检索结果-内蒙古大学图书馆

在减毒伤寒杆菌CVD908疫苗株中四环素诱导表达恶性疟原虫MSP1-31片段基因

第二军医大学学报 2002年第1期23卷 51-53页

作者：钱锋潘卫庆第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

目的 :用含 PL tet O启动子的 p ZE11质粒在减毒伤寒杆菌 CVD90 8疫苗株中表达恶性疟原虫 MSP1- 31片段基因。方法 :构建受四环素诱导调控的重组质粒 p ZE11/ MSP1- 31,将该重组质粒用电穿孔转化法转化入减毒伤寒杆菌 CVD90 8/ tet R... 详细信息

目的 :用含 PL tet O启动子的 p ZE11质粒在减毒伤寒杆菌 CVD90 8疫苗株中表达恶性疟原虫 MSP1- 31片段基因。方法 :构建受四环素诱导调控的重组质粒 p ZE11/ MSP1- 31,将该重组质粒用电穿孔转化法转化入减毒伤寒杆菌 CVD90 8/ tet R疫苗株中 ,用免疫印迹反应检测 MSP1- 31在 CVD90 8/ tet R株中的四环素诱导表达。结果 :构建了重组的 p ZE11/ MSP1- 31质粒 ,免疫印迹反应显示该 MSP1- 31基因在 CVD90 8/ tet R株中得到有效表达 ,且依赖于四环素的存在。结论 :成功地构建了由四环素诱导的、表达恶性疟原虫 MSP1- 31的减毒伤寒杆菌疫苗株。

关键词：伤寒沙门氏菌恶性疟原虫裂殖子表面蛋白-1 四环素基因表达 PLteto启动子

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尾加压素受体GPR14在大鼠心血管系统及脑内的表达

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第二军医大学学报 2002年第1期23卷 45-47页

作者：李玲袁文俊邱景伟潘秀颉第二军医大学基础医学部生理学教研室上海200433

目的 :观察尾加压素 (U )受体 GPR14在 SD大鼠心血管系统及脑内的表达。方法 :采用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)检测 GPR14。结果 :在心血管系统中 ,大鼠颈总动脉、胸主动脉、左心房及左心室均表达 GPR14m RNA,其中心室表... 详细信息

目的 :观察尾加压素 (U )受体 GPR14在 SD大鼠心血管系统及脑内的表达。方法 :采用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)检测 GPR14。结果 :在心血管系统中 ,大鼠颈总动脉、胸主动脉、左心房及左心室均表达 GPR14m RNA,其中心室表达丰度最高 ;在中枢神经系统中 ,大鼠小脑、大脑皮质、下丘脑及海马均表达 GPR14m RNA,其中小脑表达丰度较高。结论 :U 受体 GPR14在大鼠心血管系统及脑组织中都有表达 ,提示 U 在心血管及中枢神经活动中发挥重要作用。

关键词： G蛋白偶联受体尿紧张素类小脑聚合酶链反应心血管系统大鼠尾加压素受体 GPR14 mRNA

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干细胞:生物医药研究的新靶标

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第二军医大学学报 2002年第11期23卷 1161-1165页

作者：胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

曾几何时,我有过一个很朦胧的概念,即"个体生长发育和功能维持可能是通过干细胞在空间和时间上的有序增殖与分化来实现的".虽然,这一概念当时还未真正形成,而且也还没有明确的解释,但就目前来说,它与各相关学科的现有理论和... 详细信息

曾几何时,我有过一个很朦胧的概念,即"个体生长发育和功能维持可能是通过干细胞在空间和时间上的有序增殖与分化来实现的".虽然,这一概念当时还未真正形成,而且也还没有明确的解释,但就目前来说,它与各相关学科的现有理论和知识并不冲突,而且还显得十分吻合.

关键词：新靶标干细胞生物药学应用肿瘤

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脱氢皮质酮对大鼠海马神经元的毒性作用及其机制的探讨

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第二军医大学学报 2002年第6期23卷 632-635页

作者：万顺伦孙刚等第二军医大学基础医学部生理学教研室，上海200433

目的 :研究糖皮质激素的代谢产物 11-脱氢皮质酮对大鼠海马神经元的毒性作用及其机制。方法 :采用 Westernblotting、放射性酶活性测定及 MTT染色测定法进行实验。结果 :Western blotting和放射性酶活性测定均证明了原代培养大鼠海马... 详细信息

目的 :研究糖皮质激素的代谢产物 11-脱氢皮质酮对大鼠海马神经元的毒性作用及其机制。方法 :采用 Westernblotting、放射性酶活性测定及 MTT染色测定法进行实验。结果 :Western blotting和放射性酶活性测定均证明了原代培养大鼠海马神经元内存在使 11-脱氢皮质酮转化为皮质酮的酶 ,即型 11β-羟基类固醇脱氢酶 (11β- HSD1)。 11-脱氢皮质酮能够促进 11β- HSD1蛋白的表达。细胞存活实验表明 :11-脱氢皮质酮 (10 - 6 m ol/ L )可对无血清 DMEM培养的大鼠海马神经元产生损伤作用 ,此作用不仅可为 11β- HSD1抑制剂甘珀酸 (carbenoxolone,CBX)所阻断 ,还能为糖皮质激素受体 (glucocorticoidreceptor,GR)拮抗剂阻断 ,但不能为肾上腺皮质激素受体 (m ineralocorticoid receptor,MR)拮抗剂所阻断。结论 :11-脱氢皮质酮能够对大鼠海马神经元产生毒性作用 ,此毒性作用是由 11β- HSD1参与并由 GR受体介导的。 11-脱氢皮质酮使 11β- HSD1蛋白表达增加 ,又反过来促进 11-脱氢皮质酮向皮质酮的转化 ,此正反馈作用可能在应激性迟发性神经元死亡中发挥一定的作用。

关键词： 11-脱氢皮质酮 11β-羟基类固醇脱氢酶脱氢皮质酮大鼠海马神经元毒性作用

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庚型肝炎病毒全基因转基因小鼠的制备与遗传

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第二军医大学学报 2002年第11期23卷 1175-1178页

作者：胡卫江王宏卫戚中田李建秀胡以平第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 基础医学部细胞生物学教研室

目的:利用显微注射方法产生整合庚型肝炎病毒(HGV)全基因的转基因小鼠,并研究HGV基因的遗传特性。方法:将含有HGV全长基因的载体线性化后,将目的基因DNA溶于显微注射用缓冲液,依常规方法进行显微注射,得到仔鼠后用PCR及基因组DNA South... 详细信息

目的:利用显微注射方法产生整合庚型肝炎病毒(HGV)全基因的转基因小鼠,并研究HGV基因的遗传特性。方法:将含有HGV全长基因的载体线性化后,将目的基因DNA溶于显微注射用缓冲液,依常规方法进行显微注射,得到仔鼠后用PCR及基因组DNA Southern印迹法鉴定。阳性小鼠即为建立者(founder)小鼠,将founder小鼠与正常小鼠交配得到F代小鼠,随后将F1代阳性鼠与正常小鼠交配得到F2代小鼠。结果:共得到5只founder小鼠,其中4只与正常小鼠交配,得到F1代小鼠共41只,其中29只为阳性,阳性率为71％。F2代小鼠共21只,其中16只为阳性,阳性率为76％。结论:得到了整合有HGV全长基因的转基因小鼠,并证明HGV基因可以在转基因小鼠体内稳定传递。

关键词：制备庚型肝炎病毒转基因小鼠遗传学动物模型

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小鼠受精卵显微操作方法的改进

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第二军医大学学报 2002年第9期23卷 1032-1033页

作者：李建秀胡卫江胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 第二军医大学实验动物中心

目的 :改进小鼠受精卵显微操作方法 ,提高小鼠受精卵的存活率、假孕母鼠生产率及得仔率。方法 :以一定长度大小及浓度的 DNA片段为材料 ,分别进行常规及改进的显微操作后 ,统计分析受精卵存活率、假孕母鼠生产率及得仔率。结果 :经改... 详细信息

目的 :改进小鼠受精卵显微操作方法 ,提高小鼠受精卵的存活率、假孕母鼠生产率及得仔率。方法 :以一定长度大小及浓度的 DNA片段为材料 ,分别进行常规及改进的显微操作后 ,统计分析受精卵存活率、假孕母鼠生产率及得仔率。结果 :经改进后缩短操作时间的显微操作法与常规显微操作法相比 ,小鼠受精卵的存活率由 6 0 .3%提高至 79.5 %、假孕母鼠生产率由 35 .7%提高至 5 6 .8%、得仔率由 10 .1%提高至 14.1%,均有显著差别 (P<0 .0 1)。结论 :改进的显微操作法可推广应用于常规的转基因小鼠制备。

关键词：受精卵存活率生产率得仔率显微操作法

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胶质细胞源性神经营养因子体内转基因治疗对脊髓运动神经元的保护作用

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中华骨科杂志 2002年第9期22卷 551-555页

作者：鲁凯伍陈哲宇侯铁胜傅强李明曹莉金大地第一军医大学南方医院脊柱骨病科广州510515 第二军医大学基础医学部神经生物教研室第二军医大学长海医院骨科

目的研究脂质体介导胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)体内转基因对大鼠脊髓损伤(SCI)后脊髓前角运动神经元的保护作用.方法雄性SD大鼠50只随机均分为绿色荧光蛋白(GFP)组和GDNF组.采用改良Nystrom法制备大鼠脊髓急性压迫损伤模型,将脂质... 详细信息

目的研究脂质体介导胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)体内转基因对大鼠脊髓损伤(SCI)后脊髓前角运动神经元的保护作用.方法雄性SD大鼠50只随机均分为绿色荧光蛋白(GFP)组和GDNF组.采用改良Nystrom法制备大鼠脊髓急性压迫损伤模型,将脂质体DC-Chol和重组质粒pEGFP-GDNF cDNA混合后注入大鼠损伤脊髓.利用RT-PCR技术和荧光显微镜检测GDNF基因体内转染的表达;应用尼氏染色、酶组织化学染色方法观察SCI后伤区前角运动神经元存活的数目和胆碱酯酶(CHE)及酸性磷酸酶(ACP)的变化;采用斜板试验和BBB评分观察大鼠后肢运动功能恢复情况.结果SCI后1周和4周GDNF在损伤局部有转录和蛋白水平高表达.SCI后第1、2、4周,GDNF组前角运动神经元存活数目(20.4±3.2、21.7±3.6、22.5±3.4)明显多于GFP组(16.8±2.8、17.3±2.7、18.2±3.2)(P＜0.05).SCI后第1、2周,GDNF组前角运动神经元中CHE平均灰度值(74.2±25.8,98.7±31.6)低于GFP组(98.5±32.2,134.6±45.2)(P＜0.01),ACP平均灰度值(84.5±32.6,79.5±28.4)高于GFP组(61.2±24.9,52.6±19.9)(P＜0.01).大鼠SCI后1～4周,GDNF治疗组后肢运动功能评分明显高于GFP对照组,两组间差异有显著性意义(P＜0.05).结论GDNF体内转基因能保护脊髓不完全性损伤后引起的神经元坏死和退变,促进大鼠后肢运动功能的恢复,提示阳离子脂质体介导GDNF体内转基因治疗SCI的方法是可行的.

关键词：神经生长因子转化生长因子β 脊髓损伤运动神经元脂质体转基因

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HGV RNA基因组感染HepG2细胞的研究

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微生物学通报 2002年第1期29卷 60-64页

作者：任浩朱分禄戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

　为了观察HGV　RNA基因组在HepG2细胞中的复制和表达并建立HGV感染的细胞模型,体外转录制备HGV RNA基因组,Lipofectamin介导转染HepG2细胞。取HGV RNA阳性培养上清液传代感染HepG2细胞,采用RT-PCR、免疫组化和Western blot等技术检测HG... 详细信息

　为了观察HGV　RNA基因组在HepG2细胞中的复制和表达并建立HGV感染的细胞模型,体外转录制备HGV RNA基因组,Lipofectamin介导转染HepG2细胞。取HGV RNA阳性培养上清液传代感染HepG2细胞,采用RT-PCR、免疫组化和Western blot等技术检测HGV在HepG2细胞中的复制和表达。HepG2细胞在转染后24h便可在培养上清液中检测到HGV负链RNA,传代感染的细胞及培养上清液中可检测到HGV正、负链RNA。在90d内传代20余次,均能检测到HGV的复制。免疫组化和Western　blot可检测到HGV E2蛋白在感染细胞中的表达。HGV感染细胞经冻存后复苏,仍能检测到 HGV RNA。故 HGV RNA基因组能够在HepG2细胞中复制和表达,此细胞模型有可能用于HGV的复制与感染防治的研究。

关键词：庚型肝炎病毒 HGV RNA基因组 HepG2细胞复制表达

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胶质细胞源性神经营养因子对大鼠脊髓损伤后神经元的保护作用

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中华实验外科杂志 2002年第4期19卷 380-380,T002页

作者：鲁凯伍陈哲宇侯铁胜傅强李明金大地广州第一军医大学南方医院脊柱骨病科 510515 第二军医大学基础医学部神经生物教研室第二军医大学长海医院骨科

神经营养因子（NTFs）在神经再生、突触形成以及神经损伤修复过程中起着重要的作用。胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）是目前发现的活性最强的运动神经元神经营养因子。本实验旨在观察外源性GDNF对大鼠脊髓急性压迫损伤后神经元的保护... 详细信息

神经营养因子（NTFs）在神经再生、突触形成以及神经损伤修复过程中起着重要的作用。胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）是目前发现的活性最强的运动神经元神经营养因子。本实验旨在观察外源性GDNF对大鼠脊髓急性压迫损伤后神经元的保护作用。

关键词：胶质细胞源性神经营养因子大鼠脊髓损伤神经元保护作用

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噬菌体表面展示人干扰素-α 2b

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第二军医大学学报 2002年第4期23卷 403-406页

作者：吴晓兰潘卫马仲才陈秋莉武文斌曹明媚戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

目的：建立一种研究人干扰素-α结构与功能的新平台。方法：利用噬菌体表面展示（phage display）技术表达人于扰素-α2b（hIFN-αa2b）基因。结果：生物活性测定表明，3×108TU重组噬菌体干扰素的抗病毒活性与SIU基因工程IFN-α2a... 详细信息

目的：建立一种研究人干扰素-α结构与功能的新平台。方法：利用噬菌体表面展示（phage display）技术表达人于扰素-α2b（hIFN-αa2b）基因。结果：生物活性测定表明，3×108TU重组噬菌体干扰素的抗病毒活性与SIU基因工程IFN-α2a的活性相当，并能被 IFN-α单抗中和。结论：hlFN-α 2b在噬菌体表面能正确折叠和功能性表达，即成功地建立了噬菌体展示外源肽（hIFN-α）的技术平台。

关键词：人干扰素-α 抗病毒活性噬菌体表面展示

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