检索结果-内蒙古大学图书馆

医学综述 2004年第12期10卷 736-739页

作者：蒋平吕军焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

基因芯片(gene chip)是将大量的靶基因片段用点样仪有序地、高密度地(点与点之间的距离一般<500μm)固定在玻璃、硅等固相载体上的一项技术。它将待测样品用荧光染料标记成探针与芯片杂交，杂交后的信号用激光扫描仪检测，计算机分... 详细信息

基因芯片(gene chip)是将大量的靶基因片段用点样仪有序地、高密度地(点与点之间的距离一般<500μm)固定在玻璃、硅等固相载体上的一项技术。它将待测样品用荧光染料标记成探针与芯片杂交，杂交后的信号用激光扫描仪检测，计算机分析检测结果，可获得类似于传统的点杂交的分子杂交数据，比较各组织间靶基因表达谱的差异，以达到快速、高效、高通量及平行性地分析生物信息的目的。

关键词：脑创伤和损伤基因芯片表达谱芯片 mRNA 法医学

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可溶性TRAIL蛋白的高密度培养及补料策略研究

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生物工程学报 2004年第3期20卷 408-413页

作者：章越沈亚领夏小霞孙爱友魏东芝周劲松张国钧王梁华焦炳华华东理工大学生物化学研究所生物反应器工程国家重点实验室上海200237 上海恰尔生物技术有限公司上海200336 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

采用分批补料的方法高密度培养重组大肠杆菌C6 0 0 pBV TRAIL制备人可溶性TRAIL蛋白 ,优化发酵工艺 ,探索简单高效的分离纯化方法并测定蛋白生物活性。通过比较几种不同的补料策略 :间歇流加、DO stat、pH stat,摸索了一种流加策略 ,即... 详细信息

采用分批补料的方法高密度培养重组大肠杆菌C6 0 0 pBV TRAIL制备人可溶性TRAIL蛋白 ,优化发酵工艺 ,探索简单高效的分离纯化方法并测定蛋白生物活性。通过比较几种不同的补料策略 :间歇流加、DO stat、pH stat,摸索了一种流加策略 ,即DO stat pH stat组合流加 ,有效的避免了发酵过程中 ,尤其是诱导表达阶段乙酸积累的增加 ,使TRAIL蛋白在高密度培养条件下 ,得到高效表达。菌体密度最终达到 30 0g L(WCW )以上 ,可溶性TRAIL蛋白占菌体总蛋白的 4 2 % ,含量为 1 1g L。在整个发酵过程中 ,乙酸浓度接近于 0 ,且未使用任何特殊手段 ,如纯氧、加压等 ,简化了发酵工艺 ,降低了发酵成本 ,为TRAIL的工业化生产创造了条件。

关键词：重组大肠杆菌分批补料发酵 TRAIL 分离纯化

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新型血管形成抑制因子Tumstatin<,45-132>的克隆和表达

新型血管形成抑制因子Tumstatin<,45-132>的克隆和表达

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第14次全国干扰素及细胞因子学术会议

作者：罗以勤王梁华球谊焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物教研室(上海)

目的:克隆人Tumstatin全长编码区及编码Tumstatin的序列,在大肠杆菌重组表达并用内皮细胞增殖试验进行活性检测.方法:采用RT-PCR从人胚肾细胞系293细胞中克隆人的Tumstatin全长编码基因,继以PCR扩增出Tumstatin编码的基因(45-132位氨基... 详细信息

目的:克隆人Tumstatin全长编码区及编码Tumstatin<,45-132>的序列,在大肠杆菌重组表达并用内皮细胞增殖试验进行活性检测.方法:采用RT-PCR从人胚肾细胞系293细胞中克隆人的Tumstatin全长编码基因,继以PCR扩增出Tumstatin<,45-132>编码的基因(45-132位氨基酸),PCR产物克隆到pBV22载体中测序证后,转化BL21,42℃进行热诱导表达,SDS-PAGE分析表达产物,对重组蛋白纯化后测定生物活性.结果:RT-PCR扩增出Tumstatin全长编码序列以及PCR扩增出Tumstatin<,45-132>编码序列,经序列分析证实与GenBank中序列完全一致.含有Tumstatin<,45-132>编码基因的表达载体转化BL21后可表在出相对分子量(Mr)为9.6kD的重组蛋白,表达产物的蛋白量占菌体蛋白量的10﹪,该重组蛋白纯化后能够抑制内皮细胞增殖.结论:成功克隆全长Tumstatin cDNA,并在大肠杆菌中表达重组Tumstatin<,45-132>蛋白,并证实具有抑制内皮细胞增殖.

关键词：生物活性血管形成抑制因子表达载体内皮细胞增殖

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玄参中苯丙素苷XS-8对兔血小板cAMP和兔血浆中PGI_2/TXA_2的影响

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第二军医大学学报 2004年第8期25卷 920-921页

作者：黄才国李医明贺祥魏善建姜华第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海200433 中国科学院上海药物研究所新药研究国家重点实验室上海201203

玄参属(Scrophularia L.)是玄参科(Scrophulariaceae)的一个大属,世界上共有200种以上,我国约有40种[1].玄参属有许多药材作为民间药物治疗各种疾病[2].我们对玄参的化学成分进行了较为系统的分离,发现其主要成分为环烯醚萜苷和苯丙素苷... 详细信息

玄参属(Scrophularia L.)是玄参科(Scrophulariaceae)的一个大属,世界上共有200种以上,我国约有40种[1].玄参属有许多药材作为民间药物治疗各种疾病[2].我们对玄参的化学成分进行了较为系统的分离,发现其主要成分为环烯醚萜苷和苯丙素苷.药理实验中证实苯丙素苷能抑制血小板聚集和大鼠中性白细胞花生四烯酸(AA)代谢物白三烯(LTB4)的生成[3].本研究在此基础上,进一步探讨苯丙素苷抗血小板聚集的作用机制.

关键词：玄参苯丙素苷 XS-8 血小板 cAMP 血浆 PGI2/TXA2

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HBV基因疫苗诱导正常及HBV转基因小鼠产生体液免疫应答

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第二军医大学学报 2004年第1期25卷 47-50页

作者：余宏宇陈新龙宋维余永伟张乐之胡以平第二军医大学长征医院病理科上海200003 长海医院烧伤科长征医院贵宾诊疗科长海医院病理科长海医院实验诊断科基础医学部细胞生物学教研室

目的 :用乙型肝炎病毒 (HBV)蛋白基因真核表达载体诱导正常小鼠及 HBV转基因小鼠产生特异性体液免疫应答 ,以探讨其预防及治疗 HBV慢性感染的可行性。方法 :将 HBV S2 .S基因的真核表达载体 p CMV- S2 .S(PS)和相应的空载体 pc D-NA3.0... 详细信息

目的 :用乙型肝炎病毒 (HBV)蛋白基因真核表达载体诱导正常小鼠及 HBV转基因小鼠产生特异性体液免疫应答 ,以探讨其预防及治疗 HBV慢性感染的可行性。方法 :将 HBV S2 .S基因的真核表达载体 p CMV- S2 .S(PS)和相应的空载体 pc D-NA3.0分别免疫正常 C5 7BL/ 6小鼠及同一品系 HBV转基因小鼠 (n=5 )。每只小鼠肌内注射纯化质粒 1 0 0 μg。用 EL ISA方法检测小鼠血清抗 HBs和抗 pre S2效价及 HBV转基因小鼠血清 HBs Ag和 HBe Ag的水平。注射基因疫苗后第 8周 ,活检取转基因小鼠肝脏组织 ,制备石蜡切片并行 H- E染色 ,光镜下观察其病理改变。结果 :PS诱导正常及转基因小鼠产生了抗 HBs及抗pre S2 ,并且抗 pre S2的出现早于抗 HBs约 1～ 2周。PS免疫 8周后 ,转基因小鼠血清 HBs Ag和 HBe Ag为阴性。注射基因疫苗后第 8周病理检查转基因小鼠肝脏组织 ,肝细胞出现程度不同的广泛浊肿和水样变性 ,而相应的对照组无明显改变。免疫前后肝组织内单个核淋巴细胞数量无显著变化。结论 :研究表明 HBV中蛋白基因疫苗能够有效诱导 HBs Ag特异性的体液免疫应答 ,能够清除转基因小鼠血清中的 HBs Ag和 HBe Ag;初步的实验结果为研制治疗

关键词： HBV 基因疫苗转基因小鼠体液免疫免疫应答乙型肝炎病毒

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游离的LIF受体α亚基胞内区远膜端对HL-60细胞恶性程度的影响及相关机制

游离的LIF受体α亚基胞内区远膜端对HL-60细胞恶性程度的影响及相...

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第14次全国干扰素及细胞因子学术会议

作者：杨玲王凤玫刘善荣仵敏娟刘厚奇第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室(上海)

目的:探讨游离的LIF受体α亚基胞内区远膜端对HL-60细胞恶性程度的影响及其相关分子P44/42MAPK和Stat3的表达水平.方法:构建LIF受体α亚基胞内区远膜端(190CT3)真核表达载体,利用脂质体转染HL-60细胞,G418筛选阳性克隆,获得pcDNA3.0-190... 详细信息

目的:探讨游离的LIF受体α亚基胞内区远膜端对HL-60细胞恶性程度的影响及其相关分子P44/42MAPK和Stat3的表达水平.方法:构建LIF受体α亚基胞内区远膜端(190CT3)真核表达载体,利用脂质体转染HL-60细胞,G418筛选阳性克隆,获得pcDNA3.0-190CT3HL-60细胞株,用该细胞及野生型HL-60细胞分别注射裸鼠,H-E染色观察比较两组裸鼠主要脏器的病理变化,分析两种细胞株的恶性程度.同时,利用免疫沉淀及免疫印迹技术分别检测两种细胞中P44/42MAPK和Stat3的磷酸化及非磷酸化水平.结果:转染有190CT3和HL-60细胞与野生型HL-60细胞相比,其恶生程度明显降低,P44/42MAPK的磷酸化水平受到抑制,而Stat3的磷酸化水平明显升高.结论:游离的LIF受体α亚基胞内区远膜端可以启动其下游的信号转导,快速活化Stat3,同时抑制P44/42MAPK的磷酸化,降低白血病HL-60细胞的恶性程度.

关键词：白血病抑制因子白血病信号转导丝裂活化蛋白激酶

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海洋微生物抗肿瘤研究进展

海洋微生物抗肿瘤研究进展

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全国首届海洋生物化学与分子生物学学术会议暨全国第五届海洋生命活性物质与天然生化药物学术研讨会

作者：杨好许强芝焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海 200433

自从美国1967年提出“向海洋寻求药物”的口号，“蓝色药物”引起了各国的重视，短短几十年便有一万多种新化合物被发现，其中两百多种已申请专利，最初研究的焦点主要在海藻和软体动物身上，并且得到了许多极具潜力的先导化合物，但海... 详细信息

自从美国1967年提出“向海洋寻求药物”的口号，“蓝色药物”引起了各国的重视，短短几十年便有一万多种新化合物被发现，其中两百多种已申请专利，最初研究的焦点主要在海藻和软体动物身上，并且得到了许多极具潜力的先导化合物，但海洋动植物资源有限，分离纯化复杂，难以工业化生产等弊端一直是阻碍海洋药物研究进一步开展的棘手问题，而海洋中种类最为多样的海洋微生物以其代谢产物多样和可培养逐渐吸引研究者的目光，尤其在抗肿瘤活性方面。有学者预言最有前途的抗肿瘤药物来自海洋，而海洋微生物在此领域有着巨大的潜力。本文介绍了海洋微生物的多样性和异质性，简述了海洋细菌来源的抗肿瘤活性物质：别单孢菌属、土壤杆菌属、芽饱杆菌属、假单孢菌属等。并对海洋放线菌来源的抗肿瘤活性物质、海洋藻青菌来源的抗肿瘤活性物质进行了分析。研究发现与陆地微生物不同，海洋真菌而并非放线菌成为海洋微生物抗癌药物的主要来源。

关键词：海洋微生物海洋药物软体动物抗肿瘤活性海洋放线菌海洋真菌

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急性缺氧对大鼠海马神经元NMDA诱发电流的影响

急性缺氧对大鼠海马神经元NMDA诱发电流的影响

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中华医学会第七次全国神经病学学术会议

作者：林毅勇邵福源赵忠新赵瑛孙刚刘玲第二军医大学长征医院神经科第二军医大学长征医院神经科第二军医大学长征医院神经科第二军医大学长征医院神经科第二军医大学基础医学部生理学教研室南京军区南京总医院神经科

缺血性神经元损伤是一个复杂的病理生理过程,多种因素参与了缺血后的脑组织损伤,形成神经毒性级联。在脑缺血引起脑损伤的机制研究中,神经元谷氨酸受体的激活特别是NMDA受体的激活导致神

关键词：大鼠海马神经元急性缺氧

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玄参中苯丙素苷对大鼠肝损伤细胞凋亡的影响

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中西医结合肝病杂志 2004年第3期14卷 160-161页

作者：黄才国李医明贺祥魏善建焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海200433 上海药物研究所

目的 :观察玄参中苯丙素苷对大鼠肝损伤细胞凋亡的影响。方法 :采用D 氨基半乳糖 (D Gal)造成大鼠急性肝损伤模型 ,观察玄参中苯丙素苷对此模型肝细胞凋亡及相关基因表达的影响。结果 :玄参中苯丙素苷明显抑制模型肝细胞凋亡 ,上调bcl ... 详细信息

目的 :观察玄参中苯丙素苷对大鼠肝损伤细胞凋亡的影响。方法 :采用D 氨基半乳糖 (D Gal)造成大鼠急性肝损伤模型 ,观察玄参中苯丙素苷对此模型肝细胞凋亡及相关基因表达的影响。结果 :玄参中苯丙素苷明显抑制模型肝细胞凋亡 ,上调bcl 2蛋白表达 ,下调Fas/FasL的表达。结论 :玄参中苯丙素苷抗肝损伤细胞凋亡可能与其调控肝细胞凋亡相关基因有关。

关键词：玄参苯丙素苷大鼠肝损伤细胞凋亡药效学

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HCV结构蛋白重组杆状病毒表达载体的构建

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嘉兴学院学报 2004年第3期16卷 101-103页

作者：李菲朱诗应嘉兴学院生物与化学工程学院浙江嘉兴314001 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

丙型肝炎病毒 ( HCV)结构蛋白的核心蛋白 ( C)和包膜蛋白 2 ( E2 )含有多个 T细胞表位和中和抗体表位 ,可诱导机体产生保护性免疫应答。该实验用 PCR扩增 HCV结构区基因 ,克隆到载体 p Fast Bac1中 ,构建了重组杆状病毒表达载体 p FB1 -... 详细信息

丙型肝炎病毒 ( HCV)结构蛋白的核心蛋白 ( C)和包膜蛋白 2 ( E2 )含有多个 T细胞表位和中和抗体表位 ,可诱导机体产生保护性免疫应答。该实验用 PCR扩增 HCV结构区基因 ,克隆到载体 p Fast Bac1中 ,构建了重组杆状病毒表达载体 p FB1 -CEE,为

关键词：丙型肝炎病毒结构蛋白杆状病毒表达栽体克隆

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