第二军医大学基础医学部生物学教研室

细胞因子对肾小球系膜细胞表面表达细胞间粘附分子１的影响郭志勇梁嘉靖△崔若兰近年来免疫病理学研究已经证实细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ－１）作为细胞粘附分子中免疫球蛋白超家族成员之一，通过与炎性细胞表面同族型配体之间相互作... 详细信息

细胞因子对肾小球系膜细胞表面表达细胞间粘附分子１的影响郭志勇梁嘉靖△崔若兰近年来免疫病理学研究已经证实细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ－１）作为细胞粘附分子中免疫球蛋白超家族成员之一，通过与炎性细胞表面同族型配体之间相互作用形成粘附，在免疫监测、炎症反应、...

关键词：肾小球肾炎系膜细胞细胞因子 ICAM-1

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血管形成抑制因子tumstatin_(45-132)的基因克隆、表达和生物学活性

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第2期21卷 141-143页

作者：罗以勤王梁华球谊焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

　目的: 克隆人tumstatin全长编码区基因及编码tum statin45-132的基因, 在大肠杆菌中表达。方法: 采用RT PCR从人胚肾细胞系 293细胞中克隆人的tumstatin全长编码基因, 继以PCR扩增tumstatin45-132 (45 -132位氨基酸 )编码基因, PCR产... 详细信息

　目的: 克隆人tumstatin全长编码区基因及编码tum statin45-132的基因, 在大肠杆菌中表达。方法: 采用RT PCR从人胚肾细胞系 293细胞中克隆人的tumstatin全长编码基因, 继以PCR扩增tumstatin45-132 (45 -132位氨基酸 )编码基因, PCR产物克隆到pBV220载体中, 测序证实后, 转化***21, 于 42℃进行热诱导表达。用SDS -PAGE分析表达产物, 对重组蛋白纯化后用内皮细胞增殖试验测定其生物学活性。结果: RT- PCR扩增出tumstatin全长编码基因, 以PCR扩增出tumstatin45-132的编码基因, 经序列分析证实与GenBank中的序列完全一致。以含有tumstatin45-132编码基因的表达载体转化***21后, 可表达出相对分子质量(Mr)为 9 600的重组蛋白。表达产物的蛋白量占菌体蛋白量的 10%, 纯化后能抑制内皮细胞的增殖。结论: 成功克隆全长tumstatincDNA, 并在大肠杆菌中表达重组tumstatin45-132蛋白, 证实其具有抑制内皮细胞增殖的活性。

关键词： tumstatin45-132基因表达生物学活性

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强啡肽A及其受体拮抗剂对大鼠脊髓损伤后脊髓血流量的影响

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第二军医大学学报 1996年第5期17卷 471-473页

作者：李明孙学军叶晓健洪新如路长林第二军医大学长海医院骨科第二军医大学基础医学部神经生物学教研室第二军医大学长征医院骨科

目的：探讨强啡肽Ａ在脊髓损伤（ＳＣＩ）中的作用。方法：采用Ａｌｌｅｎ打击法复制大鼠ＳＣＩ模型，应用强啡肽Ａ放免检测技术和氢清除法分别测定伤段脊髓组织２４ｈ内强啡肽Ａ含量和脊髓血流量（ＳＣＢＦ）的变化，并观察脊髓蛛网膜... 详细信息

目的：探讨强啡肽Ａ在脊髓损伤（ＳＣＩ）中的作用。方法：采用Ａｌｌｅｎ打击法复制大鼠ＳＣＩ模型，应用强啡肽Ａ放免检测技术和氢清除法分别测定伤段脊髓组织２４ｈ内强啡肽Ａ含量和脊髓血流量（ＳＣＢＦ）的变化，并观察脊髓蛛网膜下腔注射强啡肽Ａ及其受体拮抗剂ｎｏｒ－ＢＮＩ对ＳＣＢＦ的影响。结果：ＳＣＢＦ在伤后１０ｍｉｎ即有明显下降、２ｂ较１ｈ略有回升，４～８ｈ又进一步下降，两次下降相差显著；ＳＣＩ后脊髓蛛网膜下腔注射强啡肽Ａ可明显加剧脊髓缺血，而注射强啡肽受体拮抗剂ｎｏｒ－ＢＮＩ则可显著减轻脊髓缺血。脊髓强啡肽Ａ含量在伤后１０ｍｉｎ明显升高，１～２ｈ有所下降，但仍高于对照组，４，８ｈ较２ｈ略增加。强啡肽Ａ含量与ＳＣＢＦ的变化，两者呈显著相关性。结论：ＳＣＩ后强啡肽Ａ的过度释放是ＳＣＩ后继发性损伤的重要因素。

关键词：脊髓损伤脊髓血流量强啡肽A 受体拮抗剂

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GDNF基因体内转染对大鼠脊髓损伤后轴突再生的影响

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第二军医大学学报 2001年第7期22卷 648-650,F003页

作者：鲁凯伍陈哲宇曹莉侯铁胜傅强李明路长林第二军医大学长海医院骨科上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的 :研究脂质体介导的胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)基因在大鼠损伤脊髓内的表达 ,观察外源性 GDNF对损伤脊髓轴突再生的作用。方法 :利用 Nystrom法制备大鼠胸髓压迫损伤模型。以直接注射法将脂质体 DC- Chol和重组质粒p EGFP- ... 详细信息

目的 :研究脂质体介导的胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)基因在大鼠损伤脊髓内的表达 ,观察外源性 GDNF对损伤脊髓轴突再生的作用。方法 :利用 Nystrom法制备大鼠胸髓压迫损伤模型。以直接注射法将脂质体 DC- Chol和重组质粒p EGFP- GDNF c DNA混合后注入大鼠损伤脊髓。采用 RT- PCR技术和荧光显微镜检测 GDNF基因转染后的体内表达 ,并通过辣根过氧化酶 (HRP)顺行追踪技术和神经微丝 (NF)、胶质原纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫组化活性的变化来评价 GDNF基因转染对轴突再生的影响。结果 :经脂质体 DC- Chol介导 GDNF基因可有效地转染脊髓组织并得到表达。GDNF转基因 4周后可明显增加 NF阳性轴突数目 ,促进皮质脊髓束再生并通过损伤区。结论 :外源性 GDNF在损伤区局部高表达具有神经损伤保护作用 ,提示阳离子脂质体介导 GDNF体内转基因治疗创伤性脊髓损伤的方法是可行的。

关键词：脊髓损伤胶质细胞源性神经营养因子脂质体基因治疗法神经再生 SCI

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噬菌体展示protein A及protein L Ig结合单结构域随机组合文库及Ig亲和筛选

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生物化学与生物物理进展 2005年第6期32卷 535-543页

作者：徐容沈毅臖邓松华蔡春晓陈秋莉贾建安王锦红潘欣潘卫安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

ProteinA和proteinL是细菌产生的两种结构和功能均不同的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)结合分子,在细菌的致病中起重要作用.用含SacⅠ位点的特定引物PCR分别扩增制备proteinA的A、B、C、D抗体结合结构域和proteinL的B3抗体结合结构域,... 详细信息

ProteinA和proteinL是细菌产生的两种结构和功能均不同的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)结合分子,在细菌的致病中起重要作用.用含SacⅠ位点的特定引物PCR分别扩增制备proteinA的A、B、C、D抗体结合结构域和proteinL的B3抗体结合结构域,各结构域DNA片段经SacⅠ酶切后,再随机连接形成各种不同长度的分子组合文库,将该文库呈现在噬菌体表面构建了噬菌体展示Ig结合分子单结构域随机组合文库,所建组合文库容量为2.3×106个菌落形成单位,滴度为4.1×1011TU/ml,包含各种单结构域片段,并以随机方式连接.用人Ig对该文库进行4轮亲和筛选,随机挑选36个代表性的阳性克隆进行序列测定分析表明,亲和筛选获得了多种非天然形式存在的新的Ig结合分子结构,其中32个克隆具有由proteinL的单结构域和proteinA的单结构域间隔重复排列而成的特征性(MDPL-MDPA)n结构.对噬菌体展示Ig结合分子单结构域随机组合文库的体外分子进化研究的尝试,为Ig结合分子的结构和功能研究提供了一新的途径,也为Ig结合分子的定向改造打下基础.

关键词：噬菌体展示分子进化结构域组合文库 protein A protein L

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抑郁症大鼠各脑区甘丙肽含量的变化及盐酸氟西汀对其的影响

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第二军医大学学报 2002年第6期23卷 636-638页

作者：郑兴东王雪琦高霄飞赵小林由振东路长林何成第二军医大学科研部上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的 :探讨甘丙肽 (GAL )在大鼠实验性抑郁症发病过程中的作用。方法 :建立抑郁症大鼠模型 ,应用 Open- field法观察大鼠行为 ,放射免疫分析测定实验大鼠各脑区 GAL含量 ;并观察腹腔注射盐酸氟西汀对实验性抑郁症大鼠行为及各脑区 GAL... 详细信息

目的 :探讨甘丙肽 (GAL )在大鼠实验性抑郁症发病过程中的作用。方法 :建立抑郁症大鼠模型 ,应用 Open- field法观察大鼠行为 ,放射免疫分析测定实验大鼠各脑区 GAL含量 ;并观察腹腔注射盐酸氟西汀对实验性抑郁症大鼠行为及各脑区 GAL含量的影响。结果 :与对照组相比 ,抑郁组大鼠的水平运动和垂直运动均显著减少 ,血浆、下丘脑、海马、颞叶、顶叶前脑的 GAL含量均显著下降。腹腔注射盐酸氟西汀后 ,可显著改善实验性抑郁症大鼠的水平运动和垂直运动 ,升高其海马和前脑 GAL的含量。结论 :海马和前脑中的 GAL可能参与了抑郁症的发病过程 ,并可能与盐酸氟西汀的抗抑郁作用有关。

关键词：抑郁症大鼠甘丙肽含量盐酸氟西汀影响

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HCV核心蛋白DNA疫苗诱导的小鼠体液免疫应答

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第二军医大学学报 1998年第3期19卷 209-211页

作者：赵平戚中田潘卫崔晓红朱诗应陈景山第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：观察丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心蛋白ＤＮＡ疫苗诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠体液免疫应答的效力，为研制应用于人类的ＨＣＶＤＮＡ疫苗提供实验依据。方法：将全长ＨＣＶ核心蛋白基因插入真核表达质粒载体ｐｃＤＮＡ３．１，构建ＨＣＶ... 详细信息

目的：观察丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心蛋白ＤＮＡ疫苗诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠体液免疫应答的效力，为研制应用于人类的ＨＣＶＤＮＡ疫苗提供实验依据。方法：将全长ＨＣＶ核心蛋白基因插入真核表达质粒载体ｐｃＤＮＡ３．１，构建ＨＣＶ核心蛋白重组表达质粒ｐｃＤＮＡ３．１ＨＣＶｃｏｒｅ，肌注ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，以ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血清ＨＣＶ抗体。以此重组质粒转染小鼠ＮＩＨ３Ｔ３细胞，以ＨＣＶ抗体阳性小鼠血清为捕获抗体进行Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，检测ＤＮＡ疫苗编码的ＨＣＶ核心蛋白的表达。结果：３０％（３／１０）免疫小鼠产生ＨＣＶ核心蛋白抗体，该抗体能检测到重组质粒在ＮＩＨ３Ｔ３细胞表达的ＨＣＶ核心蛋白。

关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白基因 DNA疫苗体液免疫应答

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