检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2006年第12期27卷 1295-1298页

作者：尚雁君黄才国蒋山好朱大元魏善建焦炳华李锴男张建荣第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海200433 中国科学院上海药物研究所上海201203 第四军医大学基础医学部病理学教研室西安710033 第二军医大学长海医院实验诊断科上海200433

目的观察丹参总酚酸对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响。方法将40只健康、雄性SD大鼠随机分为4组分别为UUO组、假手术组(SOR)、阳性对照依那普利(ACEI)组和丹参总酚酸样品(TSA)组,术前分别给UUO组和SOR组灌生理盐水,ACEI组... 详细信息

目的观察丹参总酚酸对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响。方法将40只健康、雄性SD大鼠随机分为4组分别为UUO组、假手术组(SOR)、阳性对照依那普利(ACEI)组和丹参总酚酸样品(TSA)组,术前分别给UUO组和SOR组灌生理盐水,ACEI组和丹参总酚酸组分别灌胃ACEI[6mg/(kg·d)]和丹参总酚酸[20mg/(kg·d)],连续8d。术后第7天分别处死各组大鼠用免疫组织化学方法测定TGF-β1的表达情况。行H-E和Masson染色,动态观察肾间质病理学改变。结果丹参总酚酸组和ACEI组TGF-β1的表达量与模型组(0.22±0.06)比较有明显的下降(P<0.05),结果分别是1.38±0.26和1.38±0.26。丹参总酚酸能显著减少UUO大鼠肾小管间质TGF-β1的表达,减轻胶原在肾间质的沉积,改善了肾脏病理改变。结论丹参总酚酸对UUO所致的大鼠肾脏纤维化的形成有明显的抑制作用,其作用可能跟降低TGF-β1的表达有关。

关键词：丹参总酚酸肾间质纤维化转化生长因子β1

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含三联密码AAA的Kozak类似序列特异性增强口蹄疫DNA疫苗的免疫效果

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第10期26卷 915-919页

作者：张秀伟郭瀛军王开宇黄力杨勇军张术陈祖欢王凯慧杨康鹃孙树汉上海第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室吉林省延边大学医院200433 吉林省延边大学医院

目的引入6种不同的Kozak类似序列制备口蹄疫DNA疫苗,比较分析Kozak类似序列中不同碱基组成对口蹄疫DNA疫苗表达水平及免疫效果的影响作用。方法在口蹄疫DNA疫苗抗原编码基因VP1起始位点引入Kozak通用序列及所设计的5种Kozak类似序列(KZ1... 详细信息

目的引入6种不同的Kozak类似序列制备口蹄疫DNA疫苗,比较分析Kozak类似序列中不同碱基组成对口蹄疫DNA疫苗表达水平及免疫效果的影响作用。方法在口蹄疫DNA疫苗抗原编码基因VP1起始位点引入Kozak通用序列及所设计的5种Kozak类似序列(KZ1-KZ6),插入真核表达载体pVAX1,制备口蹄疫DNA疫苗,对6～8周龄BALB/c小鼠进行免疫,用间接ELISA分析实验动物外周血VP1的抗体滴度；同时插入带有绿色荧光蛋白的融合表达载体pEGFP-N1构建6种体外表达质粒,转染HeLa细胞,进行瞬时表达并分析体外表达水平。结果引入含三联密码AAA的Kozak类似序列KZ6的疫苗质粒pKV6接种动物后产生的免疫抗体滴度高于其他组；相应的体外表达质粒pKG6转染HeLa细胞后体外表达水平亦高于其他组。结论含三联密码AAA的Kozak类似序列KZ6的口蹄疫DNA疫苗,能特异性地增强口蹄疫DNA疫苗的表达水平及免疫效果。

关键词：三联密码AAA Kozak类似序列口蹄疫 DNA疫苗表达水平免疫效果

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脊髓损伤后运动功能恢复过程中酪氨酸硝基化蛋白表达的变化

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中国临床康复 2006年第32期10卷 99-101,i0003页

作者：周强曹莉吴爱群吕保来何成解放军第二军医大学神经生物教研室上海市200000 郑州大学基础医学院人体解剖学教研室

目的:观察大鼠脊髓损伤后运动功能恢复过程中酪氨酸硝基化蛋白的表达变化情况。方法:实验于2004-07/2005-09在解放军第二军医大学神经生物实验室完成。选择SD雄性大鼠44只,采用随机数字表法分成3组:正常对照组8只,假手术组12只,脊髓损伤... 详细信息

目的:观察大鼠脊髓损伤后运动功能恢复过程中酪氨酸硝基化蛋白的表达变化情况。方法:实验于2004-07/2005-09在解放军第二军医大学神经生物实验室完成。选择SD雄性大鼠44只,采用随机数字表法分成3组:正常对照组8只,假手术组12只,脊髓损伤组24只。改良Allen法致大鼠脊髓中等程度损伤。①进行改良Tarlov评分,分为0～6级,级别越高下肢运动功能越佳。②进行改良Rivlin斜板实验,将大鼠身体轴线与斜板纵轴垂直放置,斜板每次升高5°,以大鼠能够停留5s的最大角度为其功能值。③免疫荧光染色:术后分别于1,3,7,14d取假手术组(每次2只)和脊髓损伤组(每次5只)大鼠损伤区脊髓进行免疫荧光染色测定酪氨酸硝基化蛋白的表达。④Westernblot印迹:假手术组和脊髓损伤1d组分别取4只大鼠损伤区脊髓进行Westernblot印迹进一步验证。结果:纳入动物44只,均进入结果分析。①Tarlov评分比较:正常对照组为6级,假手术组伤后1,3,7,14d分别为5.2,5.4,5.8,6.0级,与正常对照组相比差异无显著性(P>0.05);脊髓损伤组伤后1,3d降至最低点(1.4,2.0级),第7天时明显上升(3.1级),至伤后14d开始缓慢上升(3.5级),但仍未达到正常水平。②Rivlin斜板实验比较:假手术组伤后1,3,7,14d爬坡角度分别为73.5°,73.8°,74.4°,75.8°,差异无显著性(P>0.05),每一时相点与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05);脊髓损伤组损伤后即刻出现明显障碍,爬坡角度减小(伤后1,3,7,14d分别为35.4°,36.2°,38.4°,41.4°),与假手术组各时相点比较差异显著(P<0.01),随时间延续均有不同程度恢复,14d功能恢复较损伤后1d有明显提高(P<0.01)。③免疫荧光染色:显示硝基化酪氨酸蛋白位于脊髓前角运动神经元,胶质细胞以及脊髓中央管的室管膜细胞中。正常脊髓中无酪氨酸硝基化蛋白阳性细胞。脊髓损伤组中酪氨酸硝基化蛋白呈阳性反应的脊髓细胞随着脊髓损伤后时程的延长而逐渐减少。在脊髓损伤后1,3d时最高,脊髓损伤后7d时明显减少,14d后降至更低,但仍有少量表达。脊髓损伤各组与相应时相点的假手术组相比差异显著(P<0.05)。④Westernblot印迹:假手术组脊髓组织中酪氨酸硝基化蛋白的表达极低,而脊髓损伤1d组酪氨酸硝基化蛋白表达量很高,与免疫荧光染色的结果相一致。结论:脊髓损伤导致运动功能障碍,可能与脊髓支配运动相关的神经细胞蛋白质的酪氨酸残基发生硝基化有关。

关键词：脊髓损伤酪氨酸硝基酪氨酸运动障碍

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βB2晶体蛋白基因敲除小鼠模型的建立

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第二军医大学学报 2006年第11期27卷 1246-1248页

作者：张军黄才国李闻捷 Wei Weng 汪佳祺第二军医大学长海医院中心实验室上海200433 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 美国inGenious Targeting Laboratory Inc．纽约11790—3350

目的:建立βB2晶体蛋白基因敲除小鼠模型。方法:采用美国iGTL实验室的技术构建打靶载体,建立基因敲除小鼠模型。采用PCR对小鼠基因型进行鉴定,Western印迹法对晶体蛋白的表达进行鉴定。结果:PCR成功检测出3种基因型;纯合子基因敲除的小... 详细信息

目的:建立βB2晶体蛋白基因敲除小鼠模型。方法:采用美国iGTL实验室的技术构建打靶载体,建立基因敲除小鼠模型。采用PCR对小鼠基因型进行鉴定,Western印迹法对晶体蛋白的表达进行鉴定。结果:PCR成功检测出3种基因型;纯合子基因敲除的小鼠未检测到βB2晶体蛋白的表达。结论:成功构建了βB2晶体蛋白基因敲除的小鼠模型。

关键词： β晶体蛋白小鼠基因敲除

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脊髓损伤后自主神经反射异常大鼠心脏和肠系膜前动脉α-肾上腺素能受体的表达

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第二军医大学学报 2006年第2期27卷 156-159页

作者：石学银邹最李盈科徐振东周运恒于军刘刚第二军医大学长征医院麻醉科上海200003 复旦大学附属华山医院麻醉科上海200040 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:观察高位脊髓横切(spinal cord transection,SCT)慢性期自主神经反射异常(autonomic dysreflexia,AD)大鼠心脏和肠系膜前动脉α-肾上腺素能受体(-αAR)各亚型mRNA表达量,探讨AD的可能机制。方法:暴露大鼠脊髓,横切T4节段,术后4周... 详细信息

目的:观察高位脊髓横切(spinal cord transection,SCT)慢性期自主神经反射异常(autonomic dysreflexia,AD)大鼠心脏和肠系膜前动脉α-肾上腺素能受体(-αAR)各亚型mRNA表达量,探讨AD的可能机制。方法:暴露大鼠脊髓,横切T4节段,术后4周用自制导管刺激直肠,观察升压反应,挑选发生AD的大鼠(AD组,n=16),取其心脏和肠系膜前动脉及其分支,实时定量PCR测定α1A-,α1B-,α1D-,α2A-,α2B-,α2C-AR mRNA的表达量,与只暴露脊髓、不进行横切的大鼠(假手术组,n=16)进行比较。结果:与假手术组相比,AD组大鼠心脏α1A-AR mRNA(P<0.05)、α1B-AR mRNA(P<0.01)表达下调,而α1D-ARmRNA表达量未见明显改变;肠系膜前动脉α1A、-α1D、-α2B-AR mRNA(P<0.01)、α2C-AR mRNA(P<0.05)表达上调,而α1B-、α2A-AR mRNA表达量未见明显改变。结论:大鼠SCT慢性期AD的发生可能与心脏α1A-、α1B-AR,肠系膜前动脉α1A-、α1D-、α2B-、α2C-AR的异常表达有关。

关键词：脊髓损伤自主神经反射异常受体肾上腺素能α 心脏肠系膜动脉基因表达

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从系统论角度探讨神经系统疾病的研究思路

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第二军医大学学报 2006年第3期27卷 337-339页

作者：褚澄薛利军扬州市第一人民医院神经内科扬州225001 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

随着社会人口老龄化的出现,脑血管病、阿尔茨海默病等神经系统疾病的发病率正逐渐增加。作为一种理论和方法学基础,系统论在神经系统疾病研究中具有重要作用。本文根据系统论的原则,分别从整体性、层次性与时序性三个层面出发,通过近年... 详细信息

随着社会人口老龄化的出现,脑血管病、阿尔茨海默病等神经系统疾病的发病率正逐渐增加。作为一种理论和方法学基础,系统论在神经系统疾病研究中具有重要作用。本文根据系统论的原则,分别从整体性、层次性与时序性三个层面出发,通过近年神经系统疾病病因学及诊断与治疗等方面研究的相关进展,对神经系统疾病的研究思路作一探讨。

关键词：系统论神经系统疾病发病机制诊断治疗学

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云南狗牙花吲哚类生物碱成分及其生物活性研究

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第二军医大学学报 2006年第1期27卷 92-96页

作者：宣伟东陈海生袁志仙张晓冬黄矛第二军医大学药学院天然药物化学教研室上海200433 解放军第411医院药研中心上海200081 第二军医大学基础医学部新药评价中心上海200433

目的:研究云南狗牙花吲哚类生物碱成分,阐明其戒毒活性的物质基础。方法:云南狗牙花茎枝粉末的95%乙醇提取浸膏经酸提碱沉后得到总生物碱(TEYA),TEYA经反复硅胶柱层析、Sephadex LH20凝胶柱层析分离纯化化学成分,波谱学分析鉴定化学结构... 详细信息

目的:研究云南狗牙花吲哚类生物碱成分,阐明其戒毒活性的物质基础。方法:云南狗牙花茎枝粉末的95%乙醇提取浸膏经酸提碱沉后得到总生物碱(TEYA),TEYA经反复硅胶柱层析、Sephadex LH20凝胶柱层析分离纯化化学成分,波谱学分析鉴定化学结构,采用条件性位置偏爱模型对单体化合物进行活性评价。结果:分离鉴定了9个吲哚类生物成分:冠狗牙花定碱(1),伏康京碱(2),3-R-乙氧基冠狗牙花定碱(3),3-S-乙氧基冠狗牙花定碱(4),19-表-海尼山辣椒碱(5),海尼山辣椒碱(6),19-表-非洲伏康树碱(7),7-羟基冠狗牙花定碱(8),12-methoxyl-voaphylline(9)。化合物2、7对吗啡的身体依赖性和精神依赖性都有一定的防治作用。结论:化合物3、4、8、9为首次从该植物中分离得到,冠狗牙花定碱类吲哚生物碱为云南狗牙花总碱的主要活性成分。

关键词：云南狗牙花吲哚生物碱类吗啡依赖口生物活性

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SMO保存液对犬肾低温保存期间皮质细胞凋亡的影响

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第二军医大学学报 2006年第10期27卷 1059-1062页

作者：牛强朱有华于常虎罗明缪明永第二军医大学长征医院全军器官移植研究所上海200003 基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的：探讨自制上海多器官保存液（Shanghai multi-organ preservation solution,SMO液）对低温保存期间犬肾皮质细胞凋亡的影响,以探讨SMO液的作用机制.方法：犬肾分别以0～4℃的SMO液、高渗枸橼酸盐腺嘌呤液（HC-A）或UW液（Universit... 详细信息

目的：探讨自制上海多器官保存液（Shanghai multi-organ preservation solution,SMO液）对低温保存期间犬肾皮质细胞凋亡的影响,以探讨SMO液的作用机制.方法：犬肾分别以0～4℃的SMO液、高渗枸橼酸盐腺嘌呤液（HC-A）或UW液（University of Wisconsin solution）灌洗保存,在低温保存各时间点取肾皮质标本作形态学观察;采用TUNEL法检测皮质细胞凋亡发生情况;以硫代巴比妥酸法测定各保存液组肾皮质丙二醛（MDA）含量的改变,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性变化.结果：低温保存第1天光镜观察细胞水肿、胞质空泡化、肾小管坏死等改变,三组相似,但保存2 d后SMO组和UW组形态学改变明显轻于HC-A组.随低温保存时间延长,各保存液组肾皮质细胞凋亡的发生增加,而SMO组凋亡指数显著低于同时点HC-A液组（P＜0.05）.随着低温保存时间延长,各保存液组肾皮质MDA含量增加,保存1～3 d SMO液组MDA含量显著低于HC-A液组（P＜0.05）;低温保存中SMO液组、HC-A液组、UW液组肾皮质SOD酶活性无明显差异.结论：SMO液可以提高肾皮质保存效果,可能与其减少低温保存期间肾皮质细胞凋亡和抑制脂质过氧化损伤有关.

关键词：器官保存反应性氧族低温细胞凋亡

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DoksPTB结构域与EGFR特异性结合

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郑州大学学报（医学版） 2006年第3期41卷 509-511页

作者：阎志勇吴爱群张勇路长林何成郑州大学基础医学院人体解剖学教研室郑州450052 第二军医大学神经生物学教研室上海200433

目的:探讨Doks家族的PTB结构域在识别上游分子时的特异性。方法:利用裂解大量内源性表达表皮生长因子受体(EGFR)的COS-7传代细胞株获取EGFR,利用大肠杆菌表达GST融合蛋白GST1PTB、GST4PTB和GST5PTB,采用GST共沉淀技术检测Dok1、4和5的PT... 详细信息

目的:探讨Doks家族的PTB结构域在识别上游分子时的特异性。方法:利用裂解大量内源性表达表皮生长因子受体(EGFR)的COS-7传代细胞株获取EGFR,利用大肠杆菌表达GST融合蛋白GST1PTB、GST4PTB和GST5PTB,采用GST共沉淀技术检测Dok1、4和5的PTB结构域能否与EGFR结合。结果:Dok1的PTB结构域,而非Dok4和Dok5的PTB结构域,能够特异性地与被激活的EGFR结合,不能与未激活的EGFR结合。结论:Doks家族的PTB结构域功能有差别,即PTB结构域在识别上游分子时具有特异性。

关键词： Doks PTB结构域谷胱苷肽-S转移酶共沉淀表皮生长因子受体

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海螵蛸多糖的提取分离及活性组分CPS-1的纯化

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第二军医大学学报 2006年第1期27卷 17-21页

作者：魏江洲张建鹏刘军华王顺春冯伟华焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 上海中医药大学中药研究所上海201203

目的:从海洋中草药海螵蛸(乌贼骨)中提取分离得到多糖活性物质。对粗多糖中主要的活性组分CPS-1进行纯化,得到成分相对均一的天然活性多糖。方法:用热水抽提法提取海螵蛸多糖粗品,并对提取工艺进行正交设计,优化提取方法。对粗品组分进... 详细信息

目的:从海洋中草药海螵蛸(乌贼骨)中提取分离得到多糖活性物质。对粗多糖中主要的活性组分CPS-1进行纯化,得到成分相对均一的天然活性多糖。方法:用热水抽提法提取海螵蛸多糖粗品,并对提取工艺进行正交设计,优化提取方法。对粗品组分进行总糖量测定。用DEAE-Sepharose F.F柱及Sepharose CL-6B柱对海螵蛸多糖粗品进行分离。通过活性检测实验确定活性部分。最后使用Sephacryl S-300柱进一步纯化。用HPLC来检测精品多糖的纯度。标准曲线法测定相对分子质量。结果:成功得到海螵蛸粗多糖。经过离子交换柱DEAE-Sepharose Fast Flow和Sepharose CL-6B柱及分子筛Sephacr-yl S-300柱的进一步分离纯化和活性跟踪,最后得到相对均一的活性精品多糖CPS-1,其含糖量达93.6%,相对分子质量为1×106。结论:不同的提取条件影响海螵蛸多糖的得率。不同性质的分离材料能够将相对分子质量及电荷有差异的多糖分离,达到分离的目的。精品多糖CPS-1是从海洋中草药海螵蛸中得到的均一多糖组分。

关键词：海螵蛸多糖类分离提纯 CPS-1

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