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第二军医大学学报 1996年第4期17卷 391-392页

作者：宋燕斌崔晓红潘卫王锦红戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室

ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ假阳性结果分析宋燕斌，崔晓红，潘卫，王锦红，戚中田丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是新近认识的一种单股正链ＲＮＡ病毒，在感染者外周血中的含量低［１］，目前认为逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测... 详细信息

ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ假阳性结果分析宋燕斌，崔晓红，潘卫，王锦红，戚中田丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是新近认识的一种单股正链ＲＮＡ病毒，在感染者外周血中的含量低［１］，目前认为逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ是诊断ＨＣＶ感染的最敏...

关键词：丙型肝炎病毒聚合酶链反应假阳性

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重组人白细胞介素2的抗原特性鉴定和部分氨基酸序列分析

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第二军医大学学报 1994年第6期15卷 525-527页

作者：郑杭民杜平戚中田曹广文杨文国第二军医大学基础医学部微生物学教研室

以包含体形式由大肠杆菌表达的基因重组人白细胞介素２（ｒｈＩＬ－２），经纯化后其纯度已达９５％以上［１］。我们采用免疫印迹法和部分氨基酸序列分析等较特异、敏感和准确的检测手段，对纯化ｒｈＩＬ－２的抗原特性和Ｎ末端１５个... 详细信息

以包含体形式由大肠杆菌表达的基因重组人白细胞介素２（ｒｈＩＬ－２），经纯化后其纯度已达９５％以上［１］。我们采用免疫印迹法和部分氨基酸序列分析等较特异、敏感和准确的检测手段，对纯化ｒｈＩＬ－２的抗原特性和Ｎ末端１５个氨基酸序列进行检测分析，获得了满意的结果。

关键词：白细胞介素2 免疫印迹法氨基酸序列分析

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MicroRNA与黑素瘤

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中国肿瘤生物治疗杂志 2013年第2期20卷 255-258页

作者：于少硕苏铎张意第二军医大学研究生管理大队临床九队上海200433 第二军医大学基础医学部生物技术队上海200433 第二军医大学基础医学部免疫学教研室上海200433

MicroRNA(miRNA)是一种内源性非编码小RNA,在转录后水平负调节靶基因的表达,并参与多种细胞的生命活动,特别是在肿瘤的发生、发展和迁移过程中起重要作用。miRNA通过调控相关靶基因,影响黑素瘤相关蛋白的转录翻译,从而促进或抑制黑素瘤... 详细信息

MicroRNA(miRNA)是一种内源性非编码小RNA,在转录后水平负调节靶基因的表达,并参与多种细胞的生命活动,特别是在肿瘤的发生、发展和迁移过程中起重要作用。miRNA通过调控相关靶基因,影响黑素瘤相关蛋白的转录翻译,从而促进或抑制黑素瘤的发生、发展和转移。miR-137和miR-182可以负向调节小眼球相关转录因子(microphthalmia-associatedtranscription factor,MITF)表达,抑制黑素瘤增殖和侵袭;MITF也可以反向调控miR-137和miR-182,增强黑素瘤的迁移能力。miR-221和miR-222通过下调p27Kipl/CDKN1B和c-kit受体两条信号通路促进黑素细胞恶化,从而在黑素瘤中发挥癌基因样效应;而在早幼粒白血病锌指蛋白(promyelocytic leukemia Zinc-Finger,PLZF)结合miR-221和miR-222的调节区后,可以抑制黑素瘤细胞转化和侵袭。Let-7家族成员主要抑制黑素瘤发生、发展和迁移,一旦缺失或表达下降则促进黑素瘤增殖发展。miR-34通过下调原癌基因和相关细胞周期蛋白表达,在黑素瘤中主要发挥抑癌基因样作用。通过检测正常个体和黑素瘤患者外周血miRNA表达谱的差异,有助于诊断黑素瘤;监测分析相关miRNA变化有助于判断患者的疗效和预后情况。因此,深入探索相关miRNA在黑素瘤中的靶基因及调控作用机制有望为黑素瘤的诊断、治疗开辟新途径。

关键词： microRNA 黑素瘤调控治疗诊断

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重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a突变区的氨基酸序列分析

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第二军医大学学报 1997年第4期18卷 309-312页

作者：缪为民陈建鹤王梁华周丙荣娄永华焦炳华第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：对重组人肿瘤坏死因子α衍生物３ａ（ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ）突变区进行氨基酸序列分析。方法：通过ＰＣＲ扩增，获得５＇端含ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ突变区的半分子。用融合蛋白表达系统对该半分子进行大肠杆菌表达。表达产物经亲... 详细信息

目的：对重组人肿瘤坏死因子α衍生物３ａ（ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ）突变区进行氨基酸序列分析。方法：通过ＰＣＲ扩增，获得５＇端含ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ突变区的半分子。用融合蛋白表达系统对该半分子进行大肠杆菌表达。表达产物经亲和层析法纯化，用Ⅹａ因子酶切，去除载体多肽，然后进行Ｎ末端２０个氨基酸顺序分析。结果和结论：氨基酸序列符合预想突变序列，即发生下列氨基酸替换：８０位Ｉｌｅ→Ｓｅｒ，９０位Ｌｙｓ→Ｈｉｓ，９２位Ａｓｎ→Ｖａｌ。

关键词：肿瘤坏死因子衍生物突变氨基酸顺序

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睫状神经营养因子对毒胡萝卜素所致大鼠海马神经元[Ca^(2+)]_i升高的抑制作用

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第二军医大学学报 2005年第9期26卷 1057-1060页

作者：王宗文严进李萍路长林蒋春雷倪鑫第二军医大学护理系心理学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433 第二军医大学海军医学系航海医学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部生理学教研室上海200433

目的:观察睫状神经营养因子(CNTF)对内质网钙泵特异性抑制剂毒胡萝卜素(thapsigargin,Tg)引起海马神经元内胞质游离Ca2+浓度([Ca2+]i)升高的抑制作用。方法:出生24 h以内SD大鼠海马神经元原代培养10~14 d备用,以活细胞内荧光探针Frua2/A... 详细信息

目的:观察睫状神经营养因子(CNTF)对内质网钙泵特异性抑制剂毒胡萝卜素(thapsigargin,Tg)引起海马神经元内胞质游离Ca2+浓度([Ca2+]i)升高的抑制作用。方法:出生24 h以内SD大鼠海马神经元原代培养10~14 d备用,以活细胞内荧光探针Frua2/AM实时检测[Ca2+]i。实验分3组:A组(n=20),EGTA(3 mmol/L);B组(n=40),EGTA(3 mmol/L)+Tg(10μmol/L);C组(n=12),EGTA(3 mmol/L)+Tg(10μmol/L)+CNTF(500 U/μl)。结果:用足量EGTA螯合细胞外Ca2+后,测得[Ca2+]i≤(30.73±7.25)nmol/L;加入EGTA+Tg后,[Ca2+]i显著升高([Ca2+]i≥[91.55±12.24]nmol/L);加入EGTA+Tg+CNTF后,升高的[Ca2+]i明显降低([Ca2+]i≤[26.09±7.16]nmol/L,P<0.01)。结论:CNTF可明显减弱Tg的钙库质膜钙泵抑制作用,使胞质[Ca2+]i降低。提示CNTF通过增加胞内钙库对细胞内游离Ca2+的吸收作用来降低海马神经元的Ca2+负荷。

关键词：海马神经元睫状神经营养因子毒胡萝卜素钙离子

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妊高征患者脐血、羊水中降钙素基因相关肽含量的变化

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第二军医大学学报 1999年第8期20卷 574-575页

作者：李娟戎霖王成海第二军医大学长海医院妇产科上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的：探讨妊娠高血压综合征（妊高征）患者脐血、羊水中降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）含量的变化。方法：应用放射免疫测定法，观察２６例正常妊娠妇女和３２例妊高征患者脐血与羊水中ＣＧＲＰ含量的变化。结果：脐动脉血中... 详细信息

目的：探讨妊娠高血压综合征（妊高征）患者脐血、羊水中降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）含量的变化。方法：应用放射免疫测定法，观察２６例正常妊娠妇女和３２例妊高征患者脐血与羊水中ＣＧＲＰ含量的变化。结果：脐动脉血中ＣＧＲＰ含量，妊高征患者显著高于正常妊娠者（Ｐ＜０．０５），且随着病情的加重逐渐增加，重度者显著高于轻度者（Ｐ＜０．０５）；羊水中ＣＧＲＰ含量妊高征患者显著高于正常妊娠对照组（Ｐ＜０．０５）；脐动脉血、羊水中ＣＧＲＰ含量的变化与新生儿１ｍｉｎＡｐｇａｒ评分呈显著负相关（Ｐ＜００１，Ｐ＜０．０５）。结论：脐动脉血、羊水中ＣＧＲＰ含量的变化可能与胎儿宫内缺氧有关。

关键词：胎血羊水 CGRP 妊娠高血压

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原发性肝癌癌旁组织CD44V　mRNA表达及其意义

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第二军医大学学报 1995年第3期16卷 228-230页

作者：刘鹏飞吴孟超陈汉钱光相傅继梁第二军医大学长海医院肝胆外科第二军医大学基础医学部生物学教研室

研究３１例原发性肝癌癌旁组织ＣＤ４４ＶｍＲＮＡ表达，发现癌旁组织ＣＤ４４ＶｍＲＮＡ表达高于癌组织者具有更强的侵袭转移能力。对于原发性肝癌侵袭转移情况的评估，癌旁组织ＣＤ４４ＶｍＲＮＡ的表达可能较单纯癌组织的表达更有意义。

关键词： CD44 肿瘤转移癌旁组织肝肿瘤 mRNA

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nm23H1正反义表达载体的构建

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第二军医大学学报 1999年第6期20卷 350-352页

作者：金嗣松潘星华王元和胡以平傅继梁第二军医大学基础医学部生物学教研室第二军医大学长征医院普通外科

目的：构建ｎｍ２３Ｈ１正反义表达载体ｐｃ３ＡＮ和ｐｃ３ＡＭ。方法：将ｎｍ２３Ｈ１基因正、反向插入质粒ｐｃＤＮＡ３和ｐＲＣ／ＣＭＶ，并转染肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１。结果：转染正义表达载体后ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ和蛋白表达... 详细信息

目的：构建ｎｍ２３Ｈ１正反义表达载体ｐｃ３ＡＮ和ｐｃ３ＡＭ。方法：将ｎｍ２３Ｈ１基因正、反向插入质粒ｐｃＤＮＡ３和ｐＲＣ／ＣＭＶ，并转染肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１。结果：转染正义表达载体后ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ和蛋白表达水平增加，转染反义表达载体后ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ和蛋白表达水平降低。结论：构建的载体能在肝癌细胞内有效表达。

关键词：肝肿瘤 nm23H1基因正反义表达载体载体构建

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病理性氧供依赖与器官组织能量代谢间的关系

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第二军医大学学报 1999年第4期20卷 234-236页

作者：单红卫杨兴易陈学云景炳文缪明永陈克明第二军医大学长征医院急救科第二军医大学基础医学部生物化学教研室

目的：分析病理性氧供依赖与器官组织能量代谢间的关系，探讨该关系对器官组织氧合评价的意义。方法：以大鼠盲肠结扎穿孔（ＣＬＰ）方法制作脓毒性休克模型，随机分成ＣＬＰ前及ＣＬＰ后２，４，５，６，７，８ｈ组，测定氧动力学等指... 详细信息

目的：分析病理性氧供依赖与器官组织能量代谢间的关系，探讨该关系对器官组织氧合评价的意义。方法：以大鼠盲肠结扎穿孔（ＣＬＰ）方法制作脓毒性休克模型，随机分成ＣＬＰ前及ＣＬＰ后２，４，５，６，７，８ｈ组，测定氧动力学等指标后，立即处死动物并取肝、心、肾组织标本，用生物发光法测定磷酸肌酸（ＰＣ）和三磷酸腺苷（ＡＴＰ）含量。结果：全身氧供给（ＤＯ２）与氧消耗（ＶＯ２）呈双相变化关系，ＤＯ２进行性降低并在ＣＬＰ后６ｈ降至临界ＤＯ２值（ｃＤＯ２），以后呈病理性氧供依赖关系。ＣＬＰ后５ｈ，肝组织ＰＣ含量明显降低（Ｐ＜０．０５），６ｈ时肝ＡＴＰ含量及肾ＰＣ、ＡＴＰ含量均明显降低；心肌ＰＣ、ＡＴＰ分别在ＣＬＰ后６，７ｈ始显著下降（Ｐ＜０．０１）。结论：病理性氧供依赖关系的出现反映了心、肝、肾组织能量代谢障碍存在，但在其出现前，肾、肝组织已开始出现这种异常，故应尽早预防器官生物能量衰竭发生。

关键词：氧供给氧消耗脓毒性休克多器官衰竭

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聚集蛋白基因转染促进移植肌肉功能恢复的实验研究

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中华整形外科杂志 2006年第5期22卷 378-382页

作者：张盈帆江华林子豪蔡在龙吴包金第二军医大学附属长征医院整形外科上海200003 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室

目的研究转染神经源性聚集蛋白基因对游离移植肌肉功能恢复的影响。方法选大鼠股薄肌原位移植模型,按移植术后即刻肌肉内注射溶液的不同分为pCS2+-agrin基因转染实验组,pCS2+空质粒组以及生理盐水注射组,后两组作为手术对照组,基因电转... 详细信息

目的研究转染神经源性聚集蛋白基因对游离移植肌肉功能恢复的影响。方法选大鼠股薄肌原位移植模型,按移植术后即刻肌肉内注射溶液的不同分为pCS2+-agrin基因转染实验组,pCS2+空质粒组以及生理盐水注射组,后两组作为手术对照组,基因电转染术后不同时间检测各组肌肉收缩功能、神经源性agrin蛋白表达,以及终板区烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)数量的变化。结果术后早期agrin基因转染组肌肉功能恢复明显优于空质粒转染组以及生理盐水注射组(4、5、10周,P<0.05),但术后晚期15及20周时各组肌肉功能间差异无统计学意义。免疫组化显示agrin基因转染后,术后1周到5周,有大量棕黄色抗原抗体复合物沉积在终板及其邻近区域,但到第10周时表达明显减少,接近对照组水平。agrin基因转染组终板区的nAChR数量在各个时间点均高于实验对照组。结论移植肌肉终板区转染神经源性agrin基因,促进了移植肌肉早期功能的恢复。

关键词：聚集蛋白基因治疗肌肉移植肌肉功能

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