检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 1999年第10期20卷 795-797页

作者：胡小吾缪明永王来兴周晓平王文仲刘建民潘锋第二军医大学长海医院神经外科上海200433 第二军医大学基础医学部生物化学教研室山东郯城县第一人民医院脑外科

目的：研究一氧化氮（ＮＯ）在缺血性脑损伤中的作用。方法：夹闭沙土鼠双侧颈总动脉２０ｍｉｎ制备前脑缺血性脑损伤模型，分生化组和病理组。每组又分：（１）假手术组；（２）缺血对照组；（３）硝基－Ｌ－精氨酸（ＬＮＮＡ... 详细信息

目的：研究一氧化氮（ＮＯ）在缺血性脑损伤中的作用。方法：夹闭沙土鼠双侧颈总动脉２０ｍｉｎ制备前脑缺血性脑损伤模型，分生化组和病理组。每组又分：（１）假手术组；（２）缺血对照组；（３）硝基－Ｌ－精氨酸（ＬＮＮＡ）组，分３种剂量（３，２０，５０ｍｇ／ｋｇｉｐ）；（４）Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）组，３００ｍｇ／ｋｇｉｐ。第１，２组仅ｉｐ等量生理盐水。结果：缺血性损伤后脑含水量增加，一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性明显升高，ＬＮＮＡ剂量依赖性抑制ＮＯＳ活性，小剂量能明显减轻脑水肿。小、中剂量ＬＮＮＡ能减轻缺血性损伤后海马ＣＡ１区和ＣＡ２区锥体细胞缺失，小剂量作用明显，大剂量加重细胞缺失。结论：脑缺血后ＮＯＳ活性明显增加，加重缺血性脑损伤。通过ＬＮＮＡ适当降低脑组织ＮＯＳ活性能明显减轻脑水肿和海马区细胞坏死。

关键词：一氧化氮脑缺血 NOS 抑制剂颅脑损伤

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睫状神经营养因子单克隆抗体制备

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第二军医大学学报 1999年第8期20卷 560-562页

作者：邓小华周芸曾瑞云蒋春雷路长林第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433 上海第二医科大学医学检验重点实验室上海200025

目的：制备睫状神经营养因子（ｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ，ＣＮＴＦ）单克隆抗体。方法：将ＣＮＴＦ免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞和ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，经３次克隆化培养，获得... 详细信息

目的：制备睫状神经营养因子（ｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ，ＣＮＴＦ）单克隆抗体。方法：将ＣＮＴＦ免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞和ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，经３次克隆化培养，获得分泌ＣＮＴＦ单克隆抗体的杂交瘤细胞株；然后进行体内诱生获取含大量ＣＮＴＦ单克隆抗体的腹水和血清；再进行ＣＮＴＦ单克隆抗体鉴定和效价测定。结果：获得５株分泌ＣＮＴＦ单克隆抗体的杂交瘤细胞株，抗体亚型为ＩｇＧ２ａ；腹水和血清中该抗体效价分别为１∶１０７～１∶１０８和１∶１０６；该抗体能特异性地显示ＳＤ大鼠脑内表达ＣＮＴＦ的神经元，其中１株单克隆抗体能抑制ＣＮＴＦ促进体外培养新生ＳＤ大鼠骨骼肌细胞增殖的功能。结论：制备成功高效且特异的ＣＮＴＦ单克隆抗体，为ＣＮＴＦ结构、功能和机制的研究提供了有效工具。

关键词：神经营养因子单克隆抗体 CNTF

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用逆转录巢式PCR法检测重组逆转录病毒滴度

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第二军医大学学报 1999年第2期20卷 124-125页

作者：高军曹广文龙建秋吴晓兰崔龙戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室海军医学研究所流行病学研究室

在以逆转录病毒为载体的基因治疗研究中，重组逆转录病毒的滴度测定是必要步骤。一般常用的载体都含有来自细菌的新霉素抗性基因（ＮｅｏＲ）并作为选择基因，常规的滴度测定方法是质粒性重组载体经理化方法转入一种病毒包装细胞中，第... 详细信息

在以逆转录病毒为载体的基因治疗研究中，重组逆转录病毒的滴度测定是必要步骤。一般常用的载体都含有来自细菌的新霉素抗性基因（ＮｅｏＲ）并作为选择基因，常规的滴度测定方法是质粒性重组载体经理化方法转入一种病毒包装细胞中，第３天收获的病毒再感染另一种病毒包装...

关键词：逆转录病毒滴度聚合酶链反应巢式重组

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TNF,IFN,MHCⅠ类分子基因“正反馈”式放大表达的重组腺病毒载体

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第二军医大学学报 1999年第9期20卷 608-610页

作者：杨淑英曹广文段芳龄陈秋莉杜平第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 河南医科大学消化疾病研究所郑州450003

目的：为使外源性ＴＮＦ，ＩＦＮ基因和内源性主要组织相容性复合物Ⅰ类（ＭＨＣⅠ）分子基因表达呈现“正反馈”式放大效应，构建在ＨＬＡ Ｂ７启动子调控、ＩＲＥＳ连接下协同表达ＴＮＦα和ＩＦＮβ... 详细信息

目的：为使外源性ＴＮＦ，ＩＦＮ基因和内源性主要组织相容性复合物Ⅰ类（ＭＨＣⅠ）分子基因表达呈现“正反馈”式放大效应，构建在ＨＬＡ Ｂ７启动子调控、ＩＲＥＳ连接下协同表达ＴＮＦα和ＩＦＮβ基因的重组腺病毒载体。方法和结果：从ｐＧＬ３Ｂ７ＴＮＦ及ｐＩＲＩＦ中切下Ｂ７ｐｒｏ ＴＮＦ和ＩＲＥＳ ＩＦＮβ基因片段，先后插入ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳｋ（＋），构建成ｐＢＬＢ７ＴＮＩＲＩＦ。回收ＴＮＦα ＩＲＥＳ ＩＦＮβ基因片段，连入ＡｄＣＭＶＬｉｎｋ１中，构建成ＣＭＶ启动子驱动表达的ＡｄＣＭＶＴＮＩＲＩＦ（＋）。回收Ｂ７ｐｒｏ ＴＮＦ ＩＲＥＳ ＩＦＮβ基因片段，连入缺失Ｅ１和Ｅ３区及启动子的ＡｄＢｇｌⅡ中，构建成ＨＬＡ Ｂ７启动子驱动表达的ＡｄＢ７ＴＮＩＲＩＦ（－）。结论：此两种载体为“正反馈”式放大肿瘤免疫原性提供一条新途径。

关键词：腺病毒载体肿瘤免疫疗法 TNF IFN MHCⅠ

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介绍一种观察组织内小血管的电镜制样方法

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海军军医大学学报 1999年第10期20卷 806-806页

作者：沙继宏叶煦亭杨向群杨勇骥郑尊 200433 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室!上海第二军医大学基础医学部解剖学教研室

电镜观察血管标本,一般比较容易做的是游离血管,如主动脉、肾动脉或毛细血管,前者可直接取材,后者数量众多.如果要观察组织内一定直径的小血管,则比较麻烦,因为要找到一定直径的小血管不容易,用常规方法进行,工作量很大.我们摸索了一种... 详细信息

电镜观察血管标本,一般比较容易做的是游离血管,如主动脉、肾动脉或毛细血管,前者可直接取材,后者数量众多.如果要观察组织内一定直径的小血管,则比较麻烦,因为要找到一定直径的小血管不容易,用常规方法进行,工作量很大.我们摸索了一种方法,现介绍如下.

关键词：血管电镜制样

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蝾螈椭圆囊毛细胞换能、编码和突触传递的形态学基础

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神经解剖学杂志 1999年第2期15卷 153-156页

作者：高文元 MichaelL.Wiederhold 第二军医大学基础医学部生理学教研室上海200433 德洲大学圣安东尼奥医学中心耳鼻喉科实验室美国tx78284

本实验研究椭圆囊毛细胞换能、编码和突触传递的形态和显微力学基础。以幼年蝾螈为对象，光镜和电镜观察椭圆囊囊斑的微细和超微结构。实验结果：（１）只有毛细胞的高静纤毛和动纤毛的头部和耳石膜接触，耳石膜的剪切力由直接和间接两... 详细信息

本实验研究椭圆囊毛细胞换能、编码和突触传递的形态和显微力学基础。以幼年蝾螈为对象，光镜和电镜观察椭圆囊囊斑的微细和超微结构。实验结果：（１）只有毛细胞的高静纤毛和动纤毛的头部和耳石膜接触，耳石膜的剪切力由直接和间接两种途径传递至静纤毛；（２）耳石膜和表皮板组成纤毛束上下两端的致密板状结构，皮板下微管起固定和支撑下板作用，在两板之间的无定形物质有缓冲和利于上板滑动的功能，这种安排是纤毛受力后偏曲的基础；（３）囊斑上皮存在着动纤毛排列方向不同的四种毛细胞，感受器依靠这些分布不同的毛细胞群进行信号编码；（４）多根传入神经末梢和１～２根传出神经末梢与毛细胞构成传入和传出突触，存在于毛细胞底部胞液内和传出神经末梢内的囊泡是突触传递的物质基础。

关键词：机械电换能突触前庭器官毛细胞蝾螈

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小鼠神经细胞cdc2类蛋白激酶调节亚基p35^(Nck5a)基因的克隆和鉴定

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第二军医大学学报 1999年第10期20卷 716-719页

作者：周常文戴旭明薛红傅继梁兰州军区乌鲁木齐总医院临床医学研究所新疆乌鲁木齐市830000 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433 香港科技大学生物化学系

目的：获取小鼠神经细胞ｃｄｃ２类激酶（Ｎｃｌｋ）调节亚基ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因组ＤＮＡ，用于构建基因重复性打靶载体。方法：用噬斑原位杂交法从λＰＳ基因文库中克隆小鼠ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因；用限制性内切酶酶切图谱分析和... 详细信息

目的：获取小鼠神经细胞ｃｄｃ２类激酶（Ｎｃｌｋ）调节亚基ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因组ＤＮＡ，用于构建基因重复性打靶载体。方法：用噬斑原位杂交法从λＰＳ基因文库中克隆小鼠ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因；用限制性内切酶酶切图谱分析和序列测定进行基因组结构分析。结果：获得较完整的ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因组ＤＮＡ酶切图谱；该基因由一个外显子组成，长９２４ｂｐ，编码３０７个氨基酸的蛋白质，内含子长２０８ｂｐ，位于５′端侧翼序列中。测定的序列（－１０８０至＋９２４ｂｐ和＋３７２１至＋４２２２ｂｐ）与已报道的序列基本一致，仅在－１３５和－２９５位各插入一个碱基Ｇ。结论：得到的ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因组ＤＮＡ片段长约１１ｋｂ，其５′端侧翼序列含有一些已知的调控序列，３′端含有ｐｏｌｙＡ的信号序列。

关键词： P35^Nck5a基因克隆序列分析 cdc2类激酶小鼠

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电穿孔法转化大肠杆菌的影响因素