检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2004年第10期25卷 1078-1081页

作者：王凯慧郭瀛军高远舰王开宇颜宏利孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :研究 Annexin B1与其他膜联蛋白的相关性及生物学功能。方法 :从 Swiss- Prot和 NCBI- Structure数据库中已知的膜联蛋白氨基酸序列中 ,根据物种的分类挑选 6 8个 ,用生物信息学方法分析 Annexin B1的结构、功能与进化。结果 :An... 详细信息

目的 :研究 Annexin B1与其他膜联蛋白的相关性及生物学功能。方法 :从 Swiss- Prot和 NCBI- Structure数据库中已知的膜联蛋白氨基酸序列中 ,根据物种的分类挑选 6 8个 ,用生物信息学方法分析 Annexin B1的结构、功能与进化。结果 :Annexin B1包含 4个序列和结构高度相似的结构域 ,含有 8个 Ca2 + 结合位点 ,二级结构显示蛋白主要由 α螺旋结构组成 ,具有寄生生物所特有的氨基酸残基。在物种进化上 ,Annexin B1和节肢动物为 1支 ,新杆线虫、植物、鸟类和脊椎动物为 1支 ,原虫、腔肠动物、两栖类和脊索动物为 1支。另外 ,Annexin B1与 Annexin A1在进化上有较强的亲缘关系 ,结构和功能上 An-nexin A1和 Annexin A5相似。结论 :Annexin B1具有膜联蛋白的结构特征 ,含有抗凝血、参与细胞凋亡、炎性反应、信号转导和细胞分化等细胞生理功能的氨基酸结构域和决定种属特异性的氨基酸序列 ,在进化上同源于 Annexin A1。

关键词： Annexin B1 结构功能进化

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DNA疫苗海藻酸钠微球的制备及体外释药

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第二军医大学学报 2004年第1期25卷 58-60页

作者：刘善奎高申钟延强张洪英孙树汉第二军医大学药学院药剂学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室

目的 :研制 DNA疫苗海藻酸钠微球 ,并对其体外释药特性进行考察。方法 :以海藻酸钠为载体 ,采用 W/ O乳化 -离子交联法制备 DNA疫苗海藻酸钠微球 ;考察粒径大小、外观、载药量等理化特性 ;考察微球的体外释药特性及影响因素。结果 :... 详细信息

目的 :研制 DNA疫苗海藻酸钠微球 ,并对其体外释药特性进行考察。方法 :以海藻酸钠为载体 ,采用 W/ O乳化 -离子交联法制备 DNA疫苗海藻酸钠微球 ;考察粒径大小、外观、载药量等理化特性 ;考察微球的体外释药特性及影响因素。结果 :微球球形圆整 ,分散性好 ,平均粒径为 (1 2 .0 3± 6 .9) μm,载药量可达 5 % ,包封率为 5 6 .0 % ;微球的体外释放速率与载药量呈正相关 ,与壳聚糖的交联固化度呈负相关。结论 :海藻酸钠可以作为 DNA疫苗微球的可生物降解辅料 ;乳化离子交联法的制备工艺简便 ,有利于 DNA疫苗结构和功能的稳定性 ;海藻酸钠微球是

关键词： DNA疫苗海藻酸钠微球制备体外释药

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hVEGF_(121)基因转染对人脐静脉内皮细胞生长的作用

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第二军医大学学报 2004年第10期25卷 1074-1077页

作者：李红华刘厚奇汤淑萍熊俊汤瑞宝胡凯猛第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433

目的 :构建人血管内皮生长因子 (h VEGF) - 12 1的真核细胞复制表达质粒 ,将 h VEGF1 2 1 基因转染进人脐静脉内皮细胞 (human umbilical vein endothelial cell,HUVEC) ,通过旁分泌作用来加快其生长速度。方法 :采用 RT- PCR方法 ,从... 详细信息

目的 :构建人血管内皮生长因子 (h VEGF) - 12 1的真核细胞复制表达质粒 ,将 h VEGF1 2 1 基因转染进人脐静脉内皮细胞 (human umbilical vein endothelial cell,HUVEC) ,通过旁分泌作用来加快其生长速度。方法 :采用 RT- PCR方法 ,从人胚胎成纤维细胞中克隆 h VEGF1 2 1 前体蛋白全长 c DNA,构建重组真核表达质粒 pc DNA3- h VEGF1 2 1 ,用 Fu GENE6介导转染入HU VEC。收集转染的 HU VEC培养上清 ,用 EL ISA法定量检测 h VEGF蛋白的表达情况 ;绘制细胞生长曲线 ,检测 h VEGF1 2 1促进 HUVEC增殖的生物学活性。设转染 pc DNA3空质粒载体和不转染任何 DNA的 HU VEC做对照。结果 :(1)成功构建了 pc DNA3- h VEGF1 2 1 真核表达质粒 ,经测序证明基因序列与 Gen Bank中核酸序列一致 ,且插入方向正确 ;(2 )转染细胞瞬时表达 h VEGF蛋白 ,于转染 1d后每 10 4 个细胞每天可分泌 h VEGF蛋白 5 9.95 pg,约为对照组的 10 0倍 ;之后表达水平先快后慢下降 ,于转染 7d后仍较对照组高近 1倍 ;(3)转染细胞生长速度明显加快 ,在转染 3d后细胞数与对照组相比即有显著性差异 (P<0 .0 1) ,细胞倍增时间从对照组的 7d以上缩短为 3d左右。结论 :成功构建了 pc DNA3- h VEGF1 2 1 真核表达质粒 ;该质粒能在 HU

关键词：人血管内皮生长因子-121 真核表达人脐静脉内皮细胞细胞增殖

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蛋白激酶与蛋白磷酸酶在细胞增殖分化中的机制研究

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第二军医大学学报 2004年第5期25卷 550-552页

作者：刘善荣刘厚奇戚中田赵兰娟王凤玫冯根生第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 基础医学部微生物学教研室 Burnham Institute

细胞生长发育和癌变过程中有众多复杂的信号转导途径以及信号分子参与,其中最基本的生化反应过程是系列蛋白质(信号分子)的磷酸化.

关键词：蛋白激酶蛋白磷酸酶细胞增殖细胞分化

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Mac-1在细胞内走向的直视研究

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中国科学（C辑） 2004年第3期34卷 263-270页

作者：严鸣毛积芳韦毅钟纪根杨生生徐仁宝第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部生化与分子生物学教研室上海200433 复旦大学生命科学院上海200433

分别构建荧光蛋白(FP,fluorescenceprotein)与Mac-1的两个亚基(CD11b,CD18)融合蛋白表达载体,并在鉴定pYFP-CD18和pCD11b-BFP共转染的CHO细胞(CHO-Mac-1-FP)表达的Mac-1-FP(Mac-1fusedwithfluorescenceprotein)具有与正常白细胞表达的野生型Mac-1基本一致的结构与功能的基础上,结合应用PE标记的CD11b单抗,通过激光共聚焦显微镜观测CD11b,CD18在PMA刺激和ICAM-1结合后于胞内的走向与归宿.结果显示:(ⅰ)在静态的细胞膜上看不到Mac-1,PMA活化后1h,胞膜上可见CD11b-PE和YFP-CD18群集,2h后内吞,内吞后YFP-CD18的荧光减弱,提示Mac-1有部分降解;24h后PMA再次活化,部分CD11b-PE与YFP-CD18可再次出现在膜上,说明Mac-1还可以被循环利用.(ⅱ)ICAM-1包被磁珠与Mac-1-FP-CHO细胞作用后,4h内粘附增加,同时伴有Mac-1-FP的群集,8h后粘附减少,同时伴有Mac-1-FP的荧光逐渐减弱,这一过程与PMA活化后Mac-1-FP的变化过程类似,提示ICAM-1作用后也可能出现内吞并降解.由以上结果可以得出结论,Mac-1活化后的走向是由胞浆内转位到质膜上,然后内吞,内吞后被降解或可被再利用,与此同时粘附活性亦发生相应的变化,提示受体介导性内吞是白细胞粘附活性降低的重要机制之一.

关键词： Mac-1 PMA ICAM-1 走向细胞白细胞免疫反应

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大鼠肝再生时线粒体通透性转换的变化

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第二军医大学学报 2004年第3期25卷 292-294页

作者：缪明永朱克军汪振诚刘军华蒋雷王学敏焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的 :研究大鼠肝再生过程中肝细胞线粒体膜通透性转换 (PT)的变化规律。方法 :SD大鼠肝 70 %部分切除 (PH)制作肝再生模型 ,断头取肝分离线粒体后 ,通过检测静息态和不同浓度钙离子诱导下线粒体悬液在 5 4 0 nm处光密度值 (D540 )变... 详细信息

目的 :研究大鼠肝再生过程中肝细胞线粒体膜通透性转换 (PT)的变化规律。方法 :SD大鼠肝 70 %部分切除 (PH)制作肝再生模型 ,断头取肝分离线粒体后 ,通过检测静息态和不同浓度钙离子诱导下线粒体悬液在 5 4 0 nm处光密度值 (D540 )变化来观察线粒体 PT的时相变化。结果 :与对照组比较 ,大鼠肝再生早期 (PH后 0～ 2 4 h)和后期 (PH后 1 2 0～ 1 6 8h)都表现为肝线粒体先收缩后肿胀 ,也即通透性先下降后增高 ;同时大鼠肝再生早期肝线粒体可明显抵抗钙离子的诱导作用 ,而 PH后2 4 h和 1 6 8h组的大鼠肝线粒体对钙离子的诱导非常敏感。环孢素 A(Cs A)可阻断钙的诱导作用。结论 :大鼠肝再生过程中线粒体 PT出现明显规律性改变。

关键词：大鼠肝再生线粒体通透性转换钙离子环孢素A

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改良PCR-RFLP法测定异质性线粒体基因的相对含量

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第二军医大学学报 2004年第9期25卷 1036-1037页

作者：龙建纲王洁缪明永王学敏第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的 :改进 PCR- RFL P法 ,确认线粒体异质性基因并测定异质性线粒体基因的相对含量。方法 :依据先期实验中克隆测序得到的 ECV 30 4细胞中线粒体基因 (D- L OOP区 )多态性位点 ,采用两轮 PCR法 ,以第 1轮 PCR胶回收产物为模板 ,作第 2... 详细信息

目的 :改进 PCR- RFL P法 ,确认线粒体异质性基因并测定异质性线粒体基因的相对含量。方法 :依据先期实验中克隆测序得到的 ECV 30 4细胞中线粒体基因 (D- L OOP区 )多态性位点 ,采用两轮 PCR法 ,以第 1轮 PCR胶回收产物为模板 ,作第 2轮 PCR,并在第 2轮 PCR中引入限制性内切酶位点 ,酶切产物行琼脂糖电泳 ,测定异质性线粒体基因的相对含量。结果 :ECV30 4细胞中存在 5 13A/ G异质性 ,二者比例约为 1∶ 3。结论 :确证 ECV30 4细胞中含有 5 13A/ G异质性碱基 ,改良 PCR-RFL P法测定异质性线粒体基因相对含量较为简单可靠。

关键词：线粒体基因异质性 PCR-RFLP

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一种改进的提取人外周血和组织线粒体DNA的方法

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第二军医大学学报 2004年第4期25卷 444-446页

作者：朱克军汪振诚王学敏缪明永焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的 :建立一种简便、快捷地从人外周血和组织中制备高质量线粒体 DNA的方法。方法 :以差速离心法分离线粒体 ,用碱性 SDS法裂解线粒体膜 ,释放线粒体 DNA后用酚 /氯仿抽提 ,TE或 dd H2 O溶解。然后将所得线粒体 DNA进行纯度鉴定并和... 详细信息

目的 :建立一种简便、快捷地从人外周血和组织中制备高质量线粒体 DNA的方法。方法 :以差速离心法分离线粒体 ,用碱性 SDS法裂解线粒体膜 ,释放线粒体 DNA后用酚 /氯仿抽提 ,TE或 dd H2 O溶解。然后将所得线粒体 DNA进行纯度鉴定并和其他现有方法制备的线粒体 DNA用 PCR进行长片段扩增 ,比较扩增效果。结果 :用改进的方法制备的线粒体 DNA中没有检测到核 DNA,并能有效扩增 8kb长的目的片段。结论 :改进后的方法简便、快捷 ,制备的线粒体 DNA纯度高 ,也有利于长片段

关键词：外周血线粒体DNA 聚合酶链反应骨骼肌

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人髂腰肌神经的显微解剖和大鼠髂腰肌的复合动作电位研究

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第二军医大学学报 2004年第11期25卷 1216-1219页

作者：麻文谦张少成张传森党瑞山崔毅第二军医大学长海医院骨科第二军医大学基础医学部解剖学教研室上海200433 第二军医大学长海医院肌电图室上海200433

目的 :了解髂腰肌的神经支配及电生理学特征。方法 :在 30侧经甲醛溶液固定的成人尸体标本上进行显微解剖观察与测量 ,于手术显微镜下操作 ,剥离神经外膜 ,分离出神经束 ,研究髂腰肌神经的走行、分布及其神经纤维的来源 ,通过逆行追踪... 详细信息

目的 :了解髂腰肌的神经支配及电生理学特征。方法 :在 30侧经甲醛溶液固定的成人尸体标本上进行显微解剖观察与测量 ,于手术显微镜下操作 ,剥离神经外膜 ,分离出神经束 ,研究髂腰肌神经的走行、分布及其神经纤维的来源 ,通过逆行追踪观察各分支的神经纤维在神经干内的分布定位的特征 ;对大鼠髂腰肌神经进行电生理学测定 ,依次刺激 L2 ～ L5神经根 ,于髂腰肌记录其复合肌肉动作电位 (CMAP) ,观察并计算其运动潜伏期 (motor latency)、动作电位的波幅及波幅下面积以判定神经功能的状况 ,研究各腰神经根对髂腰肌支配的不同效应。结果 :支配腰大肌的神经纤维主要来源于 L2 ,其次是 L3,肌支纤维在 L2 神经干的外上侧束走行 ,部位较恒定。髂肌肌支则在股神经起始处发出 ,其神经纤维主要来源于 L4 ,其次为 L3及L2 ,一部分集中于 L4 神经根近侧端 (靠近脊神经节 )的下内象限 ,来源于 L2 、L3的神经纤维在股神经起始处断面的内上象限集中。电生理检测运动传导中复合肌肉动作电位发现对 L2 、L4 神经根刺激后测得波幅下面积分别为 (7.4 6± 2 .2 3)、(2 1.4 8± 1.87) m V· ms,与其他神经根所测相比有明显差异 (P<0 .0 5 )。结论 :腰大肌的神经纤维来源主要是 L2 ,肌支纤维在 L2 神经干的外上部走行。

关键词：髂腰肌神经支配显微解剖神经电生理

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生长因子与糖尿病性神经变性及再生

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第二军医大学学报 2004年第3期25卷 326-328页

作者：张丽华路长林同济大学附属同济医院，上海200092 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室，上海200433

糖尿病性神经变性是最常见的周围神经的病理表现 ,对其治疗 ,重要的是促进周围神经再生和防止神经变性。糖尿病引起的神经再生障碍部分甚至全部是由于某些神经营养因子水平降低或其受体表达降低所致。本文对一些主要的神经营养因子对糖... 详细信息

糖尿病性神经变性是最常见的周围神经的病理表现 ,对其治疗 ,重要的是促进周围神经再生和防止神经变性。糖尿病引起的神经再生障碍部分甚至全部是由于某些神经营养因子水平降低或其受体表达降低所致。本文对一些主要的神经营养因子对糖尿病性神经病理变性及再生作用。

关键词：生长因子糖尿病性神经变性神经营养因子神经再生

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