检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2006年第5期27卷 497-499页

作者：刘翾张勇矫力刘秀杰张照环王永刚朱伟何成第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

目的:研究downstream of kinases1(dok1)与TrkA之间的相互作用,寻找TrkA的可能底物或调控蛋白,以深入认识TrkA下游信号转导机制。方法:将TrkA胞内域与LexA蛋白融合作为DNA结合蛋白,分别将dok1、dok1PTB及dok1ΔPTB与B42AD蛋白融合作为... 详细信息

目的:研究downstream of kinases1(dok1)与TrkA之间的相互作用,寻找TrkA的可能底物或调控蛋白,以深入认识TrkA下游信号转导机制。方法:将TrkA胞内域与LexA蛋白融合作为DNA结合蛋白,分别将dok1、dok1PTB及dok1ΔPTB与B42AD蛋白融合作为激活域蛋白,共转化酵母菌后,通过β-半乳糖苷酶活性检测以及氨基酸营养缺陷生长实验分析它们之间的相互作用。结果:dok1及dok1PTB与TrkA之间在酵母中存在结合,而dok1ΔPTB不与TrkA结合。结论:证实TrkA与dok1之间具有相互作用,dok1的PTB结构域在介导此相互作用的过程中非常重要。

关键词： TrkA Dok1 酵母双杂交

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PC12-Mint2基因工程细胞株的构建

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第二军医大学学报 2005年第2期26卷 214-216页

作者：张骐张勇曹莉刘翾矫力何成第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

目的:构建稳定表达Mint2蛋白的PC12-Mint2基因工程细胞株。方法:用PCR方法将Mint2基因亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1A,构建真核表达质粒peDNA3.1A-Mint2;采用脂质体Lipofectamine2000介导,将重组载体转染入PC12细胞,G418筛选抗性克隆,... 详细信息

目的:构建稳定表达Mint2蛋白的PC12-Mint2基因工程细胞株。方法:用PCR方法将Mint2基因亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1A,构建真核表达质粒peDNA3.1A-Mint2;采用脂质体Lipofectamine2000介导,将重组载体转染入PC12细胞,G418筛选抗性克隆,有血清培养并传代具有G418抗性的细胞,数代培养后获得工程细胞株;分别提取野生型PC12细胞和PC12-Mint2工程细胞的mRNA及细胞裂解液,RT-PCR方法检测Mint2基因是否整合入PC12细胞基因组,并用West-ern印迹法检测外源基因Mint2在PC12-Mint2工程细胞中是否正常表达。结果:扩增出的基因片段大小为2 253 bp;pcDNA3.1A-Mint2重组质粒酶切结果表明Mint2基因正确地插入到pcDNA3.1A载体中,测序结果正确;将peDNA3.1A-Mint2转染PC12细胞,经G418筛选获得PC12-Mint2工程细胞株;RT-PCR结果表明Mint2基因已整合入PC12细胞,Western印迹结果显示在120 000处有特异条带,大小与Mint2蛋白理论计算值一致,表明在PC12-Mint2基因工程细胞中确实有Mint2蛋白表达。结论:本试验成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1-Mint2,并获得了稳定表达Mint2蛋白的PC12-Mint2基因工程细胞株,为进一步研究Mint2生物学功能及其作用机制奠定了基础。

关键词：基因亚克隆 Mint2 PC12细胞转染 Western印迹法

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庚型肝炎病毒基因组全长cDNA的拼接及克隆

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第二军医大学学报 1998年第4期19卷 301-306页

作者：朱分禄戚中田任浩宋燕斌邵力第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：构建ＧＢ病毒Ｃ／庚型肝炎病毒（ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ）基因组全长ｃＤＮＡ克隆。方法：以覆盖ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ分离株ＨＧＶ－Ｉｗ全长基因组且互相重叠的５个基因片段Ｉｗ５，Ｉｗｑ２，Ｉｗｈ６，Ｉｗ３和Ｉｗ３为起始材料... 详细信息

目的：构建ＧＢ病毒Ｃ／庚型肝炎病毒（ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ）基因组全长ｃＤＮＡ克隆。方法：以覆盖ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ分离株ＨＧＶ－Ｉｗ全长基因组且互相重叠的５个基因片段Ｉｗ５，Ｉｗｑ２，Ｉｗｈ６，Ｉｗ３和Ｉｗ３为起始材料，采用重叠延伸ＰＣＲ拼接和连接酶连接的方法，构建ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ基因组全长ｃＤＮＡ克隆。结果：ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ基因组全长ｃＤＮＡ克隆的酶切图谱与预期一致；核苷酸序列分析显示，克隆的ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ基因组全长ｃＤＮＡ的核苷酸及推测的氨基酸序列与原ＨＧＶ－Ｉｗ序列一致。结论：ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ基因组全长ｃＤＮＡ的克隆已经构建成功。该克隆的构建，为深入研究ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ的致病性及致病机制、复制及转录和翻译机制。

关键词：全长cDNA 拼接克隆庚型肝炎病毒基因组

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TrkA膜外域各结构域重组蛋白的制备和活性测定

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第二军医大学学报 2003年第8期24卷 853-855页

作者：郭超阎志勇由振东张勇曹莉路长林何成第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

目的 :制备有活性的 Trk A膜外域各结构域重组蛋白。方法 :用 PCR法克隆 Trk A膜外域各结构域 (分别命名为CL C、Ig1和 Ig2 )的 c DNA片段 ,然后插入融合表达载体 p ET- 2 8a(+)中 ,经测序证实后 ,转入大肠杆菌 BL2 1中表达 ,并用亲和... 详细信息

目的 :制备有活性的 Trk A膜外域各结构域重组蛋白。方法 :用 PCR法克隆 Trk A膜外域各结构域 (分别命名为CL C、Ig1和 Ig2 )的 c DNA片段 ,然后插入融合表达载体 p ET- 2 8a(+)中 ,经测序证实后 ,转入大肠杆菌 BL2 1中表达 ,并用亲和层析法进行纯化 ,用神经生长因子 (NGF)诱导 PC12细胞株测定 Trk A与配体结合的关键结构域 (CL C、Ig1和 Ig2 )活性。结果 :成功地用大肠杆菌制备了纯度达 90 %以上的 Trk A膜外域各结构域重组蛋白 ;NGF+Ig2组 PC12细胞突起生长率明显低于 NGF组 (P<0 .0 5 ) ,NGF+CL C、NGF+Ig1组与 NGF组相比没有显著差异。结论 :Ig2能抑制经 NGF诱导的 PC12细胞的分化 ,CL C和 Ig1不能抑制

关键词： TrkA膜外域结构域重组蛋白制备活性测定融合表达载体 pET-28a(+)

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生长抑素与脑瘤关系的临床研究

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第二军医大学学报 1995年第5期16卷 426-428页

作者：路红社周晓平赵孟尧过宗南王成海林葆城第二军医大学长海医院神经外科第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

生长抑素（Ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ，ＳＳ）与肿瘤的关系日益受到重视。５６例脑瘤患者，男３８例，女１８例。其中脑膜瘤２６例；脑胶质瘤３０例分为Ⅰ级１０例，Ⅱ级１０例，Ⅲ～Ⅳ级１０例。入院时和术后８ｄ采集血标本，入院时、... 详细信息

生长抑素（Ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ，ＳＳ）与肿瘤的关系日益受到重视。５６例脑瘤患者，男３８例，女１８例。其中脑膜瘤２６例；脑胶质瘤３０例分为Ⅰ级１０例，Ⅱ级１０例，Ⅲ～Ⅳ级１０例。入院时和术后８ｄ采集血标本，入院时、手术后３、６、８ｄ收集脑脊液，脑组织与瘤周脑组织在手术中收集。采用放射免疫方法测定各种样品的ＳＳ含量。全部脑瘤组织中ＳＳ含量均低于其周围正常脑组织。随着脑胶质瘤恶性程度的升高，其ＳＳ含量比其周围脑组织降低愈显著。提示脑瘤组织中ＳＳ含量的降低与脑瘤的发生、发展及生长有密切关系。

关键词：生长抑素脑肿瘤放射免疫法

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封闭近交群体内等位墓因纯化的数学模型

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第二军医大学学报 2000年第4期21卷 387-390页

作者：徐玲玲方影祝国强第二军医大学基础医学部数理教研室上海200433

目的：试建立线性代数模型，以拟合封闭近交群体内等位基因纯化的过程。方法：通过考察与性染色体Ｘ连锁的等位基因频率的变化规律，获得邻近两代（第ｎ－１代和第ｎ代）自交对基因型概率之间的关系为Ｘ^（ｎ）＝ＭＸ^（ｎ－１）。经矩... 详细信息

目的：试建立线性代数模型，以拟合封闭近交群体内等位基因纯化的过程。方法：通过考察与性染色体Ｘ连锁的等位基因频率的变化规律，获得邻近两代（第ｎ－１代和第ｎ代）自交对基因型概率之间的关系为Ｘ^（ｎ）＝ＭＸ^（ｎ－１）。经矩阵相似变换，求得系数矩阵Ｍ的特征值、特征向量和可逆矩阵Ｐ。结果：第ｎ代自交对各种基因型的概率与起始状态基因型的概率之间的关系为Ｘ^（ｎ）＝Ｐ·Ｄ~ｎ·Ｐ^(－１)·Ｘ^（０），当ｎ→∞时，杂合自交对的基因型概率全为零，而只有纯合自交对的基因型概率非零，即自交对的等位基因都趋于纯化，只留下（Ａ，ＡＡ）和（ａ，ａａ）型。结论：线性代数模型定量地模拟了封闭近交群体内等位基因逐步纯化的过程，同时能客观分析不同自交代之间的生物数学特征及内在联系，根据模型还能由初始条件预报纯化基因型的频率。

关键词：数学模型封闭近交群体等位基因纯化

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丙肝病毒非结构蛋白基因3的克隆及其体外诱导表达

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第二军医大学学报 1998年第4期19卷 307-310页

作者：张树忠梁嘉靖戚中田胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室

目的：研究丙肝病毒非结构蛋白基因３（ｎｓ３基因）在体外真核细胞中的诱导表达。方法：以ＰＣＲ方法从含ＨＣＶｎｓ３基因的重组载体ｐＢｎｓ３中扩增出ｎｓ３基因，并将其插入到克隆载体ｐＧＥＭ－Ｔ中，再与表达载体ｐＭＳＧ重组，... 详细信息

目的：研究丙肝病毒非结构蛋白基因３（ｎｓ３基因）在体外真核细胞中的诱导表达。方法：以ＰＣＲ方法从含ＨＣＶｎｓ３基因的重组载体ｐＢｎｓ３中扩增出ｎｓ３基因，并将其插入到克隆载体ｐＧＥＭ－Ｔ中，再与表达载体ｐＭＳＧ重组，以得到重组表达载体ｐＭＳＧ－ｎｓ３。然后采用磷酸钙沉淀法将其转染哺乳动物ＣＨＯ细胞，经地塞米松（ＤＭ）诱导，采用ＥＬＩＳＡ及Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ技术检测ＮＳ３蛋白的表达水平。结果：用所构建的诱导型表达载体ｐＭＳＧ－ｎｓ３转染ＣＨＯ细胞，经ＤＭ（３×１０－８ｍｏｌ／Ｌ）诱导后可表达ＮＳ３蛋白，其浓度与时间呈正相关。结论：所得到的表达载体在培养细胞中能够有效地表达。

关键词：丙型肝炎病毒基因3 非结构蛋白基因表达

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唾液酸衍生物的立体选择性硫酸酯化

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第二军医大学学报 1998年第4期19卷 381-383页

作者：崔浩李文姬李绍顺第二军医大学基础医学部药理学教研室

唾液酸以各种形式存在于生物体中，是连接在细胞表面糖脂和糖蛋白末端的一个九碳糖，具有广泛的生物学活性。Ｋｏｃｈｅｔｋｏｖ［１］和Ｋｕｂｏ［２］等从海胆卵中分离得到Ｎ－羟乙酰基唾液酸的８－硫酸酯衍生物，引起人们对唾液酸硫... 详细信息

唾液酸以各种形式存在于生物体中，是连接在细胞表面糖脂和糖蛋白末端的一个九碳糖，具有广泛的生物学活性。Ｋｏｃｈｅｔｋｏｖ［１］和Ｋｕｂｏ［２］等从海胆卵中分离得到Ｎ－羟乙酰基唾液酸的８－硫酸酯衍生物，引起人们对唾液酸硫酸酯衍生物研究的兴趣。最近Ｔａｎａ...

关键词：唾液酸衍生物硫酸酯化立体选择性抗病毒活性

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疟疾疫苗研究的现状和展望

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第二军医大学学报 2004年第1期25卷 1-4页

作者：潘卫庆第二军医大学基础医学部病原生物学教研室

疟原虫抗药性及疟蚊对杀虫剂抗性的产生和迅速扩散迫切需要研究新的疟疾防治方法,以控制该传染病的流行.根据自愿者试验、动物模型及现场研究结果,研制疫苗预防疟疾是可行的.当前,全球科学家正在研制3种类型的疟疾疫苗--抗红内期原虫疫... 详细信息

疟原虫抗药性及疟蚊对杀虫剂抗性的产生和迅速扩散迫切需要研究新的疟疾防治方法,以控制该传染病的流行.根据自愿者试验、动物模型及现场研究结果,研制疫苗预防疟疾是可行的.当前,全球科学家正在研制3种类型的疟疾疫苗--抗红内期原虫疫苗、抗红前期原虫疫苗和传播阻断疫苗,其中一些候选疫苗已进入临床试验,并产生有意义的结果.由于疟原虫具有复杂的生活史、抗原变异和多种入侵途径,有效疫苗的研制将面临极大的困难,但是这种疫苗终究能够研制成功.

关键词：疟疾疫苗红内期红前期传播阻断

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血管紧张素Ⅱ受体-1在清醒大鼠血压波动性调节中的作用

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第二军医大学学报 1997年第4期18卷 342-345页

作者：王涤松尚长浩张黎明苏定冯第二军医大学基础医学部药理学教研室

目的：探讨血管紧张素Ⅱ受体－１（ＡＴ１受体）在清醒ＷＫＹ大鼠和自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血压波动性（ＢＰＶ）调节中的作用。方法：应用计算机化清醒自由活动大鼠血流动力学监测技术，分别观察了：（１）静注新型非肽类ＡＴ１受... 详细信息

目的：探讨血管紧张素Ⅱ受体－１（ＡＴ１受体）在清醒ＷＫＹ大鼠和自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血压波动性（ＢＰＶ）调节中的作用。方法：应用计算机化清醒自由活动大鼠血流动力学监测技术，分别观察了：（１）静注新型非肽类ＡＴ１受体拮抗剂Ｌｏｓａｒｔａｎ（Ｌｏｓ）；（２）静注神经节阻断剂氯异吲哚铵（Ｃｈｌｏｒ）；（３）静注Ｃｈｌｏｒ和Ｌｏｓ；（４）静滴血管紧张素Ⅱ（ＡＮＧⅡ）及静注Ｃｈｌｏｒ后静滴ＡＮＧⅡ对ＷＫＹ大鼠和ＳＨＲ血压和ＢＰＶ的影响。结果：Ｌｏｓ不影响ＷＫＹ大鼠的血压，但减小其ＢＰＶ，降低ＳＨＲ的血压，但不影响其ＢＰＶ。Ｃｈｌｏｒ降低ＷＫＹ大鼠和ＳＨＲ的血压，增大它们的ＢＰＶ。Ｃｈｌｏｒ＋Ｌｏｓ可降低ＷＫＹ大鼠和ＳＨＲ的血压，但不影响它们的ＢＰＶ。静滴ＡＮＧⅡ升高ＷＫＹ大鼠和ＳＨＲ的血压，增大它们的ＢＰＶ；静注Ｃｈｌｏｒ后再静滴ＡＮＧⅡ，两者血压均维持在各自基础值水平，而ＢＰＶ都极显著增大。结论：交感神经调节的介入掩盖了Ｌｏｓ对ＳＨＲＢＰＶ的影响；交感神经被阻断后，ＡＴ１受体的激活不仅对血压的维持有代偿作用，而且与此时血压发生剧烈波动，即ＢＰＶ增大有关。

关键词：血压波动性受体血管紧张素调节

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