检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2000年第9期21卷 849-852页

作者：朱分禄任浩朱诗应谢南潘卫董辉戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 南昌市传染病医院中心实验室

目的 :利用 Bac- to- Bac HT杆状病毒系统在 Sf9昆虫细胞中表达庚型肝炎病毒 (HGV) NS3蛋白 ,并对表达产物的免疫原性进行研究。方法 :将 HGV NS3基因片段定向克隆至转座载体 p Fast Bac HTa,转化 DH10 Bac感受态细胞 ,37℃振荡培养 4... 详细信息

目的 :利用 Bac- to- Bac HT杆状病毒系统在 Sf9昆虫细胞中表达庚型肝炎病毒 (HGV) NS3蛋白 ,并对表达产物的免疫原性进行研究。方法 :将 HGV NS3基因片段定向克隆至转座载体 p Fast Bac HTa,转化 DH10 Bac感受态细胞 ,37℃振荡培养 4h使发生转座 ,用抗生素平皿筛选重组 bacmid。脂质体介导转染 Sf9昆虫细胞 ,待细胞形态明显改变后收获细胞和培养上清液 ,将上清液再次感染 Sf9细胞以大量表达 HGV NS3重组蛋白。利用 SDS- PAGE和 Western- blotting方法分析重组蛋白。结果 :SDS- PAGE分析发现表达产物在 Mr43810处有一条明显的蛋白带 ,占细胞总蛋白量的 30 %以上 ;应用 Ni- NTA亲和层析柱获得了纯化的重组蛋白 ;Western- blotting显示该抗原可与 HGV RNA阳性血清发生特异反应。结论 :获得了昆虫细胞内表达的 HGV NS3重组蛋白 ,并证明该蛋白有可能用于 HGV感染的抗体检测。

关键词：免疫原性杆状病毒载体庚型肝炎 NS3蛋白

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人单核细胞趋化蛋白1基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

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第二军医大学学报 2000年第4期21卷 318-321页

作者：王汉涛郭葆玉屠岳王元和张淑英孟荣贵第二军医大学长海医院普通外科上海200433 药学院生化药学教研室长征医院普通外科基础医学部卫生毒理学教研室

目的：克隆表达具有重要生物功能的人单核细胞趋化蛋白１（ｈｕＭＣＰ－１）。方法：从人外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中提取ｐｏｌｙ（Ａ）~＋ＲＮＡ，用ＲＴ－ＰＣＲ法扩增出ｈｕＭＣＰ－１ｃＤＮＡ。将ｈｕＭＣＰ－１ｃＤＮＡ插... 详细信息

目的：克隆表达具有重要生物功能的人单核细胞趋化蛋白１（ｈｕＭＣＰ－１）。方法：从人外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中提取ｐｏｌｙ（Ａ）~＋ＲＮＡ，用ＲＴ－ＰＣＲ法扩增出ｈｕＭＣＰ－１ｃＤＮＡ。将ｈｕＭＣＰ－１ｃＤＮＡ插入融合表达载体ｐＧＥＸＩＮ，１ｍｍｏｌ／Ｌ异丙基－β－Ｄ－硫代半乳糖苷（ＩＰＴＧ）诱导后获得高效表达。结果：Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证明与ｈｕＭＣＰ－１单克隆抗体有明显交叉反应。结论：ｈｕＭＣＰ－１基因的克隆并表达成功为今后的实验室和临床研究提供了有用的材料。

关键词：基因克隆融合表达单核细胞趋化蛋白 huMCP-1

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血管内皮生长因子基因治疗兔下肢缺血的实验研究

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第二军医大学学报 2000年第5期21卷 447-449页

作者：顾洪陈少萍张电波王官将毛积芳第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 长海医院心血管内科长征医院放射科

目的 :了解血管内皮生长因子 (VEGF)基因治疗兔下肢缺血模型后新生血管和侧支循环形成状况。方法 :构建h VEGF1 6 5 的真核表达载体 ,通过直接肌肉注射将 h VEGF1 6 5 基因转染缺血部位肌细胞 ,经颈总动脉插管行下肢血管造影。结果 :V... 详细信息

目的 :了解血管内皮生长因子 (VEGF)基因治疗兔下肢缺血模型后新生血管和侧支循环形成状况。方法 :构建h VEGF1 6 5 的真核表达载体 ,通过直接肌肉注射将 h VEGF1 6 5 基因转染缺血部位肌细胞 ,经颈总动脉插管行下肢血管造影。结果 :VEGF治疗组在质粒转染后 2和 4周动脉血管造影显示 ,新生血管数目和侧枝血管形成较对照组明显增加。结论 :肌细胞能够吸收裸露的 VEGF c DNA质粒并获得局部高效表达。

关键词：侧支循环血管内皮生长因子基因治疗下肢缺血

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高密度培养大肠杆菌TG1/pGEX-hCT和高表达重组人降钙素

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第二军医大学学报 2000年第3期21卷 213-215页

作者：窦鸿李民毛积芳陈常庆第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 中国科学院上海生物工程研究中心

目的 :高密度、高表达培养重组大肠杆菌 TG1/p GEX- h CT,生产重组人降钙素 (rh CT)。方法和结果 :应用 NBSBio Flo30 0 0型 5 L 自控发酵罐 ,采用分批培养和补料分批培养相结合的培养技术 ,控制碳源和氮源的补加 ,控制溶解氧 ,使重组... 详细信息

目的 :高密度、高表达培养重组大肠杆菌 TG1/p GEX- h CT,生产重组人降钙素 (rh CT)。方法和结果 :应用 NBSBio Flo30 0 0型 5 L 自控发酵罐 ,采用分批培养和补料分批培养相结合的培养技术 ,控制碳源和氮源的补加 ,控制溶解氧 ,使重组菌 *** TG1/p GEX- h CT发酵光密度 [D(6 0 0 ) ]达到 5 8.6 ,人降钙素和 GST融合蛋白 (GST- h CT)的含量达到 3.2 g/L。结论 :本研究为工业化生产重组 h CT奠定了基础。

关键词：降钙素多肽激素大肠杆菌 TG1/pGEX-hCT

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视网膜表面膜的电镜标本制备方法

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海军军医大学学报 2000年第6期21卷 507-507页

作者：颜永碧谢志芳陆月良第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室!上海200433

病变视网膜表面的一层膜在眼底病诊断中有重要意义,但其不仅组织薄,而且非常软,手术取下来的表面膜组织易卷缩在一起,须飘浮在液体表面才能展开.视网膜表面膜如用常规电镜标本制样方法显示不出其细胞层次.为了能很好地观察表面膜组织中... 详细信息

病变视网膜表面的一层膜在眼底病诊断中有重要意义,但其不仅组织薄,而且非常软,手术取下来的表面膜组织易卷缩在一起,须飘浮在液体表面才能展开.视网膜表面膜如用常规电镜标本制样方法显示不出其细胞层次.为了能很好地观察表面膜组织中各种细胞形态及它们相互之间的关系,我们摸索出了一种简单、方便、易行的方法,现报告如下.

关键词：视网膜表面膜超薄切片显微镜检查,电子

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微波技术在超微结构病理诊断标本制备中的应用

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海军军医大学学报 2000年第6期21卷 589-589页

作者：颜永碧谢志芳陆月良第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室!上海200433

电镜作为某些疾病的病理检查的一种工具,已为广大医务工作者所熟知.但电镜样品常规制备的方法周期较长,影响及时诊断.近几年来,我们将微波照射作为常规技术应用于电镜标本制备.结果表明,该方法不仅缩短了样品制备时间,同时,还可以满足... 详细信息

电镜作为某些疾病的病理检查的一种工具,已为广大医务工作者所熟知.但电镜样品常规制备的方法周期较长,影响及时诊断.近几年来,我们将微波照射作为常规技术应用于电镜标本制备.结果表明,该方法不仅缩短了样品制备时间,同时,还可以满足电镜诊断要求.现已成为本室制备超微结构病理诊断标本的常规技术,介绍如下.

关键词：微波超微结构显微镜检查,电子

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镉离子诱发的氧自由基对肝细胞损伤及钙离子分布的影响

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中华预防医学杂志 2000年第4期34卷 256-256页

作者：叶煦亭沙继宏周雍杨勇骥胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海市200433

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强啡肽A_(1～13)对大鼠脑出血后脑水肿的治疗作用

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中国药理学通报 1999年第1期15卷 77-79页

作者：孙学军王成海路长林第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的研究强啡肽Ａ（ＤｙｎＡ１～１３）与大鼠胶原酶诱导的脑出血后脑水肿形成的关系，寻找治疗脑出血后脑水肿的特异性药物。方法大鼠大脑尾壳核内微量注射０．４ＩＵ细菌胶原酶；４ｈ后侧脑室注射ＤｙｎＡ１～１３及κ受体拮抗剂ｎｏ... 详细信息

目的研究强啡肽Ａ（ＤｙｎＡ１～１３）与大鼠胶原酶诱导的脑出血后脑水肿形成的关系，寻找治疗脑出血后脑水肿的特异性药物。方法大鼠大脑尾壳核内微量注射０．４ＩＵ细菌胶原酶；４ｈ后侧脑室注射ＤｙｎＡ１～１３及κ受体拮抗剂ｎｏｒ－ＢＮＩ；放射免疫法测定脑出血大鼠皮层、海马、尾壳核、下丘脑和垂体中ＤｙｎＡ１～１３含量；干湿重法测定脑组织含水量。结果胶原酶诱导大鼠脑出血后，顶叶皮层、额叶皮层、海马和尾壳核内ＤｙｎＡ１～１３含量明显减少，与对照组相比，Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１，与此同时，上述脑区组织含水量亦明显增加；但下丘脑和垂体ＤｙｎＡ１～１３含量明显增加（Ｐ＜０．０１）。侧脑室给予ＤｙｎＡ１－１３可以显著降低脑出血后脑组织含水量；κ受体拮抗剂ｎｏｒ－ＢＮＩ可以阻断该作用。结论ＤｙｎＡ１～１３可以通过κ受体治疗脑出血后脑水肿。

关键词：脑出血脑水肿强啡肽A1-13 治疗

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脑源性神经营养因子基因工程细胞脑内移植治疗帕金森病大鼠的实验研究

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中华神经科杂志 1999年第1期32卷 13-15页

作者：曲伸何小龙何成由振东王成海路长林第二军医大学基础医学部神经生物教研室

目的观察脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）基因工程成肌细胞脑内纹状体移植对帕金森病大鼠的治疗作用。方法建立逆转录病毒介导的ＢＤＮＦ表达质粒并转染成肌细胞，筛选阳性细胞进行脑内移植。结果基因工程成肌细胞脑内移植可明显提高帕... 详细信息

目的观察脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）基因工程成肌细胞脑内纹状体移植对帕金森病大鼠的治疗作用。方法建立逆转录病毒介导的ＢＤＮＦ表达质粒并转染成肌细胞，筛选阳性细胞进行脑内移植。结果基因工程成肌细胞脑内移植可明显提高帕金森病大鼠黑质酪氨酸羟化酶（ＴＨ）阳性神经元的存活率，使纹状体多巴胺含量明显增加，动物的旋转行为改善约５０％，并持续２个月之久。结论脑源性神经营养因子基因工程成肌细胞脑内纹状体移植可明显改善动物的旋转行为并可促进黑质神经原的存活。

关键词：脑源性神经生长因子基因疗法震颤性麻痹

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移植NT-4基因修饰细胞对大鼠前角运动神经元损伤的保护作用

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第二军医大学学报 1999年第3期20卷 158-160页

作者：侍坚路长林曲伸何小龙王成海第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的：观察神经营养素４（ＮＴ－４）基因修饰细胞对成年大鼠脊髓前角运动神经元损伤的保护作用。方法：应用逆转录病毒介导的体外ＮＴ－４基因转移方法，制备高表达ＮＴ－４的基因修饰细胞。离断大鼠左侧坐骨神经作为外周神经损伤模型... 详细信息

目的：观察神经营养素４（ＮＴ－４）基因修饰细胞对成年大鼠脊髓前角运动神经元损伤的保护作用。方法：应用逆转录病毒介导的体外ＮＴ－４基因转移方法，制备高表达ＮＴ－４的基因修饰细胞。离断大鼠左侧坐骨神经作为外周神经损伤模型，右侧作为对照，在离断处移植ＮＴ－４基因修饰细胞。观察大鼠脊髓前角运动神经元尼氏染色和胆碱酯酶染色的变化。结果：在移植ＮＴ－４基因修饰细胞组和对照组间，尼氏和胆碱酯酶染色有显著性差异。结论：移植ＮＴ－４基因修饰细胞对外周神经损伤所造成的运动神经元的退变有显著的改善作用。

关键词：神经营养素4 运动神经元损伤基因修饰大鼠

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