检索结果-内蒙古大学图书馆

直接RT－PCR技术扩增人β－肌动蛋白和粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子cDNA片段

第二军医大学学报 1996年第2期17卷 181-184页

作者：戴旭明胡以平王肖鹏傅继梁第二军医大学基础医学部生物学教研室

直接ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增人β－肌动蛋白和粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子ｃＤＮＡ片段戴旭明，胡以平，王肖鹏，傅继梁基因表达的调控与正常细胞的增殖、分化、功能表达及其癌变过程关系密切，也是现代分子生物学研究的重点之一。转录... 详细信息

直接ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增人β－肌动蛋白和粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子ｃＤＮＡ片段戴旭明，胡以平，王肖鹏，傅继梁基因表达的调控与正常细胞的增殖、分化、功能表达及其癌变过程关系密切，也是现代分子生物学研究的重点之一。转录水平的基因调控尤为重要，研究也较深...

关键词： GM-CSF cDNA β-肌动蛋白聚合酶链反应逆转录

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嗅鞘细胞移植联合应用GDNF对大鼠脊髓损伤的治疗作用

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第二军医大学学报 2002年第6期23卷 593-597,F004页

作者：曹莉叶俊丽刘丽陈菲陈哲宇李建红路长林何成第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

目的 :研究嗅鞘细胞 (OECs)移植并联合应用胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对脊髓损伤的保护和促进再生作用。方法 :建立成年 SD大鼠脊髓 T8半横断损伤模型 ,将体外培养纯化的 OECs植入脊髓损伤处 ,同时局部应用 GDNF。采用斜板试验和 ... 详细信息

目的 :研究嗅鞘细胞 (OECs)移植并联合应用胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对脊髓损伤的保护和促进再生作用。方法 :建立成年 SD大鼠脊髓 T8半横断损伤模型 ,将体外培养纯化的 OECs植入脊髓损伤处 ,同时局部应用 GDNF。采用斜板试验和 BBB联合功能评分观察大鼠运动功能恢复情况 ,并通过辣根过氧化物酶逆行示踪技术评价 OECs和 GDNF对神经元存活和纤维再生的影响。结果 :(1) OECs和 GDNF联合应用时对皮质和红核神经元有逆行性保护作用 ,可促进脊髓下行传导束再生 ,肢体运动功能恢复。 (2 ) OECs和 GDNF联合应用组对脊髓损伤的修复作用最强 ,高于 GDNF或 OECs单用组。结论 :联合应用 GDNF和 OECs在脊髓损伤修复治疗中具有协同作用。

关键词：嗅鞘细胞移植 GDNF 大鼠脊髓损伤治疗作用胶质细胞源性神经营养因子红核脊髓束皮质脊髓束

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组蛋白脱乙酰化酶HDAC1 cDNA的克隆及其酵母表达质粒的构建

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第二军医大学学报 1999年第4期20卷 205-208页

作者：陈坚张晓琴傅继梁第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：获得ＨＤＡＣ１的ｃＤＮＡ及构建酵母双杂合系统中的靶基因。方法：利用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从人Ｊｕｒｋａｔ细胞中扩增出一约１．４５ｋｂ的ＤＮＡ片段，作全自动测序，重组入ｐＬｅｘＡ载体，构建成ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１，并... 详细信息

目的：获得ＨＤＡＣ１的ｃＤＮＡ及构建酵母双杂合系统中的靶基因。方法：利用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从人Ｊｕｒｋａｔ细胞中扩增出一约１．４５ｋｂ的ＤＮＡ片段，作全自动测序，重组入ｐＬｅｘＡ载体，构建成ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１，并用醋酸锂法转化酵母菌ＥＧＹ４８，在选择性培养基上观察ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１在ＥＧＹ４８中的表达情况。结果：获得的１．４５ｋｂ的ＤＮＡ编码的氨基酸序列与文献报道的ＨＤＡＣ１一致，转化的酵母菌在选择性培养基ＳＤ／Ｇａｌ／Ｒａｆ／－Ｕｒａ／－Ｈｉｓ／上培养３ｄ后，长出约１ｍｍ大小的白色菌落。结论：获得了ＨＤＡＣ１的ｃＤＮＡ，ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１对ＥＧＹ４８没有毒性作用，也没有自身激活ＬａｃＺ功能，可作为酵母双杂合系统中的靶基因。

关键词：组蛋白脱乙酰化酶酵母双杂合系统质粒克隆

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庚型肝炎病毒NS3蛋白在大肠杆菌中的表达

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中华微生物学和免疫学杂志 1999年第6期19卷 475-478页

作者：朱分禄任浩宋燕斌戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

目的　获取具备免疫反应原性的庚型肝炎病毒ＮＳ３抗原。方法　从重组质粒Ｉｗｑ２利用ＰＣＲ反应扩增出ＧＢＶＣ／ＨＧＶＮＳ３基因片段，克隆至表达载体ｐＰＲＯＥＸＨＴａ后进行核苷酸序列测定，待鉴定正确后经ＩＰＴＧ诱... 详细信息

目的　获取具备免疫反应原性的庚型肝炎病毒ＮＳ３抗原。方法　从重组质粒Ｉｗｑ２利用ＰＣＲ反应扩增出ＧＢＶＣ／ＨＧＶＮＳ３基因片段，克隆至表达载体ｐＰＲＯＥＸＨＴａ后进行核苷酸序列测定，待鉴定正确后经ＩＰＴＧ诱导重组工程菌，用ＳＤＳＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ对重组蛋白进行鉴定。结果　酶切鉴定和核苷酸序列测定结果表明成功地构建了重组工程菌ｐＨＴＮＳ３／ＤＨ５α且克隆的基因片段为ＧＢＶＣ／ＨＧＶＮＳ３基因片段。ＳＤＳＰＡＧＥ分析诱导表达产物发现在相对分子质量约４３８１０处有一条明显的蛋白表达带，占菌体总量的１７．７％。用ＮｉＮＴＡ亲和层析柱快捷地获得了纯化的重组蛋白。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定发现重组蛋白可与ＧＢＶＣ／ＨＧＶＲＮＡ阳性病人血清发生抗原抗体反应。结论　获得了具备免疫反应原性的ＧＢＶＣ／ＨＧＶＮＳ３抗原，该重组蛋白可用于ＧＢＶＣ／ＨＧＶ感染的检测。

关键词：庚型肝炎病毒 NS蛋白大肠杆菌表达

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人雄激素受体激素结合区cDNA片段在大肠杆菌中表达的影响因素

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第二军医大学学报 1997年第4期18卷 384-385页

作者：王志强王学敏毛积芳卢建第二军医大学基础医学部生物化学教研室第二军医大学基础医学部病理生理学教研室

人雄激素受体激素结合区ｃＤＮＡ片段在大肠杆菌中表达的影响因素王志强王学敏毛积芳卢建△人雄激素受体（ｈＡＲ）是类固醇激素受体超家族的成员之一，其分子为９１９个氨基酸残基组成的多肽链，分３个功能区：Ｎ端区、ＤＮＡ结合区和... 详细信息

人雄激素受体激素结合区ｃＤＮＡ片段在大肠杆菌中表达的影响因素王志强王学敏毛积芳卢建△人雄激素受体（ｈＡＲ）是类固醇激素受体超家族的成员之一，其分子为９１９个氨基酸残基组成的多肽链，分３个功能区：Ｎ端区、ＤＮＡ结合区和激素结合区。激素结合区由２４４个氨...

关键词：人雄激素受体激素结合区大肠杆菌基因表达

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硝酸银耳蜗光镜制片改做透射电镜样品的方法

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第二军医大学学报 2003年第9期24卷 936-936,940页

作者：张琰敏刁明芳颜永碧第二军医大学基础医学部生理学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室

耳蜗标本的电镜制备难度较大，很难做出理想的标本。有关显示和制作耳蜗电镜标本方面的文章虽有很多，但大疗分资料是描述如何修正耳蜗螺旋器方向的定向、定位。本文介绍了同一份耳蜗标本，光镜观察与电镜观察相结合的样品制备方法。

关键词：硝酸银耳蜗光镜制片透射电镜

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一种组织RNA的快速提取方法

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第二军医大学学报 1996年第6期17卷 581-582页

作者：郭兴中徐仁宝第二军医大学基础医学部生物化学教研室第二军医大学基础医学部病理生理学教研室

一种组织ＲＮＡ的快速提取方法郭兴中，徐仁宝从细胞或组织中快速地提取高质量的总ＲＮＡ是进行斑点杂交、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交及构建ｃＤＮＡ文库成功与否的先决条件。本实验在硫氰酸胍一步法的基础上进行了改进，使ＲＮＡ的提取与分... 详细信息

一种组织ＲＮＡ的快速提取方法郭兴中，徐仁宝从细胞或组织中快速地提取高质量的总ＲＮＡ是进行斑点杂交、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交及构建ｃＤＮＡ文库成功与否的先决条件。本实验在硫氰酸胍一步法的基础上进行了改进，使ＲＮＡ的提取与分析在更短的的时间内得到解决。１材料...

关键词： RNA 分子杂交基因表达提取

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正常人心脏和瓣膜内羟脯氨酸与氨基己糖的含量

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第二军医大学学报 1995年第3期16卷 272-273页

作者：纪荣明党瑞山姜宗来杨向群姜关祥冯伟华陈如坤第二军医大学基础医学部解剖学教研室第二军医大学基础医学部生物化学教研室第二军医大学长海医院胸心外科

死亡２ｈ后正常成年男性心脏标本，应用生物化学方法测定了右心房、右心室、左心房、左心室、左室前乳头肌、主动脉瓣和肺动脉瓣内羟脯氨酸和氨基己糖的含量（μｍｏｌ／ｍｇ组织）。二者在上述各部内的含量依次为：３１．２和５２．０... 详细信息

死亡２ｈ后正常成年男性心脏标本，应用生物化学方法测定了右心房、右心室、左心房、左心室、左室前乳头肌、主动脉瓣和肺动脉瓣内羟脯氨酸和氨基己糖的含量（μｍｏｌ／ｍｇ组织）。二者在上述各部内的含量依次为：３１．２和５２．０；１５．６和４４．１；４８．７和５７．８；１４．４和３９．７；３２．８和４１．０；４３．１和７２．５；５８．１和６９．９．左右心房羟脯氨酸含量之比值为１∶０．６４；左右心房氨基己糖含量之比值为１∶０．９；氨基己糖与羟脯氨酸之比值右心房为２．８∶１；左心房为２∶１；右心室为４．８∶１；左心室为４．６∶１。本实验提供了正常成年人心脏、主动脉和肺动脉瓣内羟脯氨酸与氨基己糖的正常值，将为进一步研究病理情况下上述结构的生化成分改变，以及心脏疾病的诊断和治疗提供依据。

关键词：心脏主动脉瓣肺动脉瓣羟脯氨酸氨基己糖胶原

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风湿性心脏病患者心肌心源性阿片肽含量的变化及其对心功能的影响

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第二军医大学学报 1997年第S1期18卷 34-38页

作者：王志农张宝仁朱家麟郝家骅王成海黄爱军路长林第二军医大学长海医院胸心外科第二军医大学基础医学部神经生物教研室

目的：探讨心肌内源性阿片肽（ＥＯＰ）的变化和对术前心功能的影响及其可能的机制。方法：应用放射免疫法测定２１例风湿性二尖瓣病变患者心肌中β－内啡肽（β－ＥＰ）、亮脑啡肽（Ｌｅｕ－ＥＮＫ）和强啡肽Ａ１－１３（ＤｙｎＡ１－... 详细信息

目的：探讨心肌内源性阿片肽（ＥＯＰ）的变化和对术前心功能的影响及其可能的机制。方法：应用放射免疫法测定２１例风湿性二尖瓣病变患者心肌中β－内啡肽（β－ＥＰ）、亮脑啡肽（Ｌｅｕ－ＥＮＫ）和强啡肽Ａ１－１３（ＤｙｎＡ１－１３）以及ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ含量。结果：风心病二尖瓣狭窄组（ＭＳ组）、二尖瓣关闭不全组（ＭＩ组）心肌β－ＥＰ、Ｌｅｕ－ＥＮＫ和ＤｙｎＡ１－１３含量均显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）；ＭＩ组心肌β－ＥＰ、Ｌｅｕ－ＥＮＫ含量显著高于ＭＳ组（Ｐ＜０．０５），ＤｙｎＡ１－１３含量在ＭＩ和ＭＳ两组间无统计学差异（Ｐ＞０．０５）；风心病ＭＳ和ＭＩ组心肌ｃＡＭＰ含量及ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值均显著低于正常对照组（Ｐ＜０．０５），而ｃＧＭＰ含量高于正常对照组（Ｐ＜０．０５）；ＭＳ和ＭＩ两组间ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ含量及ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值均无显著差异（Ｐ＞０．０５））；心肌β－ＥＰ和Ｌｅｕ－ＥＮＫ含量与ＬＶＥＦ、ＦＳ、ＬＣＷＩ、ＬＶＳＷＩ、ＣＩ、ＳＩ呈明显负相关（Ｐ＜０．０５）；心肌ＤｙｎＡ１－１３与ＬＣＷＩ、ＬＶＳＷＩ、ＣＩ、ＳＩ亦呈明显负相关（Ｐ＜０．０５）；心肌β－ＥＰ、Ｌｅｕ－ＥＮＫ和ＤｙｎＡ１－１３含量?

关键词：内源性阿片肽风湿性心脏病心功能

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人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因Oct4的克隆及其在大肠杆菌中的表达(英文)

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第二军医大学学报 2003年第9期24卷 937-940页

作者：刘善荣王庆敏杨玲汤淑萍惠宁蒋正戚中田刘厚奇第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室第二军医大学长海医院妇产科第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的 :克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。方法 :取 4～ 6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜 ,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建成 pGEX5T Oct4重组质粒。β硫... 详细信息

目的 :克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。方法 :取 4～ 6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜 ,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建成 pGEX5T Oct4重组质粒。β硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导使该基因在k80 2菌中表达。结果 :用PCR方法扩增获得大小约 1 .1kb条带 ;全自动测序与GenBank中登录的序列 97%同源。获得了pGEX5T Oct4重组子并在k80 2菌中获得了表达 ,SDS PAGE分析有一特异性的 6 2 0 0 0条带。结论 :扩增和克隆了人胚生殖系细胞多能性调节蛋白Oct4全长cDNA并在大肠杆菌中获得表达。

关键词：人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因 Oct4 克隆基因克隆基因表达

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