检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 1998年第3期19卷 287-289页

作者：王官将毛积芳窦鸿蔡在龙邹鲁峰第二军医大学基础医学部生物化学教研室

重组人降钙素在大肠杆菌的表达和纯化王官将毛积芳窦鸿蔡在龙邹鲁峰人降钙素（Ｈｕｍａｎｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ，ｈＣＴ）是甲状腺滤泡旁细胞分泌的多肽激素，在体内参与钙、磷代谢的调节。临床上降钙素用于治疗各种疾病，如高血钙症、... 详细信息

重组人降钙素在大肠杆菌的表达和纯化王官将毛积芳窦鸿蔡在龙邹鲁峰人降钙素（Ｈｕｍａｎｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ，ｈＣＴ）是甲状腺滤泡旁细胞分泌的多肽激素，在体内参与钙、磷代谢的调节。临床上降钙素用于治疗各种疾病，如高血钙症、骨质疏松症和骨瘤病等，具有副作用小...

关键词：重组人降钙素大肠杆菌基因表达纯化

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一种新型克隆载体的构建

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第二军医大学学报 1996年第4期17卷 387-389页

作者：邹鲁峰毛积芳窦鸿蔡在龙伍军王官将第二军医大学基础医学部生物化学教研室

一种新型克隆载体的构建邹鲁峰，毛积芳，窦鸿，蔡在龙，伍军，王官将基因工程中寡肽基因的表达通常具有重组产物难以纯化和易受工程菌自身消化等障碍，为了克服这些困难，人们采用寡肽基因为单体的多聚基因或融合基因表达的方式，以期... 详细信息

一种新型克隆载体的构建邹鲁峰，毛积芳，窦鸿，蔡在龙，伍军，王官将基因工程中寡肽基因的表达通常具有重组产物难以纯化和易受工程菌自身消化等障碍，为了克服这些困难，人们采用寡肽基因为单体的多聚基因或融合基因表达的方式，以期获得重组寡肽产物［１．２］．近来，...

关键词：基因表达克隆载体 pMJ96

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烫伤早期大鼠肾皮质细胞氧自由基、Ca^（2＋）细胞化学和Ca^（2＋）－Mg^（2＋）－ATP酶活性的变化

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第二军医大学学报 1996年第2期17卷 141-144页

作者：窦鸿沙继红赵麟冯伟华黄海魏尧梅第二军医大学基础医学部生物化学教研室

研究重度烫伤大鼠肾皮质细胞膜（质膜、内质网及线粒体膜）Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性、细胞内Ｃａ２＋定位和半定量及肾皮质内Ｈ２Ｏ２（氧自由基）定位，以探讨烫伤早期肾损伤的机制。方法：化学法和细胞化学法。结果：发现肾... 详细信息

研究重度烫伤大鼠肾皮质细胞膜（质膜、内质网及线粒体膜）Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性、细胞内Ｃａ２＋定位和半定量及肾皮质内Ｈ２Ｏ２（氧自由基）定位，以探讨烫伤早期肾损伤的机制。方法：化学法和细胞化学法。结果：发现肾小管细胞内Ｃａ２＋浓度升高在烫伤后６０ｍｉｎ达到高峰，Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性在６０或１２０ｍｉｎ为最低，并与亚细胞结构的损伤程度显著相关。烫伤后３０ｍｉｎ肾皮质间质毛细血管及肾小球毛细血管壁出现Ｈ２Ｏ２细胞化学阳性沉积物，６０ｍｉｎ时消失。以上变化在观察时间内（５ｈ）具有可恢复性。结论：严重烫伤时肾缺血，皮质毛细血管内皮细胞受氧自由基损伤，改变了血管通透性，引起组织水肿，继而Ｃａ２＋泵活性下降，Ｃａ２＋过载，进一步影响细胞结构和功能。

关键词：烫伤肾皮质细胞膜氧自由基钙离子 ATP

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Northern印迹法的改进

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第二军医大学学报 1999年第3期20卷 195-196页

作者：郭兴中第二军医大学基础医学部生物化学教研室

Ａｌｗｉｎｅ发明的Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹法被广泛用于检测ｍＲＮＡ的大小和丰度，但由于其降解酶ＲＮａｓｅ广泛存在，且理化性质稳定，故在实际操作中，尤其是从组织中提取总ＲＮＡ进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹，对那些设备不是很完善的... 详细信息

Ａｌｗｉｎｅ发明的Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹法被广泛用于检测ｍＲＮＡ的大小和丰度，但由于其降解酶ＲＮａｓｅ广泛存在，且理化性质稳定，故在实际操作中，尤其是从组织中提取总ＲＮＡ进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹，对那些设备不是很完善的实验室来说，得到一个比较理想的杂交...

关键词：核糖核酸 RNA 印迹法 Northern

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人降钙素cDNA的化学合成与克隆

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第二军医大学学报 1996年第5期17卷 447-449页

作者：蔡在龙窦鸿毛积芳邹鲁峰伍军王官将第二军医大学基础医学部生物化学教研室

目的：克隆人降钙素ｃＤＮＡ。方法和结果：应用ＡＢＩ３９１ＤＮＡ合成仪，将人降钙素ｃＤＮＡ分成６个片段合成。退火、磷酸化、连接，最终将人降钙素ｃＤＮＡ克隆于载体ｐＧＥＭ７ｚ（＋），经ＤＮＡ双链测序，证明克隆到的人降钙素... 详细信息

目的：克隆人降钙素ｃＤＮＡ。方法和结果：应用ＡＢＩ３９１ＤＮＡ合成仪，将人降钙素ｃＤＮＡ分成６个片段合成。退火、磷酸化、连接，最终将人降钙素ｃＤＮＡ克隆于载体ｐＧＥＭ７ｚ（＋），经ＤＮＡ双链测序，证明克隆到的人降钙素ｃＤＮＡ序列与设计的完全一致。结论：本研究为寡肽ｃＤＮＡ（或基因）的化学合成与克隆提供了简捷、可靠的方法；为人的降钙素ｃＤＮＡ的高效表达奠定了基础。

关键词：降钙素 cDNA 化学合成克隆

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镉诱导金属硫蛋白的纯化及其抗体制备

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第二军医大学学报 1997年第2期18卷 124-127页

作者：金慧英周雍胡惠民冯伟华赵麟刘军华第二军医大学基础医学部生物化学教研室

目的：建立简便分离纯化镉诱导金属硫蛋白（ＣｄＭＴ）的方法，并制备抗ＣｄＭＴ抗血清。方法：采用加长ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５柱层析分离纯化由ＣｄＣｌ２诱导的大鼠肝组织ＣｄＭＴ，以此为抗原免疫家兔制得抗ＣｄＭＴ抗血... 详细信息

目的：建立简便分离纯化镉诱导金属硫蛋白（ＣｄＭＴ）的方法，并制备抗ＣｄＭＴ抗血清。方法：采用加长ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５柱层析分离纯化由ＣｄＣｌ２诱导的大鼠肝组织ＣｄＭＴ，以此为抗原免疫家兔制得抗ＣｄＭＴ抗血清。结果：纯化的ＣｄＭＴ经ＳＤＳＰＡＧＥ测定相对分子质量及Ｃｄ含量测定与标准ＣｄＭＴ一致，氨基酸组分分析也与文献报道基本一致；获得的抗血清对大鼠ＣｄＭＴ具有特异性反应。结论：本法为一种简便高效的分离纯化ＣｄＭＴ的方法，抗ＣｄＭＴ抗血清的制备可为进一步建立敏感的ＥＬＩＳＡ和免疫组化方法进行组织内ＭＴ含量测定及定位，有利于深入研究Ｃｄ中毒机理和ＭＴ生物学功能。

关键词：金属硫蛋白镉中毒纯化抗体制备

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大鼠肝乳酸脱氢酶与磷脂脂质体的相互作用

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第二军医大学学报 1994年第1期15卷 15-19页

作者：孙建新陈志杨雨善第二军医大学基础医学部生物化学教研室

以荧光光度法研究了大鼠肝ＬＤＨ－Ｍ４与磷脂脂质体的相互作用。磷脂脂质体对ＬＤＨ－Ｍ４具有抑制作用。磷脂酰肌醇（ＰＩ）脂质体的作用比磷脂酰乙醇胺（ＰＥ）大。当磷脂／蛋白（Ｗ／Ｗ）比为６时，ＰＩ能完全抑制ＬＤＨ的活性，抑... 详细信息

以荧光光度法研究了大鼠肝ＬＤＨ－Ｍ４与磷脂脂质体的相互作用。磷脂脂质体对ＬＤＨ－Ｍ４具有抑制作用。磷脂酰肌醇（ＰＩ）脂质体的作用比磷脂酰乙醇胺（ＰＥ）大。当磷脂／蛋白（Ｗ／Ｗ）比为６时，ＰＩ能完全抑制ＬＤＨ的活性，抑制作用呈剂量效应。而磷脂酰乙醇胺，当其磷脂／蛋白（Ｗ／Ｗ）比超过２时，抑制作用不明显，抑制作用呈非剂量效应。当以２８０ｎｍ为激发波长时，ＬＤＨ－Ｍ４的发射峰为３４５ｎｍ，主要为色氨酸的吸收。磷脂脂质体对ＬＤＨ－Ｍ４的内源性荧光具有猝灭作用，并使发射峰红移，ＰＩ的作用比ＰＥ的作用大，ＮａＣｌ能减轻磷脂脂质体对酶的内源性荧光的影响，该结果提示静电作用在磷脂与酶相互作用过程中是主要的。Ｓｔｅｒｎ－Ｖｅｌｍｅｒ图提示，荧光猝灭机制主要为静态猝灭，即酶吸附于磷脂脂质体表面形成了酶脂质体复合物。这种吸附改变了酶的构象，从而影响了酶的活性。

关键词：磷脂脂质体荧光猝灭乳酸脱氢酶

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大鼠肝乳酸脱氢酶M_4的分离纯化